CN103611040B - 高良姜植物的花和/或果实在制备抑菌剂或防治水产动物细菌性疾病药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及中医药领域，特别涉及高良姜植物的花和/或果实在制备抑菌剂或防治水产动物细菌性疾病药物中的应用。本发明提供的防治水产动物细菌性疾病的高良姜制备物由高良姜植物的花和/或果实制得。该高良姜制备物可有效抑制鱼害粘球菌或肠型点状气单胞菌，可有效防治水产动物细菌性疾病，可用于制备防治水产动物细菌性疾病的药物。

Description

高良姜植物的花和/或果实在制备抑菌剂或防治水产动物细菌性疾病药物中的应用

技术领域

本发明涉及中医药领域，特别涉及高良姜植物的花和/或果实在制备抑菌剂或防治水产动物细菌性疾病药物中的应用。

背景技术

水产养殖业在我国国民经济中占有举足轻重的地位，它在很大程度上对野生水产品起到了补充甚至替代的作用。然而在水产养殖业高速发展的同时，越来越多的水产品疾病也接踵而至，这些疾病大多属细菌性疾病，如淡水鱼类的出血性败血病、肠炎病和烂鳃病，海水鱼类的弧菌病和链球菌病。细菌性疾病是我国目前危害鱼种类最多、范围最大、流行地区最广、流行季节最长及造成损失最大的一种传染病。

为预防细菌性疾病发生，提高水产养殖动物的成活率，渔民大量使用抗生素等药品，导致水产品中抗生素含量严重超标，危害食品安全，同时某些病原菌极易对抗生素产生耐药性，导致其防治工作更为艰巨。

免疫接种是提高水产养殖动物对某一特定性病原菌免疫力最有效的方法。目前，已报道有防治水产养殖动物疾病的复合菌苗，其制备方法为：将水产养殖动物易感染的细菌分别培养、灭活后制得。该技术虽然对虾、鱼、海参的常见细菌性疾病有满意的防治效果，但是菌苗制作过程繁琐，成本高昂，而且水产养殖动物易感染的疾病种类繁多，单靠制作菌苗难以满足其对所有疾病的抵抗，因此应用范围受到很大限制。

针对上述问题，目前多采用中药来防治水产动物疾病，如市售药物“鱼虾败毒散”，它是由黄连、黄芩和板蓝根等中药经浸提、萃取而制成的速效药物，对水产养殖动物疾病有良好的防治效果，但是黄连、黄芩和板蓝根等中药被大量用于防治人类疾病的医药制备中，使得鱼虾败毒散的原材料来源受到影响，而且价格昂贵，增大了养殖成本。因此，开发新型的、对细菌性疾病防治效果好、价格低廉、原材料易得、制备过程简单的中药，成为水产养殖业的研究重点。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了高良姜植物的花和/或果实在制备抑菌剂或防治水产动物细菌性疾病药物中的应用。通过研究发现，该高良姜制备物能够有效抑制鱼害粘球菌、肠型点状气单胞菌等细菌，可有效防治水产动物细菌性疾病，从而可广泛应用于制备抑菌剂或防治水产动物细菌性疾病药物。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了高良姜植物的花和/或果实在制备抑菌剂中的应用。

姜科植物高良姜AlpiniaofficinarumHance产于广东的湛江、徐闻、惠阳、东莞等县市，广西的陆川、博白等县，海南省的陵水、儋县、屯昌等县市，此外台湾及云南亦有小量的栽培。高良姜一般是指高良姜植物的根茎，不仅是一种重要药材，而且是一种大宗香料，近年来其种植面积不断增大。高良姜植物的花和果实具有高良姜本身的香味，但是不作为药物使用，被废弃田间，造成极大的资源浪费。本发明通过研究，证明了高良姜植物的花和/或果实能够有效抑制鱼害粘球菌、肠型点状气单胞菌等细菌，可有效防治水产动物细菌性疾病，从而可广泛应用于制备抑菌剂或防治水产动物细菌性疾病药物。

