CN104862249A - 用于制备高净菌力微生物菌肥的微生态制剂及其制备方法 - Google Patents
用于制备高净菌力微生物菌肥的微生态制剂及其制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种用于制备高净菌力微生物菌肥的微生态制剂及其制备方法，用于制备高净菌力微生物菌肥的微生态制剂由以下组分组成：培养基、基质和菌种，所述菌种包括菌种A和菌种B。用于制备高净菌力微生物菌肥的微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：所述制备过程包括三个阶段：细菌期、霉菌期和脱水期。本发明能够提高土壤肥力，防治植物病害，无害环保。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种用于制备高净菌力微生物菌肥的微生态制剂及其制备方法。
背景技术
目前，广大农村地区的土壤肥力下降。重用轻养是导致耕地质量整体水平低的主要原因。耕地长期处于超负荷生产与入不敷出状态，耕地养分消耗过大而又未能及时补充各种养分，肥料资源得不到合理配置，相当部分耕地质量明显下降。且有机肥施用量偏少，无机肥偏施氮肥，氮、磷、钾配比不平衡。针对土壤等级和土壤肥力下降的实际，加快改造中低产田，大力推广土肥技术，将中低产田改造成高产田，特别适用于板结的土地、有连作障碍的土地以及育苗基质。
通常单一微生物经发酵产生微生物代谢物，防治植物病害的能力有限，目前缺乏一种能够提高土壤肥力、防治植物病害的用于制备高净菌力微生物菌肥的微生态制剂及其制备方法。
在植物病害方面，由于长期连作与杀菌剂类农药的滥用，土壤微生物群落失衡，植物体微生态失调，尤其使尖孢镰刀霉等病原微生物占优势，这使植物病害频发；滥用杀菌剂则加剧微生态失调，从而陷入恶性循环。因此，必须利用微生态原理，采用高净菌力的有益微生物进行“以菌治菌”防治法才能根本地抑制病害。
目前，缺乏一种能够防治植物病害的用于制备高净菌力微生物菌肥的微生态制剂及其制备方法。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供了一种能够防治植物病害的用于制备高净菌力微生物菌肥的微生态制剂及其制备方法。
为了实现上述目的，本发明通过如下技术方案实现：本发明的一种用于制备高净菌力微生物菌肥的微生态制剂，用于制备高净菌力微生物菌肥的微生态制剂由以下组分组成：培养基、基质和菌种，所述菌种包括菌种A和菌种B。
进一步地，所述培养基按质量百分比由以下组分组成：
进一步地，所述基质按质量百分比由以下组分组成：
所述木炭、沸石和贝壳均为粉末状。
更进一步地，所述菌种A按质量百分比由以下一级菌种的组分组成：
进一步地，所述菌种B按质量百分比由以下一级菌种的组分组成：
本发明所述的用于制备高净菌力微生物菌肥的微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：所述制备过程包括三个阶段：细菌期、霉菌期和脱水期；
(1)细菌期:将菌种A与10-15倍的培养基混合，以喷洒或泼洒的方式接种至所述的基质并以机械或人工混合均匀，使用快速水分仪测定物料的含水量；当含水量达到60％-70％时，喷洒或泼洒菌种B；最后将物料堆垛成条状或冢状并覆膜进行发酵；所述物料为菌种、培养基、基质的混合物；
发酵期间每日测定2-3次物料堆内的温度、pH，或在物料堆内埋入电极实时测定；当温度达到50-55℃时进行翻堆降温；当pH达到5以下且物料堆内有肉眼可见的菌丝；环境温度为15-30℃；
(2)霉菌期:将细菌期的半成品物料摊开，并喷洒菌种B，每立方米物料喷洒0.5-1L并以机械或人工混合均匀；最后将物料平摊放置或放置于浅盘中多层架高进行发酵；直至长出大量孢子；环境温度为15-30℃，环境相对湿度为80％以上；
(3)脱水期：将其含水量降至25％以下。
进一步地，在步骤(1)中，制备培养基：按比例称取水、糖蜜、粗盐、尿素、大豆蛋白胨、酵母浸出物，然后充分混合并进行巴氏杀菌，将混合物加热至温度为65℃，并维持30min，待其冷却至40℃以下时，加入D-异抗坏血酸钠并使其充分溶解；最后以碳酸氢钠或柠檬酸调pH至6.5-6.8；
制备基质：按比例称取米糠或麸皮、木屑、珍珠岩、木炭、沸石和贝壳并且混合均匀。
进一步地，在步骤(1)中，制备菌种，所述菌种包括菌种A和菌种B；
制备菌种A：子步骤(1)：先将微生物进行扩增培养，将制备的培养基100-150ml，置于250ml三角烧瓶内并高压蒸汽灭菌，准备10组；将微生物接种入其中，若一级菌种为试管种，用接种环挑取菌苔接入其中；若一级菌种为含菌产品，则取1-3g接入其中；
子步骤(2)：接种好后，将植物乳杆菌、耐酸乳杆菌、开菲尔乳杆菌置于电热恒温培养箱中，在温度为32-35℃时，静置培养时间为24-36h，其余一级菌种皆置于水浴或气浴恒温振荡器中，在温度为28-32℃下，振荡速率为100-150r/min时，培养时间为12-24h；
子步骤(3)：将所得的各种菌液按体积比的比例混合并加入十倍体积的所述的培养基混合，置于血清瓶或小型生物反应器中，在温度为28-33℃时，每隔4-5h振荡或搅拌一次，直至pH降至4.5以下使用；如产生恶臭则不得使用。
更进一步地，在步骤(1)中，制备菌种B：按上述比例的一级菌种按上述质量百分比的比例混合，并加入10-20倍体积的培养基；混合均匀；接种前摇匀。
进一步地，在步骤(2)中，所述物料平摊放置的厚度不超过20厘米。
有益效果：本发明能够提高土壤肥力，防治植物病害，无害环保。与现有技术相比，具有如下优点：
(1)本发明进行堆肥发酵的所产生氨气较使用其他制剂与自然堆肥少，以及制剂本身无毒。本发明具有净菌力，净菌力是指人工施用的有益微生物或含有益微生物的物质对病原微生物的拮抗抑制力。
(2)微生态制剂为固体制剂，适用于厌氧、中温堆肥，对发酵过程具有促进作用，且能够抑制甚至灭活物料中的病原微生物及寄生虫卵；接种此微生态制剂所发酵的堆肥施用后不但可提高土壤肥力，而且能够促进土壤形成团粒化结构形成从而改善土质，亦能够拮抗病原微生物从而防治植物病害，特别适用于板结的土地、有连作障碍的土地以及育苗基质。
附图说明
图1为本发明的堆肥物料所产氨浓度图。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例进一步说明本发明的技术解决方案，这些实施例不能理解为是对技术解决方案的限制。
实施例1
如图1所示，为本发明的堆肥物料所产氨浓度图；测试方法为蒸馏法。由图1可知，本发明的微生态制剂的无害环保，产氨气的浓度明显低于自然堆肥和现有的品牌制剂。
本发明的一种用于制备高净菌力微生物菌肥的微生态制剂，用于制备高净菌力微生物菌肥的微生态制剂由以下组分组成：培养基、基质和菌种，所述菌种包括菌种A和菌种B。
所述培养基按质量百分比由以下组分组成：
所述基质按质量百分比由以下组分组成：
所述木炭、沸石和贝壳均为粉末状。
所述菌种A按质量百分比由以下一级菌种的组分组成：
所述菌种B按质量百分比由以下一级菌种的组分组成：
本发明所述的用于制备高净菌力微生物菌肥的微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：所述制备过程包括三个阶段：细菌期、霉菌期和脱水期；
(1)制备培养基：按比例称取水、糖蜜、粗盐、尿素、大豆蛋白胨、酵母浸出物，然后充分混合并进行巴氏杀菌，将混合物加热至温度为65℃，并维持30min，待其冷却至40℃以下时，加入D-异抗坏血酸钠并使其充分溶解；最后以碳酸氢钠或柠檬酸调pH至6.5；
制备基质：按比例称取米糠或麸皮、木屑、珍珠岩、木炭、沸石和贝壳并且混合均匀。
制备菌种，所述菌种包括菌种A和菌种B；
制备菌种A：子步骤(1)：先将微生物进行扩增培养，将制备的培养基100ml，置于250ml三角烧瓶内并高压蒸汽灭菌，准备10组；将微生物接种入其中，若一级菌种为试管种，用接种环挑取菌苔接入其中；若一级菌种为含菌产品，则取1g接入其中；
子步骤(2)：接种好后，将植物乳杆菌、耐酸乳杆菌、开菲尔乳杆菌置于电热恒温培养箱中，在温度为32℃时，静置培养时间为24h，其余一级菌种皆置于水浴或气浴恒温振荡器中，在温度为28℃下，振荡速率为100r/min时，培养时间为12h；
子步骤(3)：将所得的各种菌液按体积比的比例混合并加入十倍体积的所述的培养基混合，置于血清瓶或小型生物反应器中，在温度为28℃时，每隔4h振荡或搅拌一次，直至pH降至4.5以下使用；如产生恶臭则不得使用。
制备菌种B：按上述比例的一级菌种按上述质量百分比的比例混合，并加入10倍体积的培养基；混合均匀；接种前摇匀。
细菌期:将菌种A与10倍的培养基混合，以喷洒或泼洒的方式接种至所述的基质并以机械或人工混合均匀，使用快速水分仪测定物料的含水量；当含水量达到60％时，喷洒或泼洒菌种B；最后将物料堆垛成条状或冢状并覆膜进行发酵；所述物料为菌种、培养基、基质的混合物；
发酵期间每日测定2次物料堆内的温度、pH，或在物料堆内埋入电极实时测定；当温度达到50℃时进行翻堆降温；当pH达到5以下且物料堆内有肉眼可见的菌丝；环境温度为15℃；
(2)霉菌期:将细菌期的半成品物料摊开，并喷洒菌种B，每立方米物料喷洒0.5L并以机械或人工混合均匀；最后将物料平摊放置或放置于浅盘中多层架高进行发酵；直至长出大量孢子；环境温度为15℃，环境相对湿度为80％以上；所述物料平摊放置的厚度不超过20厘米。
(3)脱水期：将其含水量降至25％以下。
本发明能够提高土壤肥力，防治植物病害，无害环保。与现有技术相比，具有如下优点：
(1)本发明进行堆肥发酵的所产生氨气较使用其他制剂与自然堆肥少，以及制剂本身无毒。本发明具有净菌力，净菌力是指人工施用的有益微生物或含有益微生物的物质对病原微生物的拮抗抑制力。
(2)微生态制剂为固体制剂，适用于厌氧、中温堆肥，对发酵过程具有促进作用，且能够抑制甚至灭活物料中的病原微生物及寄生虫卵；接种此微生态制剂所发酵的堆肥施用后不但可提高土壤肥力，而且能够促进土壤形成团粒化结构形成从而改善土质，亦能够拮抗病原微生物从而防治植物病害，特别适用于板结的土地、有连作障碍的土地以及育苗基质。
实施例2
实施例2与实施例1基本相同，区别在于：所述培养基按质量百分比由以下组分组成：
所述基质按质量百分比由以下组分组成：
所述木炭、沸石和贝壳均为粉末状。
所述菌种A按质量百分比由以下一级菌种的组分组成：
所述菌种B按质量百分比由以下一级菌种的组分组成：
本发明所述的用于制备高净菌力微生物菌肥的微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：所述制备过程包括三个阶段：细菌期、霉菌期和脱水期；
在步骤(1)中，制备培养基：最后以碳酸氢钠或柠檬酸调pH至6.7；
制备菌种，所述菌种包括菌种A和菌种B；
制备菌种A：子步骤(1)：先将微生物进行扩增培养，将制备的培养基130ml，置于250ml三角烧瓶内并高压蒸汽灭菌，准备10组；若一级菌种为含菌产品，则取2g接入其中；
子步骤(2)：接种好后，将植物乳杆菌、耐酸乳杆菌、开菲尔乳杆菌置于电热恒温培养箱中，在温度为33℃时，静置培养时间为24-36h，其余一级菌种皆置于水浴或气浴恒温振荡器中，在温度为29℃下，振荡速率为120r/min时，培养时间为18h；
子步骤(3)：将所得的各种菌液按体积比的比例混合并加入十倍体积的所述的培养基混合，置于血清瓶或小型生物反应器中，在温度为30℃时，每隔4.5h振荡或搅拌一次，直至pH降至4.5以下使用；
制备菌种B：按上述比例的一级菌种按上述质量百分比的比例混合，并加入15倍体积的培养基；
细菌期:将菌种A与12倍的培养基混合，以喷洒或泼洒的方式接种至所述的基质并以机械或人工混合均匀，使用快速水分仪测定物料的含水量；当含水量达到65％时，喷洒或泼洒菌种B；发酵期间每日测定2次物料堆内的温度、pH，或在物料堆内埋入电极实时测定；当温度达到53℃时进行翻堆降温；当pH达到5以下且物料堆内有肉眼可见的菌丝；环境温度为20℃；
(2)霉菌期:将细菌期的半成品物料摊开，并喷洒菌种B，每立方米物料喷洒0.8L并以机械或人工混合均匀；最后将物料平摊放置或放置于浅盘中多层架高进行发酵；直至长出大量孢子；环境温度为20℃，环境相对湿度为80％以上。
实施例3
实施例3与实施例1基本相同，区别在于：本发明的一种用于制备高净菌力微生物菌肥的微生态制剂，用于制备高净菌力微生物菌肥的微生态制剂由以下组分组成：培养基、基质和菌种，所述菌种包括菌种A和菌种B。
所述培养基按质量百分比由以下组分组成：
所述基质按质量百分比由以下组分组成：
所述菌种A按质量百分比由以下一级菌种的组分组成：
所述菌种B按质量百分比由以下一级菌种的组分组成：
本发明所述的用于制备高净菌力微生物菌肥的微生态制剂的制备方法，包括以下步骤：所述制备过程包括三个阶段：细菌期、霉菌期和脱水期；
(1)制备培养基：按比例称取水、糖蜜、粗盐、尿素、大豆蛋白胨、酵母浸出物，然后充分混合并进行巴氏杀菌，将混合物加热至温度为65℃，并维持30min，待其冷却至40℃以下时，加入D-异抗坏血酸钠并使其充分溶解；最后以碳酸氢钠或柠檬酸调pH至6.8；
制备基质：按比例称取米糠或麸皮、木屑、珍珠岩、木炭、沸石和贝壳并且混合均匀。
制备菌种，所述菌种包括菌种A和菌种B；
制备菌种A：子步骤(1)：先将微生物进行扩增培养，将制备的培养基150ml，置于250ml三角烧瓶内并高压蒸汽灭菌，准备10组；若一级菌种为含菌产品，则取3g接入其中；
子步骤(2)：接种好后，将植物乳杆菌、耐酸乳杆菌、开菲尔乳杆菌置于电热恒温培养箱中，在温度为35℃时，静置培养时间为36h，其余一级菌种皆置于水浴或气浴恒温振荡器中，在温度为32℃下，振荡速率为150r/min时，培养时间为24h；
子步骤(3)：将所得的各种菌液按体积比的比例混合并加入十倍体积的所述的培养基混合，置于血清瓶或小型生物反应器中，在温度为33℃时，每隔5h振荡或搅拌一次，直至pH降至4.5以下使用；如产生恶臭则不得使用。
制备菌种B：按上述比例的一级菌种按上述质量百分比的比例混合，并加入20倍体积的培养基。
细菌期:将菌种A与10-15倍的培养基混合，以喷洒或泼洒的方式接种至所述的基质并以机械或人工混合均匀，使用快速水分仪测定物料的含水量；当含水量达到70％时，喷洒或泼洒菌种B；
发酵期间每日测定3次物料堆内的温度、pH，或在物料堆内埋入电极实时测定；当温度达到55℃时进行翻堆降温；当pH达到5以下且物料堆内有肉眼可见的菌丝；环境温度为30℃；
(2)霉菌期:将细菌期的半成品物料摊开，并喷洒菌种B，每立方米物料喷洒1L并以机械或人工混合均匀；最后将物料平摊放置或放置于浅盘中多层架高进行发酵；直至长出大量孢子；环境温度为30℃，环境相对湿度为80％以上。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，本发明要求保护范围由所附的权利要求书、说明书及其等效物界定。
Claims (5)
1.一种用于制备高净菌力微生物菌肥的微生态制剂，其特征在于：用于制备高净菌力微生物菌肥的微生态制剂由以下组分组成：培养基、基质和菌种，所述菌种包括菌种A和菌种B；
所述菌种A按质量百分比由以下一级菌种的组分组成：
所述菌种B按质量百分比由以下一级菌种的组分组成：
2.根据权利要求1所述的用于制备高净菌力微生物菌肥的微生态制剂，其特征在于：所述培养基按质量百分比由以下组分组成：
所述食用盐为粗盐。
3.根据权利要求1所述的用于制备高净菌力微生物菌肥的微生态制剂，其特征在于：所述基质按质量百分比由以下组分组成：
所述木炭、沸石和贝壳均为粉末状。
4.根据权利要求1-3任一所述的用于制备高净菌力微生物菌肥的微生态制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：所述制备过程包括三个阶段：细菌期、霉菌期和脱水期；
步骤(1)细菌期:将菌种A与10-15倍的培养基混合，以喷洒或泼洒的方式接种至所述的基质并以机械或人工混合均匀，使用快速水分仪测定物料的含水量；当含水量达到60％-70％时，喷洒或泼洒菌种B；最后将物料堆垛成条状或冢状并覆膜进行发酵；所述物料为菌种、培养基、基质的混合物；
发酵期间每日测定2-3次物料堆内的温度、pH，或在物料堆内埋入电极实时测定；当温度达到50-55℃时进行翻堆降温；当pH达到5以下且物料堆内有肉眼可见的菌丝；环境温度为15-30℃；
在步骤(1)中，制备培养基：按比例称取水、糖蜜、粗盐、尿素、大豆蛋白胨、酵母浸出物，然后充分混合并进行巴氏杀菌，将混合物加热至温度为65℃，并维持30min，待其冷却至40℃以下时，加入D-异抗坏血酸钠并使其充分溶解；最后以碳酸氢钠或柠檬酸调pH至6.5-6.8；
制备基质：按比例称取米糠或麸皮、木屑、珍珠岩、木炭、沸石和贝壳并且混合均匀；
在步骤(1)中，制备菌种，所述菌种包括菌种A和菌种B；
制备菌种A：子步骤(1)：先将微生物进行扩增培养，将制备的培养基100-150ml，置于250ml三角烧瓶内并高压蒸汽灭菌，准备10组；将微生物接种入其中，若一级菌种为试管种，用接种环挑取菌苔接入其中；若一级菌种为含菌产品，则取1-3g接入其中；
子步骤(2)：接种好后，将植物乳杆菌、耐酸乳杆菌、开菲尔乳杆菌置于电热恒温培养箱中，在温度为32-35℃时，静置培养时间为24-36h，其余一级菌种皆置于水浴或气浴恒温振荡器中，在温度为28-32℃下，振荡速率为100-150r/min时，培养时间为12-24h；
子步骤(3)：将所得的各种菌液按体积比的比例混合并加入十倍体积的所述的培养基混合，置于血清瓶或小型生物反应器中，在温度为28-33℃时，每隔4-5h振荡或搅拌一次，直至pH降至4.5以下使用；如产生恶臭则不得使用；
在步骤(1)中，制备菌种B：按上述比例的一级菌种按上述质量百分比的比例混合，并加入10-20倍体积的培养基；混合均匀；接种前摇匀；
步骤(2)霉菌期:将细菌期的半成品物料摊开，并喷洒菌种B，每立方米物料喷洒0.5-1L并以机械或人工混合均匀；最后将物料平摊放置或放置于浅盘中多层架高进行发酵；直至长出大量孢子；环境温度为15-30℃，环境相对湿度为80％以上；
步骤(3)脱水期：将其含水量降至25％以下。
5.根据权利要求4所述的用于制备高净菌力微生物菌肥的微生态制剂的制备方法，其特征在于：在步骤(2)中，所述物料平摊放置的厚度不超过20厘米。
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