N-乙酰-D-氨基葡萄糖作为一个化学试剂,在市场上已公开出售。国际上最大的试剂公司-Sigma公司用化学合成法将氨基葡萄糖乙酰化而获得该产品,一直是作为一种生物化学分析试剂使用。
生物化学的研究表明,人体正常情况下是可以产生N-乙酰-D-氨基葡萄糖的。作为一个化合物,它能够在人体内正常存在。由于在正常人体内含量极微,对其代谢未进行较深入的研究,生物化学的研究也从未涉及到该物质对人体生理功能的影响。近年来,日本科学家在研究人体科学过程中逐渐认识到透明质酸在人体中的作用,透明质酸是一种粘弹性的物质,由等分子的N-乙酰-D-氨基葡萄糖和D-葡萄糖醛酸所组成的大分子化合物,透明质酸与水形成粘稠凝胶,有润滑和保护细胞的作用。而有些细菌、恶性肿瘤和蛇毒中含有透明质酸酶,能使透明质酸分解,粘度减少,病原体得以侵入和传播,因此说透明质酸是保护机体健康的重要物质,而作为合成透明质酸的原料之一的N-乙酰-D-氨基葡萄糖也同样具有重要的意义。
人们在进行“生物波”理论的研究时,建立了细菌波动生长模型,经过研究认识到这种波动有其内在的调节机制,主要是通过某些化学物质来完成的。这些具有调节作用的化学物质可促进生物波动,把病态的有序性慢波转变成正常的呈混沌状态的快波,有人把这种物质称为促波因子。将其分离提取出来并进行鉴定,最后被确定为N-乙酰-D-氨基葡萄糖,因其促波作用,被称为促波氨基糖。人体的许多功能需要促波因子协助完成,当体内这种促波因子缺乏时则会导致异常状况。
不适量饮酒对胃肠道的刺激和对肝脏的损伤,均来自组织受到酒精的作用后发生的应激反应,表现为非特异性炎症。传统的以酒中泡制中药材制备而成的保健酒,虽然有滋补身体的作用,但仍然存在酒精对肝脏的损伤,而且不能对胃肠道的微生态环境及肠道功能调进行整和改善。
本发明的目的在于:提供一种能够使胃肠组织及肝细胞对酒精刺激的应激反应降低进而达到在减轻酒精对胃肠道及肝脏损害的同时还能改善肠道微生态环境,促进肠道功能的以N-乙酰-D-氨基葡萄糖作为添加剂的保健酒。
本发明的上述目的是这样实现的:即采用结构式为(I)的化合物作为活性添加剂,按0.05-0.2g/100ml的重量、体积比与酒溶液配制成能够减轻酒精对肝脏损伤,并对肠道微生态环境及肠道功能具有改善和促进作用的保健酒;
其中,结构式(I)的化学名称为N-乙酰-D-葡萄糖胺(N-Acetyl-D-glucosamine),分子式:C
0H
15NO
6,结构表示如下:
经大量动物试验及人体试食试验证明,该保健酒具有减轻酒精对肝脏的损伤及调整肠道微生态系统,改善肠道功能的作用。所述的动物试验包括:
一.本发明的保健酒调整肠道菌群,维护微生态平衡的作用的试验
本试验以保健酒对小鼠使用抗生素后肠道菌群紊乱形成过程中肠道菌群的影响作为重点。
由实验结果可知,小鼠服用氟哌酸后,肠内主要菌群的菌量均发生变化,其中与人类生理活动关系较为密切的双歧杆菌,乳杆菌菌量下降,类杆菌的菌量也有所下降,在小鼠形成肠道菌群紊乱的过程中,加喂保健酒后,小鼠肠道内双歧杆菌、类杆菌、乳杆菌菌量有明显的增长,并能恢复到正常小鼠肠道内双歧杆菌、类杆菌和乳杆菌的菌量。
双歧杆菌、乳杆菌和类杆菌为小鼠肠道内主要的正常菌群,它们对维护机体的健康有着密切的关系。双歧杆菌是人体内一种重要的生理菌,具有抗感染、抗肿瘤、增强机体对某些营养物质的吸收,对机体健康起着一定的作用。乳杆菌能合成维生素,输助食物消化,促进营维生素。本发明的保健洒能使小鼠肠道内已降低的双歧杆菌、乳杆菌、类杆菌菌量上升至正常水平,从而起到改善胃肠道功能的作用。
二.本发明的保健酒对增进小鼠食欲作用的观察
由实验结果可知,本发明保健酒对三个剂量的试验组小鼠的食量及饮水量比对照组小鼠均有提高,表明该保健酒具有增进小鼠食欲的作用。
三.本发明保健酒对促进小鼠小肠运动的作用试验
由实验结果可知,三个剂量的保健酒组炭末小肠推进率与对照组相比均有提高,说明gai2保健酒能促进小肠蠕动,缩短排泄物在肠管内的停留时间。
