CN104768963A - 非达霉素的固态形式及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供非达霉素的固态形式、制备该固态形式的方法以及包含一种或多种非达霉素的所述固态形式的药物组合物和制剂，和制备该组合物和制剂的方法。本发明的固态形式表现出有利性质，例如在制造与加工中改善的可靠性和重现性以及在制剂中的稳定性。

Description

非达霉素的固态形式及其制备方法

相关申请的交叉参考

本发明主张以下美国临时申请的权益：于2012年5月10日提交的No.61/645,214；于2012年6月21日提交的No..61/662,542；于2012年8月27日提交的61/693,445；和于2012年10月25日提交的61/718,286，其全部内容引入本申请作为参考。

技术领域

本发明涉及非达霉素(fidaxomycin)的固态形式、制备该固态形式的方法和包含一种或多种所述固态形式的制剂。

发明背景

非达霉素，即3-(((6-脱氧-4-O-(3，5-二氯-2-乙基-4，6-二羟基苯甲酰基)-2-O-甲基-β-D-吡喃甘露糖基)氧基)-甲基)-12(R)-[(6-脱氧-5-C-甲基-4-O-(2-甲基-1-氧代丙基)-b-D-来苏-吡喃己糖基)氧基]-11(S)-乙基-8(S)-羟基-18(S)-(1(R)-羟基乙基)-9，13，15-三甲基氧杂环十八碳-3，5，9，13，15-五烯-2-酮，(IUPAC)，具有如下化学结构：

非达霉素，曾被称为OPT80、PAR01、PAR101、R-台勾霉素B(R-Tiacumicin B)、台勾霉素B、闰年霉素(Lipiarmicin，Lipiarmycin)和闰年霉素A3，是天然存在的18元大环，其源自于桔橙指孢囊菌亚种hamdenesis(Dactylosporangium aurantiacum subspecies hamdenesis)的发酵。

非达霉素是由Optimer制药公司开发的一种口服、窄谱抗菌药。特别是，非达霉素显示了抗艰难梭菌(Clostridium difficile)的活性。

非达霉素，及其制备方法，公开于Journal of Antibiotics，vo1.XL，no.5，pages 575-588(1987)。含有非达霉素以及其他台勾霉素的混合物的多个固态形式公开于US 7,378,508及其欧洲的对应版本EP 2 125 850 B1。特别是，其中还描述了“非达霉素”的被称为形式A和形式B的两种多晶型(包含数量不等的结构类似物)，且申请人在专利审查期间声称其主张的水合形式A表现出不同的热力学性质，且其相比于乙酸乙酯溶剂化物形式B更稳定。本申请所述的非达霉素的固态形式通过需约3至约14天的过程制备。在任何情况下，这些专利描述的多晶型包含非达霉素与多达15％或更多的其它结构相关的台勾霉素的混合物。

多晶型现象，即不同晶型的产生，是一些分子和分子络合物的性质。单个分子，如非达霉素，可引起多种具有不同的晶体结构和物理性质如熔点、热行为(例如通过热重量分析-“TGA”，或差示扫描量热法-“DSC”测量)、X-射线粉末衍射(PXRD)图、红外吸收指纹图谱(infraredabsorption fingerprint)和固态核磁共振光谱的多种多晶型物。可用一种或多种这些技术来区别化合物的不同的多晶型物。

活性药物成分的不同的固态形式(包括溶剂化物形式)可具有不同性质。不同固态形式和溶剂化物的性质的所述变化可提供改进制剂的基础，例如，通过促进更好的加工或处理特性，以有利的方向改变溶出分布，或提高稳定性(多晶型物以及化学稳定性)和贮藏寿命。不同的固态形式的性质的这些变化也可为最终剂型提供改善，例如，如果它们用于提高生物利用率。活性药物成分的不同固态形式和溶剂化物也可以产生各种多晶型物或晶型，继而可提供更多的机会以评估固体活性药物成分的性质和特征的变化。

发现药物产品的新多晶型和溶剂化物可提供具有理想加工性能(如易于操作、易于加工、低吸湿性、储存稳定性和便于纯化)的材料或作为促进转化为其它多晶型的期望的中间体晶型。药学上有用的化合物或其盐的新的多晶型和溶剂化物也可以提供改善药物产品的性能特征(溶出分布、生物利用率等)的机会。它扩大了制剂科学家可用于制剂优化的材料的所有组成成分，例如通过提供具有不同性质的产品(例如，不同结晶习性、较高的结晶度或多晶型稳定性)，这可以提供更好的加工或处理的性质、改善的溶出分布，或改善的贮藏寿命。最后，新的多晶型可在制造和加工中以相比其他晶型(例如在结晶度或多晶纯度方面)而言改进的可靠性和重现性来制备。

发明概述

本发明提供非达霉素的固态形式、制备该固态形式的方法、包含一种或多种非达霉素的固态形式的药物组合物和制剂及其制备方法。

本发明还提供治疗艰难梭菌感染或CDI(也称为艰难梭菌相关的疾病)或CDAD的方法，包括向有此需要的患者给药治疗有效量的一种或多种本发明的非达霉素的固态形式，或治疗有效量的包含一种或多种本发明的非达霉素的固态形式和任选至少一种药学上可接受的赋形剂的药物组合物。

本发明还提供所述非达霉素的固态形式在制备药物组合物和制剂中的的用途。本发明从而进一步提供包含一种或多种本发明的非达霉素的固态形式的药物组合物。所述药物组合物还可包含至少一种药学上可接受的赋形剂，由此形成能够例如向需要所述治疗的患者给药的药物制剂。

本发明包括制备上述药物制剂的方法。该方法包括将一种或多种本发明的非达霉素的固态形式或包含所述一种或多种非达霉素的固态形式的药物组合物与至少一种药学上可接受的赋形剂混合。

本申请所述的非达霉素的固态形式以及药物组合物和制剂可用作药物，尤其用于治疗艰难梭菌感染、CDI(也称为艰难梭菌相关的疾病)或CDAD。

本发明还提供非达霉素的固态形式或至少一种本发明的上述药物组合物或制剂在制备用于治疗艰难梭菌感染、CDI(也称为艰难梭菌相关的疾病)或CDAD的药物中的用途。

附图简述

图1表示非达霉素晶型Z(丙酮修饰)的典型的PXRD图。

图2表示非达霉素晶型Z(丙酮修饰)的典型的DSC曲线。

图3表示非达霉素晶型Z(丙酮修饰)的典型的TGA曲线。

图4表示非达霉素晶型Z1的典型的PXRD图。

图5表示非达霉素晶型Z1的典型的DSC曲线。

图6表示非达霉素晶型Z1的典型的TGA曲线。

图7表示非达霉素晶型C的典型的PXRD图。

图8表示非达霉素晶型Z(乙腈修饰)的典型的PXRD图。

图9表示非达霉素晶型Z1的典型的FT-IR光谱。

图10表示非达霉素晶型Z1的典型的固态C¹³核磁共振光谱。

图11表示非达霉素晶型Z1的典型的拉曼光谱。

图12表示非达霉素晶型Z1(放大的)的典型的PXRD图。

图13表示非达霉素晶型Z1(放大的)的典型的拉曼光谱。

发明详述

本发明提供非达霉素的固态形式、制备该固态形式的方法和包含一种或多种固态形式的制剂及其制备方法。

已知的被称为形式A和形式B的非达霉素的固态形式，被描述为包含非达霉素以及多达15％或更多的其他结构相关的台勾霉素的混合物的混合物。本发明提供非达霉素的固态形式，其不仅是多晶型纯的而且是化学纯的。

取决于它们与哪个其它固态形式相比较，本发明的固态形式可具有至少一个选自以下的有利性能：化学纯度或多晶型纯度、提高的结晶度、溶解度、溶解速率、生物利用率、形态或结晶习性、比表面和比重密度、稳定性-例如化学稳定性以及就多晶型转换而言的热稳定性和机械稳定性、脱水稳定性和/或贮存稳定性，较低程度的吸湿性、低含量的残留溶剂、以及有利的加工和处理特性例如可压缩性、流动性和堆积密度/振实密度。

非达霉素的固态形式包含非达霉素的晶型或结晶形式。本申请使用的固态形式、晶型、结晶形式、多晶型物和多晶型可以互换使用。

晶型在本申请中可指其特征在于“基本上如图所描述”的图形数据。这样的数据包括，例如，粉末X-射线衍射图和固态NMR谱。图形数据有可能提供更多的技术信息，以进一步确定相应的固态形式，其并非必然地或容易地通过参照峰位置和/或相对强度的数值来描述。在任何情况下，本领域技术人员将理解，所述数据的图形表示可存在小的变化，例如，峰的相对强度和峰位置的变化，这是由于本领域技术人员熟知的因素的存在，如仪器响应的变化和试样浓度和纯度的变化。尽管如此，本领域技术人员将容易地能够比较本申请附图中的图形数据和未知晶型产生的图形数据，并确认两组图形数据是否表征相同的晶型还是两种不同的晶型。

除非另有说明，本申请使用的XRPD测量通过使用的铜K_α辐射波长来进行。

本申请使用的术语“化学位移差”是指在同一NMR谱中参比信号和其他信号之间的化学位移的差异。这些化学位移差对物质(例如本发明的非达霉素晶型)提供额外的分析测量，这将弥补NMR光谱可能发生的现象，其中在所述固态NMR“指纹”观察到位移。可能发生在NMR峰的所述位移，例如作为在NMR分析中使用的仪器、温度或校准方法发生变化的结果。这种在NMR“指纹”的位移，其在一定的位置具有化学位移共振，使得即使信号的个别化学位移已经移动，在光谱的所有峰也以相同的量移动，以使得每个信号的化学位移和其他信号的化学位移之间的差得到保持。因此，可以使用该位移作为被分析的材料的可靠的表征。

在本专利申请中，化学位移差通过由¹³C NMR谱的其他(观察到的)信号的化学位移值(0至180ppm的范围)减去在相同的固态¹³C NMR谱中表现出最低化学位移的信号(参比信号)的化学位移值(100至180ppm的范围)进行计算。

本申请中的固态形式的特征在于选自以下的两个或更多个不同的数据分组的数据，例如，具有一组特定峰的粉末XRD图；或在描绘衍射图的附图中所示的粉末XRD图，或“其组合”(或“它们的组合”，或“其任何组合”，或“这些数据的组合”)。这些表达例如“其任何组合”意指，技术人员可使用所述特征分析数据的任一组合表征晶型。例如，技术人员可使用例如四或五个特征粉末XRD峰的组表征晶型，并用在粉末X-射线衍射图观察到的一种或多种的另外特征(例如，额外的峰、特征峰形、峰值强度，或甚至在粉末XRD图的一些位置上不存在峰)补充表征。可替代地，在某些情况下，本领域技术人员可以使用例如四或五个特征粉末XRD峰的组表征晶型，并用使用其他分析方法观察到的一个或多个另外特征(例如使用在固态NMR谱的一个或多个特征峰，或被表征的晶型的DSC热解曲线的特征)补充表征数据。

晶型(或多晶型物)在本申请中可作为纯的、高纯度的，或基本上没有任何其他晶型(或多晶型)。本申请上下文中使用的表述“基本上没有任何其他晶型”应被理解为表示，通过例如PXRD测量，晶型包含20％或更少、10％或更少、5％或更少、2％或更少，或1％或更少的任何其他目标化合物的形式。因此，本申请所述的作为基本上没有其他任何多晶型的非达霉素的多晶型物，应被理解为包含大于80％(w/w)、大于90％(w/w)、大于95％(w/w)、大于98％(w/w)、或大于99％(w/w)的非达霉素的目标多晶型。因此，在本发明的一些实施方案中，所述非达霉素的多晶型物可包含从1％至20％(w/w)、从5％至20％(w/w)、或从5％至10％(w/w)的非达霉素的一种或多种其他晶型。

本申请使用的术语″室温″是指约20℃至约30℃的温度。室温通常在约20℃至约25℃的范围内。

本申请使用的术语“过夜”是指约15至约20小时，通常约16至约20小时之间的时间段。

本申请使用的术语“湿晶型”是指未使用任何常规技术进行干燥以除去残留溶剂的多晶型物。所述常规技术包括但不限于蒸发、真空干燥、烘干、在氮气流下干燥等。

本申请使用的术语“干燥晶型”是指使用任何常规技术进行干燥以除去残留溶剂的多晶型物。所述常规技术包括但不限于蒸发、真空干燥、烘干、在氮气流下干燥等。

除非另有说明，本申请使用的术语“无水的”涉及结晶的非达霉素时，是指通过TGA测定的，其中含有不多于1％(w/w)的水或有机溶剂的结晶的非达霉素。本发明的非达霉素的固态无水形式是指在晶体内不含有限定的化学计量的结晶水(或其他溶剂)的形式。

