CN104940233B - 一种抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂的制备方法，包括以下步骤：a)将抗乙肝免疫核糖核酸、赋形剂和注射用水混合，得到混合溶液A；b)将所述混合溶液A依次进行过滤、冷冻和干燥，得到抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂；所述抗乙肝免疫核糖核酸、赋形剂和注射用水的质量比为1：(2～15)：(200～600)。与现有技术相比，本发明提供的制备方法能够有效控制抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂中抗乙肝免疫核糖核酸的均匀性，减少产品的复溶时间。实验结果表明，采用本发明提供的制备方法得到的抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂的复溶时间在12秒以内。

Description

一种抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂的制备方法

技术领域

本发明涉及药物制剂技术领域，更具体地说，是涉及一种抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂的制备方法。

背景技术

抗乙肝免疫核糖核酸是用乙肝疫苗作抗原免疫动物的淋巴组织，以化学方法提取而成的生物制剂。目前，临床上的抗乙肝免疫核糖核酸具有提高机体细胞免疫功能、使乙肝抗原转阴并促使乙肝抗体形成的功效，被广泛用于乙肝、乙肝病毒携带、肝硬化、肝肿大、肝损伤、急慢性肝炎、迁延性肝炎、肝癌等疾病的治疗。对于抗乙肝免疫核糖核酸的作用机理一般认为是信息核糖核酸的作用和Ag-iRNA复合物的作用。最近的一项研究表明，本品在体仙可诱生出高活性的内源性干扰素，此内源性干扰素于抗乙肝iRNA免疫核粮核酸注射后8h出现，24h达高峰，最高效价为800-1000IU/mL，44h下降至消失；在另一项抗乙肝iRNA对乙肝病毒前蛋白调控研究中证明，抗乙肝免疫核糖核酸可以抑制乙肝病毒前S蛋白的转录，从而解离乙肝病毒与肝细胞的吸附。研究表明，抗乙肝免疫核糖核酸具有既能传递细胞免疫反应，又能传递体液免疫反应的作用，全面提高受体的免疫功能，显示出免疫核糖核酸的免疫潜能。

近年来，抗乙肝免疫核糖核酸已制成各种药物剂型用于临床治疗，其中，以注射用抗乙肝免疫核糖核酸最为常用，市场需求量大。在药物制剂生产过程中，注射用抗乙肝免疫核糖核酸被制成抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂。现有的抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂的制备方法包括：采用抗乙肝免疫核糖核酸、辅料和注射用水，经冻干制成抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂。在冻干过程中，水分不经过液体状态而直接升华，这样干燥后的物质的物理、化学性能和形状基本不变，有效成分损失小，密封保存周期长。

但是，现有的制备方法不能控制产品中抗乙肝免疫核糖核酸的均匀性，使产品在使用过程中结块或者溶解不彻底，从而使得到的产品存在复溶时间长的问题，不利于产品的临床应用。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂的制备方法，本发明提供的制备方法能够有效控制产品中抗乙肝免疫核糖核酸的均匀性，减少产品的复溶时间。

本发明提供了一种抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂的制备方法，包括以下步骤：

a)将抗乙肝免疫核糖核酸、赋形剂和注射用水混合，得到混合溶液A；

b)将所述混合溶液A依次进行过滤、冷冻和干燥，得到抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂；

所述抗乙肝免疫核糖核酸、赋形剂和注射用水的质量比为1：(2～15)：(200～600)。

优选的，步骤a)中所述赋形剂包括右旋糖酐、甘露醇、乳糖一水合物、葡萄糖、甘氨酸和聚乙烯吡咯烷酮中的一种或多种。

优选的，步骤a)中所述将抗乙肝免疫核糖核酸、赋形剂和注射用水混合的过程具体为：

将抗乙肝免疫核糖核酸和注射用水的混合后，在搅拌的条件下加入赋形剂，得到混合溶液A。

优选的，所述搅拌的温度为20℃～30℃，时间为5min～10min。

优选的，步骤b)中所述过滤的过程具体为：

将混合溶液A进行两次精滤；

所述第一次精滤的微孔滤芯孔径为0.4μm～0.5μm；所述第二次精滤的微孔滤芯的孔径为0.2μm～0.25μm。

优选的，步骤b)中所述冷冻的温度为-40℃～-30℃，时间为1h～4h。

优选的，步骤b)中所述干燥的温度为30℃～40℃，时间为2h～5h。

优选的，步骤b)中所述干燥的过程具体为：

将冷冻后的混合溶液A升温至干燥温度，进行干燥处理，得到抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂。

优选的，所述升温的速率为6℃/h～8℃/h。

本发明提供了一种抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂的制备方法，包括以下步骤：a)将抗乙肝免疫核糖核酸、赋形剂和注射用水混合，得到混合溶液A；b)将所述混合溶液A依次进行过滤、冷冻和干燥，得到抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂；所述抗乙肝免疫核糖核酸、赋形剂和注射用水的质量比为1：(2～15)：(200～600)。与现有技术相比，本发明提供的制备方法能够有效控制抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂中抗乙肝免疫核糖核酸的均匀性，减少产品的复溶时间。实验结果表明，采用本发明提供的制备方法得到的抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂的复溶时间在12秒以内。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明提供了一种抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂的制备方法，包括以下步骤：

a)将抗乙肝免疫核糖核酸、赋形剂和注射用水混合，得到混合溶液A；

b)将所述混合溶液A依次进行过滤、冷冻和干燥，得到抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂；

所述抗乙肝免疫核糖核酸、赋形剂和注射用水的质量比为1：(2～15)：(200～600)。

在本发明中，将抗乙肝免疫核糖核酸、赋形剂和注射用水混合，得到混合溶液A。在本发明中，所述抗乙肝免疫核糖核酸为主药，本发明对所述抗乙肝免疫核糖核酸的来源没有特殊限制，采用本领域技术人员熟知的市售商品即可。在本发明中，所述赋形剂优选包括右旋糖酐、甘露醇、乳糖一水合物、葡萄糖、甘氨酸和聚乙烯吡咯烷酮中的一种或多种，更优选为右旋糖酐和甘露醇中的一种或两种，最优选为右旋糖酐。在本发明中，所述抗乙肝免疫核糖核酸、赋形剂和注射用水的质量比为1：(2～15)：(200～600)，更优选为1：(5～10)：(250～500)。在本发明提供的一个优选的实施例中，所述抗乙肝免疫核糖核酸、赋形剂和注射用水的质量比为1：5：250；在本发明提供的另一个优选的实施例中，所述抗乙肝免疫核糖核酸、赋形剂和注射用水的质量比为1：10：500。

在本发明中，所述将抗乙肝免疫核糖核酸、赋形剂和注射用水混合的过程优选具体为：

将抗乙肝免疫核糖核酸和注射用水的混合后，在搅拌的条件下加入赋形剂，得到混合溶液A。

本发明对所述搅拌的方法没有特殊限制，采用本领域技术人员熟知的人工搅拌或机械搅拌均可。在本发明中，所述搅拌的温度优选为20℃～30℃，更优选为25℃；所述搅拌的时间优选为5min～10min，更优选为8min。

得到所述混合溶液A后，本发明将所述混合溶液A依次进行过滤、冷冻和干燥，得到抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂。在本发明中，将所述混合溶液A与第二注射用水混合。在本发明中，所述第一注射用水与第二注射用水的质量比为6：(3～5)，优选为3：2。在本发明中，采用分步骤加水的方式能够使抗乙肝免疫核糖核酸与赋形剂混合均匀，避免抗乙肝免疫核糖核酸在溶解过程中结块或溶解不彻底，从而在制备过程中出现降解，使产品杂质含量增加。

在本发明中，将所述混合溶液A与第二注射用水混合后，依次进行过滤、冷冻和干燥，得到抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂。在本发明中，所述过滤的过程优选具体为：