由以上三个实验的阳性结果表明,本发明的保健酒具有明显改善肠道微生态、调节胃肠道功能的作用。
四.抗慢性损伤实验:
方法每天清早,按设置的剂量,分别给普通白酒对照组的大鼠灌胃38°白酒,给保健酒组灌胃保健酒。连续30日,于未次灌胃后24小时处死大鼠,取肝脏标本做病理切片供组织形态学观察,并做电镜标本观察其超微结构。
试验结果表明:使用保健酒的大鼠辞典肝脏与普通白酒对照组相比损伤程度明显减轻。前者仅出现肝组织水肿,少有坏死,而后者大片状坏死,细胞水肿,大量脂肪沉积。
五.本发明的保健酒中主要功效成分抗肝脏脂质过氧化损伤的作用
方法是以常规饲料喂饲小鼠,每天按设定的剂量以灌胃法给予保健酒,连续喂养30d,在末次灌胃后6h,颈椎脱臼处死,用0.1M磷酸缓冲液(pH7.4)0℃冰浴制备10%肝匀浆,以测定GSH及MDA含量。
实验结果表明,小鼠灌胃普通白酒后,肝脏GSH含量较正常对照组明显下降,差异显著,而脂质过氧化产物MDA含量明显上升,差异十分显著,表明肝脏有脂质过氧化损伤。而使用保健酒三个剂量组较普通白酒对照组GSH含量明显升高,有显著性的差异。统计结果表明酒中采用N-乙酰-D-葡萄糖胺能够提高小鼠肝脏的GSH含量,降低脂质过氧化产物MDA的含量。
六.急性酒精致死试验:
方法是将小鼠分组分别腹腔注射致死剂量的保健酒和白酒,试验结果表明,对照组小鼠均昏迷死亡,而试验组小鼠全部均可从昏迷中苏醒并恢复正常。
由以上三个实验的阳性结果可判定本发明的保健酒功效添加剂能够明显减轻酒精对大鼠肝脏的损伤,将其加入保健酒后大减轻了产品中酒精对肝脏的损伤,对比普通白酒具有对肝脏损伤低的显著特点。七.促波试验
1.实验材料和方法:
1.1.样品:式(I)化合物纯品。
1.2.实验材料:
菌种:奇异变形杆菌(应符合如下生化反应特征:动力(+)、尿素酶(+)、乳糖(-)、葡萄糖(+)、H2S(-)、苯丙氨酸脱氨酶(+)。
培养基:改良LB培养基(组成成份为:1%胰蛋白胨、0.5%酵母提取物,1%氯化钠、0.1%葡萄糖、0.002%TTC、PH7.2~7.4)。
1.3.实验方法:
在LB平板中心点种奇异变形杆菌,37℃培养9小时,开始出现不断向外扩展间隔3小时的同心环,以此作为对照;在LB平板中加入终浓度为0.5%式(I)化合物同法点种奇异变形杆菌,37℃培养,结果不但形成每隔3小时出现的同心环,而且与对照相比,可见在每条环上有许多细小的波动也表现出来。
2.实验结果及评价:
本实验采用生物波动模型,用以研究式(I)化合物的促波作用,结果可见式(I)化合物不仅可以使细菌细胞表现正常的生物波特征,而且使这种波动表现出更加微细的波动方式,表明式(I)化合物对生物波动是有促进作用的。
八.本发明的保健酒添加剂式(I)化合物的毒理试验包括:
1.急性毒性试验:
2.Ames试验;
3.小鼠骨髓细胞微核试验;
4.鼠精子畸性试验;
5.小鼠睾丸染色体畸变试验;
6.慢性致死试验;
7.亚慢性毒性(90天喂养)试验;
8.传统致畸试验,
试验结论表明:式(I)化合物急性毒性试验剂量超过2g/kg,是人注射剂量的300倍,仍未出现急性中毒反应;在长期毒性试验中,最高剂量已达到1g/kg,经四周试验观察,未出现中毒反应;在生殖试验中,从常规剂量7mg/kg喂小鼠,经三次传代,证明式(I)化合物对小鼠受孕、妊娠、分娩、哺乳及仔鼠发育均无影响。证明式(I)化合物属无毒物质。因此由其作为添加剂的保健酒也无毒性。
本发明提供的以式(I)化合物作为功效添加剂的保健酒不同于已知的保健酒,它不但能够在调整程度微生态环境改善程度功能具有功效而且能够最大限度避免酒精对肝脏的损伤,从而提高了该保健酒开发的价值,作为一种功效独特的保健酒,它还具有配制方法简单,无任何毒副作用的优点。
本发明的一个最佳实施方案是采用0.1g/100ml重量、体积比配制保健酒,在酒溶液100ml中,加入式(I)化合物添加剂为0.1g.还可添加其它滋补品。