一种钙定性测试条及其制作方法
技术领域
本发明涉及一种钙定性测试条及其制作方法。
背景技术
钙是人体的重要营养元素。钙摄入不足容易引起骨质疏松、骨质增生等疾病,摄入过多则会影响其他微量元素的吸收,同时增加患肾结石的风险。
目前在临床上常用的钙检测方法有分光光度法、络合滴定法、原子吸收法等,这些方法都需要专门的仪器设备和专业人员操作。
欧洲发明专利EP2538224公开了一种用于分光光度法的钙定量测试条,它由含有化学试剂的试纸块和塑料基片组成。试剂块中的主要成分为碱性缓冲、显色剂邻-甲酚酞络合酮(OCPC),使用时通过分光光度计测试570nm下的反射光强度计算出钙离子浓度。发明专利98109147和02145466.3公开的钙定量测试条中,使用了OCPC和偶氮砷ⅲ(Arsenazoⅲ),这两类指示剂在测试钙离子过程中的颜色变化都是渐变式的,在医学决定水平的钙离子变化不显著,使用仪器可定量分析钙含量变化,但肉眼难以区分钙含量的变化。
发明内容
本发明要解决的技术问题是克服现有技术的缺陷,提供一种操作简便,成本低廉,不需要专业仪器和专业人士,可用于现场检测的人体液中钙离子含量水平的测试条。
本发明的另一个目的是提供上述试剂条的制备方法。
为了解决上述技术问题,本发明提供了如下的技术方案:
本发明一种钙定性测试条,包括上卡壳和下卡壳,所述上卡壳上设置有观察孔和加样孔,所述上、下卡壳之间设置有塑料基片,所述塑料基片上粘贴有试纸块,所述试剂块包括缓冲剂试纸块(其内含缓冲剂干式试剂)、络合剂试纸块(其内含络合剂干式试剂)和显色剂试纸块(其内含显色剂干式试剂);所述塑料基片上还粘贴有观察试纸条。上、下卡壳的作用是限制溶液快速流动。用户在加样孔中滴加定量的体液(尿液或血液),1分钟后可在观察孔处观察试纸条的颜色,试纸条显蓝色则表示钙过量,显红色则表示钙不足。所述塑料基片上还粘贴有吸水纸。所述吸水纸主要是吸收混合溶液,促进显色溶液的流动和呈色均匀性,可选用0.5mm-1.0mm厚的棉质吸水纸。
进一步地,所述观察试纸条为厚度0.1mm的滤纸,所述观察试纸条经过非离子表面活性剂溶液的浸泡。
进一步地,所述上卡壳上还设置有塑料突起。所述塑料突起可有效减慢溶液的扩散,使体液和缓冲剂、络合剂等干式试剂充分反应后接触显色剂试纸块。
所述塑料基片主要用于支撑试纸块。所述塑料基片的材料可选用聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)、聚乙烯(PE)、聚丙烯(PP)、聚氯乙烯(PVC)等材料,最优的材料是PVC,PVC的价格低廉且易于切割。塑料基片的厚度在0.1mm-0.5mm间,塑料基片厚度越厚机械刚性越强,塑料基片的优选厚度为0.3mm。塑料基片上涂布一层0.1mm厚的丙烯酸胶水,用于粘结试纸。
缓冲剂试纸块主要提供缓冲成分,缓冲剂可选用2-氨基-2-甲基-1-丙醇(AMP)、N-甲基-D-葡糖胺(MEG)。当在加样孔2中滴加一定量的人体液后,缓冲剂复溶后能使溶液的pH在10-11间。试纸条载体可选用纤维素滤纸、无纺布、尼龙、玻璃纤维等,优选为纤维素滤纸。
络合剂试纸块5主要提供络合成分,用于络合溶液中的钙离子。络合剂可使用乙二胺四乙酸(EDTA)和乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸(EGTA)。由于人体液中含有一定量的Mg2+,当使用EDTA时,EDTA也会和Mg2+络合,干扰测试;当使用EGTA时,EGTA镁配合物很不稳定,而EGTA钙配合物很稳定。因此,在测试含有的人体液中钙离子含量时,使用EGTA络合剂可有效提高选择性。络合剂首选EGTA。试纸条载体可选用纤维素滤纸、无纺布、尼龙、玻璃纤维等,材料应保证不含钙成分,优选为全纤维素滤纸。
显色剂试纸块6主要提供显色剂成分,显色剂结合Ca2+后会发生颜色突变。通常用于Ca2+滴定测试的显色剂主要有钙红指示剂、铬黑T、间氯安替比林等。钙红指示剂和铬黑T等显色剂往往也会和Mg2+显色,选择性不高。间氯安替比林对Ca2+的选择性较好。因此显色剂的首选为间氯安替比林,该显色剂灵敏度高(Ca2+<2mg/L),在碱性环境下显红色,遇到钙离子后显蓝色。间氯安替比林与纤维素等的结合能力较强,遇水后不易复溶释放。显色剂的载体优选直径0.5-0.8mm的玻璃纤维,玻璃纤维上附着的间氯安替比林遇水后释放迅速(小于5秒)。
观察试纸条8主要是提供显色剂溶液的流动通道。人体液溶解试纸中的缓冲剂、络合剂、显色剂后,溶液会根据钙离子的有无显示不同的颜色。用户通过观察试纸条的呈红色还是蓝色来判断钙离子水平。使用侧向流动的方法可有效解决试纸条显色不均匀的问题。为了提高显色的速度和均匀性,试纸厚度选用0.1mm。观察试纸条经过非离子表面活性剂溶液的浸泡。非离子表面活性剂可选用吐温系列(Tween-20,Tween-80等)和曲拉通系列(Triton X-45,Triton X-100,Triton X-114,Triton X-305等),优选Triton X-45。
进一步地,在测试全血时,全血中的红细胞会干扰颜色判断,在试纸块的顶部增加滤血垫,可有效去除红细胞的影响。
本发明在使用时,将测试条水平放置,取100微升人体液(尿液或血液)滴加到加样孔上,1分钟后观察观察孔处试纸的颜色,蓝色表示不缺钙,红色表示缺钙。
一种钙定性测试条的制作方法,包括以下步骤:
(1)在塑料基片上均匀涂布一层丙烯酸胶水,以此作为测试条的基片;
(2)将一试纸条载体置于浓度为60-100g/L的2-氨基-2-甲基-1-丙醇或者N-甲基-D-葡糖胺溶液中浸泡5秒钟,取出沥水后悬挂置于40℃下烘烤25分钟备用,得到缓冲剂试纸块;
(3)将一试纸条载体置于浓度为0.01-0.03M的乙二胺四乙酸或者乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸溶液中浸泡5秒钟,所述乙二胺四乙酸或者所述乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸溶液的浓度根据Ca2+浓度阈值设置,浸泡好的试纸条载体取出沥水后悬挂置于40℃下烘烤25分钟备用,得到络合剂试纸块;
(4)将一玻璃纤维试纸置于含有0.1-0.5%(质量分数)间氯安替比林、1-5%(质量分数)聚乙烯吡咯烷酮的显色剂溶液中浸泡5秒钟,浸泡好的滤纸取出沥水后悬挂置于70℃下烘烤25分钟备用,得到显色剂试纸块;
(5)将试纸条载体置于浓度0.5-1%(质量分数)的表面活性剂溶液中浸泡5秒钟,取出沥干后置于40℃下烘烤25分钟备用,得到观察试纸条;
(6)在塑料基片上按照顺序贴装观察试纸条、吸水纸、显色剂试纸块、络合剂试纸块和缓冲剂试纸块,然后将上述粘贴好的材料分切;最后将切好的测试条置于塑料卡壳中,经压壳后即制得。
进一步地,所述试纸条载体为纤维素滤纸、无纺布、尼龙或玻璃纤维中的一种。
进一步地,所述步骤(2)和所述步骤(3)采用同一试纸条载体,制得缓冲和络合剂试纸块。
本发明所达到的有益效果是:
(1)本发明产品操作简便,成本低廉,不需要专业仪器和专业人士,可用于现场定性判断人体液中钙离子水平;
(2)本发明产品采用的显色剂随钙离子含量可呈现红蓝两种颜色,红色为缺钙,蓝色表示不缺钙,易于肉眼判断。
(3)本发明产品采用的络合剂、显色剂均对Ca2+有良好的选择性,抗干扰能力强。
(4)本发明产品为干化学方法产品,稳定性好,不受环境温湿度的影响。
(5)本发明产品采用侧向流动设计,显色均匀性好,产品的一致性佳。
附图说明
附图用来提供对本发明的进一步理解,并且构成说明书的一部分,与本发明的实施例一起用于解释本发明,并不构成对本发明的限制。在附图中:
图1是本发明实施例1的结构示意图;
图2是本发明实施例2的结构示意图;
图3是本发明实施例3的结构示意图。
具体实施方式
以下结合附图对本发明的优选实施例进行说明,应当理解,此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本发明,并不用于限定本发明。
实施例1
如图1所示,本发明一种钙定性测试条,包括上卡壳3和下卡壳10,所述上卡壳3上设置有观察孔1和加样孔2,所述上、下卡壳(3、10)之间设置有塑料基片9,所述塑料基片9上粘贴有试纸块12,所述试剂块12包括缓冲剂试纸块4(其内含缓冲剂干式试剂)、络合剂试纸块5(其内含络合剂干式试剂)和显色剂试纸块6(其内含显色剂干式试剂);所述塑料基片9上还粘贴有观察试纸条8。上、下卡壳(3、10)的作用是限制溶液快速流动。用户在加样孔2中滴加定量的体液(尿液或血液),1分钟后可在观察孔处观察试纸条的颜色,试纸条显蓝色则表示钙过量,显红色则表示钙不足。
所述塑料基片9上还粘贴有吸水纸7。所述吸水纸7主要是吸收混合溶液,促进显色溶液的流动和呈色均匀性,所述吸水纸7选用0.8mm厚的棉质吸水纸。
所述观察试纸条8为厚度0.1mm的滤纸,所述观察试纸条经过非离子表面活性剂溶液的浸泡。
所述上卡壳上还设置有塑料突起11。所述塑料突起11可有效减慢溶液的扩散,使体液和缓冲剂、络合剂等干式试剂充分反应后接触显色剂试纸块6。
所述塑料基片9用于支撑试纸块12。所述塑料基片9的材料选用聚氯乙烯(PVC),聚氯乙烯的价格低廉且易于切割,塑料基片的厚度为0.3mm。塑料基片上涂布一层0.1mm厚的丙烯酸胶水,用于粘结试纸。
缓冲剂试纸块4提供缓冲成分,缓冲剂选用N-甲基-D-葡糖胺(MEG)。当在加样孔2中滴加一定量的人体液后,缓冲剂复溶后能使溶液的pH在10-11间。试纸条载体选用纤维素滤纸。
络合剂试纸块5提供络合成分,用于络合溶液中的钙离子。络合剂乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸(EGTA)。试纸条载体选用全纤维素滤纸。
显色剂试纸块6提供显色剂成分。显色剂使用间氯安替比林,该显色剂灵敏度高(Ca2+<2mg/L),在碱性环境下显红色,遇到钙离子后显蓝色。间氯安替比林与纤维素等的结合能力较强,遇水后不易复溶释放。显色剂的载体使用直径0.5-0.8mm的玻璃纤维,玻璃纤维上附着的间氯安替比林遇水后释放迅速(小于5秒)。
观察试纸条8是提供显色剂溶液的流动通道。人体液溶解试纸中的缓冲剂、络合剂、显色剂后,溶液会根据钙离子的有无显示不同的颜色。用户通过观察试纸条的呈红色还是蓝色来判断钙离子水平。使用侧向流动的方法可有效解决试纸条显色不均匀的问题。为了提高显色的速度和均匀性,试纸厚度选用0.1mm。观察试纸条经过非离子表面活性剂溶液的浸泡。非离子表面活性剂选用TritonX-45。
本发明在使用时,将测试条水平放置,取100微升人体液(尿液或血液)滴加到加样孔上,1分钟后观察观察孔处试纸的颜色,蓝色表示不缺钙,红色表示缺钙。
一种钙定性测试条的制作方法,包括以下步骤:
(1)在塑料基片上均匀涂布一层丙烯酸胶水,以此作为测试条的基片;
(2)将一试纸条载体置于浓度为60g/L的N-甲基-D-葡糖胺溶液中浸泡5秒钟,取出沥水后悬挂置于40℃下烘烤25分钟备用,得到缓冲剂试纸块;
(3)将一试纸条载体置于浓度为0.01M的乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸溶液中浸泡5秒钟,浸泡好的试纸条载体取出沥水后悬挂置于40℃下烘烤25分钟备用,得到络合剂试纸块;
(4)将一玻璃纤维试纸置于含有0.5%(质量分数)间氯安替比林、1%(质量分数)聚乙烯吡咯烷酮的显色剂溶液中浸泡5秒钟,浸泡好的滤纸取出沥水后悬挂置于70℃下烘烤25分钟备用,得到显色剂试纸块;
(5)将试纸条载体置于浓度0.5%(质量分数)的表面活性剂溶液中浸泡5秒钟,取出沥干后置于40℃下烘烤25分钟备用,得到观察试纸条;
(6)在塑料基片上按照顺序贴装观察试纸条、吸水纸、显色剂试纸块、络合剂试纸块和缓冲剂试纸块,然后将上述粘贴好的材料分切;最后将切好的测试条置于塑料卡壳中,经压壳后即制得。
所述试纸条载体为纤维素滤纸。
实施例2
如图2所示,本发明一种钙定性测试条,包括上卡壳3和下卡壳10,所述上卡壳3上设置有观察孔1和加样孔2,所述上、下卡壳(3、10)之间设置有塑料基片9,所述塑料基片9上粘贴有试纸块12,所述试剂块12包括缓冲剂试纸块4(其内含缓冲剂干式试剂)、络合剂试纸块5(其内含络合剂干式试剂)和显色剂试纸块6(其内含显色剂干式试剂);所述塑料基片9上还粘贴有观察试纸条8。上、下卡壳(3、10)的作用是限制溶液快速流动。用户在加样孔2中滴加定量的体液(尿液或血液),1分钟后可在观察孔处观察试纸条的颜色,试纸条显蓝色则表示钙过量,显红色则表示钙不足。
所述塑料基片9上还粘贴有吸水纸7。所述吸水纸7主要是吸收混合溶液,促进显色溶液的流动和呈色均匀性,所述吸水纸7选用0.8mm厚的棉质吸水纸。
所述观察试纸条8为厚度0.1mm的滤纸,所述观察试纸条经过非离子表面活性剂溶液的浸泡。
所述上卡壳上还设置有塑料突起11。所述塑料突起11可有效减慢溶液的扩散,使体液和缓冲剂、络合剂等干式试剂充分反应后接触显色剂试纸块6。
所述塑料基片9用于支撑试纸块12。所述塑料基片9的材料选用聚氯乙烯(PVC),聚氯乙烯的价格低廉且易于切割,塑料基片的厚度为0.3mm。塑料基片上涂布一层0.1mm厚的丙烯酸胶水,用于粘结试纸。
缓冲剂试纸块4提供缓冲成分,缓冲剂选用N-甲基-D-葡糖胺(MEG)。当在加样孔2中滴加一定量的人体液后,缓冲剂复溶后能使溶液的pH在10-11间。试纸条载体选用纤维素滤纸。
络合剂试纸块5提供络合成分,用于络合溶液中的钙离子。络合剂乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸(EGTA)。试纸条载体选用全纤维素滤纸。
显色剂试纸块6提供显色剂成分。显色剂使用间氯安替比林,该显色剂灵敏度高(Ca2+<2mg/L),在碱性环境下显红色,遇到钙离子后显蓝色。间氯安替比林与纤维素等的结合能力较强,遇水后不易复溶释放。显色剂的载体使用直径0.5-0.8mm的玻璃纤维,玻璃纤维上附着的间氯安替比林遇水后释放迅速(小于5秒)。
观察试纸条8是提供显色剂溶液的流动通道。人体液溶解试纸中的缓冲剂、络合剂、显色剂后,溶液会根据钙离子的有无显示不同的颜色。用户通过观察试纸条的呈红色还是蓝色来判断钙离子水平。使用侧向流动的方法可有效解决试纸条显色不均匀的问题。为了提高显色的速度和均匀性,试纸厚度选用0.1mm。观察试纸条经过非离子表面活性剂溶液的浸泡。非离子表面活性剂选用TritonX-45。
在测试全血时,全血中的红细胞会干扰颜色判断,在试纸块的顶部增加滤血垫14,可有效去除红细胞的影响。
本发明在使用时,将测试条水平放置,取100微升人体液(尿液或血液)滴加到加样孔上,1分钟后观察观察孔处试纸的颜色,蓝色表示不缺钙,红色表示缺钙。
一种钙定性测试条的制作方法,包括以下步骤:
(1)在塑料基片上均匀涂布一层丙烯酸胶水,以此作为测试条的基片;
(2)将一试纸条载体置于浓度为100g/L的2-氨基-2-甲基-1-丙醇溶液中浸泡5秒钟,取出沥水后悬挂置于40℃下烘烤25分钟备用,得到缓冲剂试纸块;
(3)将一试纸条载体置于浓度为0.03M的乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸溶液中浸泡5秒钟,浸泡好的试纸条载体取出沥水后悬挂置于40℃下烘烤25分钟备用,得到络合剂试纸块;
(4)将一玻璃纤维试纸置于含有0.1%(质量分数)间氯安替比林、5%(质量分数)聚乙烯吡咯烷酮的显色剂溶液中浸泡5秒钟,浸泡好的滤纸取出沥水后悬挂置于70℃下烘烤25分钟备用,得到显色剂试纸块;
(5)将试纸条载体置于浓度0.5%(质量分数)的表面活性剂溶液中浸泡5秒钟,取出沥干后置于40℃下烘烤25分钟备用,得到观察试纸条;
(6)在塑料基片上按照顺序贴装观察试纸条、吸水纸、显色剂试纸块、络合剂试纸块和缓冲剂试纸块,然后将上述粘贴好的材料分切;最后将切好的测试条置于塑料卡壳中,经压壳后即制得。
所述试纸条载体为尼龙。
实施例3
如图3所示,本发明一种钙定性测试条,包括上卡壳3和下卡壳10,所述上卡壳3上设置有观察孔1和加样孔2,所述上、下卡壳(3、10)之间设置有塑料基片9,所述塑料基片9上粘贴有试纸块12,所述试剂块12包括缓冲和络合剂试纸块13(其内含缓冲剂和络合剂干式试剂)和显色剂试纸块6(其内含显色剂干式试剂);所述塑料基片9上还粘贴有观察试纸条8。上、下卡壳(3、10)的作用是限制溶液快速流动。用户在加样孔2中滴加定量的体液(尿液或血液),1分钟后可在观察孔处观察试纸条的颜色,试纸条显蓝色则表示钙过量,显红色则表示钙不足。
所述塑料基片9上还粘贴有吸水纸7。所述吸水纸7主要是吸收混合溶液,促进显色溶液的流动和呈色均匀性,所述吸水纸7选用0.8mm厚的棉质吸水纸。
所述观察试纸条8为厚度0.1mm的滤纸,所述观察试纸条经过非离子表面活性剂溶液的浸泡。
所述上卡壳上还设置有塑料突起11。所述塑料突起11可有效减慢溶液的扩散,使体液和缓冲剂、络合剂等干式试剂充分反应后接触显色剂试纸块6。
所述塑料基片9用于支撑试纸块12。所述塑料基片9的材料选用聚氯乙烯(PVC),聚氯乙烯的价格低廉且易于切割,塑料基片的厚度为0.3mm。塑料基片上涂布一层0.1mm厚的丙烯酸胶水,用于粘结试纸。
缓冲和络合剂试纸块13提供缓冲成分和络合成分。缓冲剂选用N-甲基-D-葡糖胺(MEG)。当在加样孔2中滴加一定量的人体液后,缓冲剂复溶后能使溶液的pH在10-11间。试纸条载体选用纤维素滤纸。络合剂选用乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸(EGTA)。试纸条载体选用全纤维素滤纸。
显色剂试纸块6提供显色剂成分。显色剂使用间氯安替比林,该显色剂灵敏度高(Ca2+<2mg/L),在碱性环境下显红色,遇到钙离子后显蓝色。间氯安替比林与纤维素等的结合能力较强,遇水后不易复溶释放。显色剂的载体使用直径0.5-0.8mm的玻璃纤维,玻璃纤维上附着的间氯安替比林遇水后释放迅速(小于5秒)。
观察试纸条8是提供显色剂溶液的流动通道。人体液溶解试纸中的缓冲剂、络合剂、显色剂后,溶液会根据钙离子的有无显示不同的颜色。用户通过观察试纸条的呈红色还是蓝色来判断钙离子水平。使用侧向流动的方法可有效解决试纸条显色不均匀的问题。为了提高显色的速度和均匀性,试纸厚度选用0.1mm。观察试纸条经过非离子表面活性剂溶液的浸泡。非离子表面活性剂选用TritonX-45。
在测试全血时,全血中的红细胞会干扰颜色判断,在试纸块的顶部增加滤血垫14,可有效去除滤红细胞的影响。
本发明在使用时,将测试条水平放置,取100微升人体液(尿液或血液)滴加到加样孔上,1分钟后观察观察孔处试纸的颜色,蓝色表示不缺钙,红色表示缺钙。
一种钙定性测试条的制作方法,包括以下步骤:
(1)在塑料基片上均匀涂布一层丙烯酸胶水,以此作为测试条的基片;
(2)将一试纸条载体置于含有60g/L的N-甲基-D-葡糖胺、0.03M的乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸溶液中浸泡5秒钟,取出沥水后悬挂置于40℃下烘烤25分钟备用,得到缓冲和络合剂试纸块。
(3)将一玻璃纤维试纸置于含有0.5%(质量分数)间氯安替比林、1%(质量分数)聚乙烯吡咯烷酮的显色剂溶液中浸泡5秒钟,浸泡好的滤纸取出沥水后悬挂置于70℃下烘烤25分钟备用,得到显色剂试纸块;
(4)将试纸条载体置于浓度0.5%(质量分数)的表面活性剂溶液中浸泡5秒钟,取出沥干后置于40℃下烘烤25分钟备用,得到观察试纸条;
(5)在塑料基片上按照顺序贴装观察试纸条、吸水纸、显色剂试纸块、络合剂试纸块和缓冲剂试纸块,然后将上述粘贴好的材料分切;最后将切好的测试条置于塑料卡壳中,经压壳后即制得。
所述试纸条载体为纤维素滤纸。
最后应说明的是:以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,对于本领域的技术人员来说,其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。