CN104874021B - 一种外科植入用煅烧骨的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了属于医疗用骨材料技术领域的一种外科植入用煅烧骨的制备方法。该方法以异种骨或同种异体骨作为初始材料，经过弱酸性溶液浸泡，弱碱性溶液浸泡，先升温后降温式煅烧，营养液浸泡和可溶性胶原溶液浸泡的步骤，制成适用于外科手术移植用骨材料。本发明方法采用弱酸性和弱碱性溶液交替浸泡清洗进行前处理，处理温和，能有效去除矿物小斑块或者无机物污渍，煅烧过程中采用先升温煅烧，再降温煅烧的方式，保持了骨的原有形状，煅烧后采用营养液和可溶性胶原溶液对骨进行保护和增加营养，使得移植过程更加顺利。
Description
技术领域
本发明属于医疗用骨材料技术领域，具体涉及一种外科植入用煅烧骨的制备方法。
背景技术
异种骨材料的来源不受限制，然而传染性疾病和免疫反应的风险较高。利用煅烧工艺，在合适的温度曲线下，彻底去除了异种骨的有机蛋白成分，使得骨的再生可以和支架材料理想的融合，消除了传染疾病和免疫反应的风险，可以获得一定机械强度的天然多孔生物磷灰石支架材料，来源广泛。
目前的异种骨的煅烧处理存在如下问题：骨质中经常含有矿物小斑块或者无机物污渍，采用传统的蒸煮，冲洗的前处理方法无法将其去除；骨质煅烧采用均一的温度，煅烧时间长，煅烧的温度高，材料降解困难，骨质走形变样，不利于外科移植手术的进行；炉内缺少空气的补充，有机物氧化不彻底。在进行骨移植的过程中，由于污渍去除不干净，或者缺乏必要营养而无法有效得到补充，移植失败或效果不好。同种异体骨也存在类似的问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种外科植入用煅烧骨的制备方法。该方法制备的骨无免疫原性，干净，无毒，适用于外科手术骨移植用。
一种外科植入用煅烧骨的制备方法，按照如下步骤进行：
(1)选取异种骨或同种异体骨作为原材料，采用流水冲洗骨体，置于沸水中煮1-3小时；
(2)将煮好的骨放入弱酸性溶液中浸泡12-20小时，采用质量分数为1-2％的弱碱性溶液冲洗2-5次；
(3)将浸泡好的骨放入高温炉中煅烧，在600-750℃条件下煅烧1-3小时，熄火降温至150-200℃，升温至760-800℃，煅烧1-3小时，熄火降温至150-200℃，升温至600-750℃，熄火降温至常温；煅烧过程中通气，有助于氧化的彻底；
(4)将煅烧好的骨放入氨基酸营养液中浸泡10-20小时，浸泡过程中加入腺嘌呤和碱性成纤维细胞生长因子；
(5)将浸泡好的骨用去离子水冲洗干净，将其投入可溶性胶原溶液中浸泡1-2小时，在超净台内取出并晾干，用去离子水冲洗1-6遍，超净台内晾干，环氧乙烷消毒备用。
所述弱酸性溶液为0.3-0.6M的磷酸氢铵溶液，0.1-0.3M的磷酸二氢铵溶液，双氧水或质量分数为0.1-0.5％的苹果酸溶液。
所述弱碱性溶液为质量分数为1-2％的碳酸钠溶液，质量分数为1-2％的碳酸氢钠溶液，质量分数为0.1-0.3％的苯氧基氨基丙烷溶液，或者质量分数为0.1-0.3％的苯氨基咪唑啉溶液。
所述氨基酸营养液为多聚赖氨酸溶液，必需氨基酸营养液或者全类氨基酸营养液。
所述可溶性胶原溶液的制备方法为：首先，从猪，牛的真皮和肌腱中用3％醋酸溶液提取骨明胶，重新溶解于水中配制成质量浓度为10-25％的骨明胶溶液；然后将配制好的骨明胶溶液放入反应锅内，用磷酸调节骨明胶溶液的pH值为2-4，然后加酸性蛋白酶控制骨明胶降解6-9小时，得到降解的骨明胶溶液，其中所述的酸性蛋白酶的加入量是骨明胶重量的4-8‰；将得到的降解的骨明胶溶液用盐酸或氢氧化钙调节pH为5-6.5；随后将反应物升到温度为60-75℃进行热抽提；将得到的反应物在温度为95-100℃的水浴中煮15-25分钟，得到可溶性胶原蛋白溶液。
所述腺嘌呤的加入量为骨质量的0.01-0.1％。
所述成纤维细胞生长因子的加入量为骨质量的0.05-0.15％。
本发明的有益效果：本发明的外科植入用煅烧骨的制备方法采用弱酸性和弱碱性溶液交替浸泡清洗进行前处理，处理温和，能有效去除矿物小斑块或者无机物污渍，煅烧过程中采用先升温煅烧，再降温煅烧的方式，保持了骨的原有形状，煅烧后采用营养液和可溶性胶原溶液对骨进行保护和增加营养，使得移植过程更加顺利。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步说明。
实施例1
一种外科植入用煅烧骨的制备方法，按照如下步骤进行：
(1)选取异种骨或同种异体骨作为原材料，采用流水冲洗骨体，置于沸水中煮1小时；
(2)将煮好的骨放入0.3M的磷酸氢铵溶液中浸泡12小时，采用质量分数为1％的碳酸钠溶液冲洗2次；
(3)将浸泡好的骨放入高温炉中煅烧，在600℃条件下煅烧1小时，熄火降温至150℃，升温至760℃，煅烧1小时，熄火降温至150℃，升温至600℃，熄火降温至常温；煅烧过程中通气，有助于氧化的彻底；
(4)将煅烧好的骨放入多聚赖氨酸溶液中浸泡10小时，浸泡过程中加入腺嘌呤和碱性成纤维细胞生长因子；所述腺嘌呤的加入量为骨质量的0.01％，所述成纤维细胞生长因子的加入量为骨质量的0.05％；
(5)将浸泡好的骨用去离子水冲洗干净，将其投入可溶性胶原溶液中浸泡1小时，在超净台内取出并晾干，用去离子水冲洗1遍，超净台内晾干，环氧乙烷消毒备用。
所述可溶性胶原溶液的制备方法为：首先，从猪，牛的真皮和肌腱中用3％醋酸溶液提取骨明胶，重新溶解于水中配制成质量浓度为10-25％的骨明胶溶液；然后将配制好的骨明胶溶液放入反应锅内，用磷酸调节骨明胶溶液的pH值为2-4，然后加酸性蛋白酶控制骨明胶降解6-9小时，得到降解的骨明胶溶液，其中所述的酸性蛋白酶的加入量是双90骨明胶重量的4-8‰；将得到的降解的骨明胶溶液用盐酸或氢氧化钙调节pH为5-6.5；随后将反应物升到温度为60-75℃进行热抽提；将得到的反应物在温度为95-100℃的水浴中煮15-25分钟，得到可溶性胶原蛋白溶液。
制备的煅烧骨无明显免疫原性，矿物斑和污渍少，不影响移植，移植时不变形，骨缺损愈合快，修复效果与自体骨效果无明显差异。
实施例2
一种外科植入用煅烧骨的制备方法，按照如下步骤进行：
(1)选取异种骨或同种异体骨作为原材料，采用流水冲洗骨体，置于沸水中煮2小时；
(2)将煮好的骨放入0.2M的磷酸二氢铵溶液中浸泡15小时，采用质量分数为0.2％的苯氨基咪唑啉溶液冲洗3次；
(3)将浸泡好的骨放入高温炉中煅烧，在700℃条件下煅烧2小时，熄火降温至180℃，升温至770℃，煅烧2小时，熄火降温至180℃，升温至700℃，熄火降温至常温；煅烧过程中通气，有助于氧化的彻底；
(4)将煅烧好的骨放入必需氨基酸中浸泡15小时，浸泡过程中加入腺嘌呤和碱性成纤维细胞生长因子；所述腺嘌呤的加入量为骨质量的0.05％，所述成纤维细胞生长因子的加入量为骨质量的0.09％；
(5)将浸泡好的骨用去离子水冲洗干净，将其投入可溶性胶原溶液中浸泡1.5小时，在超净台内取出并晾干，用去离子水冲洗4遍，超净台内晾干，环氧乙烷消毒备用；
所述可溶性胶原溶液的制备方法为：首先，从猪，牛的真皮和肌腱中用3％醋酸溶液提取骨明胶，重新溶解于水中配制成质量浓度为10-25％的骨明胶溶液；然后将配制好的骨明胶溶液放入反应锅内，用磷酸调节骨明胶溶液的pH值为2-4，然后加酸性蛋白酶控制骨明胶降解6-9小时，得到降解的骨明胶溶液，其中所述的酸性蛋白酶的加入量是双90骨明胶重量的4-8‰；将得到的降解的骨明胶溶液用盐酸或氢氧化钙调节pH为5-6.5；随后将反应物升到温度为60-75℃进行热抽提；将得到的反应物在温度为95-100℃的水浴中煮15-25分钟，得到可溶性胶原蛋白溶液。
制备的煅烧骨无明显免疫原性，矿物斑和污渍少，不影响移植，移植时不变形，骨缺损愈合快，修复效果与自体骨效果无明显差异。
实施例3
一种外科植入用煅烧骨的制备方法，按照如下步骤进行：
(1)选取异种骨或同种异体骨作为原材料，采用流水冲洗骨体，置于沸水中煮2小时；
(2)将煮好的骨放入0.2M的磷酸二氢铵溶液浸泡16小时，采用质量分数为1.7％碳酸钠溶液冲洗4次；
(3)将浸泡好的骨放入高温炉中煅烧，在700℃条件下煅烧2小时，熄火降温至180℃，升温至790℃，煅烧2小时，熄火降温至180℃，升温至650℃，熄火降温至常温；煅烧过程中通气，有助于氧化的彻底；
(4)将煅烧好的骨放入必需氨基酸营养液中浸泡18小时，浸泡过程中加入腺嘌呤和碱性成纤维细胞生长因子；所述腺嘌呤的加入量为骨质量的0.08％；所述成纤维细胞生长因子的加入量为骨质量的0.12％。
(5)将浸泡好的骨用去离子水冲洗干净，将其投入可溶性胶原溶液中浸泡1.5小时，在超净台内取出并晾干，用去离子水冲洗5遍，超净台内晾干，环氧乙烷消毒备用；
所述可溶性胶原溶液的制备方法为：首先，从猪，牛的真皮和肌腱中用3％醋酸溶液提取骨明胶，重新溶解于水中配制成质量浓度为10-25％的骨明胶溶液；然后将配制好的骨明胶溶液放入反应锅内，用磷酸调节骨明胶溶液的pH值为2-4，然后加酸性蛋白酶控制骨明胶降解6-9小时，得到降解的骨明胶溶液，其中所述的酸性蛋白酶的加入量是双90骨明胶重量的4-8‰；将得到的降解的骨明胶溶液用盐酸或氢氧化钙调节pH为5-6.5；随后将反应物升到温度为60-75℃进行热抽提；将得到的反应物在温度为95-100℃的水浴中煮15-25分钟，得到可溶性胶原蛋白溶液。
制备的煅烧骨无明显免疫原性，矿物斑和污渍少，移植时不变形，骨缺损愈合快，修复效果与自体骨效果无明显差异。
实施例4
一种外科植入用煅烧骨的制备方法，按照如下步骤进行：
(1)选取异种骨或同种异体骨作为原材料，采用流水冲洗骨体，置于沸水中煮2小时；
(2)将煮好的骨放入0.4％的苹果酸溶液浸泡16小时，采用质量分数为1.7％碳酸钠溶液冲洗4次；
(3)将浸泡好的骨放入高温炉中煅烧，在700℃条件下煅烧2小时，熄火降温至180℃，升温至790℃，煅烧2小时，熄火降温至180℃，升温至650℃，熄火降温至常温；煅烧过程中通气，有助于氧化的彻底；
(4)将煅烧好的骨放入必需氨基酸营养液中浸泡18小时，浸泡过程中加入腺嘌呤和碱性成纤维细胞生长因子；所述腺嘌呤的加入量为骨质量的0.08％；所述成纤维细胞生长因子的加入量为骨质量的0.12％。
(5)将浸泡好的骨用去离子水冲洗干净，将其投入可溶性胶原溶液中浸泡1.5小时，在超净台内取出并晾干，用去离子水冲洗5遍，超净台内晾干，环氧乙烷消毒备用；
所述可溶性胶原溶液的制备方法为：首先，从猪，牛的真皮和肌腱中用3％醋酸溶液提取骨明胶，重新溶解于水中配制成质量浓度为10-25％的骨明胶溶液；然后将配制好的骨明胶溶液放入反应锅内，用磷酸调节骨明胶溶液的pH值为2-4，然后加酸性蛋白酶控制骨明胶降解6-9小时，得到降解的骨明胶溶液，其中所述的酸性蛋白酶的加入量是双90骨明胶重量的4-8‰；将得到的降解的骨明胶溶液用盐酸或氢氧化钙调节pH为5-6.5；随后将反应物升到温度为60-75℃进行热抽提；将得到的反应物在温度为95-100℃的水浴中煮15-25分钟，得到可溶性胶原蛋白溶液。
制备的煅烧骨无明显免疫原性，无矿物斑和污渍，移植时不变形，骨缺损愈合快，修复效果与自体骨效果无明显差异。
实施例5
一种外科植入用煅烧骨的制备方法，按照如下步骤进行：
(1)选取异种骨或同种异体骨作为原材料，采用流水冲洗骨体，置于沸水中煮2小时；
(2)将煮好的骨放入0.4％的苹果酸溶液浸泡16小时，采用质量分数为1.7％碳酸钠溶液冲洗4次；
(3)将浸泡好的骨放入高温炉中煅烧，在700℃条件下煅烧2小时，熄火降温至180℃，升温至790℃，煅烧2小时，熄火降温至180℃，升温至650℃，熄火降温至常温；煅烧过程中通气，有助于氧化的彻底；
(4)将煅烧好的骨放入必需氨基酸营养液中浸泡18小时，浸泡过程中加入腺嘌呤；所述腺嘌呤的加入量为骨质量的0.08％；
(5)将浸泡好的骨用去离子水冲洗干净，将其投入可溶性胶原溶液中浸泡1.5小时，在超净台内取出并晾干，用去离子水冲洗5遍，超净台内晾干，环氧乙烷消毒备用；
所述可溶性胶原溶液的制备方法为：首先，从猪，牛的真皮和肌腱中用3％醋酸溶液提取骨明胶，重新溶解于水中配制成质量浓度为10-25％的骨明胶溶液；然后将配制好的骨明胶溶液放入反应锅内，用磷酸调节骨明胶溶液的pH值为2-4，然后加酸性蛋白酶控制骨明胶降解6-9小时，得到降解的骨明胶溶液，其中所述的酸性蛋白酶的加入量是双90骨明胶重量的4-8‰；将得到的降解的骨明胶溶液用盐酸或氢氧化钙调节pH为5-6.5；随后将反应物升到温度为60-75℃进行热抽提；将得到的反应物在温度为95-100℃的水浴中煮15-25分钟，得到可溶性胶原蛋白溶液。
制备的煅烧骨无明显免疫原性，无矿物斑和污渍，移植时不变形，骨缺损愈合快，修复效果与自体骨效果无明显差异。
对比例1
一种外科植入用煅烧骨的制备方法，按照如下步骤进行：
(1)选取异种骨或同种异体骨作为原材料，采用流水冲洗骨体，置于沸水中煮2小时；
(2)将煮好的骨放入0.2M的磷酸二氢铵溶液浸泡16小时；
(3)将浸泡好的骨放入高温炉中煅烧，在700℃条件下煅烧2小时，熄火降温至180℃，升温至790℃，煅烧2小时，熄火降温至180℃，升温至650℃，熄火降温至常温；
(4)将煅烧好的骨放入必需氨基酸营养液中浸泡18小时，浸泡过程中加入腺嘌呤和碱性成纤维细胞生长因子；所述腺嘌呤的加入量为骨质量的0.08％；所述成纤维细胞生长因子的加入量为骨质量的0.12％。
(5)将浸泡好的骨用去离子水冲洗干净，将其投入可溶性胶原溶液中浸泡1.5小时，在超净台内取出并晾干，用去离子水冲洗5遍，超净台内晾干，环氧乙烷消毒备用；
所述可溶性胶原溶液的制备方法为：首先，从猪，牛的真皮和肌腱中用3％醋酸溶液提取骨明胶，重新溶解于水中配制成质量浓度为10-25％的骨明胶溶液；然后将配制好的骨明胶溶液放入反应锅内，用磷酸调节骨明胶溶液的pH值为2-4，然后加酸性蛋白酶控制骨明胶降解6-9小时，得到降解的骨明胶溶液，其中所述的酸性蛋白酶的加入量是双90骨明胶重量的4-8‰；将得到的降解的骨明胶溶液用盐酸或氢氧化钙调节pH为5-6.5；随后将反应物升到温度为60-75℃进行热抽提；将得到的反应物在温度为95-100℃的水浴中煮15-25分钟，得到可溶性胶原蛋白溶液。
制备的煅烧骨无明显免疫原性，矿物斑和污渍多，影响移植，移植时不变形，骨缺损愈合快。
对比例2
一种外科植入用煅烧骨的制备方法，按照如下步骤进行：
(1)选取异种骨或同种异体骨作为原材料，采用流水冲洗骨体，置于沸水中煮2小时；
(2)将煮好的骨放入0.2M的磷酸二氢铵溶液浸泡16小时，采用质量分数为1.7％碳酸钠溶液冲洗4次；
(3)将浸泡好的骨放入高温炉中煅烧，在700℃条件下煅烧2小时，熄火降温至180℃，升温至790℃，煅烧2小时，熄火降温至180℃，升温至650℃，熄火降温至常温；
(4)将煅烧好的骨放入必需氨基酸营养液中浸泡18小时。
(5)将浸泡好的骨用去离子水冲洗干净，将其投入可溶性胶原溶液中浸泡1.5小时，在超净台内取出并晾干，用去离子水冲洗5遍，超净台内晾干，环氧乙烷消毒备用；
所述可溶性胶原溶液的制备方法为：首先，从猪，牛的真皮和肌腱中用3％醋酸溶液提取骨明胶，重新溶解于水中配制成质量浓度为10-25％的骨明胶溶液；然后将配制好的骨明胶溶液放入反应锅内，用磷酸调节骨明胶溶液的pH值为2-4，然后加酸性蛋白酶控制骨明胶降解6-9小时，得到降解的骨明胶溶液，其中所述的酸性蛋白酶的加入量是双90骨明胶重量的4-8‰；将得到的降解的骨明胶溶液用盐酸或氢氧化钙调节pH为5-6.5；随后将反应物升到温度为60-75℃进行热抽提；将得到的反应物在温度为95-100℃的水浴中煮15-25分钟，得到可溶性胶原蛋白溶液。
制备的煅烧骨无明显免疫原性，矿物斑和污渍多，影响移植，移植时不变形，骨缺损愈合慢，可见骨不连等问题。
对比例3
一种外科植入用煅烧骨的制备方法，按照如下步骤进行：
(1)选取异种骨或同种异体骨作为原材料，采用流水冲洗骨体，置于沸水中煮2小时；
(2)将煮好的骨放入0.2M的磷酸二氢铵溶液浸泡16小时，采用质量分数为1.7％碳酸钠溶液冲洗4次；
(3)将浸泡好的骨放入高温炉中煅烧，在700℃条件下煅烧2小时，熄火降温至180℃，升温至790℃，煅烧2小时，熄火降温至180℃，升温至650℃，熄火降温至常温；
(4)将煅烧好的骨放入必需氨基酸营养液中浸泡18小时，浸泡过程中加入腺嘌呤和碱性成纤维细胞生长因子；所述腺嘌呤的加入量为骨质量的0.08％；所述成纤维细胞生长因子的加入量为骨质量的0.12％。
(5)将浸泡好的骨用去离子水冲洗干净，环氧乙烷消毒备用；
制备的煅烧骨无明显免疫原性，矿物斑和污渍少，移植时变形，骨缺损愈合慢，可见骨不连等问题。
对比例4
一种外科植入用煅烧骨的制备方法，按照如下步骤进行：
(1)选取异种骨或同种异体骨作为原材料，采用流水冲洗骨体，置于沸水中煮2小时；
(2)将煮好的骨放入0.2M的磷酸二氢铵溶液浸泡16小时，采用质量分数为1.7％碳酸钠溶液冲洗4次；
(3)将浸泡好的骨放入高温炉中煅烧，在700℃条件下煅烧2小时，熄火降温至180℃，升温至790℃，煅烧2小时，熄火降温至180℃，升温至650℃，熄火降温至常温；
(4)将煅烧好的骨放入去离子水中浸泡18小时，浸泡过程中加入腺嘌呤和碱性成纤维细胞生长因子；所述腺嘌呤的加入量为骨质量的0.08％；所述成纤维细胞生长因子的加入量为骨质量的0.12％。
(5)将浸泡好的骨用去离子水冲洗干净，将其投入可溶性胶原溶液中浸泡1.5小时，在超净台内取出并晾干，用去离子水冲洗5遍，超净台内晾干，环氧乙烷消毒备用；
所述可溶性胶原溶液的制备方法为：首先，从猪，牛的真皮和肌腱中用3％醋酸溶液提取骨明胶，重新溶解于水中配制成质量浓度为10-25％的骨明胶溶液；然后将配制好的骨明胶溶液放入反应锅内，用磷酸调节骨明胶溶液的pH值为2-4，然后加酸性蛋白酶控制骨明胶降解6-9小时，得到降解的骨明胶溶液，其中所述的酸性蛋白酶的加入量是双90骨明胶重量的4-8‰；将得到的降解的骨明胶溶液用盐酸或氢氧化钙调节pH为5-6.5；随后将反应物升到温度为60-75℃进行热抽提；将得到的反应物在温度为95-100℃的水浴中煮15-25分钟，得到可溶性胶原蛋白溶液。
制备的煅烧骨无明显免疫原性，矿物斑和污渍少，移植时不变形，骨缺损愈合快慢，可见骨不连等问题。
对比例5
一种外科植入用煅烧骨的制备方法，按照如下步骤进行：
(1)选取异种骨或同种异体骨作为原材料，采用流水冲洗骨体，置于沸水中煮2小时；
(2)将煮好的骨放入0.2M的磷酸二氢铵溶液浸泡16小时，采用质量分数为1.7％碳酸钠溶液冲洗4次；
(3)将浸泡好的骨放入高温炉中煅烧，在700℃条件下煅烧10小时；
(4)将煅烧好的骨放入必需氨基酸营养液中浸泡18小时，浸泡过程中加入腺嘌呤和碱性成纤维细胞生长因子；所述腺嘌呤的加入量为骨质量的0.08％；所述成纤维细胞生长因子的加入量为骨质量的0.12％。
(5)将浸泡好的骨用去离子水冲洗干净，将其投入可溶性胶原溶液中浸泡1.5小时，在超净台内取出并晾干，用去离子水冲洗5遍，超净台内晾干，环氧乙烷消毒备用；
所述可溶性胶原溶液的制备方法为：首先，从猪，牛的真皮和肌腱中用3％醋酸溶液提取骨明胶，重新溶解于水中配制成质量浓度为10-25％的骨明胶溶液；然后将配制好的骨明胶溶液放入反应锅内，用磷酸调节骨明胶溶液的pH值为2-4，然后加酸性蛋白酶控制骨明胶降解6-9小时，得到降解的骨明胶溶液，其中所述的酸性蛋白酶的加入量是双90骨明胶重量的4-8‰；将得到的降解的骨明胶溶液用盐酸或氢氧化钙调节pH为5-6.5；随后将反应物升到温度为60-75℃进行热抽提；将得到的反应物在温度为95-100℃的水浴中煮15-25分钟，得到可溶性胶原蛋白溶液。
制备的煅烧骨无明显免疫原性，矿物斑和污渍少，移植时变形，骨缺损愈合快慢，可见骨不连等问题。
Claims (5)
1.一种外科植入用煅烧骨的制备方法，其特征在于，按照如下步骤进行：
(1)选取异种骨或同种异体骨作为原材料，采用流水冲洗骨体，置于沸水中煮1-3小时；
(2)将煮好的骨放入弱酸性溶液中浸泡12-20小时，采用质量分数为1-2％的弱碱性溶液冲洗2-5次；
(3)将浸泡好的骨放入高温炉中煅烧，在600-750℃条件下煅烧1-3小时，熄火降温至150-200℃，升温至760-800℃，煅烧1-3小时，熄火降温至150-200℃，升温至600-750℃，熄火降温至常温；
(4)将煅烧好的骨放入氨基酸营养液中浸泡10-20小时，浸泡过程中加入腺嘌呤和碱性成纤维细胞生长因子；
(5)将浸泡好的骨用去离子水冲洗干净，将其投入可溶性胶原溶液中浸泡1-2小时，在超净台内取出并晾干，用去离子水冲洗1-6遍，超净台内晾干，环氧乙烷消毒备用；
所述弱酸性溶液为0.3-0.6M的磷酸氢铵溶液，0.1-0.3M的磷酸二氢铵溶液，双氧水或质量分数为0.1-0.5％的苹果酸溶液；
所述弱碱性溶液为质量分数为1-2％的碳酸钠溶液，质量分数为1-2％的碳酸氢钠溶液，质量分数为0.1-0.3％的苯氧基氨基丙烷溶液，或者质量分数为0.1-0.3％的苯氨基咪唑啉溶液。
2.根据权利要求1所述一种外科植入用煅烧骨的制备方法，其特征在于，所述氨基酸营养液为多聚赖氨酸溶液，必需氨基酸营养液或者全类氨基酸营养液。
3.根据权利要求1所述一种外科植入用煅烧骨的制备方法，其特征在于，所述可溶性胶原溶液的制备方法为：首先，从猪，牛的真皮和肌腱中用3％醋酸溶液提取骨明胶，重新溶解于水中配制成质量浓度为10-25％的骨明胶溶液；然后将配制好的骨明胶溶液放入反应锅内，用磷酸调节骨明胶溶液的pH值为2-4，然后加酸性蛋白酶控制骨明胶降解6-9小时，得到降解的骨明胶溶液，其中所述的酸性蛋白酶的加入量占骨明胶重量的4-8‰；将得到的降解的骨明胶溶液用盐酸或氢氧化钙调节pH为5-6.5；随后将反应物升到温度为60-75℃进行热抽提；将得到的反应物在温度为95-100℃的水浴中煮15-25分钟，得到可溶性胶原蛋白溶液。
4.根据权利要求1所述一种外科植入用煅烧骨的制备方法，其特征在于，所述腺嘌呤的加入量为骨质量的0.01-0.1％。
5.根据权利要求1所述一种外科植入用煅烧骨的制备方法，其特征在于，所述成纤维细胞生长因子的加入量为骨质量的0.05-0.15％。
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