CN104870019A - 用于稳定蛋白质和Fc结构域融合的融合蛋白的组合物 - Google Patents

用于稳定蛋白质和Fc结构域融合的融合蛋白的组合物 Download PDF

Info

Publication number
CN104870019A
CN104870019A CN201380065765.7A CN201380065765A CN104870019A CN 104870019 A CN104870019 A CN 104870019A CN 201380065765 A CN201380065765 A CN 201380065765A CN 104870019 A CN104870019 A CN 104870019A
Authority
CN
China
Prior art keywords
protein
domain
compositions
ammonium
ammonium salt
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201380065765.7A
Other languages
English (en)
Inventor
朴淳宰
金成圭
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Alteogen Inc
Original Assignee
Alteogen Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Alteogen Inc filed Critical Alteogen Inc
Publication of CN104870019A publication Critical patent/CN104870019A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/02—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/14—Quaternary ammonium compounds, e.g. edrophonium, choline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/205—Amine addition salts of organic acids; Inner quaternary ammonium salts, e.g. betaine, carnitine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/177—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • A61K38/1793—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C01—INORGANIC CHEMISTRY
    • C01C—AMMONIA; CYANOGEN; COMPOUNDS THEREOF
    • C01C1/00—Ammonia; Compounds thereof
    • C01C1/16—Halides of ammonium
    • C01C1/164—Ammonium chloride
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/70578—NGF-receptor/TNF-receptor superfamily, e.g. CD27, CD30, CD40, CD95
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K15/00—Anti-oxidant compositions; Compositions inhibiting chemical change
    • C09K15/04—Anti-oxidant compositions; Compositions inhibiting chemical change containing organic compounds
    • C09K15/20—Anti-oxidant compositions; Compositions inhibiting chemical change containing organic compounds containing nitrogen and oxygen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/30—Non-immunoglobulin-derived peptide or protein having an immunoglobulin constant or Fc region, or a fragment thereof, attached thereto

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本发明涉及一种用于稳定生理活性的蛋白质和Fc结构域的融合蛋白的组合物，更具体地说，涉及一种使用含有铵盐或铵盐和琥珀酸盐的组合的组合物，稳定蛋白质和Fc结构域的融合蛋白的方法。含有根据本发明的铵盐或铵盐和琥珀酸盐组合的组合物能有效抑制蛋白质-Fc结构域融合蛋白的聚集，并因此使得融合蛋白能够储存很长一段时间。因此，该组合物可广泛用于使用该蛋白质-Fc结构域融合蛋白的医疗领域。

