CN104911266A - 小麦籽粒与面粉低蛋白含量相关的分子标记 - Google Patents
小麦籽粒与面粉低蛋白含量相关的分子标记 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104911266A CN104911266A CN201510315042.9A CN201510315042A CN104911266A CN 104911266 A CN104911266 A CN 104911266A CN 201510315042 A CN201510315042 A CN 201510315042A CN 104911266 A CN104911266 A CN 104911266A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- wheat
- protein
- protein content
- molecular marker
- flour
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
- C12Q1/6888—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
- C12Q1/6895—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms for plants, fungi or algae
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/13—Plant traits
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/156—Polymorphic or mutational markers
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Botany (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了小麦籽粒与面粉低蛋白含量相关的分子标记,它涉及小麦育种和分子生物学技术领域;它的分子标记分为籽粒低蛋白含量分子标记与面粉低蛋白含量分子标记,所述的籽粒低蛋白含量分子标记引物序列为:上游引物序列:CTGCTCTAAGATTCATGCAACC;下游引物序列:GAGGCTTGTGCCCTCTGTAG;所述的面粉低蛋白含量分子标记引物序列为:上游引物序列:AGCTGGGTTAATAACAGAGGAT;下游引物序列:CACATAACTGTCCACTCCTTT;本发明有利于减少育种家对该性状选择的工作量,提高选择的准确性和育种效率,是一种高效、快速的育种新技术。
Description
技术领域
本发明涉及小麦育种和分子生物学技术领域,具体涉及一种小麦面粉与籽粒低蛋白含量相关的分子标记。
背景技术
小麦是我国最重要的粮食作物之一,长江中下游麦区具有不利于小麦籽粒蛋白质形成和积累的生态条件,适宜发展弱筋小麦,已经成为我国弱筋小麦生产的优势产业带。低蛋白质含量是弱筋小麦品质的重要指标,国家优质小麦标准GB/T17893-1999规定优质弱筋小麦蛋白质含量应在11.5%以下;国家标准GB8608-88规定低筋小麦粉蛋白质含量应在10%以下。
籽粒蛋白质含量与面粉蛋白质含量必须在收获后才能进行品质测试,且易受环境条件影响,因此选择效率较低,分子标记辅助选择,可在DNA水平针对低蛋白质含量基因对育种材料进行选择,因而可以在苗期进行选择,并且可以克服蛋白质含量鉴定的不稳定性,降低表型评价的成本,提高弱筋小麦品质育种效率。
SSR标记作为以PCR为基础的第二代分子标记具有以下优点:一是数量极为丰富,且分布于整个基因组;二是多态性高,等位位点多,信息含量丰富;三是以孟德尔方式呈共显性遗传,易区分纯合子与杂合子;四是操作简单,可直接用PCR进行分析,所需DNA量少。
关联分析是以连锁不平衡为基础,鉴定某一群体内目标性状与遗传标记或候选基因关系的分析方法。近年来,该技术已在小麦产量、品质、抗病性等遗传学研究上广泛采用。
宁麦9号是江苏省农业科学院选育的优质弱筋专用小麦品种,具有高产、稳产和广泛的适应性及抗小麦黄花叶病、赤霉病等特点,近年来已成为长江中下游麦区小麦育种的重要亲本,以其为亲本已经育成了15个小麦新品种。其弱筋品质稳定,在饼干和蛋糕加工品质上可媲美美国、澳大利亚进口的优质软质小麦。发掘与宁麦9号低蛋白含量相关的分子标记,对弱筋小麦育种具有重要意义。
发明内容
本发明的目的在于针对现有技术的缺陷和不足,提供一种结构简单、设计合理、使用方便的一种小麦面粉与籽粒低蛋白含量相关的分子标记。
为了解决背景技术所存在的问题,本发明的一种小麦籽粒与面粉低蛋白含量相关的分子标记,它的分子标记分为籽粒低蛋白含量分子标记与面粉低蛋白含量分子标记,所述的籽粒低蛋白含量分子标记引物序列为:
上游引物序列:CTGCTCTAAGATTCATGCAACC;
下游引物序列:GAGGCTTGTGCCCTCTGTAG;
所述的面粉低蛋白含量分子标记引物序列为:
上游引物序列:AGCTGGGTTAATAACAGAGGAT;
下游引物序列:CACATAACTGTCCACTCCTTT。