除非另有说明，本申请使用的术语“非吸湿的”涉及结晶的非达霉素时，是指结晶的非达霉素吸收少于0.5％，且优选少于0.2％(w/w)的水，例如大气水，如根据Ph.Eur.章节5.11(“吸湿性”)确定的。

除非另有说明，本申请使用的术语“溶剂化物”是指在晶体结构中包含了溶剂的晶型。当溶剂为水时，该溶剂化物通常指作为“水合物”。溶剂化物中的溶剂可以化学计量数或非化学计量存在。

除非另有说明，本申请使用的术语“粉末”或“粉状的”是指粒子或颗粒形式的固体化合物，其中可注入所述粒子或颗粒。优选地，所述粉末为固体、松散和干燥颗粒。

除非另有说明，本申请使用的术语“多晶型稳定性”涉及非达霉素的晶型时，其是指，通过PXRD测量，在特殊条件下，存在少于20％、10％、5％、1％、0.5％或0.1％的结晶的非达霉素向任何其他非达霉素的固态形式的转化。在一些实施方案中，该转化为0.5％-20％、0.5％-10％或0.5％-5％或0.5％-1％或0.1％-1％，或0.1％-0.5％。

除非另有说明，本申请使用的术语“非达霉素”是指式I的基本上化学纯的分子。在本发明的上下文中，基本上纯的是指通过HPLC(面积％，在230nm检测)测量，至少95％、＞98％、＞98.5％或甚至＞99％的化学纯度。

HPLC分析法通常被设计为使用在给定波长的紫外吸收，以用于记录在任何给定的时间点经过检测器的样品中的化合物的存在和量。例如，任何用标准设备运行的HPLC的主要输出信息为在UV检测色谱图的各个峰的面积百分比，即，曲线下面积(AUC)。尤其在缺乏关于给定的化合物的比消光系数的任何详细信息时，通过HPLC得到的面积百分数值通常等同于“重量％”值，即不施加任何校正因子。例如，对于单峰(在一定的保留时间洗脱出来)的AUC百分比值，将对应于样品中的化合物的重量百分比的比例。

本申请使用的术语″参比标准″是指可同时用于活性药物成分的定量和定性分析的化合物。例如，将所述化合物在HPLC中的保留时间设置为相对保留时间，从而使定性分析成为可能。将注入HPLC柱前所述化合物在溶液中的浓度用于比较HPLC色谱图中峰下的面积，从而使定量分析成为可能。

虽然到目前为止已经以概括性术语描述了本领域关于参照标准品的一些知识，本领域的技术人员同样理解检测器响应可以是色谱图的峰高或积分峰面积，其例如通过UV或折射指数检测、从HPLC体系的洗脱剂获得，或者例如通过火焰电离检测或热导检测、从气相色谱的洗脱剂获得；或其他检测器响应(如利用荧光TLC板上斑点的UV吸光率)。参比标准的位置可用于计算化合物和其他杂质的相对保留时间。

除非另有说明，本申请使用的术语′vvm′是指在发酵过程的时间(分钟)内，达到发酵液(Kg-体积)的空气体积(Nm³/hrs)。例如，0.5vvm是指当其中发酵液为100kg时，发酵过程中的通气为50N1/min(3Nm³/hrs)。

本发明涵盖非达霉素的晶型，被命名为晶型Z。晶型Z的特征可在于选自以下一种或多种的数据：X-射线粉末衍射图，其具有在4.2、7.7、8.2、11.2和15.6°2θ±0.2°2θ的峰；基本上如在图1中所示的X-射线粉末衍射图；和这些数据的组合。

或者，晶型Z的特征可在于选自以下一种或多种的数据：X-射线粉末衍射图，其具有在4.1、9.7、10.2、11.2和15.6°2θ±0.2°2θ的峰；基本上如图8所示的X-射线粉末衍射图；和这些数据的组合。

晶型Z的特征还在于选自以下的数据：X-射线粉末衍射图，其具有在4.2、7.7、8.2、11.2和15.6°2θ±0.2°2θ的峰并还具有选自在9.8、10.3、14.3和18.8°2θ±0.2°2θ的PXRD峰的任一、二、三或四个额外的峰；基本上如图2所示的DSC热解曲线；DSC吸热峰在约115-120℃且DSC熔化起始在约160-165℃；基本上如图3所示的TGA热解曲线；和这些数据的组合。当晶型Z从丙酮制备时，测量上述DSC和TGA数据。

或者，晶型Z的特征可在于选自以下的数据：X-射线粉末衍射图，其具有在4.1、9.7、10.2、11.2和15.6°2θ±0.2°2θ的峰并还具有选自在7.8、14.1和18.7±0.2°2θ的PXRD峰的任一、二或三个额外的峰。

晶型Z的特征可在于上述数据的任意组合。

晶型Z可为丙酮溶剂化物或乙腈溶剂化物。

优选地，非达霉素晶型Z包含非达霉素，所述非达霉素的化学纯度为至少95％，或甚至至少98％(经HPLC)。

如上所述，非达霉素晶型Z具有有利性能。特别是，本发明的非达霉素晶型Z似乎是制备晶型Z1的良好中间体，如本申请进一步所述，晶型Z1本身具有有利性能。

本发明还涵盖非达霉素的晶型，被命名为晶型Z1。

本发明涵盖非达霉素的晶型，被命名为晶型Z1。晶型Z1的特征可在于选自以下的数据：X-射线粉末衍射图，其具有在4.3、8.2和11.2±0.2°2θ的峰；基本上如图4所示的X-射线粉末衍射图；固态¹³C核磁共振光谱，其具有在163.8、129.1、108.6、94.4和60.3±0.2ppm的特征峰；固态¹³C核磁共振光谱，其具有在所述特征峰和100.2±0.2ppm的峰之间的化学位移差，所述化学位移差分别为63.6、28.9、8.4、-5.8和-39.9±0.1ppm；基本上如图10所示的固态¹³C核磁共振光谱；拉曼光谱，其在2993、2974、1749、1721、1649、1594、1572、1451、1257和587±4cm^-1具有特征峰；基本上如图11所示的拉曼光谱；及其组合。

晶型Z1的特征可在于X-射线粉末衍射图，其具有在4.3、8.2和11.2°2θ±0.2°2θ的峰并还具有选自在9.7、10.2、15.6、18.8和19.0°2θ±0.2°2θ的PXRD峰的任一、二、三、四或五个额外的峰。

