CN104770102A - 一种肋柱花种子无菌萌发的方法 - Google Patents

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韦坤华
李旻辉
王晓峰
李林轩
缪剑华
朱虹
韦范
肖冬
韦莹
李翠
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Abstract

一种肋柱花种子无菌萌发的方法，包括如下步骤：(1)将肋柱花的种子冲洗干净，放入20-50％的84消毒液中浸泡消毒5-15分钟，再用无菌蒸馏水冲洗3次后获得消毒种子；(2)将步骤(1)获得的消毒种子接种到MS培养基培养，在培养温度为23～27℃，光照强度1500lux，光照时间为12～14小时/天的条件下培养15天，种子萌发获得无菌试管苗，其中MS培养基中添加30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。采用本发明所述的无菌萌发方法，发芽率达到90～100％，有效地解决了肋柱花组织培养种子萌发困难的问题，为实现肋柱花资源的可持续利用奠定了基础。

Description

一种肋柱花种子无菌萌发的方法
技术领域
本发明涉及一种植物种子萌发方法，特别是一种肋柱花种子无菌萌发的方法。
背景技术
肋柱花为龙胆科植物肋柱花Lomatogoniumr otatum(L.)Fries ex Nym.的干燥全草，分布于内蒙古、黑龙江等地，为内蒙古自治区蒙药道地药材。味苦，性寒、钝、糙、轻、燥。具有平息“协日”、清热、健胃、愈伤的功效。用于“协日”热、瘟疫、流感、伤寒、中暑头热、肝胆热、黄疸、胃“协日”、伤热等症。肋柱花为蒙医传统要药，蒙药名哈比日根—地格达，应用广泛，在肋柱花四味汤散、利胆八味散、地格达·苏木汤、伊赫哈日十二味散、土木香十味汤散等复方中用作主药或辅药，应用历史悠久，为蒙古族人民身体健康做出过巨大贡献，在蒙医药中有着不可替代的地位。由于肋柱花药材目前100％来源野生资源，再加之人为的干扰和盲目采挖，其破坏极其严重，肋柱花的野生资源蕴藏量正在逐年锐减，大量资源濒临枯竭，野生资源越来越无法满足人们的需要，因此，保护和扩大繁殖栽培这一珍稀物种已刻不容缓。
在初步的繁殖育苗工作中发现，肋柱花的种子萌发极其困难，严重制约了种苗的供应与品质。通过组织培养技术生产优质种苗已经是成为多种植物种苗生产的有效途径，但肋柱花种子细小，在开展肋柱花的组织培养研究时，常因消毒过度导致种子损伤而无法萌发，成为了制约肋柱花通过组织培养方式大量生产种苗的关键因素。
发明内容
本发明的目的是提供一种肋柱花种子无菌萌发的方法，它能够提高肋柱花种子在无菌条件下萌发，为通过组织培养技术生产肋柱花组培苗奠定基础。
本发明通过以下技术方案达到上述目的：一种肋柱花种子无菌萌发的方法，包括以下步骤：
(1)种子消毒：将肋柱花种子冲洗干净，放入20-50％的84消毒液中浸泡消毒5-15分钟，再用无菌蒸馏水冲洗3次后获得消毒种子；
(2)无菌萌发：将步骤(1)获得的消毒种子接种到MS培养基培养，在培养温度为23～27℃，光照强度1500lux，光照时间为12～14小时/天的条件下培养15天，种子萌发获得无菌试管苗，其中MS培养基中添加30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。
本发明的突出优点在于：
(1)采用所述的肋柱花种子消毒方法消毒，对种子的损伤较小，培养后种子易于萌发。
(2)采用所述的肋柱花种子无菌萌发方法进行种子萌发培养，具有种子萌发时间短，发芽率高的特点。
(3)本发明还具有操作简单、方便快捷、成本低等突出优点，通过组织培养途径切实有效地保护及促进肋柱花资源的可持续利用。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的技术方案作进一步说明。
实施例1
一种肋柱花种子无菌萌发的方法，包括以下步骤：
(1)种子消毒：将肋柱花种子冲洗干净，放入20％的84消毒液中浸泡消毒15分钟，再用无菌蒸馏水冲洗3次后获得消毒种子；
(2)无菌萌发：将步骤(1)获得的消毒种子接种到MS培养基培养，在培养温度为23～27℃，光照强度1500lux，光照时间为12～14小时/天的条件下培养15天，种子萌发获得无菌试管苗，其中MS培养基中添加30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，经统计，发芽率为96％。
实施例2
一种肋柱花种子无菌萌发的方法，包括以下步骤：
(1)种子消毒：将肋柱花种子冲洗干净，放入30％的84消毒液中浸泡消毒8分钟，再用无菌蒸馏水冲洗3次后获得消毒种子；
(2)无菌萌发：将步骤(1)获得的消毒种子接种到MS培养基培养，在培养温度为23～27℃，光照强度1500lux，光照时间为12～14小时/天的条件下培养15天，种子萌发获得无菌试管苗，其中MS培养基中添加30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，经统计，发芽率为100％。
实施例3
一种肋柱花种子无菌萌发的方法，包括以下步骤：
(1)种子消毒：将肋柱花种子冲洗干净，放入40％的84消毒液中浸泡消毒6分钟，再用无菌蒸馏水冲洗3次后获得消毒种子；
(2)无菌萌发：将步骤(1)获得的消毒种子接种到MS培养基培养，在培养温度为23～27℃，光照强度1500lux，光照时间为12～14小时/天的条件下培养15天，种子萌发获得无菌试管苗，其中MS培养基中添加30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，经统计，发芽率为93％。
实施例4
一种肋柱花种子无菌萌发的方法，包括以下步骤：
(1)种子消毒：将肋柱花种子冲洗干净，放入50％的84消毒液中浸泡消毒5分钟，再用无菌蒸馏水冲洗3次后获得消毒种子；
(2)无菌萌发：将步骤(1)获得的消毒种子接种到MS培养基培养，在培养温度为23～27℃，光照强度1500lux，光照时间为12～14小时/天的条件下培养15天，种子萌发获得无菌试管苗，其中MS培养基中添加30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，经统计，发芽率为90％。

Claims (1)

1.一种肋柱花种子无菌萌发的方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)种子消毒：将肋柱花种子冲洗干净，放入20-50％的84消毒液中浸泡消毒5-15分钟，再用无菌蒸馏水冲洗3次后获得消毒种子；
(2)无菌萌发：将步骤(1)获得的消毒种子接种到MS培养基培养，在培养温度为23～27℃，光照强度1500lux，光照时间为12～14小时/天的条件下培养15天，种子萌发获得无菌试管苗，其中MS培养基中添加30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。
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