Description

用于稳定蛋白质和Fc结构域融合的融合蛋白的组合物
技术领域
本发明涉及一种用于稳定生理活性的蛋白质和Fc结构域的融合蛋白的组合物，更具体地说，涉及一种使用含有铵盐或铵盐和琥珀酸盐组合的组合物，稳定蛋白质和Fc结构域的融合蛋白的方法。
背景技术
用于治疗疾病目的的抗体药物是应用了先进的生物过程技术，包括细胞系开发技术、细胞培养技术和纯化技术的生物药。随着这些抗体药物被证明比现有药物具有优异的疗效和安全性，对此的需求日益增多。例如，已将通过将人p75的人肿瘤坏死因子受体融合到人IgG1的Fc结构域的胞外配体结合部分而制备的融合蛋白(TNFR:Fc；依那西普)用作治疗类风湿性关节炎的药剂。此外，为了提高生理活性物质的体内的半衰期，试图使用GLP-1R激动剂和Fc结构域的融合蛋白(US2004-0558627；Chung,H.S.et al.,Regulatory peptide,170,2011)开发糖尿病治疗剂。另外，试图将诸如hGH或EPO的生理活性物质融合到Fc结构域以增加生理活性物质的体内半衰期(KR10-2008-7018012)。近年来，VEGF受体和Fc结构域的融合蛋白(aflibercept)已被批准并用作治疗湿性年龄相关性黄斑变性(WAMD)的药剂。
然而，如上所述的融合蛋白的问题在于，它们具有大且复杂的结构并且物理上不稳定，因此导致聚集。各种导致这样的聚集的因素都存在于生产和存储蛋白质的过程。
例如，聚集可以由以下一种或多种因素引起。在纯化期间，并非最佳的pH、盐的种类、盐浓度、温度、与空气接触、搅拌速度等都会引起聚集，而在配制过程中，蛋白质的浓度条件会引起聚集。在缓冲液交换期间，通过过滤膜、搅拌等会引起聚集，而在存储过程中，温度变化、pH变化、与空气接触、搅拌等会引起聚集。另外，当含有蛋白质的制剂暴露于光时，也会发生聚集，并且材料封装也会引起聚集(Hamada,H.et al.,CurrentPharmaceutical Biotechnology,10:400,2009)。
当抗体蛋白的疏水区由于其结构变化而被暴露时，在缓冲液中发生融合蛋白的最大聚集。换句话说，蛋白质分子的疏水区被集合在一起形成聚集，并且这种聚集由于抗体蛋白质之间的共价键也可能以不可逆的方式发生(Hamada,H.et al.,Current Pharmaceutical Biotechnology,10:348,2009)。
因上述原因而聚集的融合蛋白或抗体蛋白随着时间的流逝而具有降低的活性或失去活性。此外，当这些蛋白质聚集时，它们具有不会出现在非聚集状态下的抗原性，因此当被注入人体时，会导致抗毒抗体(ADA)的产生。因此，目前迫切需要一种用于减少融合蛋白的聚集的方法和稳定的制剂，其包含展现出降低的聚集水平的融合蛋白(Current Trends inMonoclonal Antibody Development and Manufacturing,Biotechnology:Pharmaceutical Aspects Volume XI,2010,pp 271-291)。
为了这个目的，尝试了加入防止聚集或控制pH的赋形剂或者加入缓冲液组合物的方法。在抗体蛋白的疏水基团暴露于蛋白质分子的表面并相互结合而引起聚集的情况下，使用能够稳定暴露的疏水基团的赋形剂来防止聚集。例如，报道了使用氨基酸如精氨酸、赖氨酸、脯氨酸、组氨酸和甘氨酸(US 4362661A和US 7648702)，聚山梨醇酯系表面活性剂，两亲性聚合物如聚乙二醇(PEG)或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)，多糖如葡聚糖，或单糖或二糖如蔗糖、麦芽糖或海藻糖(US 5945098A)。
然而，蛋白质和Fc结构域的融合蛋白比通常生产的抗体蛋白质的稳定性要差，并且因此相比其它蛋白质或抗体显示出更强的形成聚集的趋势。有这样一个实例，其中向蛋白质-Fc结构域融合蛋白中加入表面活性剂如聚山梨醇酯来制备制剂，以防止融合蛋白的聚集(Steven J.Shire et al.,Biotechnology:Pharmaceutical Aspects,Current Trends in Monoclonal AntibodyDevelopment and Manufacturing,XI:115,2010)。
因此，本发明人发现，含有铵盐或铵盐和琥珀酸盐组合的组合物可以通过抑制融合蛋白的聚集来增加蛋白质和Fc结构域的融合蛋白的稳定性，使其能够很容易地保存很长的一段时间，从而完成了本发明。
发明内容
本发明的一个目的是提供一种用于稳定化的组合物和使用该组合物稳定蛋白质-Fc结构域融合蛋白的方法，所述组合物可以通过抑制生理活性的蛋白质和Fc结构域的融合蛋白的聚集，增加该融合蛋白的稳定性。
本发明的另一个目的是提供一种用于预防和治疗疾病的组合物，该组合物包含所述用于稳定化的组合物。
为了达到上述目的，在一个方面，本发明提供了一种用于稳定蛋白质-Fc结构域融合蛋白的组合物，其含有铵盐或铵盐和琥珀酸盐的组合，以及一种用于预防和治疗疾病的组合物，其包括所述用于稳定所述融合蛋白的组合物。
在另一个方面，本发明提供了一种用于稳定蛋白质-Fc结构域融合蛋白的方法，其将铵盐或铵盐和琥珀酸盐的组合添加到含有所述融合蛋白的组合物中。
附图说明
图1示出测量在50℃将依那西普(TNF受体的水溶性部分和Fc结构域的融合蛋白)在含有各种赋形剂(精氨酸(Arg)、EDTA、甘氨酸(Gly)、组氨酸(His)、羟丙基环糊精(HP环糊精)、氯化铵、聚乙二醇(PEG)、脯氨酸(Pro)、蔗糖、海藻糖和聚山梨醇酯20)的制剂溶液中存储1周后，依那西普的聚集度的结果。
图2示出测量在50℃将依那西普在含有各种赋形剂(精氨酸(Arg)、脯氨酸(Pro)、50mM氯化铵、100mM氯化铵、200mM氯化铵、蔗糖、聚山梨醇酯20和羟丙基环糊精(HPcD))的制剂溶液中存储1周后，依那西普的聚集度的结果。
图3示出测量在37℃将依那西普在含氯化铵的制剂溶液中存储4周后，依那西普的聚集度的结果。
Arg：精氨酸；AmCl：氯化铵；AmSul：硫酸铵；
Am+Lys：氯化铵+赖氨酸；Am+EDTA：氯化铵+EDTA；
Am+Polysorabate 20：氯化铵+聚山梨醇酯20；
Am+Suc：氯化铵+蔗糖。
图4和图5示出测量在45℃将依那西普在含有精氨酸、氯化铵、硫酸铵、氯化铵+赖氨酸、氯化铵+EDTA、氯化铵+聚山梨醇酯20、和氯化铵+蔗糖的制剂溶液中存储14天后，依那西普的聚集度的结果。
Arg：精氨酸；AmCl#：氯化铵#％；
AmSul：硫酸铵；Am#+Lys：氯化铵#％+赖氨酸；
Am#+Suc：氯化铵#％+蔗糖。
图6示出测量在45℃将依那西普在含有氯化铵的各种缓冲液(磷酸钠、琥珀酸钠、柠檬酸钠和组氨酸)中存储5天后，依那西普的聚集度的结果。
图7示出测量在45℃将依那西普在不同pH的含有氯化铵的琥珀酸钠缓冲液组合物中存储5天后，依那西普的聚集度的结果。
图8示出测量在45℃将依那西普在含有氯化铵和赖氨酸的琥珀酸钠缓冲液组合物中存储14天后，依那西普的聚集度的结果。Enbrel：市售的依那西普(Enbrel)制剂；
AmCl：氯化铵；AmCl+Lys：氯化铵+赖氨酸。
具体实施方式
除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员的通常理解相同的含义。通常，本文中使用的命名法和将在下面描述的实验方法是本领域公知且通常采用的。
如本文所使用，“蛋白质和Fc结构域的融合蛋白”、“蛋白质-Fc结构域融合蛋白”是指这样的融合蛋白，其包含融合至作为抗体恒定区的Fc结构域的蛋白，其中蛋白质意指由数个氨基酸组成的通过肽键形成的氨基酸聚合物。另外，多肽与具有低分子量的寡肽和具有高分子量的蛋白质具有相同的含义。因此，如本文所使用，“蛋白质和Fc结构域的融合蛋白”与“多肽和Fc结构域的融合蛋白”具有相同的含义。
在本发明中，“蛋白质”是一种表现出任何生理活性的蛋白或多肽，并且对其种类没有限制。优选地，本发明所使用的蛋白质可以选自各种受体的可溶部分，所述受体例如TNF-受体和VEGF受体，GLP-1类似物和衍生物，flt3配体，CD40配体，促红细胞生成素，血小板生成素，降钙素，Fas配体，NF-κB配体的受体激活物(RANKL)，TNF相关凋亡诱导配体(TRAIL)，胸腺基质源性淋巴细胞生成素，粒细胞生长刺激糖蛋白，粒细胞/巨噬细胞生长刺激糖蛋白，肥大细胞生长因子，干细胞生长因子，表皮生长因子，RANTES，生长激素，胰岛素，促胰岛激素，胰岛素样生长因子，甲状旁腺激素，干扰素，神经生长因子，胰高血糖素，白介素1-18，集落刺激因子，淋巴毒素β，肿瘤坏死因子(TNF)，白血病抑制因子，抑瘤素-M和细胞表面分子Elk和HeK的各种配体(如eph相关激酶的配体，或LERKS)。最优选地，它可以是人p75TNF受体的胞外配体结合结构域。
如本文所使用，“受体的可溶性部分”是指胞外配体结合结构域，或含有胞外配体结合结构域和跨膜结构域的区域。
在本发明中，“Fc结构域”是指抗体的恒定结构域。它优选人IgG1的Fc结构域，但不限于此。除了人IgG1以外，也可以使用IgG2、IgG3和IgG4，并且Fc结构域可包含IgG1、IgG2、IgG3和IgG4的部分或全部的CH1结构域、CH2结构域、CH3结构域和铰链区。优选地，它可以包括CH2结构域、CH3结构域和铰链区，但不包括CH1结构域。
本发明中的蛋白质-Fc结构域融合蛋白可以根据本领域中已知的一般方法来生产。当在细胞中生产融合蛋白时，可通过选自离心、超滤和/或色谱工艺中的一种或多种工艺去除融合蛋白以外的物质。
在一个方面，本发明涉及一种用于稳定蛋白质-Fc结构域融合蛋白的组合物，其包含铵盐。
本发明中的“铵盐”是指由氨和酸反应生成的盐，并且可以由式NH4X(X＝单价酸基团)表示。优选地，它可以选自氯化铵、硫酸铵、碳酸铵和硝酸铵，但不限于此。
多种盐改变蛋白质的溶解性(Kunz,W.et al.,Curr.Opin.Coll.InterfaceSci.,9:1937,2004)，并且蛋白质的溶解性和表面张力的增加有关。使表面张力最大化并且增加蛋白质稳定性的阳离子是NH4 +。然而，还没有报道使用铵盐来抑制融合蛋白的聚集或稳定含有融合蛋白的组合物。本发明人发现，当将蛋白质和Fc结构域的融合蛋白存储在含铵盐的水溶液中时，有效地抑制了融合蛋白的聚集。因此，本发明提供了一种稳定蛋白质和Fc结构域的融合蛋白的组合物，所述组合物含有铵盐。
作为用于本发明中的铵盐，可以5-500mM的浓度包含选自氯化铵、硫酸铵、碳酸铵和硝酸铵中的一种。在本发明的一个例子中，以12.5-200mM的浓度使用铵盐，但即使在以12.5mM或更低或者以200mM或更高的浓度使用铵盐时，它仍表现出抑制融合蛋白的聚集的效果。因此，本发明中的铵盐有效地抑制多肽和Fc结构域的融合蛋白的聚集。在本发明的另一个例子中，显示了当将包含融合于人IgG1的Fc结构域的人p75肿瘤坏死因子受体的胞外配体结合结构域的融合蛋白存储在铵盐或硫酸铵溶液中时，该融合蛋白的聚集度相比与没有存储在铵盐溶液中的融合蛋白降低了高达约80％(图1和2)。
在另一个方面，根据本发明的用于稳定蛋白质-Fc结构域融合蛋白的组合物可进一步包括琥珀酸盐。琥珀酸盐在组合物中用作缓冲液，通过控制含有该蛋白质-Fc结构域融合蛋白的组合物的pH值，进一步降低蛋白质-Fc结构域融合蛋白的聚集。
琥珀酸盐以5-200mM的浓度，更优选20-30mM的浓度添加。在本发明中不仅可以使用琥珀酸钠，也可以使用本领域中已知的各种琥珀酸盐。在含有琥珀酸盐的组合物中，琥珀酸盐缓冲液控制所述组合物的pH至5.5-6.5，优选6.0-6.3。如果组合物的pH值低于5.5或高于6.5，那么融合蛋白的聚集会增加，并且因为这个原因，pH值优选控制在上述范围内。
在本发明的一个例子中，将磷酸钠、琥珀酸钠、柠檬酸钠和组氨酸缓冲液中每一种加入到被证明具有抑制融合蛋白聚集作用的氯化铵赋形剂中以便检查缓冲液之间的蛋白质聚集抑制效果的差别。结果是，表明在pH 6.5，在含有琥珀酸钠作为缓冲液的制剂中的聚集比含有磷酸钠作为缓冲液的市售依那西普(EnbrelTM)制剂中显著降低。另外，可以看出，在pH 6.0，含有琥珀酸钠的制剂相比于含有其它缓冲液的制剂表现出优异的聚集抑制效果(图6)。此外，检查各种pH的琥珀酸钠缓冲液的聚集抑制效果以便使其作用最大化，并且结果是，可以看出，随着琥珀酸钠的pH下降，聚集更少，并且在pH 6.0和pH 6.3，聚集比市售依那西普制剂(比较制剂)显著下降(图7)。