晶型Z1的特征还可在于选自以下一种或多种的数据：固态¹³C核磁共振光谱，其具有在163.8、129.1、108.6、94.4和60.3±0.2ppm的特征峰；固态¹³C核磁共振光谱，其具有在所述特征峰和100.2±0.2ppm的峰之间的化学位移差，所述化学位移差分别为63.6、28.9、8.4、-5.8和-39.9±0.1ppm；基本上如图10所示的固态¹³C核磁共振光谱；和这些数据的组合。

晶型Z1的特征还可在于选自以下一种或多种的数据：拉曼光谱，其在2993、2974、1749、1721、1649、1594、1572、1451、1257和587±4cm^-1具有特征峰；基本上如图11所示的拉曼光谱；及其组合。

晶型Z1的特征还可在于选自以下一种或多种的数据：基本上如图5所示的DSC热解曲线；DSC吸热峰在约127-130℃且DSC熔化起始在约164℃；基本上如图6所示的TGA热解曲线；和这些数据的组合。

晶型Z1的特征还可在于选自以下一种或多种的数据：FT-IR光谱，其具有在3551、3437、1738和1721±4cm^-1的特征峰；基本上如图9所示的FT-IR光谱；及其组合。

晶型Z1结晶的特征还可在于具有非达霉素的两个对称的独立分子的三斜晶系空间群P1，其具有的晶胞的参数为 α＝91.02°、β＝90.55°、γ＝100.59°，且晶胞体积为这是通过在的波长和在275K的温度的同步辐射测定的；或具有非达霉素的两个对称的独立分子的三斜晶系空间群P1，其具有的晶胞的参数为α＝91.7³°、β＝90.3⁹°、和γ＝100.4⁶°，这是由Le-Bail拟合在环境温度下测定的。

优选地，非达霉素晶型Z1包含非达霉素，所述非达霉素具有的化学纯度为＞95％、＞98％或甚至＞99％(经HPLC)。

上述晶型Z1可通过晶型Z去溶剂化获得。

晶型Z1的特征可在于上述数据的任意组合。

晶型Z1可为无水形式。

如上所述，非达霉素晶型Z1具有有利性能。特别是，本发明的非达霉素晶型Z1为非吸湿的。当根据欧洲药典5.11进行吸湿性测试时，晶型Z1的质量增加低于约0.2％。晶型Z1作为非吸湿的材料的优点提供非达霉素在制剂中更好的加工。如，在造粒过程后，更不粘并稳定。

此外，晶型Z1在制剂中具有极佳的稳定性。保持无水多晶型物的能力提供了提高制剂中的性能特征例如溶出分布和生物利用率的机会。

本发明涵盖非达霉素的晶型，被命名为晶型C。非达霉素的晶型C的特征可在于选自以下一种或多种的数据：X-射线粉末衍射图，其具有在6.8、7.9、10.0、10.2、12.2、13.4、14.6、15.4、16.4、17.5、18.4和23.1°2θ±0.1°2θ的峰；基本上如图7所示的X-射线粉末衍射图；和这些数据的组合。

优选地，非达霉素的晶型C具有高化学纯度和高结晶度，即，非达霉素的晶型C包含非达霉素，所述非达霉素具有的化学纯度为＞98％、＞99％或甚至＞99.3％(经HPLC)。

如上所述，非达霉素的晶型C具有有利性能。特别是，本发明的非达霉素晶型C可以高质量生产，即，高化学纯度和多晶型纯度。晶型C的X-射线粉末衍射图以高结晶度获得，如带有相对尖锐的清晰的峰的高分辨率PXRD图所示。此外，晶型C在极端条件下稳定。

上述非达霉素的晶型C可通过包括以下操作的方法获得：a)提供化学纯度经HPLC测定为＞95％，或优选＞98％的非达霉素在甲醇中的溶液，b)加热该溶液至温度为约55℃至约60℃，c)将水加至加热的溶液中，d)在约1小时的期间内保持加热的溶液的温度为约55℃至约60℃，和e)冷却加热的溶液至温度为约15℃以获得含有晶型C的悬浮液。可将该悬浮液进一步在约2小时的期间内保持在15℃。

在步骤b)所添加的水相对于步骤a)中的甲醇的比例可分别为约1∶2至约1∶3。

非达霉素的晶型C的上述制备方法还可包括从悬浮液中回收所述晶型C。例如，通过过滤包含所述晶型C的悬浮液、洗涤并干燥结晶产物，进行回收。优选地，用甲醇∶水的混合物进行洗涤。优选地，在真空下进行干燥。优选地，在约50℃的温度进行干燥。优选地，过夜干燥。

本发明还涵盖结晶的无水的非达霉素。

本发明涵盖结晶的非达霉素的丙酮溶剂化物。

本发明涵盖结晶的非达霉素的乙腈溶剂化物。

非达霉素的上述固态形式可用来制备药物组合物和药物制剂。

本发明还涵盖1)包含一种或多种本申请所述的固态形式的药物组合物；2)包含一种或多种本申请所述的固态形式的药物制剂，或包含一种或多种本申请所述的固态形式和至少一种药学上可接受的赋形剂的药物组合物；3)制备所述制剂的方法，包括将上述固态形式或药物组合物与至少一种药学上可接受的赋形剂混合；4)一种或多种本申请所述的固态形式在制备药物组合物或制剂中的用途；和5)治疗艰难梭菌感染、CDI(也被称为艰难梭菌相关的疾病)或CDAD的方法。该药物组合物可用于制备药物。本发明还提供本申请所述的晶型或药物组合物用作药物的用途。

本发明还涵盖含有本发明的药物组合物的制剂。该制剂的实例包括片剂或胶囊形式的包含药物组合物的药物，其用于治疗患有艰难梭菌感染、CDI(也被称为艰难梭菌相关的疾病)或CDAD的人。

已经参照一些优选的实施方案描述了本发明，通过考虑本说明书，其他实施方案对于本领域技术人员而言将变得明显。本发明进一步通过参考详细描述本发明的组合物的制备和使用方法的以下实施例来限定。许多修改(针对材料和方法)，可在不脱离本发明的主旨的范围内实施，这对于本领域技术人员将是显而易见的。

X-射线粉末衍射(PXRD)方法

本申请通篇所述并在以下实施例中的PXRD峰，通过使用配有Cu放射源＝Peltier检测器的ARL X-射线粉末衍射仪型号X`TRA-030来获得，使用具有圆形零背景石英板的圆形标准铝样品架。扫描参数：范围：2-40°2-θ，连续扫描，速率：3°/min。峰位置的精确度定义为±0.2°，这是因为实验差异如仪器、样品制备等。PXRD峰用Si标准校正。

差示扫描量热法(DSC)方法

DSC 822^e/700，Mettler Toledo，样品重量：3-5mg。

加热速率：10℃/min，坩埚的孔数：3。

在氮气流中：流速＝40ml/min。

扫描范围：30-250℃，10℃/分钟的加热速率。

热重量分析(TGA)方法

TGA/SDTA 851^e，Mettler Toledo，样品重量：7-15mg。

加热速率：10℃/min，在氮气流中：流速＝50ml/min。

扫描范围：30-250℃。

使用配有Head Space7694和FID检测器的AGILENT 6890N仪器，进行GC分析。

使用具有加热速率为1℃/min的-B-545仪器进行熔点测定。

FT-IR光谱法

使用Perkin-Elmer Spectrum One光谱仪收集数据，在4cm^-1分辨率下扫描16次，范围为4000-400cm^-1。样品在KBr薄片中分析。使用空杯作为背景，记录光谱。

固态 ¹³ C NMR光谱法

使用Bruker Avance II+500仪器以125MHz记录¹³C NMR光谱。使用4mm转子的SB探针。使用KBr设置魔角(magic angle)。用金刚合金(adamantine)检查磁场的均匀性。用甘氨酸优化交叉极化参数。依据甘氨酸作为外标(176.03ppm)，为低场羧基信号设定光谱参照。

扫描参数：魔角旋转速率：11kHZ。

脉冲程序：在去耦期间，cp，tppm15。

延迟时间：5s。

扫描次数：1024。

晶胞参数

非达霉素晶型Z1的粉末衍射图在由非衍射玻璃制成的1.5mm毛细管中使用同步辐射在的波长在275K测量。指数化独立地由程序DICVOL和N-TREOR显示。

对实验室粉末衍射图进行Le-Bail拟合提供在环境温度的晶胞参数。

拉曼光谱法

粉末样品装入圆锥形样本保持器中，且拉曼光谱记录于Nicolet6700 FT-IR光谱仪，其具有NXR FT-Raman组件，配有1064nm Nd：YVO₄激发激光、CaF₂分光器和Ge检测器。

仪器参数：

色谱条件I：

梯度表

时间(min)	洗脱液A(％)	洗脱液B(％)
			0	60	40
3	50	50
			14	39	61
18	15	85
			19	15	85
21	60	40
			25	60	40

色谱条件II：

梯度表

时间(min)	洗脱液A(％)	洗脱液B(％)
			0	60	40
5	47	53
			15	45	55
18	5	95
			20	5	95
21	60	40
			23	60	40

标准储备溶液：

精确称取约10.0mg的非达霉素参比标准品，将其加入20.0ml容量瓶，溶解并用乙腈填满体积。

标准溶液：

将5.0ml储备溶液移液至10.0ml容量瓶并用乙腈填满体积。

样品制备：

精确称取约10.0mg非达霉素样品，将其加入20.0ml容量瓶，溶解并用乙腈填满体积。

将5.0ml储备溶液移液至10.0ml容量瓶并用乙腈填满体积。

实施例

实施例1：制备粗非达霉素的一般操作

非达霉素制备如下：

i)在营养培养基中培养微生物以在所述营养培养基中积累非达霉素；

ii)通过本领域已知的方法从所述营养培养基中分离出粗非达霉素；

iii)通过反相色谱法用乙腈、水和乙酸的混合物作为洗脱剂纯化非达霉素；和

iv)从馏分中分离纯化后的非达霉素。

所述培养过程中使用Actionplanes deccanenesis。营养培养基包含基于重量计的以下组合：约0％至约5％的蔗糖；约0％至约3％的淀粉；约0.1％至约1.0％的大豆蛋白胨；约2％至约5％的棉籽渣(cotton seedmeal)；约0.01％至约0.1％的磷酸二氢钾；约0.05％至约0.5％的磷酸氢二钾；约0.05％至约0.5％的消泡剂；约0％至约2％的AmberliteXAD-16N树脂。培养的优选温度为从28至32℃，且pH为从6.0至8.0。在培养中，连续补给碳源。

非达霉素发酵生产还可通过以下操作完成：

非达霉素发酵生产可包括接种、随后进行发酵的步骤，如下所述：

接种：Actinoplanes deccanenesis菌株接种至种子培养基。调整并保持接种参数直到接种物转移进行主要的发酵。接种物培养基包含：约0至约5％的葡萄糖、约0至约1％的酵母提取液、约0至约1％的大豆蛋白胨、约0至约0.5％的CaCO₃、约0至约0.2％的MgSO₄·7H₂O、约0至约0.2％的K₂HPO₄、约0至约0.2％的KCl、约0至约0.3％的聚丙二醇。通过加入盐酸和/或氢氧化钠/氢氧化钾调整pH。

接种参数：

参数
		尖端速度：	1.5-4m/s
温度：	30±2℃
		压力：	0.3-0.6±0.2巴
通气速率：	0.5±0.4vvm

接种时间：40-48±24小时。

在接种后期，将该接种物(或其一部分)以8-15±5％的比率转移至无菌发酵培养基中。

发酵：发酵培养基包含：约0至约10％的蔗糖/水解淀粉、约0至约1％的大豆蛋白胨、约0至约5％的棉籽渣、约0至约0.3％的K₂HPO₄、约0至约0.2％的KH₂PO₄、约0至约1％的KCl、约0至约0.5％的聚丙二醇(PPG)。通过加入盐酸和/或氢氧化钠/氢氧化钾调整pH。

使该无菌发酵培养基接种有所述接种物。

加料：

在所述发酵过程中加入碳源。对于碳源加料，可使用蔗糖或水解淀粉。加料的碳源的总量为相对于初始体积的0-15％。

发酵参数：

参数
		温度：	30±2℃
压力：	0.3-0.5±0.2巴
		通气速率：	0.5-1.0±0.3vvm
混合(尖端速度)：	3-11m/s

在发泡的情况下，应添加无菌消泡剂。

发酵时间：168-192±24小时。

该接种/发酵培养基还可包含约0％至约2％的Amberlite XAD-16N树脂。

当完成发酵时，使用有机溶剂例如乙酸乙酯、乙酸异丁酯或异丁醇从发酵液中萃取非达霉素。浓缩有机相并通过加入抗溶剂例如正己烷来使非达霉素析出。任选地，该析出物可悬浮于第二抗溶剂中。过滤并干燥后，得到粗非达霉素。

实施例2：制备非达霉素晶型Z的操作

将通过实施例10中描述的相同操作获得的非达霉素(253.5mg，含量测定：89.1％，纯度：94.9％，无定形)和1ml丙酮/水(3/1)的混合物装入试管。将试管封闭并置于50℃水浴中。在非达霉素溶解后，将溶液在室温静置4天以产生结晶的析出物。通过过滤将该晶体从溶液中分离并用丙酮/水(3/1)洗涤。将产物于50℃在真空烘箱中干燥过夜，然后用HPLC分析。含量测定和HPLC纯度分别为＞99％和98.7％。基于PXRD分析，该产物为晶型Z。

实施例3：制备非达霉素晶型Z的操作

将通过实施例2或10中描述的相同纯化操作获得的非达霉素(496.2mg，测定：85.7％，纯度：96.4％，无定形)和2ml丙酮/水(3/1)的混合物装入试管。将试管封闭并置于55℃水浴中。在非达霉素溶解后通过将试管插入冰水中，将该溶液迅速冷却。将该溶液在室温静置7天。形成晶体并通过过滤分离并在50℃在真空烘箱中干燥过夜。产物经HPLC分析。含量测定和HPLC纯度分别为89.4％和96.4％。基于PXRD分析，得到的晶型为晶型Z。

实施例4：制备非达霉素晶型Z的操作

将通过实施例2中描述的相同纯化操作获得的或从其他结晶实验中回收的非达霉素(0.4g，测定：94.0％，纯度：95.3％)、4.8ml丙酮和0.5ml去离子水装入试管。将试管封闭并置于55℃水浴中。在非达霉素溶解后，再加入2.7ml去离子水并将该溶液于55℃水浴中搅拌。搅拌60分钟后，第一个晶体出现。将悬浮液再搅拌165分钟并滤出晶体，在50℃在真空烘箱中干燥过夜。将干燥的晶体经HPLC分析。测定纯度和HPLC纯度分别为97.6％和98.3％。基于PXRD分析，得到的晶型为晶型Z。

实施例5：制备非达霉素晶型Z的操作

将通过实施例11中描述的相同纯化操作获得的非达霉素(7.5g，浓度测定：95.5％，纯度：98.4％)、72ml丙酮和8ml去离子水装入圆底烧瓶，将其在55℃水浴中加热。在非达霉素溶解后，将额外的40ml去离子水逐滴加至溶液，同时在55℃水浴搅拌。130分钟后，未形成晶体。将一些湿的非达霉素晶体(制备自丙酮/水(60/40)混合物，如实施例2或3中所述操作)加至溶液并将得到的混合物再搅拌3小时。形成晶体并滤出来，用20ml丙酮/水(60/40)混合物洗涤，并在50℃在真空烘箱中干燥约6小时。将干燥的晶体(3.07g)经HPLC分析。测定纯度和HPLC纯度分别为94.9％和99.4％。基于PXRD，得到的晶型为晶型Z(丙酮溶剂化物)与晶型Z1的混合物(图1)。

实施例6：制备非达霉素晶型Z1的操作

将通过实施例5或11中描述的相同纯化操作获得的非达霉素(5.0g，浓度测定：97.7％和纯度：98.3％)与45ml丙酮和5ml去离子水一起加至圆底烧瓶。将烧瓶在55℃水浴中加热。在非达霉素溶解后，将额外的40ml去离子水逐滴加入同时在55℃水浴搅拌。再加入36.5ml水后，第一个晶体出现。将得到的悬浮液再搅拌2小时(在50℃水浴中)随后过滤。将收集的晶体用15ml丙酮/水(50/50)混合物洗涤。然后将晶体在真空下于50℃干燥40小时，于60℃干燥48小时，于80℃干燥48小时并最终于100℃干燥24小时。将干燥的晶体经HPLC分析。浓度测定和HPLC纯度分别为＞99％和99.4％。基于PXRD分析，该产物为晶型Z1。

实施例7：制备非达霉素晶型Z1的操作

将通过实施例6或11中描述的相同纯化操作获得的非达霉素(10.0g，浓度测定：97.7％，纯度：98.3％)与90ml丙酮和10ml去离子水一起加至圆底烧瓶。将烧瓶在55℃水浴中加热。在非达霉素溶解后，将额外的80ml去离子水逐滴加入同时在55℃水浴搅拌。再加入72ml水后，第一个晶体出现。将得到的悬浮液再搅拌2小时(温度？)随后过滤。将收集的晶体用30ml丙酮/水(50/50)混合物洗涤。然后将晶体在真空下于60℃干燥4小时以提供8.59g非达霉素。将该物质的一部分(7.96g)进一步在100℃干燥16小时。将干燥的晶体(7.92g)经HPLC分析。浓度测定和HPLC纯度分别为＞99％和99.6％。基于PXRD分析，该产物为晶型Z1。

实施例8：制备非达霉素晶型Z1的操作

粗非达霉素分批通过反相色谱法纯化，使用填充400g DiasogelSP-100-15-ODS-P的柱并用乙腈/H2O/AcOH(45/55/0.055)或乙腈/H2O/AcOH(50/50/0.05)洗脱。将收集的馏分合并并浓缩至原始体积的一半以产生析出物。将该析出物过滤，用水洗涤并在高真空下干燥。灰白色粉末的HPLC分析表明浓度测定为96.7％且纯度为98.9％。将一部分非达霉素1.0g和10ml乙腈/水(9/1)混合物加至试管。搅拌数分钟后，将非达霉素溶解形成乳白色溶液。再加入0.5g非达霉素并将得到的悬浮液在环境温度保持过夜。形成晶体，过滤并用5ml乙腈/水(9/1)混合物洗涤。然后该晶体在50℃在真空下干燥过夜。将干燥的晶体(1.0g)经HPLC分析。浓度测定和HPLC纯度分别为＞99％和99.2％。基于PXRD分析，得到的晶型为晶型Z1。

实施例9：非达霉素晶型C的操作

将通过实施例6或11中描述的相同纯化操作获得的非达霉素(22.0g，测定：95.8，HPLC纯度：98.1％)溶解于130ml甲醇。将该溶液加热至55℃并在20分钟内加入60ml的去离子水。将该混合物在55℃保持1小时，随后在150分钟内冷却至15℃。将形成的悬浮液在15℃再保持2小时。形成晶体，过滤并用26ml甲醇和12ml的去离子水的混合物洗涤。然后该晶体在50℃在真空下干燥过夜。将得到的物质(19.3g)经HPLC分析。浓度测定和HPLC纯度分别为99.5％和99.1％。

实施例10：纯化非达霉素的操作

粗非达霉素分批通过反相色谱法纯化，使用填充Merck LiChroprepRP-18(15-25u)的柱并用乙腈/H₂O/AcOH(45/55/0.055)洗脱。合并收集的包含＞90％非达霉素的馏分，并在室温蒸发乙腈，将残留的悬浮液用一半体积的乙酸乙酯萃取三次。合并上层，并蒸发乙酸乙酯。将灰白色粉末的残余物在高真空下干燥。对合并的粉末进行的HPLC分析显示浓度测定为89.1％且纯度为94.9％。PXRD分析表明粉末是无定形的。

实施例11：纯化非达霉素的操作

粗非达霉素用反相色谱法纯化，使用填充DiasogelSP-100-15-ODS-P的8L柱并用乙腈/H2O/AcOH(50/50/0.05)洗脱。合并收集的包含＞93％非达霉素的馏分并浓缩至约一半的原始体积以产生析出物。将该析出物过滤，用水洗涤并在高真空下干燥。对灰白色粉末进行的HPLC分析表明浓度测定为95.5％且纯度为98.4％。

实施例12：制备非达霉素晶型Z和Z1的操作

将通过实施例11中描述的相同纯化操作获得的非达霉素(10.0g，浓度测定：95.6％，纯度：95.2％)，在室温悬浮于乙腈/水(10/4，v/v)混合物并放置在桌子上过夜。第二天早上，将其用25ml乙腈/水(10/4，v/v)混合物稀释，将晶体滤出并用25ml乙腈/水(10/4，v/v)混合物洗涤。将湿产物取样并用PXRD分析；在此分析的基础上该湿产物为晶型Z(图8)。然后将晶体在真空下于60℃干燥6小时。将干燥的晶体(7.35g)经HPLC分析。浓度测定和HPLC纯度分别为＞99％和98.3％。基于PXRD分析，干燥的产物为晶型Z1。

实施例13：制备非达霉素晶型Z1的操作

将通过反相色谱法纯化(通过实施例11中描述的相同纯化操作获得：在如实施例11所述的反相色谱法后以每批约20g/合并批次，使用4L柱并合并包含＞98％非达霉素的馏分)的非达霉素批次(770g，浓度测定：97.1％，纯度：99.7％和362.3g，浓度测定：95.1％，纯度：99.7％)溶解于9L丙酮/水(9/1，v/v)混合物。将溶液过滤并将过滤器用1L丙酮/水(9/1)混合物洗涤。将该溶液加热至50℃并加入8.95L去离子水。在加入7.3L水后，第一个晶体出现。将得到的悬浮液再搅拌2小时随后过滤。将收集的晶体用3L丙酮/水(50/50)混合物洗涤。然后将晶体在真空下于60℃干燥2小时并于100℃干燥40小时。浓度测定和HPLC纯度分别为99.1％和99.5％。基于PXRD分析，该产物为晶型Z1。

实施例14：非达霉素晶型C的操作

将通过反相色谱法纯化(通过实施例11中描述的相同纯化操作获得：在如实施例11所述的反相色谱法后以每批约20g合并批次，使用4L柱并合并包含＞98％非达霉素的馏分)的非达霉素批次(742.3g，浓度测定：95.9％，纯度：99.7％和388g，浓度测定：95.1％，纯度：99.7％)在40℃溶解于5.5L甲醇。将溶液过滤并将过滤器用1.1L甲醇洗涤。将该溶液加热至55℃并在25分钟内加入2750ml去离子水。将混合物在55℃保持1小时，随后在145分钟内冷却至15℃。将形成的悬浮液再在15℃保持2小时。形成晶体并过滤，用880ml甲醇和420ml去离子水的混合物洗涤。然后该晶体在60℃在真空下干燥16.5小时。将得到的物质(1066g)经HPLC分析。浓度测定和HPLC纯度分别为98.0％和99.7％。

实施例15：制备非达霉素晶型Z1的操作

将通过反相色谱法纯化(通过实施例11中描述的相同纯化操作获得：在如实施例11所述的反相色谱法后以每批约20g合并批次，使用4L柱并合并包含＞98％非达霉素的馏分)的非达霉素(80.74g，浓度测定：＞99％，纯度：99.6％)在60℃溶解于800ml乙腈和200ml水。将溶液过滤并在20分钟内加入600ml去离子水。再加入450ml水后，第一个晶体出现。将浆液搅拌2小时，随后滤去晶体并在60℃在真空下干燥16小时。将得到的物质经HPLC分析。浓度测定和HPLC纯度分别为99.4％和99.8％。基于PXRD分析，该产物为晶型Z1。

实施例16：制备非达霉素晶型Z1的操作

将通过反相色谱法纯化(通过实施例11中描述的相同纯化操作获得：在如实施例11所述的反相色谱法后以每批约20g合并批次，使用4L柱并合并包含＞98％非达霉素的馏分)的非达霉素批次(402g，测定：97.7％，纯度：99.6％和884.6g，测定：99.2％，纯度：99.1％)在60℃溶解于16L乙腈/水(4/1，v/v)混合物。将溶液过滤并将过滤器用1L乙腈/水(4/1，v/v)混合物洗涤，并加入预热至35℃的10L去离子水。将混合物在35℃保持4小时，随后滤去晶体。将该晶体用1L乙腈和1L去离子水的混合物洗涤。然后该晶体在60℃在真空下干燥18小时。将得到的物质经HPLC分析。浓度测定和HPLC纯度分别为98.7％和99.5％。基于PXRD分析，该产物为晶型Z1。

Claims (26)

1.非达霉素的晶型，其中所述晶型为：

非达霉素的晶型，其被命名为形式Z1，其特征在于选自以下一种或多种的数据：X-射线粉末衍射图，其具有在4.3、8.2和11.2°2θ±0.2°2θ的峰；基本上如图4所示的X-射线粉末衍射图；和这些数据的组合；

非达霉素的晶型Z，其特征在于选自以下一种或多种的数据：X-射线粉末衍射图，其具有在4.1、9.7、10.2、11.2和15.6°2θ±0.2°2θ的峰；基本上如图8所示的X-射线粉末衍射图；和这些数据的组合；或

非达霉素的晶型，其被命名为形式C，其特征在于选自以下一种或多种的数据：X-射线粉末衍射图，其具有在6.8、7.9、10.0、10.2、12.2、13.4、14.6、15.4、16.4、17.5、18.4和23.1°2θ±0.1°2θ的峰；基本上如图7所示的X-射线粉末衍射图；和这些数据的组合。

2.权利要求1的非达霉素的晶型，其中所述晶型为权利要求1的形式Z1，其特征在于选自以下一种或多种的数据：X-射线粉末衍射图，其具有在4.3、8.2和11.2°2θ±0.2°2θ的峰；基本上如图4所示的X-射线粉末衍射图；和这些数据的组合。

3.权利要求1或权利要求2的晶型Z1，其中所述晶型Z1的特征在于X-射线粉末衍射图，其具有在4.3、8.2和11.2°2θ±0.2°2θ的峰并还具有选自在9.7、10.2、15.6、18.8和19.0°2θ±0.2°2θ的PXRD峰的任一、二、三、四或五个额外的峰。

4.权利要求2或权利要求3的晶型Z1，其特征还在于选自以下一种或多种的数据：固态¹³C核磁共振光谱，其具有在163.8、129.1、108.6、94.4和60.3±0.2ppm的特征峰；固态¹³C核磁共振光谱，其具有在所述特征峰和100.2±0.2ppm的峰之间的化学位移差，所述化学位移差分别为63.6、28.9、8.4、-5.8和-39.9±0.1ppm；基本上如图10所示的固态¹³C核磁共振光谱；和这些数据的组合。

5.权利要求2至4中任一项的晶型Z1，其特征还在于选自以下一种或多种的数据：拉曼光谱，其在2993、2974、1749、1721、1649、1594、1572、1451、1257和587±4cm^-1具有特征峰；基本上如图11所示的拉曼光谱；及其组合。

6.权利要求2至5中任一项的晶型Z1，其特征还在于选自以下一种或多种的数据：基本上如图5所示的DSC热解曲线；在约127-130℃的DSC吸热峰且DSC熔化起始在约164℃；基本上如图6所示的TGA热解曲线；和这些数据的组合。

7.权利要求2至6中任一项的晶型Z1，其特征还在于选自以下一种或多种的数据：FT-IR光谱，其具有在3551、3437、1738和1721±4cm^-1的特征峰；FT-IR光谱基本上如图9所示；及其组合。

8.权利要求2至7中任一项的晶型Z1，其特征还在于具有非达霉素的两个对称的独立分子的三斜晶系空间群P1，其具有的晶胞的参数为α＝91.02°、β＝90.55°、γ＝100.59°，且晶胞体积为这是通过在的波长和在275K的温度的同步辐射测定的；或具有非达霉素的两个对称的独立分子的三斜晶系空间群P1，其具有的晶胞的参数为 α＝91.73°、β＝90.39°和γ＝100.46°，这是在室温下由Le-Bail拟合测定的。

9.权利要求2至8中任一项的晶型Z1，其中所述晶型Z1包含非达霉素，所述非达霉素的化学纯度经HPLC测定为＞95％，优选＞98％，或甚至＞99％。

10.根据权利要求2至9中的任一项的晶型Z1，其中所述晶型Z1为无水形式。

11.权利要求1的非达霉素的晶型，其中所述晶型为形式Z，其特征在于选自以下一种或多种的数据：X-射线粉末衍射图，其具有在4.1、9.7、10.2、11.2和15.6°2θ±0.2°2θ的峰；基本上如图8所示的X-射线粉末衍射图；和这些数据的组合。

12.权利要求11的晶型Z，其中所述晶型Z特征在于选自以下的数据：X-射线粉末衍射图，其具有在4.1、9.7、10.2、11.2和15.6°2θ±0.2°2θ的峰，并还具有选自在7.8、14.1和18.7±0.2°2θ的PXRD峰的任一、二或三个额外的峰。

13.权利要求11至12的任一项的晶型Z，其中所述晶型Z为丙酮溶剂化物或乙腈溶剂化物。

14.权利要求11至13的任一项的晶型Z，其中所述晶型Z包含非达霉素，所述非达霉素的化学纯度经HPLC测定为至少95％，优选至少98％。

15.权利要求1的非达霉素的晶型，其中所述晶型为形式C，其特征在于选自以下一种或多种的数据：X-射线粉末衍射图，其具有在6.8、7.9、10.0、10.2、12.2、13.4、14.6、15.4、16.4、17.5、18.4和23.1°2θ±0.1°2θ的峰；基本上如图7所示的X-射线粉末衍射图；和这些数据的组合。

16.权利要求15的晶型C，其中所述晶型C包含非达霉素，所述非达霉素所具有的化学纯度(经HPLC测定)为＞98％，优选＞99％或＞99.3％。

17.权利要求15至16的任一项的晶型C，其中所述晶型C通过以下方法获得，所述方法包括：

a)提供化学纯度经HPLC测定为＞95％，或＞98％的非达霉素在甲醇中的溶液；

b)加热该溶液至温度为约55℃至约60℃；

c)将水加至加热的溶液中；

d)在约1小时的期间内保持加热的溶液的温度为约55℃至约60℃；

e)冷却加热的溶液至温度为约15℃以获得含有晶型C的悬浮液；和

f)任选在约2小时的期间内保持该悬浮液在约15℃。

18.非达霉素的无水晶型。

19.结晶的非达霉素溶剂化物，其中所述溶剂化物为丙酮溶剂化物或乙腈溶剂化物。

20.权利要求1至19中任一项的非达霉素的晶型在制备药物组合物中的用途。

21.药物组合物，其包含一种或多种权利要求1至19中任一项的非达霉素的晶型。

22.药物制剂，其包含一种或多种权利要求1至19中任一项的非达霉素的晶型或权利要求21的药物组合物，和至少一种药学上可接受的赋形剂。

23.制备药物制剂的方法，包括将一种或多种权利要求1至19中任一项的非达霉素的晶型或权利要求21的药物组合物，与至少一种药学上可接受的赋形剂混合。

24.权利要求1至19中任一项的非达霉素的晶型或权利要求21或22的药物组合物或制剂，其用作药物。

25.权利要求1至19中任一项的非达霉素的晶型或权利要求21或22的药物组合物或制剂，其用于治疗艰难梭菌(Clostridium difficile)感染或艰难梭菌相关的疾病。

26.治疗患有艰难梭菌感染或艰难梭菌相关的疾病的人的方法，包括给药治疗有效量的一种或多种权利要求1至19中任一项的非达霉素的晶型或权利要求21或22的药物组合物或制剂。