将混合溶液A与第二注射用水的混合溶液进行两次精滤。本发明对所述精滤的方法没有特殊限制，采用本领域技术人员熟知的微孔滤芯精滤的技术方案即可。在本发明中，所述第一次精滤的微孔滤芯孔径优选为0.4μm～0.5μm，更优选为0.45μm；所述第二次精滤的微孔滤芯的孔径优选为0.2μm～0.25μm，更优选为0.22μm。

完成所述过滤后，本发明将过滤后的混合溶液进行冷冻。本发明对所述冷冻的设备没有特殊限制，采用本领域技术人员熟知的冻干机。在本发明中，所述冷冻的温度优选为-40℃～-30℃，更优选为-35℃,；所述冷冻的时间优选为1h～4h，更优选为2h。

完成所述冷冻后，本发明将冷冻后的混合溶液进行干燥，得到抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂。在本发明中，所述干燥的温度优选为30℃～40℃，更优选为38℃；所述干燥的时间优选为2h～5h，更优选为3h。在本发明中，所述干燥的过程优选具体为：

将冷冻后的混合溶液A升温至干燥温度，进行干燥处理，得到抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂。在本发明中，所述升温的速率优选为6℃/h～8℃/h，更优选为7℃/h。

本发明提供了一种抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂的制备方法，包括以下步骤：a)将抗乙肝免疫核糖核酸、赋形剂和注射用水混合，得到混合溶液A；b)将所述混合溶液A依次进行过滤、冷冻和干燥，得到抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂；所述抗乙肝免疫核糖核酸、赋形剂和注射用水的质量比为1：(2～15)：(200～600)。与现有技术相比，本发明提供的制备方法能够有效控制抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂中抗乙肝免疫核糖核酸的均匀性，减少产品的复溶时间。实验结果表明，采用本发明提供的制备方法得到的抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂的复溶时间在12秒以内。

此外，本发明提供的制备方法减少产品复溶时间的同时，能使产品的冻干周期缩短，生产能耗降低，提高了用药安全，适于工业化大批量生产。

为了进一步说明本发明，下面通过以下实施例进行详细说明。本发明以下实施例所用的抗乙肝免疫核糖核酸由正大天晴药业集团股份有限公司提供。

实施例1

制备规格为4mg/支的抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂1000支：

(1)首先将4g抗乙肝免疫核糖核酸加入到1000g注射用水中，在25℃的条件下加入20g右旋糖酐搅拌8min，得到混合溶液A。

(2)将上述混合溶液A依次经0.45μm微孔滤芯精滤及0.22μm微孔滤芯精滤后灌装、半压塞；再将制品置于冻干机中，在-35℃条件下冷冻2h，然后控制升温速率为7℃/h升温至38℃后，干燥3h，得到抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂，观察产品性状为白色冻干疏松块状或粉末状。

对本发明实施例1提供的制备方法得到的抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂的复溶时间进行检测，检测方法具体为：用注射器抽取5mL注射用水，注入装有0.5mg产品的药瓶内，记录产品完全溶解的时间即为复溶时间。测试结果表明，本发明实施例1提供的制备方法得到的抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂的复溶时间为5秒。

实施例2

制备规格为2mg/支的抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂1000支：

(1)首先将2g抗乙肝免疫核糖核酸加入到1000g注射用水中，在25℃的条件下加入20g右旋糖酐搅拌8min，得到混合溶液A。

(2)将上述混合溶液A依次经0.45μm微孔滤芯精滤及0.22μm微孔滤芯精滤后灌装、半压塞；再将制品置于冻干机中，在-35℃条件下冷冻2h，然后控制升温速率为7℃/h升温至38℃后，干燥3h，得到抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂，观察产品性状为白色冻干疏松块状或粉末状。

按照实施例1提供的测试方法对实施例2提供的制备方法得到的抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂的复溶时间进行检测，得到复溶时间为7秒。

实施例3

制备规格为4mg/支的抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂1000支：

(1)首先将4g抗乙肝免疫核糖核酸加入到1000g注射用水中，在25℃的条件下加入8g甘露醇搅拌8min，得到混合溶液A。

(2)将上述混合溶液A依次经0.45μm微孔滤芯精滤及0.22μm微孔滤芯精滤后灌装、半压塞；再将制品置于冻干机中，在-35℃条件下冷冻2h，然后控制升温速率为7℃/h升温至30℃后，干燥5h，得到抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂，观察产品性状为白色冻干疏松块状或粉末状。

按照实施例1提供的测试方法对实施例3提供的制备方法得到的抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂的复溶时间进行检测，得到复溶时间为10秒。

实施例4

制备规格为2mg/支的抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂1000支：

(1)首先将2g抗乙肝免疫核糖核酸加入到1000g注射用水中，在25℃的条件下加入10g甘露醇搅拌8min，得到混合溶液A。

(2)将上述混合溶液A依次经0.45μm微孔滤芯精滤及0.22μm微孔滤芯精滤后灌装、半压塞；再将制品置于冻干机中，在-40℃条件下冷冻4h，然后控制升温速率为7℃/h升温至40℃后，干燥2h，得到抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂，观察产品性状为白色冻干疏松块状或粉末状。

按照实施例1提供的测试方法对实施例4提供的制备方法得到的抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂的复溶时间进行检测，得到复溶时间为12秒。

对比例1

采用现有技术提供的制备方法制备规格为4mg/支的抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂1000支：

(1)将4g抗乙肝免疫核糖核酸加入到1000g注射用水中，再加入4g甘露醇溶解；再用0.22μm滤器过滤，灌装。

(2)将制品置于冻干机中，在-45℃条件下冷冻4h，然后控制升温速率为4℃/h升温至43℃后，干燥6h，得到抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂，观察产品性状为类白色块状。

按照实施例1提供的测试方法对对比例1提供的抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂的复溶时间进行检测，得到复溶时间为52秒。

对比例2

采用现有技术提供的制备方法制备规格为2mg/支的抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂1000支：

(1)将2g抗乙肝免疫核糖核酸加入到1000g注射用水中，再加入2g甘露醇溶解；再用0.22μm滤器过滤，灌装。

(2)将制品置于冻干机中，在-45℃条件下冷冻4h，然后控制升温速率为4℃/h升温至43℃后，干燥6h，得到抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂，观察产品性状为类白色块状。

按照实施例1提供的测试方法对对比例2提供的抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂的复溶时间进行检测，得到复溶时间为48秒。

所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。

Claims (2)

1.一种抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

a）将抗乙肝免疫核糖核酸、赋形剂和注射用水混合，得到混合溶液A；

步骤a）中所述将抗乙肝免疫核糖核酸、赋形剂和注射用水混合的过程具体为：

将抗乙肝免疫核糖核酸和注射用水的混合后，在搅拌的条件下加入赋形剂，得到混合溶液A；所述搅拌的温度为20℃~30℃，时间为5min~10min；

b）将所述混合溶液A依次进行过滤、冷冻和干燥，得到抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂；

所述抗乙肝免疫核糖核酸、赋形剂和注射用水的质量比为1：（2~15）：（200~600）；

步骤b）中所述过滤的过程具体为：

将混合溶液A进行两次精滤；

所述第一次精滤的微孔滤芯孔径为0.4μm~0.5μm；所述第二次精滤的微孔滤芯的孔径为0.2μm~0.25μm；

所述冷冻的温度为-40℃~-30℃，时间为1h~4h；

所述干燥的温度为30℃~40℃，时间为2h~5h；

所述干燥的过程具体为：

将冷冻后的混合溶液A升温至干燥温度，进行干燥处理，得到抗乙肝免疫核糖核酸冻干粉针剂；所述升温的速率为6℃/h~8℃/h。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤a）中所述赋形剂包括右旋糖酐、甘露醇、乳糖一水合物、葡萄糖、甘氨酸和聚乙烯吡咯烷酮中的一种或多种。