CN104798686A - 一种白首乌组培快繁方法 - Google Patents

一种白首乌组培快繁方法 Download PDF

Info

Publication number
CN104798686A
CN104798686A CN201510216175.0A CN201510216175A CN104798686A CN 104798686 A CN104798686 A CN 104798686A CN 201510216175 A CN201510216175 A CN 201510216175A CN 104798686 A CN104798686 A CN 104798686A
Authority
CN
China
Prior art keywords
radix cynanchi
cynanchi bungei
illumination
culture
days
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201510216175.0A
Other languages
English (en)
Inventor
冯文杰
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Individual
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Priority to CN201510216175.0A priority Critical patent/CN104798686A/zh
Publication of CN104798686A publication Critical patent/CN104798686A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Landscapes

  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)

Abstract

本发明公开了一种白首乌组培快繁方法，白首乌为萝摩科鹅绒藤属植物，其块根入药，味甘、苦、性微温。白首乌主要有效成分为C21甾苷，具补血、补气、抗衰老、降血脂、降胆固醇以及促进乌发生长的作用，且无毒。本发明以白首乌种子为外植体，通过外植体消毒、不定芽诱导、增殖培养、生根培养、炼苗移栽等过程获得了白首乌离体再植株，建立了有效的白首乌组培快繁殖技术体系，短时期内即可生产大量种苗，提高繁殖效率，降低生产成本，有利加快其繁育及推广。

Description

一种白首乌组培快繁方法
技术领域
    本发明涉及农业生物技术中植物组织培养的方法，具体地说，涉及一种白首乌组培快繁方法。
背景技术
白首乌为萝摩科鹅绒藤属植物，其块根入药，味甘、苦、性微温。白首乌主要有效成分为C21甾苷，还含有丰富的淀粉、蛋白质、多种维生素和多种矿物质等。白首乌具补血、补气、抗衰老、降血脂、降胆固醇以及促进乌发生长的作用，且无毒。在生产上白首乌用于制取优质淀粉，经济价值高。
一般白首乌来自野生资源。随着生产的发展随着生活水平的不断提高，人民对医疗保健品的需求量与日俱增，野生资源不能满足需要，而且很快会导致野生资源的枯竭，故需要开展人工栽培。目前，白首乌的人工栽培主要靠块根的营养繁殖和种子育苗，易受病毒浸染，导致种性退化，产量和品质下降，不能适应规模化和标准化生产的需要，因此有必要建立以组织培养的方法快速繁殖白首乌的成套技术。因此，本发明以白首乌种子为外植体，通过外植体消毒、不定芽诱导、增殖培养、生根培养、炼苗移栽等过程获得了白首乌离体再植株，建立了有效的白首乌组培快繁殖技术体系，短时期内即可生产大量种苗，提高繁殖效率，降低生产成本，有利加快其繁育及推广。
发明内容
    本发明的目的在于提供出一种白首乌组培快繁方法，本发明以白首乌种子为外植体，通过外植体消毒、不定芽诱导、增殖培养、生根培养、炼苗移栽等过程获得了白首乌离体再植株，建立了有效的白首乌组培快繁殖技术体系，从而实现了本发明的目的。
本发明的一种白首乌组培快繁方法，包括以下的步骤：
（1）外植体准备及消毒：选取成熟饱满的白首乌种子，放入清水中浸种24～48h，在超净工作台上先75%的乙醇消毒30～60s，再用0.1%的升汞消毒 10～20min，然后用无菌水冲洗3～5次，用无菌滤纸吸干水分，接种到1/2MS培养基中（0.4%琼脂、3.0%白糖，pH5.8）。后置于每天光照12～14小时，光照强度为1000～2000lx培养14～30天。
（2）诱导培养：将步骤（1）处理得到的无菌苗的带腋芽茎段切成约 0.5cm，顶端向上接入诱导培养基上，保持节位腋芽点在培养基表面上。接种后置于每天光照12～14小时，光照强度为1000～2000lx，置于培养温度为25～28℃，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后统计诱导率。
    （3）增殖培养：以步骤（2）诱导得到不定芽作为材料，将老化的和生长不良的不定芽去掉，并将生长状态良好的不定芽切成单芽并转入增殖培养基进行扩繁。接种后置于每天光照12～14小时，光照强度为2000～3000lx，置于培养温度为25～28℃，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后统计增殖情况。
    （4）生根培养：将增殖培养基中长到3cm以上的芽苗转入生根培养基中。接种后置于每天光照12～14小时，光照强度为2000～3000lx，置于培养温度为25～28℃，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后统计生根情况。
    （5）炼苗移栽：当组培苗具备发达健壮的根后,即可移栽。移栽在遮阴棚中进行。将生长健壮的试管苗在自然条件下炼苗5～7天,再开盖炼苗3～5天.在试管苗移栽前,基质先用0.5%的KMnSO4溶液消毒,后装入营养袋。用小勺轻轻取出带根小苗(带少许培养基)移到营养小钵中。移栽完用自动喷水装置将移栽苗浇透。以后每2h喷一次,每次喷50s。
    上述步骤（2）所述的诱导培养基为：MS+1.0～5.0mg/L KT+0.1～0.5mg/L NAA+25～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L琼脂，pH为5.4～5.8。
    上述步骤（3）所述的增殖培养基为：KT+1.0～2.0mg/L KT+0.01～0.1mg/LNAA+25～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L琼脂，pH为5.4～5.8。
    上述步骤（4）所述的生根培养基为：1/2MS+0.5～1.0mg/LNAA+0.1～0.5mg/LIAA+20～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L琼脂，pH为5.4～5.8。
本发明的优点是：以白首乌种子为外植体，通过外植体消毒、不定芽诱导、增殖培养、生根培养、炼苗移栽等过程获得了白首乌离体再植株，建立了有效的白首乌组培快繁殖技术体系，短时期内即可生产大量种苗，提高繁殖效率，降低生产成本，有利加快其繁育及推广。
具体实施方式
     以下实施例是对本发明的进一步说明，不是对本发明的限制。
实施例1
 （1）外植体准备及消毒：选取成熟饱满的白首乌种子，放入清水中浸种24h，在超净工作台上先75%的乙醇消毒30s，再用0.1%的升汞消毒 10min，然后用无菌水冲洗3次，用无菌滤纸吸干水分，接种到1/2MS培养基中（0.4%琼脂、3.0%白糖，pH5.8）。后置于每天光照12小时，光照强度为1000lx培养14天。
    （2）诱导培养：将步骤（1）处理得到的无菌苗的带腋芽茎段切成约 0.5cm，顶端向上接入诱导培养基上，保持节位腋芽点在培养基表面上。接种后置于每天光照12小时，光照强度为1000lx，置于培养温度为25℃，空气相对湿度为75%的条件下培养30天诱导率达到100%。所述的诱导培养基为：MS+2.5mg/L KT+0.3mg/L NAA+25g/L蔗糖+4.5g/L琼脂，pH为5.4。
    （3）增殖培养：以步骤（2）诱导得到不定芽作为材料，将老化的和生长不良的不定芽去掉，并将生长状态良好的不定芽切成单芽并转入增殖培养基进行扩繁。接种后置于每天光照12小时，光照强度为2000lx，置于培养温度为25℃，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后增殖系数达到5.6。所述的增殖培养基为：KT+1.0mg/L KT+0.01mg/LNAA+25g/L蔗糖+3.5g/L琼脂，pH为5.4。
    （4）生根培养：将增殖培养基中长到3cm以上的芽苗转入生根培养基中。接种后置于每天光照12小时，光照强度为2000lx，置于培养温度为25℃，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后生根率达到95%以上。所述的生根培养基为：1/2MS+0.5mg/LNAA+0.1mg/LIAA+20g/L蔗糖+3.5g/L琼脂，pH为5.4。
    （5）炼苗移栽：当组培苗具备发达健壮的根后,即可移栽。移栽在遮阴棚中进行。将生长健壮的试管苗在自然条件下炼苗5天,再开盖炼苗3天.在试管苗移栽前,基质先用0.5%的KMnSO4溶液消毒,后装入营养袋。用小勺轻轻取出带根小苗(带少许培养基)移到营养小钵中。移栽完用自动喷水装置将移栽苗浇透。移栽30天后成活率达到95%以上。
     实施例2
  （1）外植体准备及消毒：选取成熟饱满的白首乌种子，放入清水中浸种48h，在超净工作台上先75%的乙醇消毒40s，再用0.1%的升汞消毒 15min，然后用无菌水冲洗5次，用无菌滤纸吸干水分，接种到1/2MS培养基中（0.4%琼脂、3.0%白糖，pH5.8）。后置于每天光照12小时，光照强度为1000lx培养25天。
    （2）诱导培养：将步骤（1）处理得到的无菌苗的带腋芽茎段切成约 0.5cm，顶端向上接入诱导培养基上，保持节位腋芽点在培养基表面上。接种后置于每天光照13小时，光照强度为1500lx，置于培养温度为26℃，空气相对湿度为75%的条件下培养30天诱导率达到900%。所述的诱导培养基为：MS+1.5mg/L KT+0.5mg/L NAA+30g/L蔗糖+5.5g/L琼脂，pH为5.4。
    （3）增殖培养：以步骤（2）诱导得到不定芽作为材料，将老化的和生长不良的不定芽去掉，并将生长状态良好的不定芽切成单芽并转入增殖培养基进行扩繁。接种后置于每天光照13小时，光照强度为2500lx，置于培养温度为26℃，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后增殖系数达到5.8。所述的增殖培养基为：KT+2.0mg/L KT+0.01mg/LNAA+30g/L蔗糖+4.5g/L琼脂，pH为5.4。
    （4）生根培养：将增殖培养基中长到3cm以上的芽苗转入生根培养基中。接种后置于每天光照13小时，光照强度为2500lx，置于培养温度为26℃，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后生根率达到100%。所述的生根培养基为：1/2MS+0.8mg/LNAA+0.2mg/LIAA+20g/L蔗糖+3.5g/L琼脂，pH为5.4。
    （5）炼苗移栽：当组培苗具备发达健壮的根后,即可移栽。移栽在遮阴棚中进行。将生长健壮的试管苗在自然条件下炼苗5天,再开盖炼苗3天.在试管苗移栽前,基质先用0.5%的KMnSO4溶液消毒,后装入营养袋。用小勺轻轻取出带根小苗(带少许培养基)移到营养小钵中。移栽完用自动喷水装置将移栽苗浇透。移栽30天后成活率达到98%。

Claims (4)

1.一种白首乌组培快繁方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）外植体准备及消毒：选取成熟饱满的白首乌种子，放入清水中浸种24～48h，在超净工作台上先75%的乙醇消毒30～60s，再用0.1%的升汞消毒 10～20min，然后用无菌水冲洗3～5次，用无菌滤纸吸干水分，接种到1/2MS培养基中0.4%琼脂、3.0%白糖，pH5.8，后置于每天光照12～14小时，光照强度为1000～2000lx培养14～30天；
（2）诱导培养：将步骤（1）处理得到的无菌苗的带腋芽茎段切成约 0.5cm，顶端向上接入诱导培养基上，保持节位腋芽点在培养基表面上，接种后置于每天光照12～14小时，光照强度为1000～2000lx，置于培养温度为25～28℃，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后统计诱导率；
（3）增殖培养：以步骤（2）诱导得到不定芽作为材料，将老化的和生长不良的不定芽去掉，并将生长状态良好的不定芽切成单芽并转入增殖培养基进行扩繁，接种后置于每天光照12～14小时，光照强度为2000～3000lx，置于培养温度为25～28℃，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后统计增殖情况；
（4）生根培养：将增殖培养基中长到3cm以上的芽苗转入生根培养基中,接种后置于每天光照12～14小时，光照强度为2000～3000lx，置于培养温度为25～28℃，空气相对湿度为75%的条件下培养30天后统计生根情况；
（5）炼苗移栽：当组培苗具备发达健壮的根后,即可移栽，移栽在遮阴棚中进行，将生长健壮的试管苗在自然条件下炼苗5～7天,再开盖炼苗3～5天.在试管苗移栽前,基质先用0.5%的KMnSO4溶液消毒,后装入营养袋，用小勺轻轻取出带根小苗(带少许培养基)移到营养小钵中，移栽完用自动喷水装置将移栽苗浇透，以后每2h喷一次,每次喷50s。
2.    根据权利要求1所述的一种白首乌组培快繁方法，其特征在于步骤（2）所述的诱导培养基为：MS+1.0～5.0mg/L KT+0.1～0.5mg/L NAA+25～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L琼脂，pH为5.4～5.8。
3.根据权利要求1所述的一种白首乌组培快繁方法，其特征在于步骤（3）所述的增殖培养基为：KT+1.0～2.0mg/L KT+0.01～0.1mg/LNAA+25～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L琼脂，pH为5.4～5.8。
4.    根据权利要求1所述的一种白首乌组培快繁方法，其特征在于步骤（4）所述的生根培养基为：1/2MS+0.5～1.0mg/LNAA+0.1～0.5mg/LIAA+20～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L琼脂，pH为5.4～5.8。
CN201510216175.0A 2015-05-02 2015-05-02 一种白首乌组培快繁方法 Pending CN104798686A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510216175.0A CN104798686A (zh) 2015-05-02 2015-05-02 一种白首乌组培快繁方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510216175.0A CN104798686A (zh) 2015-05-02 2015-05-02 一种白首乌组培快繁方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN104798686A true CN104798686A (zh) 2015-07-29

Family

ID=53684256

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201510216175.0A Pending CN104798686A (zh) 2015-05-02 2015-05-02 一种白首乌组培快繁方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN104798686A (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105706925A (zh) * 2016-02-03 2016-06-29 中国科学院植物研究所 一种紫花杯冠藤组培快繁的方法
CN106577280A (zh) * 2016-12-13 2017-04-26 侯俊 一种利用驼峰藤幼嫩茎段及叶片快速繁殖无菌苗
CN108703072A (zh) * 2018-05-26 2018-10-26 云南农业大学 一种直立白薇快速育苗方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1559193A (zh) * 2004-02-20 2005-01-05 江苏省农业科学院 白首乌通过组织培养的快速繁苗方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1559193A (zh) * 2004-02-20 2005-01-05 江苏省农业科学院 白首乌通过组织培养的快速繁苗方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
余桂红等: "白首乌组织培养快速繁殖的研究", 《甘肃农业大学学报》 *
徐飞: "白首乌的组织培养及其生理生化分析", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库》 *
杜文亮等: "白首乌的离体再生与快速繁殖", 《安徽农业科学》 *

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105706925A (zh) * 2016-02-03 2016-06-29 中国科学院植物研究所 一种紫花杯冠藤组培快繁的方法
CN105706925B (zh) * 2016-02-03 2018-05-08 中国科学院植物研究所 一种紫花杯冠藤组培快繁的方法
CN106577280A (zh) * 2016-12-13 2017-04-26 侯俊 一种利用驼峰藤幼嫩茎段及叶片快速繁殖无菌苗
CN108703072A (zh) * 2018-05-26 2018-10-26 云南农业大学 一种直立白薇快速育苗方法
CN108703072B (zh) * 2018-05-26 2021-06-01 云南农业大学 一种直立白薇快速育苗方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104885773B (zh) 一种快速培育蓝莓早期定型组培商品苗的方法
CN101889547B (zh) 齿瓣石斛种子无菌快速繁殖方法
CN103190347B (zh) 一种茶壶枣组织培养方法
CN101720670B (zh) 旱半夏组织培养快速繁殖方法
CN103931492A (zh) 苹果砧木m9的组培快速育苗方法
CN102939901A (zh) 菊花一步法组培快繁方法
CN111280063A (zh) 一种快速的沙漠蔷薇愈伤组织诱导和规模化悬浮培养方法
CN102342246B (zh) 一种大白杜鹃组培快速繁殖方法
CN102461463A (zh) 一种适用于大规模种植的构树种苗组织培养方法
CN103430845A (zh) 一种草莓组织培养方法
CN113349059A (zh) 一种凤梨变异系愈伤组织诱导及植株高效再生的新方法
CN104137779A (zh) 一种白木乌桕茎段快速诱导再生植株的方法
CN104798686A (zh) 一种白首乌组培快繁方法
CN114946657A (zh) 一种五指毛桃组织培养方法
CN105145363B (zh) 一种显著提高杉木组培生产出苗率的方法
CN104686351A (zh) 一种连香树离体快速繁殖方法
CN106613993B (zh) 一种枳的组织培养再生苗的培养方法
CN109042330A (zh) 一种桃叶卫矛的组织培养方法
CN104255480A (zh) 一种青冈的快速繁殖方法
CN108142281A (zh) 一种杜仲组织培养方法
CN109874676A (zh) 一种百香果脱毒苗的快速繁育方法
CN104285816A (zh) 一种文冠果的组织培养快繁方法
CN104782494A (zh) 一种百里香组培快繁方法
CN113068611B (zh) 一种利用四叶参叶片快速繁殖种苗的方法
CN112616675B (zh) 一种舞花姜组织培养快速繁殖方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
EXSB Decision made by sipo to initiate substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C02 Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001)
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20150729