同时，已知氨基酸抑制蛋白质的聚集，并且其中，碱性氨基酸对防止聚集具有优异的效果。在用于治疗类风湿关节炎的依那西普的情况下，精氨酸用作抗聚集剂(美国7648702B2)，并且报道了用于稳定Fc修饰抗体的制剂，其包含赖氨酸、精氨酸、组氨酸、糖、酸性缓冲液和聚山梨醇酯的组合(US 2010-0254985)。此外，报道了糖类如海藻糖、蔗糖、甘露糖醇或麦芽糖，或阴离子缓冲液如磷酸盐或柠檬酸盐的用途。另外，表面活性剂可以粘附蛋白的暴露的疏水区并提高蛋白质的溶解性，从而防止蛋白质的聚集，因此聚山梨醇酯通常用于抗体蛋白制剂，例如莫罗单抗、阿昔单抗、利妥昔单抗、达利珠、阿仑单抗、阿达木单抗、贝伐单抗和那他珠单抗。
因此，根据本发明的用于稳定蛋白质-Fc结构域融合蛋白的组合物为了进一步降低融合蛋白的聚集，还可以含有选自碱性氨基酸、糖类和表面活性剂中的一种或多种赋形剂。
作为碱性氨基酸，可以1-50mM的浓度使用精氨酸、赖氨酸、组氨酸等，作为糖类，可以0.5-10％w/v的浓度使用蔗糖、海藻糖、甘露糖醇、麦芽糖等，并且作为表面活性剂，可以0.001-0.1％w/v的浓度使用Triton、吐温或Pluronic系列，但没有限制。在本发明中可以使用任何赋形剂而没有限制，只要它可在本领域中用于抑制融合蛋白或抗体蛋白。
在本发明的一个例子中，检查琥珀酸钠缓冲液，铵离子组分和碱性氨基酸的组合的聚集抑制效果，并且作为结果，表明在含有氯化铵、琥珀酸盐和赖氨酸的组合物中的聚集度比在依那西普制剂(比较制剂)中显著降低(图8)。
在另一个方面，本发明涉及通过将铵盐加入到含有融合蛋白的组合物中，稳定蛋白质-Fc结构域融合蛋白的方法。该组合物可进一步含有琥珀酸盐。可以具有pH 5.5-6.5的缓冲液形式，以5-200mM的浓度包含该琥珀酸盐。
在本发明的一个例子中，作为蛋白质-Fc结构域融合蛋白，使用市售的关节炎治疗剂依那西普和通过在CHO细胞中表达蛋白并纯化所表达的蛋白而获得的蛋白质产物。为了检查根据本发明的铵盐是否抑制融合蛋白的聚集，并是否能有效地稳定含有该融合蛋白的制剂，进行实验，并且结果是，可以看出使用根据本发明的铵盐在抑制融合蛋白聚集方面展现出比用于防止依那西普产物聚集的精氨酸更佳的效果(实施例2)。
因此，在一个优选的实施方式中，本发明提供了用于治疗关节炎的组合物，其包含铵盐和一融合蛋白，所述融合蛋白包括融合到人IgG1的Fc结构域的人p75肿瘤坏死因子受体的胞外配体结合结构域。
以下，参照实施例对本发明进行更详细的说明。对本领域的普通技术人员来说显而易见的是，这些实施例是说明性的目的，并且不应被解释为限制或改变本发明的范围。
实施例1
使用依那西普蛋白作为蛋白质和Fc结构域的融合蛋白进行实验。如本文所使用，“TNFR:Fc”是指依那西普蛋白，而“TNFR:Fc制剂”是指含有依那西普蛋白的制剂。
进行在本实施例中的实验来比较抑制TNFR:Fc的聚集的赋形剂的效果。具体地，进行实验以检查在50℃时TNFR:Fc的聚集是否因赋形剂不同而有差异。制备除精氨酸外，与在Enbrel产品(Amgen，美国)中使用的配方相同的溶液，并且向其中加入每种赋形剂。将制备的水性溶液(25mg/ml依那西普，0.66％w/v蔗糖，65mM氯化钠，17mM磷酸钠，pH6.4)存储于50℃，然后比较水性溶液之间的聚集度。赋形剂在水性溶液中的最终浓度为25mM精氨酸，100mM脯氨酸，80mM组氨酸，100mM甘氨酸，0.2M氯化铵，10mM EDTA，20％w/v蔗糖，20％w/海藻糖，10％w/v聚乙二醇，0.04％w/v聚山梨醇酯20(吐温20)和0.1％w/v羟丙基环糊精，并且使用SE-HPLC测定TNFR:Fc的聚集度。在缓冲流动相为50mM磷酸钠(pH为6.8)，0.15M氯化钠和0.05％w/v叠氮化钠的条件下，将蛋白注入到TSK凝胶G3000SWXL(7.8×300mm)HPLC柱(TOSOH，日本)中，然后检测在280nm的蛋白质峰值。早于主峰从该柱洗脱TNFR:Fc的聚集物，并且通过比较聚集物的峰值与主峰的面积来计算聚集度。
在50℃存储1周的结果表明，TNFR:Fc蛋白的聚集确实在不同的赋形剂之间显著不同。储存在4℃(冷藏温度)的蛋白质(无抗聚集赋形剂的对照)显示出很少或没有聚集，而无论哪种赋形剂，大多数的蛋白质确实都在50℃聚集(图1)。其中，表面活性剂聚山梨醇酯20、羟丙基环糊精、两亲聚合物聚乙二醇、金属离子去除剂EDTA和氨基酸赋形剂(精氨酸、脯氨酸、组氨酸、甘氨酸等)不抑制蛋白质的聚集(图1)。然而，作为糖类赋形剂的蔗糖和海藻糖，显示出比其它赋形剂稍好的防止聚集效果。此外，在其它赋形剂的情况下，当氯化铵用作赋形剂时，只有约50％的蛋白质会聚集。
从上述结果中可以看出，在苛刻条件下使用铵会有效地抑制TNFR:Fc的聚集。
实施例2
使用TNFR:Fc作为蛋白质-Fc结构域融合蛋白进行实验。进行该实验来比较使用被用于抑制TNFR:Fc聚集的赋形剂精氨酸和使用其它赋形剂的聚集度。
被选择用于比较的赋形剂是脯氨酸、氯化钠、蔗糖、聚山梨醇酯20和羟丙基环糊精。制备无精氨酸的阴性对照和含有25mM精氨酸的阳性对照，其含有最终浓度为10mg/ml的TNFR:Fc，1％w/v蔗糖，100mM氯化钠，25mM磷酸钠(pH 6.4)。此外，测试了通过各添加100mM脯氨酸，50-200mM氯化铵，20％w/v蔗糖，0.04％w/v聚山梨醇酯20和0.1％w/v羟丙基环糊精所获得的制剂。将每种制剂以与实施例1相同的方式在50℃存储1周。使用SE-HPLC以与实施例1所述相同的方式检查聚集。
将TNFR:Fc在50℃存储1周，并且结果是，含有精氨酸的制剂显示出约10％的聚集度(图2)。然而，可以看出，其它氨基酸脯氨酸显示出对防止聚集的效果不显著，并且在抗体蛋白质制剂中常用作抗聚集剂的聚山梨醇酯20和羟丙基环糊精(HPCD)对防止聚集有很少或没有效果。然而，蔗糖这种典型的蛋白质稳定剂在过量(20％w/v)加入时显示出与精氨酸相比优异的防止聚集的效果。可以看出，在实施例1中显示出优异的稳定效果的氯化铵的抗聚集效果随着其浓度增加而增加(见图2)。此外，可以看出，使用50mM氯化铵比使用25mM精氨酸显示出更好的聚集抑制效果。
实施例3
在本实施例中，为了进一步证明在高温下已被证明有聚集抑制作用的氯化铵赋形剂的聚集抑制效果，在37℃的温度进行实验。进行实验来证明作为另一铵盐的硫酸铵和通常已知具有抑制蛋白质聚集能力的其它赋形剂的组合的聚集抑制作用。具体地，将每种赋形剂加入到含有25mg/ml的TNFR:Fc、1％w/v蔗糖、100mM氯化钠和25mM磷酸钠的稳定缓冲液(pH6.4)中，然后将每种缓冲液于37℃存储4周，随后测量。
使用不含用于聚集抑制的赋形剂的稳定缓冲液(阴性对照制剂)组合物，含有25mM精氨酸的制剂(阳性对照制剂)，含有50mM氯化铵的制剂，含有25mM硫酸铵的制剂，含有50mM氯化铵和1mM EDTA的制剂，含有50mM氯化铵和0.1％w/v聚山梨醇酯20的制剂，含有50mM氯化铵和5％w/v蔗糖的制剂，以及含有50mM氯化铵和25mM赖氨酸的制剂。将每种制剂于37℃存储4周。使用SE-HPLC以与实施例1中所述相同的方式，测量抑制聚集的效果。
表1：
[表1]
在37℃将依那西普存储在含氯化铵的制剂中4周后，测量依那西普的聚集的结果
将TNFR:Fc在37℃存储4周，并且结果是，可以看出含有铵盐的制剂有效地抑制蛋白质的聚集，并且与氯化铵类似，硫酸铵也抑制蛋白质的聚集。另外，有趣的是，可以看出，当赋形剂如EDTA或聚山梨醇酯20与氯化铵组合使用时，聚集度比使用阴性对照制剂时增加，但是，当蔗糖和赖氨酸与氯化铵组合使用时，聚集度比单独使用氯化铵降低(图3和表1)。
实施例4
进行实验来检查已被证明具有抑制融合蛋白聚集作用的氯化铵赋形剂的浓度依赖性抑制作用，并在超过37℃的温度进行。在45℃的温度进行实验，来检验TNFR:FC的细微的聚集现象的差异。
具体地，进行实验来检查氯化铵、硫酸铵和通常已知具有抑制蛋白质聚集作用的其它赋形剂的组合对TNFR:Fc的聚集抑制的效果。具体而言，在45℃将50mg/ml的TNFR:Fc存储于含有1％w/v蔗糖、100mM氯化钠和25mM磷酸钠的稳定缓冲液(pH 6.4)中，然后观察制剂溶液中铵盐的聚集抑制效果。
将不含用于聚集抑制的赋形剂的稳定缓冲液组合物(阴性对照制剂)，含有25mM精氨酸的制剂(阳性对照制剂)，各含有12.5mM、25mM和50mM氯化铵的制剂，含有25mM氯化铵和25mM赖氨酸或5％w/v蔗糖的制剂以及含有50mM氯化铵和25mM赖氨酸或5％w/v蔗糖的制剂在45℃存储2周，然后检查聚集度。使用SE-HPLC以与实施例1中所述相同的方式，测定聚集抑制效果。
表2：
[表2]
在45℃将依那西普存储在含有不同浓度氯化铵的制剂中14天后，测量依那西普的聚集的结果
实验结果表明，根据铵盐的浓度，含有铵盐的制剂显示出聚集抑制效果等于或大于含有精氨酸的制剂。此外，可以看出，当氯化铵或硫酸铵与通常已知具有抑制蛋白质聚集作用的其它赋形剂(赖氨酸和蔗糖)组合使用时，可以获得对蛋白聚集更佳的抑制效果(图4和图5和表2)。
实施例5
在本实施例中，为了使已被证明具有抑制融合蛋白聚集作用的氯化铵赋形剂的效果最大化，将使用各种缓冲液制备的制剂溶液存储于45℃，并且测量聚集抑制作用。
具体地，进行实验来检查经常用于蛋白质制剂的磷酸钠、琥珀酸钠、柠檬酸钠和组氨酸缓冲液之间的蛋白质聚集抑制效果的差异。在45℃，将50mg/ml的TNFR:Fc存储在pH 6.0和pH 6.5的100mM氯化钠、50mM氯化铵和25mM的上述四种缓冲液各种中，并观察制剂溶液抑制蛋白聚集的效果。
使用SE-HPLC以与实施例1中所述相同的方式测量聚集抑制效果。
从实验结果表明，在pH 6.5时，在含有琥珀酸钠作为缓冲液的制剂中的聚集显著低于含有其它缓冲液的制剂。另外，在含有目前市售的Enbrel制剂中使用的磷酸钠缓冲液的制剂中的聚集高于其它制剂。此外，可以看出，在pH 6.0时含有琥珀酸钠的制剂显示出比含有其它缓冲液的制剂稍好的聚集抑制效果(图6)。
实施例6
在本实施例中，为了使具有抑制融合蛋白聚集的优异效果的琥珀酸钠缓液的作用最大化，将使用调节至不同pH的琥珀酸钠缓冲液制备的制剂溶液存储于45℃，并测量制剂溶液的聚集抑制。
具体地，进行实验来检验具有不同pH的琥珀酸钠缓冲液之间的蛋白质聚集抑制效果的差异。在45℃，将50mg/ml的TNFR:Fc存储在pH 6.0、6.3、6.5和7.0的100mM氯化钠、50mM氯化铵和25mM琥珀酸钠缓冲液中，并测量制剂溶液的抑制聚集的效果。
使用SE-HPLC以与实施例1中所述相同的方式测量聚集抑制效果。
从实验结果表明，随着琥珀酸钠缓冲液的pH降低，融合蛋白的聚集减少，并且在pH 6.0和pH 6.3时，在琥珀酸盐缓冲液中的融合蛋白聚集少于市售依那西普制剂(比较制剂)(图7)。
实施例7
在本实施例中，为了证实对融合蛋白聚集具有优异抑制作用的琥珀酸钠缓冲液和铵离子组分以及碱性氨基酸的组合对融合蛋白的聚集具有更好的效果，将通过混合组分而制备的制剂溶液存储于45℃，并测量制剂溶液抑制聚集的效果。
具体地，进行实验来检查琥珀酸钠缓冲液、氯化铵和赖氨酸组合对蛋白质聚集的抑制效果。在45℃，将50mg/ml的TNFR:Fc存储在含有100mM氯化钠、50mM氯化铵、25mM赖氨酸和25mM琥珀酸钠的缓冲液中，观察0、5、10和15天的制剂溶液抑制聚集的效果。
使用SE-HPLC以与实施例1中所述相同的方式测量聚集抑制效果。
从实验结果表明，在含有氯化铵、琥珀酸盐和赖氨酸的组合物中的聚集比在Enbrel制剂(比较制剂)更少(图8)。
工业实用性
如上所述，根据本发明的含有铵盐或铵盐和琥珀酸盐组合的组合物，可有效地抑制蛋白质-Fc结构域融合蛋白的聚集，从而使融合蛋白质存储很长的一段时间。因此，该组合物可广泛用于使用该蛋白质-Fc结构域融合蛋白的医疗领域。
虽然已参照具体特征对本发明作了详细描述，但对本领域技术人员显而易见的是该描述仅仅用于优选实施方式，并不限制本发明的范围。因此，本发明的实质范围将由所附权利要求书及其等同物来限定。

Claims (32)

1.一种用于稳定蛋白质和Fc结构域的融合蛋白的组合物，其包含铵盐。
2.根据权利要求1的组合物，进一步包含琥珀酸盐。
3.根据权利要求2的组合物，其中以5-200mM的浓度包括所述琥珀酸盐。
4.根据权利要求2或3的组合物，其中所述琥珀酸盐用作具有pH 5.5-6.5的缓冲液。
5.根据权利要求1的组合物，其中所述铵盐抑制蛋白质-Fc结构域融合蛋白的聚集。
6.根据权利要求1的组合物，其中所述铵盐选自氯化铵、硫酸铵、碳酸铵和硝酸铵。
7.根据权利要求1的组合物，其中以5-500mM的浓度包括所述铵盐。
8.根据权利要求1的组合物，其中所述蛋白质-Fc结构域融合蛋白是人p75肿瘤坏死因子受体的胞外配体结合结构域融合到人IgG1的Fc结构域的融合蛋白。
9.根据权利要求1的组合物，进一步包含赋形剂。
10.根据权利要求9的组合物，其中所述赋形剂是选自碱性氨基酸、糖类和表面活性剂中的至少一种。
11.根据权利要求9的组合物，其中所述赋形剂是蔗糖、赖氨酸或蔗糖和赖氨酸两者。
12.一种稳定蛋白质-Fc结构域融合蛋白的方法，向包含所述蛋白质-Fc结构域融合蛋白的组合物中添加铵盐。
13.根据权利要求12的方法，其中所述组合物进一步包括琥珀酸盐。
14.根据权利要求13的方法，其中以5-200mM的浓度包括所述琥珀酸盐。
15.根据权利要求13或14中，其中以具有pH 5.5-6.5的缓冲液的形式添加所述琥珀酸盐。
16.根据权利要求12的方法，其中所述铵盐抑制蛋白质-Fc结构域融合蛋白的聚集。
17.根据权利要求12的方法，其中所述铵盐选自氯化铵、硫酸铵、碳酸铵和硝酸铵。
18.根据权利要求12的方法，其中以5-500mM的浓度包括所述铵盐。
19.根据权利要求12的方法，其中所述蛋白质-Fc结构域融合蛋白是人p75肿瘤坏死因子受体的胞外配体结合结构域融合到人IgG1的Fc结构域的融合蛋白。
20.根据权利要求12的方法，其中所述组合物进一步包含赋形剂。
21.根据权利要求20的方法，其中所述赋形剂是选自碱性氨基酸、糖类和表面活性剂中的至少一种。
22.根据权利要求21的方法，其中所述赋形剂是蔗糖、赖氨酸或蔗糖和赖氨酸两者。
23.一种用于治疗关节炎的组合物，其包含铵盐和一融合蛋白，所述融合蛋白包括融合到人IgG1的Fc结构域的人p75肿瘤坏死因子受体的胞外配体结合域。
24.根据权利要求23的组合物，进一步包含琥珀酸盐。
25.根据权利要求24的组合物，其中以5-200mM的浓度包括所述琥珀酸盐。
26.根据权利要求24或25的组合物，其中所述琥珀酸盐是以具有pH5.5-6.5的缓冲液的形式添加。
27.根据权利要求23的组合物，其中所述铵盐抑制蛋白质-Fc结构域融合蛋白的聚集。
28.根据权利要求23的组合物，其中所述铵盐选自氯化铵、硫酸铵、碳酸铵和硝酸铵。
29.根据权利要求23的组合物，其中以5-500mM的浓度包括所述铵盐。
30.根据权利要求23的组合物，进一步包含赋形剂。
31.根据权利要求30的组合物，其中所述赋形剂是选自碱性氨基酸、糖类和表面活性剂中的至少一种。
32.根据权利要求30的组合物，其中所述赋形剂是蔗糖、赖氨酸或蔗糖和赖氨酸两者。
CN201380065765.7A 2012-11-27 2013-10-23 用于稳定蛋白质和Fc结构域融合的融合蛋白的组合物 Pending CN104870019A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR20120134946 2012-11-27
KR10-2012-0134946 2012-11-27
PCT/KR2013/009474 WO2014084508A1 (ko) 2012-11-27 2013-10-23 단백질과 Fc 도메인을 융합한 융합 단백질의 안정화용 조성물

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN104870019A true CN104870019A (zh) 2015-08-26

Family

ID=50828096

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201380065765.7A Pending CN104870019A (zh) 2012-11-27 2013-10-23 用于稳定蛋白质和Fc结构域融合的融合蛋白的组合物

Country Status (6)

Country Link
US (1) US9474803B2 (zh)
EP (1) EP2926834A4 (zh)
JP (1) JP6026002B2 (zh)
KR (1) KR101419884B1 (zh)
CN (1) CN104870019A (zh)
WO (1) WO2014084508A1 (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109982685A (zh) * 2016-10-21 2019-07-05 美国安进公司 药物配制品及其制备方法
CN111278453A (zh) * 2017-09-07 2020-06-12 Jcr制药股份有限公司 水性药物组合物

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2006259664A1 (en) 2005-06-14 2006-12-28 Amgen Inc. Self-buffering protein formulations
US20160074515A1 (en) 2014-06-20 2016-03-17 Reform Biologics, Llc Viscosity-reducing excipient compounds for protein formulations
US10478498B2 (en) 2014-06-20 2019-11-19 Reform Biologics, Llc Excipient compounds for biopolymer formulations
US9821059B2 (en) * 2014-10-17 2017-11-21 Alteogen Inc. Composition for stabilizing protein and pharmaceutical formulation comprising the same
US10279048B2 (en) 2016-07-13 2019-05-07 Reform Biologics, Llc Stabilizing excipients for therapeutic protein formulations
US11236146B2 (en) 2016-10-28 2022-02-01 Celltrion Inc. Stable pharmaceutical formulation
WO2019036619A1 (en) * 2017-08-18 2019-02-21 Reform Biologics, Llc STABILIZING EXCIPIENTS FOR FORMULATIONS OF THERAPEUTIC PROTEIN
CN111356471A (zh) * 2017-11-20 2020-06-30 济世发展生物药业有限公司 包含赖氨酸盐作为张力调节剂的阿柏西普制剂及其用途
AU2019265005A1 (en) 2018-05-10 2020-12-17 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. High concentration vegf receptor fusion protein containing formulations
GB201901547D0 (en) * 2019-02-05 2019-03-27 Arecor Ltd Stabilized Fc Fusion protein solutions

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011141926A2 (en) * 2010-05-10 2011-11-17 Intas Biopharmaceuticals Limited Liquid formulation of polypeptides containing an fc domain of an immunoglobulin
WO2012143418A1 (en) * 2011-04-20 2012-10-26 Sandoz Ag STABLE PHARMACEUTICAL LIQUID FORMULATIONS OF THE FUSION PROTEIN TNFR:Fc

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4362661A (en) 1979-08-09 1982-12-07 Teijin Limited Immunoglobulin composition having a high monomer content, and process for production thereof
US5945098A (en) 1990-02-01 1999-08-31 Baxter International Inc. Stable intravenously-administrable immune globulin preparation
CA2103059C (en) 1991-06-14 2005-03-22 Paul J. Carter Method for making humanized antibodies
US5464934A (en) 1993-05-14 1995-11-07 Mallinckrodt Medical, Inc. Metal chelates as spacer compounds in biologically active peptides
AU2002213441B2 (en) * 2000-10-12 2006-10-26 Genentech, Inc. Reduced-viscosity concentrated protein formulations
IL159475A0 (en) 2001-06-21 2004-06-01 Altus Biologics Inc Spherical protein particles, compositions containing the same and methods for the production thereof
US20030180287A1 (en) * 2002-02-27 2003-09-25 Immunex Corporation Polypeptide formulation
EA008831B1 (ru) 2003-06-12 2007-08-31 Эли Лилли Энд Компани Слитые белки аналогов glp-1
NZ545221A (en) 2003-08-01 2009-09-25 Amgen Inc Crystalline tumor necrosis factor receptor 2 polypeptides
AU2005286607B2 (en) 2004-09-23 2011-01-27 Genentech, Inc. Cysteine engineered antibodies and conjugates
US9168286B2 (en) * 2005-10-13 2015-10-27 Human Genome Sciences, Inc. Methods and compositions for use in treatment of patients with autoantibody positive disease
CA2638811A1 (en) 2006-02-03 2007-08-16 Medimmune, Llc Protein formulations
US8216575B2 (en) * 2006-03-31 2012-07-10 Chengdu Kanghong Biotechnologies Co., Ltd. Inhibition of neovascularization with a soluble chimeric protein comprising VEGF FLT-1 and KDR domains
MX2009005776A (es) 2006-12-01 2009-06-10 Medarex Inc Anticuerpos humanos que se enlazan al cd 22 y sus usos.
US7867491B2 (en) 2007-05-30 2011-01-11 Genexine Co., Ltd. Immunoglobulin fusion proteins
WO2009026274A1 (en) 2007-08-22 2009-02-26 Medarex, Inc. Site-specific attachment of drugs or other agents to engineered antibodies with c-terminal extensions
AU2008314689A1 (en) 2007-10-22 2009-04-30 Merck Serono S.A. Method for purifying an Fc-containing protein
AU2010221156A1 (en) 2009-03-06 2011-09-22 Genentech, Inc. Antibody formulation
MX2011013455A (es) 2009-07-08 2012-02-13 Amgen Inc Diseño de moleculas de fc de anticuerpo estables y libres de agregacion a traves del diseño de la interfase del dominio de ch3.
US10995130B2 (en) * 2011-07-01 2021-05-04 Biogen Ma Inc. Arginine-free TNFR:Fc-fusion polypeptide compositions and methods of use

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011141926A2 (en) * 2010-05-10 2011-11-17 Intas Biopharmaceuticals Limited Liquid formulation of polypeptides containing an fc domain of an immunoglobulin
WO2012143418A1 (en) * 2011-04-20 2012-10-26 Sandoz Ag STABLE PHARMACEUTICAL LIQUID FORMULATIONS OF THE FUSION PROTEIN TNFR:Fc

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109982685A (zh) * 2016-10-21 2019-07-05 美国安进公司 药物配制品及其制备方法
CN109982685B (zh) * 2016-10-21 2022-03-11 美国安进公司 药物配制品及其制备方法
CN114917185A (zh) * 2016-10-21 2022-08-19 美国安进公司 药物配制品及其制备方法
CN114917185B (zh) * 2016-10-21 2023-11-14 美国安进公司 药物配制品及其制备方法
CN111278453A (zh) * 2017-09-07 2020-06-12 Jcr制药股份有限公司 水性药物组合物
US11932699B2 (en) 2017-09-07 2024-03-19 Jcr Pharmaceuticals Co., Ltd. Aqueous pharmaceutical composition

Also Published As

Publication number Publication date
EP2926834A1 (en) 2015-10-07
JP6026002B2 (ja) 2016-11-16
WO2014084508A1 (ko) 2014-06-05
KR101419884B1 (ko) 2014-07-16
US9474803B2 (en) 2016-10-25
KR20140067897A (ko) 2014-06-05
JP2016502528A (ja) 2016-01-28
US20150313996A1 (en) 2015-11-05
EP2926834A4 (en) 2016-04-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104870019A (zh) 用于稳定蛋白质和Fc结构域融合的融合蛋白的组合物
AU2017265026B2 (en) Arginine - Free TNFR: Fc- Fusion Polypeptide Compositions And Methods Of Use
EP2699265B1 (en) STABLE PHARMACEUTICAL LIQUID FORMULATIONS OF THE FUSION PROTEIN TNFR:Fc
EP2568960B1 (en) Liquid formulation of polypeptides containing an fc domain of an immunoglobulin
KR101335765B1 (ko) 지속형 에리스로포이에틴 결합체의 액상 제제
KR20110085917A (ko) 지속형 과립구 콜로니 자극인자 결합체의 액상 제제
US20220323587A1 (en) Dissolvable films and methods of their use
JP2023011601A (ja) ミオスタチンに結合するフィブロネクチンベースの足場ドメインタンパク質の安定製剤
NZ620160B2 (en) Arginine - free tnfr : fc- fusion polypeptide compositions and methods of use

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
EXSB Decision made by sipo to initiate substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20150826

WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication