CN104764652A - 一种适用于鲜烟叶多酚含量检测的干燥方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种适用于鲜烟叶多酚含量检测的干燥方法，其特征在于，具体包括如下步骤：(1)采集新鲜烟叶，用锡箔纸包好后放入冰箱调节速冻档次进行速冻3-4小时，再转入冷冻档次冷冻30天后取出，加入液氮，快速冷冻30分钟之后取出；(2)液氮速冻后，把样品放入冷冻干燥机进行冷冻，干燥以除去烟叶水分。本发明的鲜烟叶干燥方法保留了其多酚较高的含量，能克服现有烘箱干燥和液氮速冻后冷冻干燥的不足，是一种简单易行、精确、科学的技术方法，解决了大量样品保存、多酚易氧化的技术难题，提高了检测效率，适用于鲜烟叶多酚含量检测，有利于掌握鲜烟叶的质量情况，适用于烟草的科学研究和检测。

Description

一种适用于鲜烟叶多酚含量检测的干燥方法

技术领域

本发明属于烤烟化学技术领域，具体涉及一种适用于鲜烟叶多酚含量检测的干燥方法。

背景技术

烟叶富含化学成分，人们目前从烟草中鉴定出来的单体化学物质就超过3000多种，而且还有许多成分尚未鉴定出来。烟草除主要用于生产卷烟供吸食外，还可从中提取多种有利用价值的化学成分，它们中许多都是重要的生化医药原料，如多酚类(绿原酸、芸香苷等)、茄尼醇、烟碱、VE等，都具有广泛的用途和较高的经济价值。作为一种高产的天然植物资源，烟草有益于健康的潜在用途今后将受到较大关注，因此，除作为卷烟消费外，加强烟草其它用途的研究也具有重要意义。

多酚是分子中具有多个羟基酚类植物成分的总称，植物体中的酚类物质种类甚多，分布极广，含量丰富。由于酚类物质主要为碳水化合物代谢的衍生产物，故称为次生植物物质。多酚在植物体的叶、木、皮、壳和果肉中均有存在。多酚的独特结构赋予了它一系列独特的化学性质，使其具有良好抗氧化功能，还具有强化血管壁、促进肠胃消化、降血脂、增强人体免疫力、防动脉硬化、血栓形成，及利尿、降血压、抑制细菌与癌细胞生长等作用，是自然界和人类的“健康卫士”。

植物(叶片、果蔬)在采收后，当有机械性损伤发生或处于异常环境时，内部中原有的氧化还原平衡被破坏，导致氧化产物积累，造成植物变色。这类反应的速度非常快，一般需要和空气接触，由酶催化，因此称为酶促褐变。由于采收的鲜烟叶多酚易在多酚氧化酶作用下发生酶促褐变，因此，采用合适的干燥方法，对于多酚含量的准确测定显得非常重要。

目前，对于鲜烟叶多酚含量测定前的干燥方法多采用烘箱干燥和液氮速冻后冷冻干燥，还有少部分样品量较大，采用了先液氮速冻后放置冰箱保存，再于冷冻干燥机冷冻干燥。

烘箱干燥，即样品于105℃下杀青10～15min后，于60～70℃下烘干，磨碎，过筛后保存，用于多酚测定。采用烘箱干燥，杀青温度高，环境温度异常使采收的鲜烟叶内部原有的氧化还原平衡被破坏，多酚氧化成醌，发生棕色化反应(酶促褐变)，因此，采用此方法干燥，多酚含量损失，不利于多酚含量的准确测量。

液氮速冻后冷冻干燥，即放入液氮罐速冻，再于冷冻干燥机冷冻干燥处理，最后研磨成粉样。此方法先用液氮迅速固定鲜烟叶中多酚成分，再放置于冷冻干燥机抽真空进行干燥，对于样品成分的保持较好，但此方法不利于样品的大量保存。由于冷冻干燥机干燥样品至少需要两天，且每次干燥数量较少，许多样品干燥不及需放置在液氮罐中保存，但液氮罐空间较小，放置样品稍多就不利于取出，因此，液氮罐速冻样品数量太有限。

因此，通过我们的研究，发明一种保持多酚含量的鲜烟叶干燥方法，即利于多酚含量的准确测量，又可应用于大批量样品。经文献检索，国内外未见与本发明相同的公开报道。

发明内容

针对现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种适用于鲜烟叶多酚含量检测的干燥方法，该方法操作简单、高效、精确度高，既利于多酚含量的保持，又便于样品的大量保存的鲜烟叶干燥方法。

本发明采取的技术方案为：

一种适用于鲜烟叶多酚含量检测的干燥方法，其特征在于，具体包括如下步骤：

(1)采集新鲜烟叶，用锡箔纸包好后放入冰箱调节速冻档次进行速冻3-4小时，再转入冷冻档次冷冻30天后取出，加入液氮，快速冷冻30分钟之后取出；

(2)液氮速冻后，把样品放入冷冻干燥机进行冷冻，干燥以除去烟叶水分。

进一步的，所述步骤(1)中速冻档的温度设置为-20℃～24℃低温。

进一步的，所述步骤(1)中冷冻档的温度设置为-15℃～-18℃低温，可贮存30天。

进一步的，所述步骤(1)中加入液氮，快速冷冻30分钟即可取出。

进一步的，所述步骤(2)中冷冻干燥机控制温度为-50℃以下保持24-48h，冷冻干燥后磨碎，过筛后保存，用于多酚的测定。

本发明的有益效果为：

本发明的鲜烟叶干燥方法得到的多酚含量较高，避免了烘箱干燥温度高使烟叶发生棕色化反应，多酚含量损失；本发明的方法先通过调节冰箱速冻档控制-20℃～24℃低温速冻3-4小时，烟叶先通过速冻可以迅速固定鲜烟叶中的多酚成分；再转入冷冻档次冷冻，控制-15℃～-18℃低温冷冻30天，即可长时间保存，又较好的保留了烟叶原有的多酚类物质；然后，液氮速冻30min，再转入冷冻干燥机进行冷冻干燥，可节省冻干机的操作时间。该发明方法避免多酚氧化，保留了其较高的含量，微生物和酶的活性也得到了较好的保留，能克服现有烘箱干燥和液氮速冻后冷冻干燥的不足，是一种简单易行、精确、科学的技术方法。

本发明的优势在于同时解决了大量样品保存和多酚易氧化的技术难题，采用冰箱先速冻是本发明专利的关键，速冻可以迅速固定鲜烟叶中的多酚成分，且速冻后再转入冷冻，可放置冷冻贮藏30天，利于样品的大量保存，为后续的冷冻干燥机干燥样品提供了充足的时间，避免了液氮罐空间较小，液氮罐速冻样品数量有限的技术问题，便于及时干燥，及时投入检测，提高了检测效率。

本发明的干燥方法适用于鲜烟叶多酚含量检测，不仅测定结果准确，而且处理后烟叶样品呈鲜绿色，与鲜烟叶颜色一致；同时最大限度地保持了烟叶的多酚物质含量和香气成分含量，有利于掌握鲜烟叶的质量情况，适用于烟草的科学研究和检测。

具体实施方式

为实现本发明目的，结合案例进一步阐述本发明内容及实施方式：

实施案例：采用半叶法，均以液氮速冻后冷冻干燥(对于样品成分的保持较好)为对照设置3个试验(见表1)。

试验1：采集实验农场5片新鲜烟叶(均匀、完整、无病斑)，快速去除主脉，每片的一半分别用锡箔纸包裹，分别记作DA1、DA2、DA3、DA4、DA5(5次重复)，用液氮速冻，再于冷冻干燥机进行冷冻干燥，干燥后取出，磨碎，过筛后保存样品，用于多酚的测定；每片的另一半分别记作X1、X2、X3、X4、X5(5次重复)，及时放入烘箱于105℃下杀青10～15min后，于60～70℃下烘干，磨碎，过筛后保存，用于多酚的测定。

试验2：采集实验农场5片新鲜烟叶(均匀、完整、无病斑)，快速去除主脉，每片的一半分别用锡箔纸包裹，分别记作DB1、DB2、DB3、DB4、DB5，余下步骤操作方法同试验1处理DA；每片的另一半也快速分别用锡箔纸包裹，分别记作Y1、Y2、Y3、Y4、Y5，用液氮速冻，之后放置冰箱保存1天，再于冷冻干燥机冷冻干燥，干燥后保存样品，用于多酚的测定。

试验3：需采集实验农场5片新鲜烟叶(均匀、完整、无病斑)，快速去除主脉，每片的一半分别用锡箔纸包裹，分别记作DC1、DC2、DC3、DC4、DC5，余下步骤操作方法同试验1处理DA；每片的另一半也快速分别用锡箔纸包裹，分别记作Z1、Z2、Z3、Z4、Z5，冰箱速冻后转入冷冻，30天后取出，放入液氮30分钟，再于冷冻干燥机冷冻干燥(即本发明方法)，干燥后保存样品，用于多酚的测定。

试验4：采集实验农场5片新鲜烟叶(均匀、完整、无病斑)，快速去除主脉，每片的一半分别用锡箔纸包裹，分别标记，冰箱速冻后转入冷冻，30天后取出，放入液氮30分钟，再于冷冻干燥机冷冻干燥(即本发明方法)，干燥后保存样品，用于多酚的测定；每片的另一半分别标记，及时放入烘箱于105℃下杀青10～15min后，于60～70℃下烘干，磨碎，过筛后保存，用于多酚的测定。

表1干燥方法试验设置

不同干燥方法主要多酚类物质含量见表2、3、4，对试验1进行配对样本T检验可知，新绿原酸、绿原酸、咖啡酸、芸香苷，相伴概率值p分别为0.002、0.001、0.010、0.006，比显著性水平0.05小，达到显著水平，结合表2，说明烘箱干燥(处理X)各多酚含量明显比液氮速冻后冷冻干燥(对照DA)要低。

对试验2进行配对样本T检验可知，新绿原酸、绿原酸、咖啡酸、芸香苷，相伴概率值p分别为0.003、0.015、0.041、0.010，小于0.05，达到显著水平，结合表3，说明液氮速冻后放置冰箱保存，再于冷冻干燥机冷冻干燥(处理Y)各多酚含量要比液氮速冻后冷冻干燥(对照DB)显著低。

对试验3进行配对样本T检验可知，新绿原酸、绿原酸、咖啡酸、芸香苷，相伴概率值p分别为0.428、0.660、0.449、0.988，大于0.05，未达到显著水平，结合表4，可以看出，本发明方法(处理Z)各多酚含量与液氮速冻后冷冻干燥(对照DC)差异不显著，数值较接近。

对试验4进行配对样本T检验可知，新绿原酸、绿原酸、咖啡酸、芸香苷，相伴概率值p分别为0.006、0.002、0.019、0.001，比显著性水平0.05小，达到显著水平，结合表5，可以看出，本发明方法(处理ZZ)各多酚含量明显高于烘箱干燥(处理XX)。

表2不同干燥方法(DA、X)主要多酚类物质含量(单位：％)

表3不同干燥方法(DB、Y)主要多酚类物质含量(单位：％)

表4不同干燥方法(DC、Z)主要多酚类物质含量(单位：％)

表5不同干燥方法(XX、ZZ)主要多酚类物质含量(单位：％)

通过以上分析可知，烘箱干燥方法、液氮速冻后放置冰箱保存，再于冷冻干燥机冷冻干燥方法多酚含量明显低于液氮速冻后冷冻干燥方法(对照)。原因为烘箱干燥温度高使烟叶发生棕色化反应，多酚含量损失；液氮速冻后放置冰箱保存，再于冷冻干燥机冷冻干燥方法，液氮后在放置冰箱，温度相对升高，烟叶会稍“解冻”，不利于多酚含量保持。

而本发明方法各多酚含量与对照差异不显著，且也明显高于烘箱干燥。本发明方法使烟叶先速冻，保持烟叶多酚含量，再转入冷冻，干燥前放置于液氮中，便于冷冻干燥。因此，本发明方法提供了一种大批量鲜烟叶样品的冷冻干燥方法，科学高效，简单易行。

以上所述并非是对本发明的限制，应当指出：对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明实质范围的前提下，还可以做出若干变化、改型、添加或替换，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (5)

1.一种适用于鲜烟叶多酚含量检测的干燥方法，其特征在于，具体包括如下步骤：

(1)采集新鲜烟叶，用锡箔纸包好后放入冰箱调节速冻档次进行速冻3-4小时，再转入冷冻档次冷冻30天后取出，加入液氮，快速冷冻30分钟之后取出；

(2)液氮速冻后，把样品放入冷冻干燥机进行冷冻，干燥以除去烟叶水分。

2.根据权利要求1所述一种适用于鲜烟叶多酚含量检测的干燥方法，其特征在于，所述步骤(1)中速冻档的温度设置为-20℃～24℃低温。

3.根据权利要求1所述一种适用于鲜烟叶多酚含量检测的干燥方法，其特征在于，所述步骤(1)中冷冻档的温度设置为-15℃～-18℃低温，可贮存30天。

4.根据权利要求1所述一种适用于鲜烟叶多酚含量检测的干燥方法，其特征在于，所述步骤(1)中加入液氮，快速冷冻30分钟即可取出。

5.根据权利要求1所述一种适用于鲜烟叶多酚含量检测的干燥方法，其特征在于，所述步骤(2)中冷冻干燥机控制温度为-50℃以下保持24-48h，冷冻干燥后磨碎，过筛后保存，用于多酚的测定。