本发明以宁麦9号及其衍生品种(系)为材料,通过关联分析的方法,获得小麦籽粒与宁麦9号低蛋白含量相关的分子标记Xgwm539。通过关联分析的方法,获得小麦面粉与宁麦9号低面粉蛋白含量相关的分子标记Xwmc468。通过该分子标记辅助育种,可以克服常规品质育种周期长、苗期无法鉴定的不足。常规品质育种只能在杂交4代后才能对蛋白质含量进行检测,利用分子标记辅助选择,在低世代的苗期即可对低蛋白含量相关的分子标记进行选择,有利于减少育种家对该性状选择的工作量,提高选择的准确性和育种效率,是一种高效、快速的育种新技术。
附图说明
图1为具体实施方式中籽粒低蛋白分子标记扩增结果示意图;
图2为具体实施方式中面粉低蛋白分子标记扩增结果示意图。
具体实施方式
下面结合附图对本发明作进一步的说明。
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合附图及具体实施方式,对本发明进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施方式仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。
本具体实施方式采用如下技术方案:它的分子标记分为籽粒低蛋白含量分子标记与面粉低蛋白含量分子标记,所述的籽粒低蛋白含量分子标记引物序列为:
上游引物序列:CTGCTCTAAGATTCATGCAACC;
下游引物序列:GAGGCTTGTGCCCTCTGTAG;
所述的面粉低蛋白含量分子标记引物序列为:
上游引物序列:AGCTGGGTTAATAACAGAGGAT;
下游引物序列:CACATAACTGTCCACTCCTTT。
以宁麦9号及其117个衍生品种(系)为材料,其中,衍生一代 39份,衍生二代 78份。
依据Somers等的整合遗传连锁图筛选到185对多态性引物,每条染色体5-14 对,平均 8.8对。
PCR反应体系为10 μL,包含10×buffer 1 μL、15 mmol L–1 MgCl2 0.6 μL、2 mmol L–1 dNTP 0.8μL、20 ng μL–1引物1 μL、0.1 μL Taq酶、20 ng μL–1模板DNA3 μL、去离子水3.5 μL。 PCR 扩增程序为94℃预变性5 min;然后94℃变性45 s,60 ℃退火45 s,72℃延伸90 s,36个循环;最后72℃延伸10 min。扩增产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测。在相同位点上,有带记为1,无带记为0,缺失记为9。
2009、2010连续两年将宁麦9号及其117个衍生品种(系)种植于江苏省农科院试验基地,3行小区田间种植。2010和2011年分别收获种子晾干,利用Perton DA7200近红外品质测定仪按照GB/T 24899-2010方法测定籽粒蛋白含量;用Buhler 202磨粉机将籽粒磨成面粉后,按照GB 5511-85方法测定面粉蛋白含量。
利用Excel 2007对基因型及表型数据进行初步统计分析;用TASSEL 3.0软件的 MLM(mixed linear model)程序对两年的面粉蛋白质含量进行关联分析,并估算各标记效应,P<0.01时认为该标记与目标性状相关联,统计连续两年关联到的标记位点。
利用Excel 2007对基因型及表型数据进行初步统计分析;用TASSEL 3.0软件的 MLM(mixed linear model)程序对两年收获籽粒及面粉的蛋白质含量进行关联分析,并估算各标记效应,P<0.01时认为该标记与目标性状相关联,统计连续两年关联到的标记位点。
利用分子标记对小麦品种宁麦9号的衍生品系进行籽粒与面粉蛋白质含量预测。
小麦籽粒低蛋白含量分子标记过程如下:
以宁麦9号及其8个衍生品系为材料,分别采用CTAB法从这些植株叶片中分离DNA,利用上下游引物对其进行PCR扩增,扩增产物在12%聚丙烯酰胺凝胶上电泳分离,判断衍生品系DNA的PCR产物是否与宁麦9号扩增条带一致。
扩增结果如图2所示,1-8为宁麦9号衍生品系,N为宁麦9号,M为20 bp marker。图中出现2种带型,6、7、8三个品系DNA的PCR产物与宁麦9号扩增条带一致,认为其为低籽粒蛋白含量品系;1-5带型不同,判断其为高籽粒蛋白含量品系。按照国家标准GB/T17893-1999定义小麦籽粒蛋白质含量小于11.5为“低”,大于或等于11.5为“高”。
基于此判定方法和标准对每个小麦品系的籽粒蛋白质含量进行预测,小麦收获后按照GB/T 24899-2010方法对籽粒蛋白质含量进行实测并与预测结果比对,预测结果与实测结果吻合,结果参见下表。
小麦面粉低蛋白含量分子标记过程如下:
以宁麦9号及其10个衍生品系为材料,分别采用CTAB法从这些植株叶片中分离DNA,利用上下游引物对其进行PCR扩增,扩增产物在12%聚丙烯酰胺凝胶上电泳分离,判断衍生品系DNA的PCR产物是否与宁麦9号扩增条带一致。
扩增结果如图1所示,1-10为宁麦9号衍生品系,N为宁麦9号,M为20 bp marker。图中出现3种带型, 7、8、9、10四个品系DNA的PCR产物与宁麦9号扩增条带一致,认为其为低面粉蛋白含量品系;1-6带型不同,判断其为高面粉蛋白含量品系。按照国家标准GB8608-88定义小麦面粉蛋白质含量小于或等于10%为“低”,大于10%为“高”。
基于此判定方法和标准对每个小麦品系的面粉蛋白质含量进行预测,小麦收获后按照GB 5511-85方法对面粉蛋白质含量进行实测并与预测结果比对,预测结果与实测结果吻合,结果参见下表。
以上所述,仅用以说明本发明的技术方案而非限制,本领域普通技术人员对本发明的技术方案所做的其它修改或者等同替换,只要不脱离本发明技术方案的精神和范围,均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
Claims (1)
1.小麦籽粒与面粉低蛋白含量相关的分子标记,其特征在于:它的分子标记分为籽粒低蛋白含量分子标记与面粉低蛋白含量分子标记,
所述的籽粒低蛋白含量分子标记引物序列为:
上游引物序列:CTGCTCTAAGATTCATGCAACC;
下游引物序列:GAGGCTTGTGCCCTCTGTAG;
所述的面粉低蛋白含量分子标记引物序列为:
上游引物序列:AGCTGGGTTAATAACAGAGGAT;
下游引物序列:CACATAACTGTCCACTCCTTT。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201510315042.9A CN104911266A (zh) | 2015-06-10 | 2015-06-10 | 小麦籽粒与面粉低蛋白含量相关的分子标记 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201510315042.9A CN104911266A (zh) | 2015-06-10 | 2015-06-10 | 小麦籽粒与面粉低蛋白含量相关的分子标记 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN104911266A true CN104911266A (zh) | 2015-09-16 |
Family
ID=54080706
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201510315042.9A Pending CN104911266A (zh) | 2015-06-10 | 2015-06-10 | 小麦籽粒与面粉低蛋白含量相关的分子标记 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN104911266A (zh) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN106282395A (zh) * | 2016-10-26 | 2017-01-04 | 中国科学院成都生物研究所 | 一种检测小麦高籽粒蛋白质含量的引物、试剂盒、检测方法及其应用 |
CN110373489A (zh) * | 2019-07-10 | 2019-10-25 | 江苏省农业科学院 | 与小麦籽粒蛋白含量相关的kasp标记及其应用 |
CN113179947A (zh) * | 2021-05-10 | 2021-07-30 | 江苏里下河地区农业科学研究所 | 一种长江中下游地区高产抗病强筋小麦育种方法 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1462808A (zh) * | 2003-06-23 | 2003-12-24 | 南京农业大学 | 小麦望水白抗赤霉病侵染主效基因位点及其分子标记 |
-
2015
- 2015-06-10 CN CN201510315042.9A patent/CN104911266A/zh active Pending
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1462808A (zh) * | 2003-06-23 | 2003-12-24 | 南京农业大学 | 小麦望水白抗赤霉病侵染主效基因位点及其分子标记 |
Non-Patent Citations (7)
Title |
---|
HUNG, HSIAO-YI: "Characterization of a gene from breeding line WX93D180 conferring resistance to leaf rust(Puccinia triticina)in wheat", 《硕士论文版权页》 * |
HUNG,HSIAO-YI: "Characterization of a gene from breeding line WX93D180 conferring resistance to leaf rust(Puccinia triticina)in wheat", 《MASTER"S THESIS,TEXAS A&M UNIVERSTIY》 * |
LIANG ZHAO,ET AL: "A comparison of grain protein content QTLs and flour protein content QTLs across environments in cultivated wheat", 《EUPHYTICA》 * |
M. PRASAD,ET AL: "A microsatellite marker associated with a QTL for grain protein content on chromosome arm 2DL of bread wheat", 《THEOR APPL GENET》 * |
