CN104888187B - 一种防治异育银鲫鳃出血疾病的药物组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种防治异育银鲫鳃出血疾病的药物组合物，该组合物所含原料及各原料的重量份数为：中药膏20‑50份，大豆肽20‑40份，烘干淀粉10‑60份；将上述原料混合即得所述药物组合物。本发明选用中草药和微生态制剂相结合的配方，利用现代中药技术，把中药破壁后进行发酵，最大程度的提取和保留药物的有效成分，对异育银鲫“鳃出血”具有很好疗效，有效控制率可以达到80％。
Description
技术领域
本发明涉及一种药物组合物，尤其是涉及一种用于防治异育银鲫鳃出血疾病的中药组合物及其制备方法。
背景技术
江苏苏北地区人工养殖异育银鲫近年来大规模爆发“鳃出血”病，流行季节为每年的4～11月，高峰季节为4～6月和9～11月，该病流行的水温适宜范围为15.0～25.0℃，当7～8月水温处于上行期升高至26.0℃以上时，这种疾病的发生率会大幅度下降甚至停止发生。但是，9月以后水温进入下行期，即使水温高于26.0℃，疾病也可能发生。
“鳃出血”病典型症状为：体表、下颌、尤其是鳃部严重充血，将濒死病鱼提离水面时，血液会不断地顺着鳃丝流出；通过各科研院所的反复试验，表明该病的病原为鲤疱疹病毒-Ⅱ，此病毒侵染鱼鳃组织粒细胞和肾脏、脾脏的造血细胞，并导致细胞坏死，鳃组织受感染受伤时导致出血症状，此病对异育银鲫的养殖具有极大的危害，死亡率高达90％，到目前为止未有有效的控制方法。
发明内容
针对现有技术存在的上述问题，本申请人提供一种防治异育银鲫鳃出血疾病的药物组合物及其制备方法。本发明采用中药间的配伍，对异育银鲫“鳃出血”具有很好疗效，有效控制率可以达到80％。
本发明的技术方案如下：
一种防治异育银鲫鳃出血疾病的药物组合物，所述药物组合物所含原料及各原料的重量份数为：中药膏20-50份，大豆肽20-40份，烘干淀粉10-60份；将上述原料混合即得所述药物组合物；
所述中药膏的制备方法为：
(1)将黄芪5-15份、黄芩5-15份、金银花1-5份、连翘5-10份、鱼腥草15-20份、板蓝根5-20份、苦参2-10份、五味子5-20份、柴胡10-20份和甘草10-20份混合，粉粹至20～80目，制得中药粉末；
(2)将步骤(1)制得的中药粉末，加入到pH为3.0～6.0的水溶液中，并置于发酵罐中，同时在发酵罐中加入纤维素酶和果胶酶，设置发酵罐罐温为40～50℃，搅拌速度为3～10转/分钟，培养12～24h；
(3)在经过步骤(2)反应后的发酵罐中加入乳酸菌和枯草芽孢杆菌，设置发酵罐罐温25～40℃，搅拌转速3～10转/分钟，继续培养24～36h；
(4)将步骤(3)所得的发酵液倒入旋转蒸发仪的容量瓶内，设置温度为50℃，气压为0.001MPa，从沸腾开始计时，保持40分钟，40分钟后收集旋出液，然后在旋转蒸发仪的容量瓶加水至5L继续按照上述条件提取，40分钟后收集旋出液；总共重复提取三次，将三次所得的旋出液在旋转蒸发仪内浓缩，浓缩温度为80℃，气压为0.001Mpa，浓缩至浓稠膏状物为止，即得所述中药膏。
步骤(2)中所述pH为3.0～6.0的水溶液采用醋酸-醋酸钠为pH调节剂；所述中药粉末与水溶液的重量比为1:2～6。
步骤(2)中所述纤维素酶、果胶酶、中药粉末间的重量比为1:0.8～1.5:100～200；所述纤维素酶的规格为5000IU/g，所述果胶酶的规格为10000IU/g。
步骤(3)中所述乳酸菌、枯草芽孢杆菌、中药粉末间的重量比为1:0.2～0.5:50～150；所述乳酸菌的规格为200亿CFU/g，所述枯草芽孢杆菌的规格为200亿CFU/g。
本发明有益的技术效果在于：
1、本发明选用中草药和微生态制剂相结合的配方，利用现代中药技术，把中药破壁后进行发酵，最大程度的提取和保留药物的有效成分。
2、本发明采用抗病毒的中草药，预防控制病毒的发生和蔓延，辅以提高机体免疫功能的大豆肽，其作用是增强异育银鲫的非特异性免疫功能，提高其抗病力，以提升药物的使用效果；大豆肽是一种微生态制剂产品，它能激活并提高免疫细胞的活性。
3、本发明制备方法包括药物的配比、破壁、发酵、抽提与混合五大工艺步骤，其中配方比例按重量份数计；本发明采用的中药提取工艺也有别于一般的提取工艺，它首先将中药进行破壁处理，然后再进行发酵，最后在低温低压的条件下进行提取，经过破壁、发酵后的中药，其内部结构发生了较大变化，更加有利于中药的提取。
具体实施方式
下面结合实施例，对本发明进行具体描述。
实施例1
一种防治异育银鲫鳃出血疾病的药物组合物的制备方法，包括以下步骤：
(1)黄芪10份、黄芩10份、金银花5份、连翘8份、鱼腥草15份、板蓝根15份、苦参7份、五味子10份、柴胡10份、甘草10份，混合粉碎至80目，制得中药粉末；
(2)将步骤(1)制得的中药粉末，加入到pH为3.0的水溶液中(醋酸-醋酸钠为pH调节剂，中药粉末与水溶液的重量比为1:2)，并置于发酵罐中，同时在发酵罐中加入纤维素酶(5000IU/g)和果胶酶(10000IU/g)，设置发酵罐罐温为40℃，搅拌速度为10转/分钟，培养24h；所述纤维素酶、果胶酶、中药粉末间的重量比为1:0.8:100；
(3)在经过步骤(2)反应后的发酵罐中加入乳酸菌(200亿CFU/g)和枯草芽孢杆菌(200亿CFU/g)，设置发酵罐罐温40℃，搅拌转速3转/分钟，继续培养24h；所述乳酸菌、枯草芽孢杆菌、中药粉末间的重量比为1:0.5:100；
(4)将步骤(3)所得的发酵液倒入旋转蒸发仪的容量瓶内，设置温度为50℃，气压为0.001MPa，从沸腾开始计时，保持40分钟，40分钟后收集旋出液，然后在旋转蒸发仪的容量瓶加水至5L继续按照上述条件提取，40分钟后收集旋出液；总共重复提取三次，将三次所得的旋出液在旋转蒸发仪内浓缩，浓缩温度为80℃，气压为0.001Mpa，浓缩至浓稠膏状物为止，即得所述中药膏；
(5)按照膏状物50份、大豆肽40份、烘干淀粉10份的比例混合均匀，即得本发明药物组合物。
实施例2
一种防治异育银鲫鳃出血疾病的药物组合物的制备方法，包括以下步骤：
(1)黄芪5份、黄芩5份、金银花5份、连翘8份、鱼腥草15份、板蓝根15份、苦参7份、五味子10份、柴胡15份、甘草15份，混合粉碎至80目，制得中药粉末；
(2)将步骤(1)制得的中药粉末，加入到pH为5.0的水溶液中(醋酸-醋酸钠为pH调节剂，中药粉末与水溶液的重量比为1:6)，并置于发酵罐中，同时在发酵罐中加入纤维素酶(5000IU/g)和果胶酶(10000IU/g)，设置发酵罐罐温为50℃，搅拌速度为3转/分钟，培养12h；所述纤维素酶、果胶酶、中药粉末间的重量比为1:1.5:200；
