CN104761748B

CN104761748B - 双模板分子印迹固相萃取膜的制备方法及所制膜的应用

Info

Publication number: CN104761748B
Application number: CN201510022941.XA
Authority: CN
Inventors: 高文惠; 王姣姣
Original assignee: Hebei University of Science and Technology
Current assignee: Hebei University of Science and Technology
Priority date: 2014-08-12
Filing date: 2015-01-16
Publication date: 2018-04-03
Anticipated expiration: 2035-01-16
Also published as: CN104151596A; CN104761748A

Abstract

本发明公开了一种双模板分子印迹固相萃取膜的制备方法及所制膜的应用，其中的制备方法包括溶解、预聚合、聚合、模板洗脱、干燥等步骤，是以一种三唑类化合物和一种菊酯类化合物作为双模板物质，以α‑甲基丙烯酸为功能单体，尼龙66作为基膜，合成对三唑类物质和菊酯类物质具有特异性识别的分子印迹固相萃取膜。本发明的制备过程简单，易于控制，所制双模板分子印迹固相萃取膜稳定性好、强度高，形态规整，对三唑类和菊酯类物质的吸附效率高，可直接应用，不需要研磨、装柱等繁琐的过程。本发明适用于制备双模板分子印迹固相萃取膜，所制产品可进一步用于食品、饲料及其它样品中三唑类和菊酯类农药残留分析时样品的净化和富集。

Description

双模板分子印迹固相萃取膜的制备方法及所制膜的应用

技术领域

本发明属于化学合成、分析化学及超分子化学领域，涉及分子印迹固相萃取膜的制备及应用，具体地说是一种双模板分子印迹固相萃取膜的制备方法及所制膜的应用。

背景技术

三唑酮、戊唑醇、联苯三唑醇和烯唑醇等均属三唑类杀菌剂，其为广谱内吸杀菌剂，主要用于防治植物病害，对病原微生物有杀死作用或抑制生长作用，因其高效、广谱、低毒以及长效性而广泛地应用于农作物等病虫害的防治，同时该类农药在农作物、土壤和水体中的残留也给生物安全和人体健康带来了负面影响。

胺菊酯、三氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯和氰戊菊酯等都属于拟除虫菊酯类杀虫剂，是高效、广谱、速效杀虫剂、杀螨剂，以触杀和胃毒作用为主，无内吸作用。它们能有效地防治棉花、果树、蔬菜、大豆等作物上的多种害虫，也能防治动物体上的寄生虫。

按中国农药毒性分级标准，三唑类杀菌剂属于低毒杀菌剂，大鼠急性经口LD₅₀﹥4000mg/kg，雄小鼠急性经口LD₅₀约为2000mg/kg；菊酯类杀虫剂属于中等毒杀虫剂，大鼠急性经口50mg/kg<LD₅₀<500mg/kg。超标使用三唑类杀菌剂、菊酯类杀虫剂必然会导致食品、饲料等的安全隐患。

在进行安全分析时，由于食品和饲料等样品的组成比较复杂，被分析物处于痕量状态，易受到干扰，样品前处理成为食品安全分析的关键步骤。传统的食品、饲料等样品前处理技术主要有液液萃取、索氏提取技术等，但其存在处理时间长、操作繁琐、回收率不稳定、选择性差、有机溶剂用量大，污染环境、易乳化、不易实现自动化等缺点。随着科学技术的进步，分子印迹固相萃取技术应运而生，虽能克服原来提取技术存在的部分缺点，如操作简便，选择性强等，但传统分子印迹固相萃取技术仍存在一些缺点，如所得印迹聚合物颗粒较大、形状不均匀、研磨过程中容易破坏聚合物结构而造成印迹效率不高等。

分子印迹膜（molecularly imprinted membrane，MIM）是一种将分子印迹技术与膜分离技术相结合，制备出的具有特异选择性的分离膜，是分子印迹新的发展方向之一。MIM是一种结合了微孔筛分作用和分子印迹特异性吸附能力的膜。除了筛分作用外，由于膜对目标分子的特异性吸附及由此产生的目标分子对扩散通道更高的接近能力，MIM能传输特定的底物分子。人工合成的MIM膜可以分为三种基本类型：无孔、微孔和大孔膜。对于无孔膜，溶液扩散是其实现传输的主因，而后两种膜，对物质的传输和分离主要取决于孔的筛分作用。这些孔（通道）的表面或内部如果存在特异性结合位点将有利于提高传输的选择性。

人工合成的分子印迹萃取膜主要是由单模板物质合成的，但是合成的分子印迹萃取膜只能特异性识别一类物质，选择性单一，广适性差。目前，有极少数分子印迹萃取膜是由双模板物质合成的，但是这两种模板物质或是化学性质相似，或者是同系物，或是结构类似物，在进行聚合的过程中，分子间的斥力小，相互之间的干扰小，易于发生聚合反应，形成分子印迹萃取膜，但是这种萃取膜的选择性单一，只能同时识别化学性质和结构相似的单类物质，不能同时识别化学性能相差较大的两类物质，而在食品和饲料等农残分析的过程中，残留的物质成分多且复杂，农残的化学结构、性能之间相差较大，因而这种分子印迹萃取膜虽是由双模板物质合成的，但是其选择性和广适性还是受到了很大的限制。

发明内容

本发明要解决的技术问题，是提供一种双模板分子印迹固相萃取膜的制备方法，包括溶解、预聚合、聚合、模板洗脱、干燥等步骤，是以一种三唑类化合物和一种菊酯类化合物作为双模板物质，并以α-甲基丙烯酸为功能单体，尼龙66作为基膜，合成对三唑类和菊酯类物质具有特异性识别的分子印迹固相萃取膜，本发明制备的印迹膜稳定性好、强度高，形态规整，对三唑类和菊酯类物质的吸附效率高，可直接应用，不需要研磨、装柱等繁琐的过程；本发明的制备过程简单，易于控制。

本发明的另外一个目的，是提供上述方法所制双模板分子印迹固相萃取膜的一种应用。

为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：

一种双模板分子印迹固相萃取膜的制备方法，按照如下步骤顺序进行：

⑴溶解

取一种三唑类化合物，和一种菊酯类化合物，作为双模板物质，溶于致孔剂中，加入功能单体，得A；其中，

所述三唑类化合物与所述菊酯类化合物间的摩尔比为1-2：1；

所述功能单体的摩尔量，与所述三唑类化合物、菊酯类化合物的总量间的摩尔比为2-6：1；

所述双模板物质与致孔剂的重量体积比为1：40-75 mmol/mL；

⑵预聚合

向A中加入交联剂乙二醇二甲基丙烯酸酯和引发剂偶氮二异丁腈，于频率200Hz下超声15-60min，得B；

⑶聚合

向B中加入基膜，将基膜取出后放入载玻片中夹紧并置于容器中，通入高纯氮气至充满容器后，抽真空，将容器密封后得C；

将C置于55-70℃下，水浴反应12-24h，得D；

当水浴反应的时间超过24h,由于反应时间过长，导致基膜损坏，降低其使用寿命；当反应时间小于12h，由于聚合不完全，基膜上的聚合物易脱落；

⑷模板洗脱

将D用甲醇-乙酸混合溶液脱除双模板物质，然后用甲醇浸泡除去过量乙酸，得E；

⑸干燥

将E于30-45℃下烘干，得目标产品，即双模板分子印迹固相萃取膜。

作为本发明的一种限定：

①所述三唑类化合物为联苯三唑醇；

②所述菊酯类化合物为三氟氯氰菊酯；

③所述功能单体为α-甲基丙烯酸；

④所述致孔剂为乙腈；

⑤所述交联剂，与所述三唑类化合物、菊酯类化合物的总量间的摩尔比为40-60：1；

当交联剂的用量过大时，键合在基膜上的聚合物过于致密，模板物质不易洗脱，影响萃取膜的吸附效果，当交联剂的用量过小，则聚合在基膜上的聚合物网络结构机械强度低，易损坏，使用寿命短；

⑥所述引发剂，与所述三唑类化合物与菊酯类化合物的总量间的摩尔比为0.8-1.5：1；

引发剂的用量过大，会浪费试剂，引发剂的用量过小，则不能引发聚合反应；

⑦在所述步聚（3）中将基膜取出后且置于载玻片前，要将所述基膜于频率200Hz下超声20-70min；

⑧所述基膜为尼龙66。

本发明还有一种限定，所述甲醇-乙酸混合溶液，以体积比为9:1的甲醇与乙酸配得。

本发明的制备方法作为一个整体，具有制备步骤简单，过程易于控制等优点，制备的双模板分子印迹固相萃取膜具有对三唑类和菊酯类物质特异性识别位点，选择性好，吸附量较大。

本发明还提供了上述制备方法所制双模板分子印迹固相萃取膜的一种应用，它用于吸附三唑类物质和菊酯类物质。

作为限定，所述的双模板分子印迹固相萃取膜在用于吸附三唑类物质和菊酯类物质前，先用甲醇润湿，再用水淋洗。

作为进一步限定，在对食品、饲料中三唑类和菊酯类农药残留分析时，所制双模板分子印迹固相萃取膜用于样品的净化和残留农药的富集。

由于采用了上述的技术方案，本发明与现有技术相比，所取得的技术进步在于：

本发明提供的双模板分子印迹固相萃取膜的制备方法，包括溶解、预聚合、聚合、模板洗脱、干燥等步骤，合成了对三唑类和菊酯类物质具有特异性识别的分子印迹固相萃取膜，该膜兼具分子印迹和膜分离技术两方面优点：

①该膜稳定性好、强度高，形态规整，膜上具有特异性的空间位点，可实现特异性吸附；

②该膜可同时对三唑类和菊酯类物质进行吸附，吸附效率高，吸附量较大；

③该膜可直接应用，不需要研磨、装柱等繁琐的过程；

④本发明的制备过程简单，易于控制，成本低，易于工业化生产。

本发明适用于制备双模板分子印迹固相萃取膜，所制膜产品可进一步应用于针对食品、饲料及其它样品中的三唑类和菊酯类农药残留进行分析时对样品的净化和富集。

附图说明

图1为联苯三唑醇的化学结构式；

图2为三氟氯氰菊酯的化学结构式；

图3为本发明实施例1中双模板分子印迹固相萃取膜印迹原理示意图；

图4为非模板分子印迹聚合体系的红外吸收光谱图；

图5为分子印迹聚合体系的红外吸收光谱图；

图6a和图6b分别为空白尼龙66膜不同放大倍数下的扫描电子显微镜（SEM）图；

图7a和图7b分别为实施例1中步骤（13）所制产物不同放大倍数下的扫描电子显微镜（SEM）图；

图8为实施例1制备的双模板分子印迹固相萃取膜的选择吸附性能图；

图9为白菜样品提取液的高效液相色谱图；

图10为白菜样品提取液过膜后洗脱液的高效液相色谱图；

图11为白菜样品加标提取液通过实施例1中所制膜后洗脱液的高效液相色谱图。

图中：1-三唑酮，2-戊唑醇，3-联苯三唑醇，4-烯唑醇，5-胺菊酯，6-三氟氯氰菊酯，7-高效氯氰菊酯，8-氰戊菊酯。

本发明下面将结合说明书附图和具体实施例作进一步详细说明。

具体实施方式

下述实施例中所使用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法。

下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业渠道得到。

实施例1 一种双模板分子印迹固相萃取膜的制备方法

本实施例中双模板分子印迹固相萃取膜的制备方法，按照如下的步骤顺序进行：

（11）溶解

取1mol联苯三唑醇和1mol三氟氯氰菊酯，组成双模板物质，溶于150L致孔剂乙腈中，再加入10mol功能单体α-甲基丙烯酸，得A1；

（12）预聚合

向A1中加入100mol交联剂乙二醇二甲基丙烯酸酯和2mol引发剂偶氮二异丁腈，于频率200Hz下超声30min，得B1；

（13）聚合

向B1中加入基膜尼龙66，在频率200Hz下超声45min后将基膜取出，放入两片载玻片之间，夹紧后置于容器中，通入高纯氮气至充满容器后，抽真空，将容器密封后得C1；

将C1置于65℃下，水浴反应24h，得D1；

（14）模板洗脱

用体积比为9:1的甲醇-乙酸混合溶液，将D1脱除模板物质，然后用甲醇浸泡除去过量乙酸，得E1；

（15）干燥

将E1于45℃下烘干，即得双模板分子印迹固相萃取膜；

本实施例制备方法简单，过程易于控制，成本低，膜稳定性好、强度高，形态规整，膜上具有特异性的空间位点，可实现特异性吸附。

实施例2-6 双模板分子印迹固相萃取膜的制备方法

实施例2-6分别为一种双模板分子印迹固相萃取膜的制备方法，制备过程与实施例1相似，不同之处仅在于：相应的技术参数有所不同，具体结果见表1。

表1 双模版分子印迹固相萃取膜技术参数

实施例2-6制备方法简单，过程易于控制，成本低，膜稳定性好、强度高，形态规整，膜上具有特异性的空间位点，可实现特异性吸附。

实施例7 双模板分子印迹固相萃取膜的表征

为了更好地说明实施例1中所制备的双模板分子印迹固相萃取膜的结构特征，本实施例对实施例1中步骤（12）得到的预聚合体系进行了红外光谱，并对实施例1中步骤（13）得到的分子印迹膜进行了扫描电子显微镜（SEM）测试：

⑴红外光谱表征

为了确定分子印迹聚合体系形成了氢键，利用红外光谱对非模板预聚合体系以及实施例1中步骤（12）得到的预聚合体系进行了表征，结果分别如图4和图5所示。

图4中，1638cm^-1处的峰是由于MAA分子（α-甲基丙烯酸）中C=C的存在。

图5中可以明显看到三氟氯氰菊酯和联苯三唑醇中的烷基、羰基和苯环的特征峰。如2965cm^-1是的烷基伸缩振动峰，1696cm^-1是三氟氯氰菊酯中羰基的伸缩振动峰，且由于氢键的形成而使该吸收峰向低波数方向移动。1600 cm^-1和1486cm^-1之间的峰为苯环的振动吸收峰。而且2253cm^-1处的吸收峰较强，它的出现是MAA中-COOH与三氟氯氰菊酯和联苯三唑醇中C=O和C≡N基团形成较强氢键的有力证据。

⑵SEM表征

通过扫描电镜对空白膜尼龙66和实施例1中步骤（13）得到的印迹膜进行了表征，结果分别如图6a和6b及图7a和7b所示。

由图6a和图7a对比可看出，分子印迹膜表面明显的被聚合物附着，但仍留有基膜本身的通道，进一步对比图6b和图7b可知分子印迹聚合物与基膜的纤维结合在一起，使基膜本身的通道变窄，印证了实施例8中甲醇通量下降的现象，同时由实施例8可知，分子印迹聚合物使得膜对联苯三唑醇和三氟氯氰菊酯的吸附量大大提高。

考虑到印迹条件和已知原料的结构特点（联苯三唑醇化学结构式如图1所示，三氟氯氰菊酯化学结构式如图2所示），双模板分子印迹固相萃取膜的合成原理如图3所示，图中表示两类模板分子和功能单体在交联剂的作用下，通过氢键预聚合，后在N₂环境下，通过水浴加热，聚合形成分子印迹膜材料，再用甲醇-乙酸溶液洗脱模板后形成带有空腔结构的分子印迹膜，可用于三唑类和菊酯类农药的吸附。

实施例8 双模板分子印迹固相萃取膜的吸附性能研究

本实施例对实施例1制备的双模板分子印迹固相萃取膜进行了甲醇通量、最大吸附量和选择吸附能力的测定：

⑴甲醇通量的测定

将实施例1制备的印迹膜和以PVDF为基膜制备的印迹膜进行了甲醇通量的测定，结果见表2，其中，以PVDF基膜制备印迹膜的方法与实施例1相同，不同之处仅在于：在聚合步骤中，加入基膜PVDF后不进行超声，而是浸泡2min。

水浴加热条件下的实验与实施例1相同，真空干燥箱聚合条件下的实验，即聚合步骤中，聚合在真空干燥箱的环境下进行，其它的步骤参数与实施例1相同。

表2 不同基膜和不同聚合方式下分子印迹膜的甲醇通量

上述结果表明，空白基膜的甲醇通量相对较大，聚合后，印迹膜的通量下降。因为，修饰后在基膜表面形成了一层印迹层，使得膜表面更加致密，导致了甲醇通量的下降。

⑵最大吸附量的测定

将实施例1制备的印迹膜和以PVDF为基膜制备的印迹膜进行了三氟氯氰菊酯和联苯三唑醇的最大吸附量测定，即用1mL含有一定浓度的三氟氯氰菊酯和联苯三唑醇的样品溶液做渗透实验，渗透通过MIM（有效直径2.5cm），流速用真空泵控制。

以有机膜为基膜制备的印迹膜和以PVDF为基膜制备的印迹膜在使用前分别先用5mL水过膜，然后用5mL甲醇活化。样品溶液过膜后，用5mL水淋洗，最后用3mL甲醇洗脱，洗脱液用甲醇定容至3mL，供高效液相色谱仪（HPLC）检测。

HPLC在210nm下检测，C₁₈柱（4.6mm×250 mm，5μm）分离，进样体积为20μL，流速1mL/min，流动相组成为甲醇-水，体积比为80:20，其吸附性能用HPLC在210nm下测定，三氟氯氰菊酯和联苯三唑醇的吸附量由下式计算：

三氟氯氰菊酯：Y=124611.15x-31072.63，r=0.9997；

联苯三唑醇：Y=79635.27x-1326.79，r=0.9993

其中：X表示被测物浓度（即吸附量），μg/mL；Y表示峰面积。

具体结果见表3，其中，PVDF基膜制备印迹膜的方法与实施例1相似，不同之处仅在于：在聚合步骤中，加入基膜PVDF后不进行超声处理，而是浸泡2min。

表3 不同基膜和不同聚合方式下分子印迹膜的吸附量

上述结果表明，以尼龙66为基膜，采用水浴加热的方式聚合的分子印迹膜对三氟氯氰菊酯和联苯三唑醇的吸附量较大；而采用水浴加热聚合方式下，对三氟氯氰菊酯和联苯三唑醇的吸附能力，以尼龙66作为基膜制备的印迹膜比以PVDF作为基膜制备的印迹膜的吸附量大。

⑶选择性吸附能力的测定

为了进一步研究实施例1制备的印迹膜对菊酯类和三唑类物质的选择吸附性能，将实施例1制备的印迹膜通过含有菊酯类和三唑类农药的渗透溶液，即用1mL含有一定浓度的三唑酮、戊唑醇、联苯三唑醇、烯唑醇、胺菊酯、三氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯和氰戊菊酯的甲醇溶液渗透通过MIM（有效直径2.5cm），流速用真空泵控制。

其中，实施例1制备的印迹膜在使用前分别先用5mL水过膜，然后用5mL甲醇活化。渗透溶液过膜后，用5mL水淋洗，最后用3mL甲醇洗脱，洗脱液用甲醇定容至3mL，供高效液相色谱仪（HPLC）检测。

HPLC在210nm下检测，C₁₈柱（4.6mm×250mm，5μm）分离，进样体积为20μL，流速lmL/min，流动相组成为甲醇-水，体积比为80:20。三唑酮、戊唑醇、联苯三唑醇、烯唑醇、胺菊酯、三氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯和氰戊菊酯的吸附量由下式计算：

三唑酮：Y=66237.34x+59637.24，r=0.9985；

戊唑醇：Y=50124.82x+67453.21，r=0.9991；

联苯三唑醇：Y=64237.19x+54213.71，r=0.9990；

烯唑醇：Y=23164.92x+64531.60，r=0.9973；

胺菊酯：Y=99581.64x+60259.36，r=0.9987；

三氟氯氰菊酯：Y=55347.94x+98790.35，r=0.9993；

高效氯氰菊酯：Y=56229.19x+92137.23，r=0.9967；

氰戊菊酯：Y=21863.99x+8495.72，r=0.9959；

具体的结果见图8。

由图8可知，分子印迹膜对八种农药均有吸附，吸附效果依次为三唑酮>联苯三唑醇>胺菊酯>三氟氯氰菊酯>戊唑醇>烯唑醇>高效氯氰菊酯>氰戊菊酯，说明多种物质存在时分子印迹膜对其吸附性能存在差异，主要原因是八种农药的结构与分子量的大小不同，分子量最小的三唑酮吸附量最大，而分子量与模板分子量相近，但结构差异较大的氰戊菊酯吸附量最小。

实施例9 双模板分子印迹固相萃取膜在白菜样品检测中的应用

（1）样品处理

①样品的提取

准确称取2.5g白菜样品（来自超市），匀浆或捣碎、研磨，加入3g无水硫酸钠，用15mL乙腈溶液分两次提取，超声15min，于4000r/min离心10min，合并两次上清液，浓缩后，用乙腈定容至5mL。

②样品的净化

分子印迹固相萃取膜使用前先用5mL水过膜，然后用5mL甲醇活化。加入样品提取液1mL过膜，再用5mL水淋洗，最后用3mL甲醇洗脱，洗脱液用甲醇定容至3mL，供高效液相色谱仪检测。

色谱柱Symmetry ® C₁₈柱（4.6mm×250mm，5μm）；流动相：甲醇-水，梯度洗脱程序见表1；进样量：20μL；柱温：30℃；检测波长范围：200-300nm。表4为梯度洗脱程序。

表4 梯度洗脱程序

其中，白菜样品提取液的高效液相色谱图如图9所示，白菜样品提取液过膜后洗脱液的高效液相色谱图如图10所示，通过图9和图10对比可知，分子印迹固相萃取膜对白菜样品净化效果好，对杂质不具有吸附能力。

（2）线性关系与检测限

将三唑酮、戊唑醇、联苯三唑醇、烯唑醇、胺菊酯、三氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯和氰戊菊酯分别配制成质量浓度为0.01-10μg/mL的一系列不同浓度的标准溶液，绘制标准曲线。其线性关系和检测限如表5所示。

表5 线性关系与检测限

由表5可知，八种被测物在0.01-10μg/mL的范围内具有较好的线性关系。

（3）白菜、苹果、鸡饲料中八种被测物的加标回收率实验

分别在白菜、苹果、鸡饲料样品中同时加入含有三唑酮、戊唑醇、联苯三唑醇、烯唑醇、胺菊酯、三氟氯氰菊酯、高效氯氰菊酯和氰戊菊酯的标准品，进行样品提取，分别用实施例1中制备的印迹膜常温吸附，加标提取液过膜后洗脱，其中白菜提取液、苹果提取液的制备与本实施例（1）中①中制备步骤相同，苹果提取液的制备中只需将白菜样品换做苹果样品，鸡饲料提取液的制备与本实施例（1）中①相似，不同之处仅在于白菜样品换为鸡饲料，样品研磨后无须加入无水硫酸钠，印迹膜常温吸附以及洗脱过程与本实施例（1）中②相同。

白菜、苹果、鸡饲料样品在0.2µg/mL和2µg/mL 2个添加水平下，进行加标回收率试验，分析结果如下表所示，八种农药平均回收率在85.7%-95.9%之间，相对标准偏差（RSDs）在1.45%-3.72%之间（n=5），由此说明本发明制备双模板分子印迹固相萃取膜对三唑类和菊酯类物质的回收率高，精密度好。表6为白菜、苹果和鸡饲料的回收率和精密度实验结果（n=5）。

表6 样品的回收率和精密度实验结果

另外，本实验还对加入含有八种农药成分的标准品（1mL）的白菜样品提取液过膜洗脱，过膜及洗脱过程与本实施例（1）中②相同，对洗脱液进行了高效液相色谱测试，色谱图如图11所示，其中八种农药成分的浓度（μg/mL）对照表6从上到下依次为：2.5、2、2.3、2、2.3、2、2、1。

对比图10和图11，可以看出，分子印迹固相萃取膜只对模板物质及其结构类似物有吸附作用，显示出该膜的高度选择性。

实施例10-13 双模板分子印迹固相萃取膜的制备方法

实施例10-13分别为一种双模板分子印迹固相萃取膜的制备方法，制备步骤以及相应的技术参数与实施例1相似，不同之处仅在于实施例10中的三唑类模板分子为戊唑醇，菊酯类模板分子为高效氯氰菊酯；实施例11中的三唑类模板分子为烯唑醇，菊酯类模板分子为氰戊菊酯；实施例12中的三唑类模板分子为三唑酮，菊酯类模板分子为三氟氯氰菊酯；实施例13中的三唑类模板分子为联苯三唑醇，菊酯类模板分子为胺菊酯。

实施例10-13中所制备的双模板分子印迹固相萃取膜的制备方法简单，过程易于控制，成本低，膜稳定性好、强度高，形态规整，膜上具有特异性的空间位点，可实现特异性吸附。

实施例14 实施例2-6、10-13所制双模板分子印迹固相萃取膜的表征、吸附性能研究及在白菜样品检测中的应用

本实施例分别依据实施例7-9中所述的方法、步骤对实施例2-6、10-13所制双模板分子印迹固相萃取膜进行了表征、吸附性能研究及在白菜样品检测中应用，实结果证明：实施例2-6、10-13所制双模板分子印迹固相萃取膜的稳定性好、强度高，形态规整，膜上具有特异性的空间位点，相比较其它的模板的分子印迹固相萃取膜来说，双模板分子印迹固相萃取膜吸附量大，多种农药物质存在时分子印迹膜对其吸附性能存在差异。

双模板分子印迹固相萃取膜对白菜样品净化效果好，对杂质不具有吸附能力，分子印迹固相萃取膜只对模板物质及其结构类似物有吸附作用，显示出该膜的高度选择性。

实施例1-6、10-13，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明所作的其它形式的限定，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述技术内容作为启示加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但凡是未脱离本发明权利要求的技术实质，对以上实施例所作出的简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明权利要求保护的范围。

Claims

1.一种双模板分子印迹固相萃取膜的制备方法，其特征在于按照如下步骤顺序进行：

⑴溶解

所述三唑类化合物与所述菊酯类化合物间的摩尔比为1-2：1；

所述功能单体，与所述三唑类化合物、菊酯类化合物的总量间的摩尔比为2-6：1；

所述双模板物质与致孔剂的重量体积比为1：40-75 mmol/mL;

⑵预聚合

所述交联剂量，与所述三唑类化合物、菊酯类化合物的总量间的摩尔比为40-60：1；

所述引发剂，与所述三唑类化合物、菊酯类化合物的总量间的摩尔比为0.8-1.5：1；

⑶聚合

将C置于55-70℃下，水浴反应12-24h，得D；

⑷模板洗脱

⑸干燥

2.根据权利要求1所述的双模板分子印迹固相萃取膜的制备方法，其特征在于：

所述三唑类化合物为联苯三唑醇；

所述菊酯类化合物为三氟氯氰菊酯；

所述功能单体为α-甲基丙烯酸；

所述致孔剂为乙腈。

3.根据权利要求1所述的双模板分子印迹固相萃取膜的制备方法，其特征在于：在所述步骤（3）中，将基膜取出后且置于载玻片前，要将所述基膜于频率200Hz下超声20-70min。

4.根据权利要求1所述的双模板分子印迹固相萃取膜的制备方法，其特征在于：所述基膜为尼龙66。

5.根据权利要求1-4中任意一项所述的双模板分子印迹固相萃取膜的制备方法，其特征在于：所述甲醇-乙酸混合溶液，由体积比为9:1的甲醇与乙酸配得。

6.权利要求1-5中任意一项所述的双模板分子印迹固相萃取膜的制备方法所制双模板分子印迹固相萃取膜的一种应用，它用于吸附三唑类物质和菊酯类物质。

7.根据权利要求6所述的双模板分子印迹固相萃取膜的应用，其特征在于：所述的双模板分子印迹固相萃取膜在用于吸附三唑类物质和菊酯类物质前，先用甲醇润湿，再用水淋洗。

8.根据权利要求7所述的双模板分子印迹固相萃取膜的应用，其特征在于：在对食品、饲料中三唑类和菊酯类农药残留分析时，它用于样品的净化和残留农药的富集。