在本发明提供的一些实施例中，菌为鱼害粘球菌。

在本发明提供的另一些实施例中，菌为肠型点状气单胞菌。

本发明还提供了高良姜植物的花和/或果实在制备防治水产动物细菌性疾病药物中的应用。

作为优选，细菌性疾病为出血性败血病、肠炎病、烂鳃病、弧菌病或链球菌病。

在本发明提供的一些实施例中，细菌性疾病为肠炎病或烂鳃病。

作为优选，水产动物为鱼类、虾类、螺类或贝壳类。

在本发明提供的一些实施例中，水产动物为鱼类、虾类或螺类。

本发明还提供了一种防治水产动物细菌性疾病的高良姜制备物，该高良姜制备物由高良姜植物的花和/或果实制得。

在本发明提供的一些实施例中，该高良姜制备物的制备方法为：取高良姜植物的花和/或果实，经粉碎、醇提，即得。

在本发明提供的一些实施例中，醇提具体为：取粉碎后的高良姜植物的花和/或果实与乙醇水溶液混合，加热回流，过滤，浓缩。

在本发明提供的一些实施例中，醇提过程中，高良姜植物的花和/或果实与乙醇水溶液的质量比为1:（3～10）。

在本发明提供的一些实施例中，乙醇水溶液的体积百分含量为30%～95%。

作为优选，乙醇水溶液的体积百分含量为50%。

作为优选，醇提的次数为2次。

作为优选，每次醇提的时间为30～60min。

在本发明提供的一些实施例中，醇提过程中浓缩的倍数为3倍。

在本发明提供的另一些实施例中，该高良姜制备物的制备方法为：取高良姜植物的花和/或果实，经粉碎、水煎，即得。

在本发明提供的一些实施例中，水煎具体为：取粉碎后的高良姜植物的花和/或果实与水混合，煎煮，过滤，浓缩。

在本发明提供的一些实施例中，水煎过程中，高良姜植物的花和/或果实与水的质量比为1:（3～10）。

作为优选，水煎的次数为2次。

作为优选，每次水煎的时间为30～60min。

在本发明提供的一些实施例中，水煎过程中浓缩的倍数为3倍。

在本发明提供的另一些实施例中，该高良姜制备物的制备方法为：取高良姜植物的花和/或果实，经粉碎，即得。

为了保证高良姜制备物药效的充分发挥，作为优选，粉碎的粒径为20～40目。

本发明提供的高良姜制备物可直接投入到养殖池中，用于防治水产动物疾病。

为保证药物施用剂量有一个共同的参照标准，本发明中的药物施用剂量均采用最小致死剂量（引起受试对象中的个别成员出现死亡的剂量），确保受试药物达到最大防治效果。

本发明提供了高良姜植物的花和/或果实在制备抑菌剂或防治水产动物细菌性疾病药物中的应用。本发明提供的防治水产动物细菌性疾病的高良姜制备物由高良姜植物的花和/或果实制得。通过抗菌活性试验的研究发现，本发明提供的高良姜制备物均对引起鱼烂鳃病的粘球菌和引起鱼肠炎病的肠型点状气单胞菌表现出明显的抑制作用，与阳性对照药物的抑菌活性相当，表明本发明提供的高良姜制备物具有明显的抑菌活性；通过高良姜制备物在养殖水体中的抑菌试验的研究发现，本发明提供的高良姜制备物对养殖水体的抑菌效果优于现有产品的抑菌效果，或与现有产品的抑菌效果相当，表明本发明提供的高良姜制备物能够有效地抑制细菌数量，避免养殖水体中细菌引发各种疾病，为水产动物提供良好的饲养环境；通过高良姜制备物对养殖水体中鱼苗、虾苗、东风螺成活率影响的研究发现，施用本发明提供的高良姜制备物后，鱼苗、虾苗、东风螺的成活率极大地增加了，且成活率优于阳性对照组，表明本发明提供的高良姜制备物可提高鱼苗、虾苗、东风螺的成活率。由此可见，该高良姜制备物能够有效抑制鱼害粘球菌、肠型点状气单胞菌等细菌，可有效防治水产动物细菌性疾病，从而可广泛应用于制备抑菌剂或防治水产动物细菌性疾病药物。

具体实施方式

本发明公开了高良姜植物的花和/或果实在制备抑菌剂或防治水产动物细菌性疾病药物中的应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。

本发明提供的高良姜植物的花和/或果实在制备抑菌剂或防治水产动物细菌性疾病药物中的应用中所用高良姜植物的花和/或果实可由市场购得，其为种植的副产物，来源充足。

下面结合实施例，进一步阐述本发明：

实施例1高良姜制备物的制备

称取干燥的高良姜果实140g，粉碎，加入1400g体积分数为30%的乙醇加热回流提取2次，每次1h，醇提后过滤，滤液浓缩至浸膏，即得。

实施例2高良姜制备物的制备

称取干燥的高良姜花120g，粉碎，加入700g体积分数为95%的乙醇加热回流提取2次，每次50min，醇提后过滤，滤液浓缩至浸膏，即得。

实施例3高良姜制备物的制备

称取干燥的高良姜果实200g粉碎，加入600g体积分数为50%的乙醇加热回流提取2次，每次30min，醇提后过滤，滤液浓缩至浸膏，即得。

实施例4高良姜制备物的制备

称取干燥的高良姜果实120g，粉碎，加入1200mL水煎煮2次，每次1h，水煎后过滤，滤液浓缩至浸膏，即得。

实施例5高良姜制备物的制备

称取高良姜花150g，粉碎，加入900mL水煎煮2次，每次50min，水煎后过滤，滤液浓缩至浸膏，即得。

实施例6高良姜制备物的制备

称取干燥的高良姜果实200g，粉碎，加入600mL水煎煮2次，每次30min，水煎后过滤，滤液浓缩至浸膏，即得。

实施例7高良姜制备物的制备

取干燥的高良姜果实，粉碎至30目，即得。

实施例8高良姜制备物的制备

取干燥的高良姜花，粉碎至20目，即得。

实施例9高良姜制备物的制备

取干燥的高良姜果实，粉碎至40目，即得。

实施例10抗菌活性试验

试验菌种：引起鱼烂鳃病的粘球菌（MyxococcusPiscicola）；引起鱼肠炎病的肠型点状气单胞菌（Aeromonaspunctata）。

试验分组：试验分为对照组和试验组，对照组分别施用磺胺嘧啶（防治鱼烂鳃病的阳性对照药物）和土霉素（防治鱼肠炎病的阳性对照药物）；试验组分别施用实施例1至6提供的高良姜制备物。

试验菌种均用牛肉膏固体培养基活化，用其液体培养基培养试验菌种备用（浓度1×10⁷）。刚灭菌的固体牛肉膏培养基冷却至50～60℃，在每200mL培养基中加2000μL粘球菌或肠型点状气单胞菌培养液，充分摇匀，倒平板待用。待平板凝固后将直径为6mm的滤纸片置于平板上，然后分别在滤纸片上加入实施例1至6提供的高良姜制备物和阳性对照药物50μL。高良姜制备物的浓度为0.1mg/mL，阳性对照浓度为0.1mg/mL。将上述处理平板于28℃下培养2天，用抑菌圈直径大小表示试验用药的抑菌活性。试验结果如表1所示。

表1抑菌活性检测结果

由表1的试验数据可知，本发明实施例1至6提供的高良姜制备物均对引起鱼烂鳃病的粘球菌和引起鱼肠炎病的肠型点状气单胞菌表现出明显的抑制作用，与阳性对照药物的抑菌活性相当。

取实施例7至9提供的高良姜制备物，进行抑菌活性试验，结果与实施例1至6提供的高良姜制备物的抑菌活性相近，表明实施例7至9提供的高良姜制备物对引起鱼烂鳃病的粘球菌和引起鱼肠炎病的肠型点状气单胞菌具有明显的抑制作用。

由此可见，本发明提供的高良姜制备物对引起鱼烂鳃病的粘球菌和引起鱼肠炎病的肠型点状气单胞菌具有明显的抑制作用。

实施例11高良姜制备物在养殖水体中的抑菌试验

取池塘水，平分为11份，每份10L，设对照组和试验组，对照组又分为空白对照组和阳性药对照组，空白对照组不做任何处理，阳性药对照组施用市售的鱼虾败毒散，试验组施用本发明实施例1至9提供的高良姜制备物。为保证药物施用剂量有一个共同的参照标准，本试验除空白对照组外，其余各组均按最小致死剂量（引起受试对象中的个别成员出现死亡的剂量）施药，确保受试药物达到最大防治效果。于4h、8h、12h检测水中细菌数量，结果见表2。

表2抑菌试验检测结果

由表2的试验数据可知，本发明提供的高良姜制备物对养殖水体的抑菌效果优于现有产品的抑菌效果，或与现有产品的抑菌效果相当。结果表明本发明提供的高良姜制备物能够有效地抑制细菌数量，避免养殖水体中细菌引发各种疾病，为水产动物提供良好的饲养环境。

实施例12本发明提供的高良姜制备物对养殖水体中鱼苗成活率的影响

取池塘水，平分为11份，每份1m³，然后将每份水中分别放入鱼苗100尾（其中鲫鱼20尾，鲤鱼20尾，鲶鱼20尾，草鱼20尾，鲢鱼20尾）。设对照组和试验组，对照组又分为空白对照组和阳性药对照组，空白对照组不做任何处理，阳性药对照组施用市售的鱼虾败毒散，试验组施用本发明实施例1至9提供的高良姜制备物。为保证药物施用剂量有一个共同的参照标准，除空白对照组外，其余各组均按照最小致死剂量的一半施药，于10d、15d、20d检测鱼苗成活率，结果见表3。

表3鱼苗成活率检测结果

由表3的试验数据可知，空白对照组由于未施药，鱼苗成活率较低；而试验组和阳性对照组由于施药后，鱼苗成活率极大地增加了，且试验组的鱼苗成活率优于阳性对照组。结果表明本发明提供的高良姜制备物可提高鱼苗的成活率。

实施例13本发明提供的高良姜制备物对养殖水体中虾苗成活率的影响

取池塘水，平分为11份，每份1m³，然后将每份水中分别放入虾苗100尾。设对照组和试验组，对照组又分为空白对照组和阳性药对照组，空白对照组不做任何处理，阳性药对照组施用市售的鱼虾败毒散，试验组施用本发明实施例1至9提供的高良姜制备物。为保证药物施用剂量有一个共同的参照标准，除空白对照组外，其余各组均按照最小致死剂量的一半施药，于10d、15d、20d检测虾苗成活率，结果见表4。

表4虾苗成活率检测结果

由表4的试验数据可知，空白对照组由于未施药，虾苗成活率较低；而试验组和阳性对照组由于施药后，虾苗成活率极大地增加了，且试验组的虾苗成活率优于阳性对照组。结果表明本发明提供的高良姜制备物可提高虾苗的成活率。

实施例14本发明提供的高良姜制备物对养殖水体中东风螺成活率的影响

取池塘水，平分为11份，每份1m³，然后将每份水中分别放入东风螺100只。设对照组和试验组，对照组又分为空白对照组和阳性药对照组，空白对照组不做任何处理，阳性药对照组施用市售的鱼虾败毒散，试验组施用本发明实施例1至9提供的高良姜制备物。为保证药物施用剂量有一个共同的参照标准，除空白对照组外，其余各组均按照最小致死剂量的一半施药，于10d、15d、20d检测东风螺成活率，结果见表5。

表5东风螺成活率检测结果

由表5的试验数据可知，空白对照组由于未施药，东风螺成活率较低；而试验组和阳性对照组由于施药后，东风螺成活率极大地增加了，且试验组的东风螺成活率优于阳性对照组。结果表明本发明提供的高良姜制备物可提高东风螺的成活率。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (3)

1.高良姜植物的花和/或果实在制备抑菌剂中的应用；

所述菌为鱼害粘球菌或肠型点状气单胞菌。

2.高良姜植物的花和/或果实在制备防治水产动物细菌性疾病药物中的应用；所述细菌性疾病为肠炎病、烂鳃病。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述水产动物为鱼类、虾类、螺类或贝壳类。