(3)在经过步骤(2)反应后的发酵罐中加入乳酸菌(200亿CFU/g)和枯草芽孢杆菌(200亿CFU/g)，设置发酵罐罐温25℃，搅拌转速10转/分钟，继续培养36h；所述乳酸菌、枯草芽孢杆菌与中药粉末间的重量比为1:0.2:50；
(4)将步骤(3)所得的发酵液倒入旋转蒸发仪的容量瓶内，设置温度为50℃，气压为0.001MPa，从沸腾开始计时，保持40分钟，40分钟后收集旋出液，然后在旋转蒸发仪的容量瓶加水至5L继续按照上述条件提取，40分钟后收集旋出液；总共重复提取三次，将三次所得的旋出液在旋转蒸发仪内浓缩，浓缩温度为80℃，气压为0.001Mpa，浓缩至浓稠膏状物为止，即得所述中药膏；
(5)按照膏状物20份、大豆肽30份、烘干淀粉50份的比例混合均匀，即得本发明药物组合物
实施例3
一种防治异育银鲫鳃出血疾病的药物组合物的制备方法，包括以下步骤：
(1)黄芪5份、黄芩10份、金银花5份、连翘10份、鱼腥草15份、板蓝根15份、苦参10份、五味子10份、柴胡10份、甘草10份，混合粉碎至80目，制得中药粉末；
(2)将步骤(1)制得的中药粉末，加入到pH为6.0的水溶液中(醋酸-醋酸钠为pH调节剂，中药粉末与水溶液的重量比为1:4)，并置于发酵罐中，同时在发酵罐中加入纤维素酶(5000IU/g)和果胶酶(10000IU/g)，设置发酵罐罐温为45℃，搅拌速度为5转/分钟，培养18h；所述纤维素酶、果胶酶与中药粉末间的重量比为1:1:150；
(3)在经过步骤(2)反应后的发酵罐中加入乳酸菌(200亿CFU/g)和枯草芽孢杆菌(200亿CFU/g)，设置发酵罐罐温30℃，搅拌转速8转/分钟，继续培养30h；所述乳酸菌、枯草芽孢杆菌与中药粉末间的重量比为1:0.3:100；
(4)将步骤(3)所得的发酵液倒入旋转蒸发仪的容量瓶内，设置温度为50℃，气压为0.001MPa，从沸腾开始计时，保持40分钟，40分钟后收集旋出液，然后在旋转蒸发仪的容量瓶加水至5L继续按照上述条件提取，40分钟后收集旋出液；总共重复提取三次，将三次所得的旋出液在旋转蒸发仪内浓缩，浓缩温度为80℃，气压为0.001Mpa，浓缩至浓稠膏状物为止，即得所述中药膏；
(5)按照膏状物20份、大豆肽20份、烘干淀粉60份的比例混合均匀，即得本发明药物组合物
测试例：
1、将实施例2制得的本发明药物组合物按照1‰的比例添加到鳊鱼用全价饲料中，搅拌混合均匀阴干后备用；将该饲料应用于江苏宜兴市和桥镇一家鳊鱼养殖户进行塘口养殖试验，养鱼塘平均水深2.5米，放养规格为15～20尾/kg，放养密度为1500～1800尾/亩，共计放养2亩，饲喂七个月后出鱼。
经测定鳊鱼平均体重为550g/尾，健康状况良好，体色及体表粘液正常，经解剖肝脏胰脏眼观正常，鳊鱼总体抗应激能力强，无发红发毛现象，长期饲喂结果表明该预混料安全无毒副作用。
2、试验动物：选自江苏省常州市芙蓉镇一养殖塘的异育银鲫当年鱼种，在试验前先养殖两周，挑选体质健壮、反应敏捷、体长大小相接近的200尾异育银鲫作为试验动物。
试验设计：采用单因子设计，将上述200尾鳊鱼随机分成两个处理组，一个试验组，一个对照组，每组设4个重复，共8个养殖桶(养殖桶规格：直径70cm，高100cm)，每个养殖桶25尾试验鱼。试验组和对照组饲喂的饲料均为通威股份有限公司无锡分公司生产的异育银鲫专用饲料，其中试验组饲料添加了本发明实施例2制得的药物组合物(添加比例为1‰)；对照组和试验组在开始试验前，均暂养一周，试验正式开始后，试验组和对照组分别投喂不同的饲料，一周后开始进行异育银鲫的鲤疱疹病毒攻毒，然后开始记录接下来一周各桶的试验鱼状况。试验结果见表1。
养殖管理：养殖过程中采用微循环系统换水，间隙式增氧，温度控制在20～25℃；以养殖桶为单位，于每日9:00、13:00、18:00进行投饵，每日投饵量为该养殖桶内鳊鱼总体重的2.5～3.0％，连续投饵15天。
表1
由表1数据可知，与对照组相比，试验组异育银鲫的存活率明显高于对照组；该试验结果表明，本发明的药物对异育银鲫的“鳃出血”具有很好的预防和治疗效果，可显著提高感染鲤疱疹病毒的异育银鲫存活率。
上述实施例中大豆肽为本公司生产的产品，其余各原料均为市售商品，所述各试验方法如无特殊说明均为本领域常规方法，所涉及各生产设备均为饲料领域常规生产设备。
以上所述的仅是本发明的优选实施方式，本发明不限于以上实施例。可以理解，本领域技术人员在不脱离本发明的精神和构思的前提下直接导出或联想到的其他改进和变化，均应认为包含在本发明的保护范围之内。
Claims (4)
1.一种防治异育银鲫鳃出血疾病的药物组合物，其特征在于所述药物组合物所含原料及各原料的重量份数为：中药膏20-50份，大豆肽20-40份，烘干淀粉10-60份；将上述原料混合即得所述药物组合物；
所述中药膏的制备方法为：
(1)将黄芪5-15份、黄芩5-15份、金银花1-5份、连翘5-10份、鱼腥草15-20份、板蓝根5-20份、苦参2-10份、五味子5-20份、柴胡10-20份和甘草10-20份混合，粉粹至20～80目，制得中药粉末；
(2)将步骤(1)制得的中药粉末，加入到pH为3.0～6.0的水溶液中，并置于发酵罐中，同时在发酵罐中加入纤维素酶和果胶酶，设置发酵罐罐温为40～50℃，搅拌速度为3～10转/分钟，培养12～24h；
(3)在经过步骤(2)反应后的发酵罐中加入乳酸菌和枯草芽孢杆菌，设置发酵罐罐温25～40℃，搅拌转速3～10转/分钟，继续培养24～36h；
(4)将步骤(3)所得的发酵液倒入旋转蒸发仪的容量瓶内，设置温度为50℃，气压为0.001MPa，从沸腾开始计时，保持40分钟，40分钟后收集旋出液，然后在旋转蒸发仪的容量瓶加水至5L继续按照上述条件提取，40分钟后收集旋出液；总共重复提取三次，将三次所得的旋出液在旋转蒸发仪内浓缩，浓缩温度为80℃，气压为0.001Mpa，浓缩至浓稠膏状物为止，即得所述中药膏。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于步骤(2)中所述pH为3.0～6.0的水溶液采用醋酸-醋酸钠为pH调节剂；所述中药粉末与水溶液的重量比为1:2～6。
3.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于步骤(2)中所述纤维素酶、果胶酶、中药粉末间的重量比为1:0.8～1.5:100～200；所述纤维素酶的规格为5000IU/g，所述果胶酶的规格为10000IU/g。
4.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于步骤(3)中所述乳酸菌、枯草芽孢杆菌、中药粉末间的重量比为1:0.2～0.5:50～150；所述乳酸菌的规格为200亿CFU/g，所述枯草芽孢杆菌的规格为200亿CFU/g。
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