姜朋等: "弱筋小麦宁麦9 号及其衍生系的蛋白质含量遗传多样性及关联分析", 《作物学报》 * |
常斌: "弱筋小麦宁麦9号品质性状QTL定位", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 农业科技辑》 * |
陈小霖: "宁麦9号衍生优良农艺性状及品质性状与SSR标记的关联分析", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 农业科技辑》 * |
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN106282395A (zh) * | 2016-10-26 | 2017-01-04 | 中国科学院成都生物研究所 | 一种检测小麦高籽粒蛋白质含量的引物、试剂盒、检测方法及其应用 |
CN106282395B (zh) * | 2016-10-26 | 2019-08-20 | 中国科学院成都生物研究所 | 一种检测小麦高籽粒蛋白质含量的引物、试剂盒、检测方法及其应用 |
CN110373489A (zh) * | 2019-07-10 | 2019-10-25 | 江苏省农业科学院 | 与小麦籽粒蛋白含量相关的kasp标记及其应用 |
CN110373489B (zh) * | 2019-07-10 | 2021-01-08 | 江苏省农业科学院 | 与小麦籽粒蛋白含量相关的kasp标记及其应用 |
CN113179947A (zh) * | 2021-05-10 | 2021-07-30 | 江苏里下河地区农业科学研究所 | 一种长江中下游地区高产抗病强筋小麦育种方法 |
CN113179947B (zh) * | 2021-05-10 | 2022-07-29 | 江苏里下河地区农业科学研究所 | 一种长江中下游地区高产抗病强筋小麦育种方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN106868131B (zh) | 陆地棉6号染色体与纤维强度相关的snp分子标记 | |
CN105512513B (zh) | 一种基于ssr分子标记鉴别扁桃属植物种质的方法 | |
CN104969855B (zh) | 一种培育广谱、持久穗瘟抗性水稻育种材料的方法 | |
CN102162011A (zh) | 一个水稻抗稻瘟病基因的分子标记方法 | |
CN110117673A (zh) | 甘蓝型油菜矮杆性状位点的分子标记及其应用 | |
CN107201404A (zh) | 一种针对天门冬属雌雄异株植物性别的分子生物学鉴别方法及其应用 | |
CN104498486B (zh) | 黄瓜抗白粉病基因pm‑h的Indel标记及其应用 | |
CN104498490A (zh) | 与小麦籽粒低蛋白质含量qtl紧密连锁的分子标记及其应用 | |
CN111394508B (zh) | 一种与辣椒小果基因连锁的分子标记及应用 | |
CN104911266A (zh) | 小麦籽粒与面粉低蛋白含量相关的分子标记 | |
CN109055580A (zh) | 凡纳滨对虾c型清道夫受体内与生长相关分子标记及应用 | |
CN101491212B (zh) | 分子标记辅助选择快速培育稻米直链淀粉含量中等的水稻品系的方法 | |
CN109234423A (zh) | 大豆分子标记及其多态性在鉴定大豆分枝数性状中的应用 | |
CN103936843A (zh) | 水稻Os05g26890.1蛋白、编码该蛋白的基因及其应用 | |
CN103468791B (zh) | 分子标记辅助选育豇豆耐鼓粒品种的方法及其使用的pcr引物组 | |
CN104805081A (zh) | 一种小麦粒重分子标记及其应用 | |
CN103361340B (zh) | 海湾扇贝耐热相关热休克蛋白70基因标记及其辅助育种方法 | |
CN103834647B (zh) | 小麦矮杆基因RhtDC20紧密连锁的SSR标记Xgwm537及其用途 | |
CN104762298B (zh) | 一种水稻苗期耐盐基因qST11及其分子标记方法 | |
CN103114134B (zh) | 检测小麦远缘杂交杂种中x型hmw-gs基因的方法 | |
CN107746895B (zh) | 一种低磷条件下提升大麦收获指数qtl位点的分子标记及应用 | |
CN105543366A (zh) | 水稻抗稻瘟病基因Pi25基因内特异SNP共显性分子标记开发及应用 | |
CN105063201A (zh) | 玉米第9号染色体穗行数主效qtl的分子标记及其应用 | |
CN101984057A (zh) | 一种尼罗罗非鱼性别差异性分子标记及其应用 | |
CN102433334B (zh) | 一种水稻库源新基因(ss2)的紧密连锁分子标记 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20150916 |
|
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |