CN103860663B - 一种防治水产养殖动物真菌病的中药制剂及制备方法 - Google Patents
一种防治水产养殖动物真菌病的中药制剂及制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103860663B CN103860663B CN201410113318.0A CN201410113318A CN103860663B CN 103860663 B CN103860663 B CN 103860663B CN 201410113318 A CN201410113318 A CN 201410113318A CN 103860663 B CN103860663 B CN 103860663B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- preparation
- water
- chinese
- fish
- medicine
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 67
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 title claims abstract description 24
- 239000003814 drug Substances 0.000 title abstract description 100
- 238000009360 aquaculture Methods 0.000 title abstract description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 39
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 19
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 23
- DTGKSKDOIYIVQL-WEDXCCLWSA-N (+)-borneol Chemical compound C1C[C@@]2(C)[C@@H](O)C[C@@H]1C2(C)C DTGKSKDOIYIVQL-WEDXCCLWSA-N 0.000 abstract description 17
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 abstract description 17
- REPVLJRCJUVQFA-UHFFFAOYSA-N (-)-isopinocampheol Natural products C1C(O)C(C)C2C(C)(C)C1C2 REPVLJRCJUVQFA-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 16
- 244000153955 Reynoutria sachalinensis Species 0.000 abstract description 16
- 235000003202 Reynoutria sachalinensis Nutrition 0.000 abstract description 16
- 229940116229 borneol Drugs 0.000 abstract description 16
- CKDOCTFBFTVPSN-UHFFFAOYSA-N borneol Natural products C1CC2(C)C(C)CC1C2(C)C CKDOCTFBFTVPSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 16
- DTGKSKDOIYIVQL-UHFFFAOYSA-N dl-isoborneol Natural products C1CC2(C)C(O)CC1C2(C)C DTGKSKDOIYIVQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 16
- 240000003152 Rhus chinensis Species 0.000 abstract description 13
- 235000014220 Rhus chinensis Nutrition 0.000 abstract description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 12
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 12
- 239000000843 powder Substances 0.000 abstract description 12
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical group CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 78
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 45
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 22
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 17
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 description 14
- 235000020639 clam Nutrition 0.000 description 13
- FDZZZRQASAIRJF-UHFFFAOYSA-M malachite green Chemical compound [Cl-].C1=CC(N(C)C)=CC=C1C(C=1C=CC=CC=1)=C1C=CC(=[N+](C)C)C=C1 FDZZZRQASAIRJF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 11
- 229940107698 malachite green Drugs 0.000 description 10
- 230000008569 process Effects 0.000 description 10
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 9
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 8
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 7
- 241000376029 Tachysurus fulvidraco Species 0.000 description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 7
- 238000006213 oxygenation reaction Methods 0.000 description 7
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 7
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 6
- 241000252498 Ictalurus punctatus Species 0.000 description 6
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 6
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 6
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 6
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 5
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 5
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 5
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 5
- 241000252230 Ctenopharyngodon idella Species 0.000 description 4
- 244000046101 Sophora japonica Species 0.000 description 4
- 235000010586 Sophora japonica Nutrition 0.000 description 4
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 241001459819 Carassius gibelio Species 0.000 description 3
- 241000252212 Danio rerio Species 0.000 description 3
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 description 3
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 210000004681 ovum Anatomy 0.000 description 3
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 description 3
- 230000024241 parasitism Effects 0.000 description 3
- 239000000273 veterinary drug Substances 0.000 description 3
- 241001124076 Aphididae Species 0.000 description 2
- 241000345998 Calamus manan Species 0.000 description 2
- 240000005636 Dryobalanops aromatica Species 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 241000907663 Siproeta stelenes Species 0.000 description 2
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 2
- 238000004500 asepsis Methods 0.000 description 2
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 238000006298 dechlorination reaction Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 208000010824 fish disease Diseases 0.000 description 2
- 229940084434 fungoid Drugs 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 230000012447 hatching Effects 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 2
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 2
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 235000012950 rattan cane Nutrition 0.000 description 2
- 239000004576 sand Substances 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 241000208223 Anacardiaceae Species 0.000 description 1
- 208000031295 Animal disease Diseases 0.000 description 1
- 241000237519 Bivalvia Species 0.000 description 1
- 241001164374 Calyx Species 0.000 description 1
- 239000003390 Chinese drug Substances 0.000 description 1
- 241000675108 Citrus tangerina Species 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 208000007163 Dermatomycoses Diseases 0.000 description 1
- 241000907904 Dipterocarpus Species 0.000 description 1
- 241000283070 Equus zebra Species 0.000 description 1
- 240000002373 Ficus pumila Species 0.000 description 1
- 235000006718 Ficus pumila Nutrition 0.000 description 1
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 description 1
- 206010019345 Heat stroke Diseases 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 244000130592 Hibiscus syriacus Species 0.000 description 1
- ZSBXGIUJOOQZMP-UHFFFAOYSA-N Isomatrine Natural products C1CCC2CN3C(=O)CCCC3C3C2N1CCC3 ZSBXGIUJOOQZMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010023126 Jaundice Diseases 0.000 description 1
- 241000321520 Leptomitales Species 0.000 description 1
- ZSBXGIUJOOQZMP-JLNYLFASSA-N Matrine Chemical compound C1CC[C@H]2CN3C(=O)CCC[C@@H]3[C@@H]3[C@H]2N1CCC3 ZSBXGIUJOOQZMP-JLNYLFASSA-N 0.000 description 1
- 241000721570 Melaphis Species 0.000 description 1
- 241000235395 Mucor Species 0.000 description 1
- 235000014676 Phragmites communis Nutrition 0.000 description 1
- 241001529246 Platymiscium Species 0.000 description 1
- 241000219050 Polygonaceae Species 0.000 description 1
- 208000004880 Polyuria Diseases 0.000 description 1
- 208000008350 Pruritus Vulvae Diseases 0.000 description 1
- 240000001341 Reynoutria japonica Species 0.000 description 1
- 235000018167 Reynoutria japonica Nutrition 0.000 description 1
- 239000006159 Sabouraud's agar Substances 0.000 description 1
- 240000000203 Salix gracilistyla Species 0.000 description 1
- 241000233667 Saprolegnia Species 0.000 description 1
- 241001460075 Saprolegnia parasitica Species 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 1
- 241000237551 Veneridae Species 0.000 description 1
- 206010056530 Vulvovaginal pruritus Diseases 0.000 description 1
- 238000002814 agar dilution Methods 0.000 description 1
- 244000144974 aquaculture Species 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000007640 basal medium Substances 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 230000002354 daily effect Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 210000003298 dental enamel Anatomy 0.000 description 1
- 201000003929 dermatomycosis Diseases 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000035619 diuresis Effects 0.000 description 1
- 230000000857 drug effect Effects 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000003912 environmental pollution Methods 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 235000021471 food effect Nutrition 0.000 description 1
- 230000009246 food effect Effects 0.000 description 1
- 235000021393 food security Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 230000001408 fungistatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- 239000010977 jade Substances 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 229930014456 matrine Natural products 0.000 description 1
- 201000002266 mite infestation Diseases 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000862 numbness Toxicity 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 230000007096 poisonous effect Effects 0.000 description 1
- 239000001965 potato dextrose agar Substances 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 201000003068 rheumatic fever Diseases 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 description 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- GOLXNESZZPUPJE-UHFFFAOYSA-N spiromesifen Chemical compound CC1=CC(C)=CC(C)=C1C(C(O1)=O)=C(OC(=O)CC(C)(C)C)C11CCCC1 GOLXNESZZPUPJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000002352 surface water Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000820 toxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 239000000341 volatile oil Substances 0.000 description 1
- 210000003905 vulva Anatomy 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Farming Of Fish And Shellfish (AREA)
Abstract
本发明公开了一种防治水产养殖动物真菌病的中药制剂及制备方法,它由一定比例的冰片、五倍子、忍冬藤、木槿皮、苦参、虎杖制成,其步骤是:A、将冰片、五倍子、忍冬藤、木槿皮、苦参、虎杖分别粉碎至40-60目。B、将步骤A粉碎的冰片、五倍子、忍冬藤、木槿皮、苦参、虎杖与海蛤粉混合均匀,获得一种混合物;C、将步骤B获得的混合物用适量(一般为20-30倍量)的水煎煮28-32分钟,过滤;再加入15-20倍量的水煎煮20分钟,再过滤,合并滤液;D、使用时将步骤C获得的滤液,稀释成所需要的药物浓度。该制剂配方合理,使用方便,成本低廉、效果确切,起效快。更主要的是不含化学药物,无污染,无残留,操作简便易行,药物用量少。
Description
技术领域
本发明属于水产动物疾病防治(渔药)技术领域,更具体涉及一种防治水产动物水霉病等真菌性病的纯中药复方制剂,同时还涉及一种防治水产动物水霉病等真菌性病的纯中药复方制剂的制备方法,适于水产养殖动物及鱼卵水霉病的防治。
背景技术
水霉病(Saprolegnisis)又叫肤霉病、白毛病,是由多种水生真菌引起的一种常见继发性真菌性疾病,对水产动物的种类没有严格的选择性,是一种世界性分布的鱼类疾病,各种水产动物,从卵到各龄成体都可感染,在换水或搬运时鱼类体表受伤,水霉菌便乘机入侵,极易发生水霉病的传染并迅速蔓延,造成大量鱼死亡,危害特别严重,已成为水产养殖的主要疾病之一,给我国渔业生产造成了重大损失。长期以来,水霉病的防治是鱼类病害防治中最棘手的一个难题,养殖鱼类患了真菌性疾病很难治愈。以往较为有效的防治药物为孔雀石绿,但自2002年起我国开始禁用孔雀石绿,导致水霉病的有效防治药物长期处于空白,从而使得在养殖生产上对该病的防治遇到了极大的困难,而孔雀石绿的屡禁不止也给水产食品安全带来了极大的隐患。因此,无论是对于水产养殖病害防治的实际需要,还是对于维护公共卫生安全来说,开发出安全、高效,能够在防治水霉病方面替代“孔雀石绿”的药物都是十分迫切的。为此,我们在国家“十一五”科技支撑项目的资助下,承担了“防治鱼类水霉病孔雀石绿替代药物的开发研究”,经过多年来的反复试验研究,发现由五倍子、海蛤粉、冰片、木槿皮、忍冬藤和苦参组成的纯中药复方制剂对水霉菌具有很好的抑制和杀灭效果。
目前水产用兽药国家标准药物有近150个品种,然而,基本没有用于水产动物水霉病防治的药物。文献中很许多抗水霉药物的报道,但效果都不确切,而且多数是化学制剂或者配方中含有化学制剂,存在毒副作用大的问题,申报新水产用兽药的难度大。虽然也有些纯中药制剂,但有效剂量太大,使用成本高。
发明内容
本发明的目的是在于提供了一种防治水产动物水霉病的纯中药复方制剂。该制剂配方合理,成本低廉,使用方便,效果确切,起效快,而且绿色环保。
本发明的另一个目的是在于提供了一种防治水产动物水霉病的纯中药复方制剂的制备方法:先将药物粉碎至40-60目大小,然后加入适当量的水煮沸30分钟,过滤。将滤渣再加适量的水煮20-30分钟,再过滤。合并两次的滤液,备用。煎煮药剂时的用水量应根据使用的目的不同,适当增减,但不少于药量的30倍。制备方法简单易行,可以提高药效,减少药物用量。
为了实现上述的目的,本发明采用以下技术措施:
一种防治水产动物水霉病的中药复方制剂,它由以下原料的质量分数制成:
一种防治水产动物水霉病的中药复方制剂,它由以下原料的质量分数制成(优选范围):
一种防治水产动物水霉病的中药复方制剂,它由以下原料的质量分数制成(较好范围):
一种防治水产动物水霉病的中药复方制剂,它由以下原料的质量分数制成(最佳范围):
一种防治水产动物水霉病的中药复方制剂,它由以下原料的质量分数制成(最佳值):
该发明所提供的防治水产动物水霉病的制剂各组分包括:
海蛤粉:为帘蛤科动物青蛤等几种海蛤的贝壳。味咸、性寒、无毒。
忍冬藤:又名大薜荔、水杨藤、千金藤,多年生半常绿缠绕灌木,茎中空,幼枝密生短柔毛。叶对生;密被短柔毛;叶片卵圆形,或长卵形,先端短尖,罕钝圆,基部圆形或近于心形,全缘,两面和边缘均被短柔毛。花成对腋生;花梗密被短柔毛;小苞长约1毫米;花萼短小有残叶及叶痕。具有清热解毒,疏风通络的疗效。可用于温病发热,疮痈肿毒,热毒血痢,风湿热痹。
五倍子:又名百虫仓、百药煎、棓子,为同翅目蚜虫科的角倍蚜或倍蛋蚜雌虫寄生于漆树科植物“盐肤木”及其同属其他植物的嫩叶或叶柄,刺伤而生成一种囊状聚生物虫瘿,经烘倍干燥后所得。可以治疗多种疾病。
冰片:又名片脑、桔片、龙脑香、梅花冰片、羯布罗香、梅花脑、冰片脑、梅冰等,是龙脑香科植物龙脑香的树脂和挥发油加工品提取获得的结晶,是近乎于纯粹的右旋龙脑。亦有用化学方法合成,有毒。
木槿皮:为锦葵科木槿属植物木槿HibiscussyriacusL.的茎皮或根皮。春、夏砍伐茎枝,剥皮晒干;秋季挖根,剥皮晒干。干燥的茎皮或根皮呈半圆筒或圆筒状,长15~30厘米,宽窄及厚薄多不一致,通常宽0.7~1厘米,厚约2毫米。外皮粗糙,土灰色,有纵向的皱纹及横向的小突起(皮孔);内表面淡黄绿色,现明显之丝状纤维。
苦参:为豆科苦参属的植物。别名:苦骨、地槐、水槐、菟槐、骄槐、野槐或白茎。生长于海拔1,500米的地区,多生在山坡、沙地、草坡、灌木林中及田野附近,目前尚未由人工引种栽培。功能主治:清热燥湿,杀虫,利尿。用于热痢,黄疸尿闭,阴肿阴痒,湿疹,湿疮,皮肤瘙痒,疥癣。
虎杖:别名酸筒杆、酸桶芦、大接骨、斑庄根,拉丁学名:Polygonumcuspidatum,蓼科、虎杖属植物,多年生草本。根状茎粗壮,横走。茎直立。微苦,微寒。归肝、胆、肺经。有清热解毒、清凉解暑、健胃清食作用。
一种防治水产动物水霉病的纯中药复方制剂的制备方法,其步骤是:
A、将冰片、五倍子、忍冬藤、木槿皮、苦参、虎杖分别粉碎至40-60目。
B、将步骤A粉碎的冰片、五倍子、忍冬藤、木槿皮、苦参、虎杖与海蛤粉混合均匀,获得一种混合物;
C、将步骤B获得的混合物用适量(药量的20-30倍)的水煎煮28-32分钟,过滤;将滤渣加适量的水(15-20倍)再煎煮20-30分钟,再过滤。合并两次的滤液,备用。煎煮时所用的水量应根据使用时的药物浓度进行适当增减,以保证合并后滤液的药物浓度不小于所需要的最大浓度(3%)。
D、使用时将步骤C获得的滤液,配置到所需的浓度。按下列表格中的药物浓度要求用于亲鱼、鱼卵的短时间浸泡消毒。运输时间不超过6小时,可以用0.2-0.3%的浓度。用高浓度(大于1%)短时间浸泡的处理方式,效果更好(表1)。
表1药物浓度与浸泡时间的关系
试验过程中,研究人员发现其中各组分重量最优配比为:海蛤粉25%,冰片10%,五倍子15%,忍冬藤15%,木槿皮10%,苦参15%,虎杖10%。各组分混合并粉碎之后,用水煎煮30分钟,其滤液用于亲鱼、鱼卵的短时间浸泡消毒,以及采用短时间浸泡的方式用于鱼种或成鱼水霉病的预防和治疗,也用于运输过程中防止水霉感染。
水本发明所述的水霉病是指水霉(Saprolegniaspp)、鳃霉(Branchiomycesspp)、镰刀霉(Fusariumspp),绵霉(Achlyaspp)和毛霉(Mucorspp)等真菌引起的水产养殖动物或鱼卵的感染。
本发明与现有技术相比,具有以下优点和效果:
该发明所提供的防治水产动物水霉病的制剂有着显著优点:纯中药组成、药效确切、起效快、在鱼体内无不良残留、安全无公害、使用方便、使用成本不高。不仅可以起到预防作用,更重要的是对已经感染的病鱼有治疗作用。本发明不仅为水产动物水霉病防治提供了一种有效的药物制剂,而且该制剂属于绿色环保渔药,不存在严重的毒副作用等问题,为无公害水产养殖业供了必要技术支撑。特别是,由于其可靠的有效性和安全性,而且是纯中药制剂,因此可望很容易地注册成为新水产用兽药,早日服务于水产养殖业的可持续发展。
复方中药制剂对水霉菌的体外抑菌和杀菌效果
1)药物及制备,同前述。
2)实验菌种:寄生水霉(本实验室保存),以马铃薯葡萄糖培养基活化。
3)实验方法:采用琼脂稀释法,以沙保弱琼旨作为基础培养基
4)将上述药液按一定比例加入到培养基中,使沙保弱琼脂培养基中的药物含量分别为0.01%,0.05%,0.1%,0.2%,0.3%,0.5%,1%和2%,然后灭菌,倒平板。
菌液的准备:将实验菌株分别接种沙保弱培养基15℃培养5天,以无菌生理盐
水加入培养管中,以无菌注射器反复冲洗倒人无菌试管中,以无菌生理盐水调至0.5麦氏单位,菌液浓度相当于1.5×108CFU/ml。然后再以无菌生理盐水将菌液浓度稀释到1×105CFU/ml,备用。
5)接种与培养:以无菌操作吸取菌液0.1ml接种到上述药培养皿中,每个平皿接种相同量的菌液,以玻棒涂布均匀,然后置16℃孵箱培养。每天观察一次结果。以对照管生长良好为培养标准,记录真菌不生长的最低药物浓度管的含药浓度为最低抑菌浓度(MIC)。然后将MIC管至最高药物浓度管每管加人1ml无菌生理盐水,充分洗涤后分别接种于无药沙保弱基础培养管中,放16℃孵箱继续培养7天,以最低药物浓度无菌生长者为最低杀菌浓度(MBC)。
表2复方中药制剂煎煮液对寄生水霉菌的以外抑菌实验结果
由上表可以看出,本中药制剂的最低抑菌浓度(MIC)较低,只有0.1%的浓度,是具有实用价值的作用浓度。而且,本药剂具有很强的杀菌效果,在最低抑菌浓度(0.1%)下即具有一定的杀菌作用,高于0.1%的浓度,水霉菌完全不生长(表2)。这个效果比一般的中药制剂都要突出。
附图说明
图1为一种复方中药制剂(中药)和孔雀石绿对水霉菌的抑制作用结果图。
其中的对照为未添加任何药物。中药制剂对水霉菌的抑菌试验结果图。阳性对照为孔雀石绿,另设立无药物的空白对照。
图2为一种中药制剂防治鱼卵孵化过程中水霉感染的实验结果图。
所用的鱼卵为斑马鱼鱼卵,水温25℃。A:未添加药物,霉菌生长茂盛;B添加有0.2%的中药煎煮液,没有明显的水霉生长。
具体实施方式
实施例1:
一种防治水产动物水霉病的中药复方制剂,它由以下原料的质量分数制成(最佳值):
一种防治水产动物水霉病的纯中药复方制剂的制备方法,其步骤是:
A、将冰片、五倍子、忍冬藤、木槿皮、苦参、虎杖分别粉碎至40-60目。
B、将步骤A粉碎的冰片、五倍子、忍冬藤、木槿皮、苦参、虎杖与海蛤粉混合均匀,获得一种混合物;
C、将步骤B获得的混合物用水适量(中药的20或24或26或28或30倍量)煎煮29-31分钟,用三层纱布过滤,药渣再放入锅中加10或13或15或17或19或20倍的热水继续煎煮15或17或19或23或26或28或30分钟,再过滤。合并两次的滤液。将药物浓度调整到1%,备用。所用水量根据最终所需的药物浓度大小,适当增减以保证最终药液的浓度不小于所需要的浓度。
D、使用时将步骤C获得的滤液,配置到所需的浓度。
采用平板法测定该复方中药制剂对水霉的最低抑菌浓度(MIC)。培养基为马铃薯葡萄糖培养基PotatoDextrosebroth。实验在24孔板上进行。中药的浓度梯度为0.005%,0.01%,0.05%,0.1%。阳性对照为孔雀石绿,浓度梯度为0.1,0.2,0.3和0.4ppm,另设立一无药对照组(对照)。培养温度为21-23℃。结果表明,该中药制剂对寄生水霉菌(Saprolegniaparasitica)的MIC=0.1%(w/v);孔雀石绿其最低抑菌浓度为0.1ppm(结果见图1),这个结果与文献报道的相似,说明我们的实验结果可靠可信;无药对照组全部长满了霉菌。这说明,该中药制剂对水霉菌的确具有很强的抑制或杀灭作用。
因此,由于该中药制剂的用量相对较大(0.1%),不适宜全池泼洒使用。不过可用于成鱼和鱼苗的运输、鱼卵消毒,亲鱼的消毒以及养殖鱼类在转池过程中的消毒。在鱼类运输,特别是长途运输过程中,鱼体非常容易被碰伤和相互擦伤,给水霉菌的感染提供了非常好的条件。可以说,水霉感染是鱼类长途运输过程中的常见现象。为了防止在运输过程发生水霉感染,可以在运送鱼的水体中加入终浓度为0.1%以上的复方中药制剂,这样做不仅可以防止水霉的感染,也可以防止伤口的细菌感染,提高鱼的运输成活率。
实施例2表明:
为了测试该中药制剂对常用鱼的毒性大小,特进行以下实验。实验在体积为50L的PVP养鱼箱中进行,持续充氧。得到结果如下表2:
1.纯中药复方制剂的配置及初加工。按照海蛤粉25%,冰片10%,五倍子15%,忍冬藤15%,木槿皮10%,苦参15%,虎杖10%的比例进行配比,准确称量所需原料,将以上各组分混合后,放入粉碎机粉碎至不大于40或45或50或55或60目大小。
2.中药制剂的煎煮。将该中药制剂放入15或17或18或20倍量的水中进行煎煮,水沸之后再持续30分钟。用三层纱布过滤,药渣再放入锅中加10或12或14或15倍的热水继续煎煮15-30分钟,再过滤。合并两次的滤液。将合并后的滤液体积调整到药物(原料)的浓度为0.1%-3.0%,待用。
3.将试验鱼放入不同浓度的药液中,持续不同的时间(见下表3),统计不同处理导致的死亡鱼数。
4.结果表明,该中药制剂对草鱼、斑马鱼和异育银鲫的毒性随着浓度增大,或浸泡时间延长而增大。而且,规格大的个体比规格小的个体耐受性更强些(表1)。
表3复方中草药对多种鱼类的毒性试验结果(水温14-16℃)
因此,该复方中药制剂可用于亲鱼的消毒。在孵化前,对亲鱼采用1%的浓度进行消毒处理15-0min,以杀灭亲鱼可能携带的水霉菌。这个药物浓度和作用时间不会对亲鱼产生毒害作用。如果采用3%的中药药物浓度进行浸泡,不能超过15分钟,否则将产生明显的毒性反应。
实施例3表明:
为了研究在鱼卵孵化过程中,使用该中药对水霉等真菌的抑制作用,特进行以下实验。
1.纯中药复方制剂的配置及初加工。按照海蛤粉20%,冰片12%,五倍子14%,忍冬藤15%,木槿皮14%,苦参15%,虎杖10%的比例进行配比,准确称量所需原料,将以上各组分混合后,放入粉碎机粉碎至不大于40或45或50或55或60目大小。
2.中药制剂的煎煮。将该中药制剂放入15或16或18或20倍量的水中进行煎煮,水沸之后再持续30分钟。用三层纱布过滤,药渣再放入锅中加15或16或18或-20倍的热水继续煎煮15-30分钟,再过滤。合并两次的滤液。将合并后的滤液体积调整到药物(原料)的浓度为2.0%,用于添加到水体中,产生0.05%-0.3%的终浓度,待用。
3.实验在实验室内进行,实验容器为白色搪瓷盆中进行。面积为25×45cm2,水深5cm。人工充氧。每个盆中放100粒异育银鲫卵,并按表1中的要求加入中药药液、对照药物孔雀石绿,并设立一不加药液的阴性对照组。3天以后检查,结果如下表4。在不加药液的对照组鱼卵上,发现有水霉属水霉、棉霉属水霉和鳃霉属水霉等多种真菌的寄生,而且生长茂盛。加有药物的试验组也有些鱼卵(<15%)生长有真菌,但生长不良,说明虽然没有完全控制,但其生长还是受到了很好的抑制。
4.采用斑马鱼鱼卵进行相同的试验。用药方式改为短时间浸泡,然后转入到清水中继续孵育,获得如表5中的结果。
表4复方中药制剂预防异育银鲫卵水霉感染的试验结果
注:用药方式为持续浸泡;试验水温21-23℃
因此,该中药制剂的确可用于鱼卵的消毒。
从表2中可以看出,该中药制剂对水霉菌的抑菌效果优于或相当于孔雀石绿,孵化率也与孔雀石相当。
这些结果说明,在孵化时使用一定浓度的复方中药制剂煎煮液,对鱼卵孵化具有可靠的保护作用。
表5复方中药制剂用于斑马鱼卵消毒对孵化率的影响
表5的结果说明,采用不高于2%的中药药液进行短时间浸泡,然后转入清水中,可以有效地防止鱼卵在孵育过程中被霉菌感染,而且对孵化率没有影响。实施例4表明:复方中药复方制剂用于草鱼水霉病的预防
1.纯中药复方制剂的配置及初加工。按照海蛤粉25%,冰片10%,五倍子15%,忍冬藤15%,木槿皮10%,苦参15%,虎杖10%的比例进行配比,准确称量所需原料,将以上各组分混合后,放入粉碎机粉碎至不大于40或44或48或52或56或60目大小。
2.中药制剂的煎煮。将该中药制剂放入30或34或38或42或4650倍量的水中进行煎煮,水沸之后再持续30分钟。用三层纱布过滤,药渣再放入锅中加20或24或26或28或30倍的热水继续煎煮15-30分钟,再过滤。合并两次的滤液。将合并后的滤液体积调整到药物(原料)的浓度为千分之五至千分之十(0.5%-1.0%),待用。
3.试验用草鱼约300尾购自某养殖场,在捕捞和运输过程中,体表损伤明显,许多鱼的鳞片脱落。运回到实验室之后,往暂养池中加入培养好的霉菌5个平板(加入之前充分捣碎),2小时之后进行药物处理。
4.将草鱼(体重45-75g,数量约为50尾左右)放入50L、浓度为1%的药液中浸泡10分钟,浸泡过程中持续人工充氧。所有鱼类的全身都能接触到药液。浸泡结束后,将鱼捞出,放回大池中(体积为2m3,水温15℃),药液保留。后续的鱼(体重45-75g,数量约为50尾左右)再放入药液中,浸泡15分钟,浸泡过程中持续人工充氧。浸泡结束后,将鱼捞出放回池塘中,保留药液,并加入20%的新鲜药液继续按前面的程序使用(体重45-75g,数量约会50尾左右)。最后一次浸泡结束后,将鱼和残存的药液全部倒入池塘中。
4.结果:药物处理组未发生明显的水霉感染现象;对照池(未经药物处理的),水霉病的发生率(有可见的水霉菌感染)高达36%。
实施例5表明:用于黄颡鱼水霉病的预防
1.纯中药复方制剂的配置及初加工。按照海蛤粉22%,冰片15%,五倍子18%,忍冬藤13%,木槿皮12%,苦参10%,虎杖10%的比例进行配比,准确称量所需原料,将以上各组分混合后,放入粉碎机粉碎至不大于40或43或47或51或56或60目大小。
2.中药制剂的煎煮。将该中药制剂放入20或22或25或27或30倍量的水中进行煎煮,水沸之后再持续30分钟。用三层纱布过滤,药渣再放入锅中加15或16或18或20倍的热水继续煎煮15-30分钟,再过滤。合并两次的滤液。将合并后的滤液体积调整到药物(原料)的浓度为0.5-2.0%,待用。
3.供试鱼为购自水产品市场的黄颡鱼,体重为45-75g,在每个50L的水箱中盛装20L经充分曝气去氯后的自来水。持续人工充氧,水温15℃,试验期间不投喂饵料。经检查,试验鱼都有在运输过程中造成的不同程度的外伤。通过体表刮片检查了5尾黄颡鱼,显微镜下均可见有不同程度的霉菌寄生。一周后,将所有鱼捞起,检查每尾鱼的感染程度并计数。此外,进行霉菌分离和初步鉴定。结果见表6。用药组的感染程度显著低于未用药组,而且未用药组还有2尾鱼死亡,用药组全部存活,药物处理的效果明显。
表6复方中药制剂对黄颡鱼水霉病的预防效果
实施例6表明:用于治疗斑点叉尾鮰水霉病
1.纯中药复方制剂的配置及初加工。按照海蛤粉20%,冰片15%,五倍子20%,忍冬藤11%,木槿皮14%,苦参10%,虎杖10%的比例进行配比,准确称量所需原料,将以上各组分混合后,放入粉碎机粉碎至不大于40-80目大小。
2.中药制剂的煎煮。将该中药制剂放入20或22或24或26或28或30倍量的水中进行煎煮,水沸之后再持续30分钟。用三层纱布过滤,药渣再放入锅中加15或17或19或20倍的热水继续煎煮15-30分钟,再过滤。合并两次的滤液。将合并后的滤液体积调整到药物(原料)的浓度为千分之二十(2.0%),待用。
3.供试鱼为购自水产品市场的斑点叉尾鮰(IetalurusPunetaus),体重为55-95g,在每个50L的水箱中盛装25L经充分曝气去氯后的自来水。持续人工充氧,水温15℃,试验期间不投喂饵料。经检查,试验鱼都有在运输过程中造成的不同程度的外伤。通过体表刮片检查了5尾斑点叉尾鮰,均可见有不同程度的霉菌寄生。在实验室内继续饲养2周(水温11-15℃),挑选有明显感染症状的用于试验,并进行感染程度等级分类和计数。此外,进行霉菌分离和初步鉴定。
4.药物处理:将感染霉菌的斑点叉尾鮰放入30L浓度为2.0%的药液中浸泡15分钟,所有鱼类的全身都能接触到药液即可。浸泡过程中持续人工充氧。浸泡结束后,将鱼捞出放入大池(体积为2m3,水温13℃)中,浸泡后的药液也全部倒入池中。对照组不用药物处理,在30L的水箱中放置15分钟后,也转入另一个大池(体积为2m3,水温13℃)中。正常投喂,每日检查,若有死鱼,及时捞出。一周后,将所有的试验鱼捞起,检查。结果如下表7。
表7复方中药制剂对斑点叉尾鮰水霉病的治疗效果
结果发现:药物处理组的多数鱼不再有明显的霉菌感染,即使有少数几尾(4尾)身体上仍然有霉菌,但颜色变黄,而且鱼的活泼程度良好。而未经药物处理的对照组,多数身体上有明显的水霉菌感染,而且颜色白净,病鱼的活力低下。
实施例7表明:用于预防黄颡鱼运输过程中的霉菌感染
1.纯中药复方制剂的配置及初加工。按照海蛤粉20%,冰片15%,五倍子18%,忍冬藤13%,木槿皮12%,苦参12%,虎杖10%的比例进行配比,准确称量所需原料,将以上各组分混合后,放入粉碎机粉碎至不大于40或45或50或55或60目大小。
2.中药制剂的煎煮。将该中药制剂放入20或23或26或2930倍量的水中进行煎煮,水沸之后再持续30分钟。用三层纱布过滤,药渣再放入锅中加15或17或19或20倍的热水继续煎煮15-30分钟,再过滤。合并两次的滤液。将合并后的滤液体积调整到药物(原料)浓度为千分之二十(2%),待用。
3.供试鱼为购自水产品市场的黄颡鱼,体重为45-75g。将80尾鱼分装于2个运输袋中,每个袋约40尾,水与鱼的比例为3:1。其中一个袋中加入终浓度为0.3%的中药煎煮液,另一个不加药液。
4.在氧气袋中坚持3小时以后,放入水族箱中养殖10天,然后检查每尾鱼体表水霉感染情况。结果见表8。中药组和对照的孔雀石绿组的霉菌感染和发病情况明显轻于未用药物的对照组。
表8复方中药制剂用于运输过程中对黄颡鱼水霉病的防治效果
Claims (6)
1.一种防治水产动物水霉病的中药复方制剂,它由以下原料的质量分数制成:
2.根据权利要求1所述的一种防治水产动物水霉病的中药复方制剂,其特征在于:
3.根据权利要求1所述的一种防治水产动物水霉病的中药复方制剂,其特征在于:
4.根据权利要求1所述的一种防治水产动物水霉病的中药复方制剂,其特征在于:
5.根据权利要求1所述的一种防治水产动物水霉病的中药复方制剂,其特征在于:
6.根据权利要求1所述的一种防治水产动物水霉病的中药复方制剂,其特征在于:
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201410113318.0A CN103860663B (zh) | 2014-03-25 | 2014-03-25 | 一种防治水产养殖动物真菌病的中药制剂及制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201410113318.0A CN103860663B (zh) | 2014-03-25 | 2014-03-25 | 一种防治水产养殖动物真菌病的中药制剂及制备方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN103860663A CN103860663A (zh) | 2014-06-18 |
CN103860663B true CN103860663B (zh) | 2016-05-25 |
Family
ID=50900050
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201410113318.0A Expired - Fee Related CN103860663B (zh) | 2014-03-25 | 2014-03-25 | 一种防治水产养殖动物真菌病的中药制剂及制备方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN103860663B (zh) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105288382A (zh) * | 2014-06-30 | 2016-02-03 | 天津法莫西医药科技有限公司 | 一种用于防治观赏鱼水霉病的中药组合物 |
CN108635409A (zh) * | 2018-06-25 | 2018-10-12 | 四川农业大学 | 一种用于治疗水霉病的厚朴提取物散剂及其制备方法 |
CN113663001A (zh) * | 2021-08-24 | 2021-11-19 | 四川成康动物药业有限公司 | 一种含大黄五倍子精华液组合物及其制备方法和装置 |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN100363030C (zh) * | 2005-09-29 | 2008-01-23 | 大连太平洋海珍品有限公司 | 鱼、虾、蟹杀霉菌用中草药制剂 |
CN1939468B (zh) * | 2006-09-27 | 2010-04-14 | 西南大学 | 复方五倍子渔用抗菌剂配方 |
CN103041332B (zh) * | 2012-12-05 | 2014-07-30 | 青岛绿曼生物工程有限公司 | 治疗鱼水霉病的纯中药组合物及其制备方法 |
CN103272005A (zh) * | 2013-06-04 | 2013-09-04 | 江苏中洋集团股份有限公司 | 一种生态防治澳洲龙纹斑水霉病的中草药制备方法及应用 |
-
2014
- 2014-03-25 CN CN201410113318.0A patent/CN103860663B/zh not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN103860663A (zh) | 2014-06-18 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN102389499B (zh) | 一种用于水产养殖病毒性病害防治的中药提取液及其制备方法 | |
TW200830991A (en) | TTO-based disinfectants & anesthetics for use in aquaculture | |
CN101711528B (zh) | 一种驱杀轮虫及原生动物的复方药物组合物及其制备方法 | |
CN104367907B (zh) | 一种中草药羊蜱抗虫剂及其制备与使用方法 | |
CN107969445A (zh) | 一种中草药杀虫剂 | |
CN105230556A (zh) | 中华鳖全程无公害生态养殖方法 | |
CN106259093A (zh) | 一种泥鳅养殖的方法 | |
CN103536586A (zh) | 一种防治水产动物水霉病的方法 | |
CN105031128B (zh) | 预防或治疗水产养殖动物体外寄生虫的中药组合物及其制备方法和应用 | |
CN103860663B (zh) | 一种防治水产养殖动物真菌病的中药制剂及制备方法 | |
CN106577536A (zh) | 一种防草鱼肠炎病的养殖方法 | |
CN103652341A (zh) | 促生长防脱壳河蟹专用饲料 | |
KR101208741B1 (ko) | 양식 어류의 운반 스트레스 저감을 위한 활어 운송방법 | |
CN108328716A (zh) | 一种治理养殖虾蟹水体方法 | |
CN108077331A (zh) | 一种水产养殖用的综合解毒液的制备方法及其应用 | |
CN103301241B (zh) | 一种治疗水生动物水蛭病的中草药及其制备方法 | |
CN105558434A (zh) | 一种具有诱鱼作用的组合物 | |
CN101946812B (zh) | 番石榴叶及其提取物的用途 | |
CN104274543A (zh) | 一种治疗固着纤毛虫病的药物 | |
CN101396024B (zh) | 松毛虫质型多角体病毒苏云金杆菌杀虫可湿性粉剂及制备方法 | |
CN108837029B (zh) | 一种防治水产动物水霉病的药物组合物及其制备方法 | |
CN106860442A (zh) | 一种组合物杀菌剂及其在水产养殖中的应用 | |
NIE et al. | Diseases of grass carp (Ctenopharyngodon idellus Valenciennes, 1844) in China, a review from 1953 to 1983 | |
KR101171727B1 (ko) | 때죽 나무열매 추출물을 이용한 어류용 천연 마취 조성물 및 어류 운송방법 | |
CN103301242B (zh) | 一种中草药组合物在制备防治草鱼虫菌并发综合症复方制剂中的用途 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20160525 |
|
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |