CN104737904A - 一种金焰彩栾组织培养培养基 - Google Patents

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董筱昀
吕运舟
张敏
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Abstract

本发明涉及一种金焰彩栾组织培养培养基，包括初代培养基、继代培养基、壮苗培养基和生根培养基，其中壮苗培养基和生根培养基与继代培养基配方相同；首次采用组织培养的方式进行无性繁殖金焰彩栾，不但繁殖速率快、成活率高而且能保持培养植物的优良特性。

Description

一种金焰彩栾组织培养培养基
技术领域
本发明涉及一种组织培养基，具体涉及一种金焰彩栾组织培养培养基。
背景技术
“金焰彩栾”为新选育的观赏品种，其主要特性为1-3年生树干或枝条呈黄色，春季新芽、叶呈桔红色，夏季叶呈黄绿色，秋叶呈金黄色，具有很高的园艺观赏价值。现有技术中，主要采用嫁接和扦插的方法进行繁殖，没有组织培养的培养基和培养方法的报道。扦插、嫁接繁殖虽然能保持原有植物的优良性状，但是繁殖速度慢，难以满足市场对该植物需求。
发明内容
本发明的目的在于：为解决以上问题提供一种采用组织培养的方式进行无性繁殖，繁殖速率快而且能保持培养植物的优良特性的金焰彩栾组织培养培养基。
本发明所采用的技术方案是这样的：
一种金焰彩栾组织培养培养基，包括初代培养基、继代培养基、壮苗培养基和生根培养基，其中：
每升初代培养基的组份及各组分的含量如下：
(1)大量元素：硝酸钾2000mg/L、硝酸铵1600mg/L、七水硫酸镁320mg/L、磷酸二氢钾160mg/L、二水氯化钙440mg/L；
(2)微量元素：碘化钾0.83mg/L、四水硫酸锰22.3mg/L、七水硫酸锌8.6mg/L、硼酸6.2mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、氯化钴0.025mg/L、二水钼酸钠0.25mg/L；
(3)铁盐：七水硫酸亚铁27.8mg/L与乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L(螯合剂)混合；
(4)有机附加物：盐酸硫胺素(VB1)0.1mg/L、盐酸吡哆辛(VB6)0.5mg/L、烟酸(VB5)0.5mg/L、维生素C80mg/L、甘氨酸2.0mg/L、肌醇100mg/L、蔗糖20000mg/L、卡拉胶6500mg/L。
(5)植物生长调节剂：6-苄氨基腺嘌呤0.04～0.06mg/L、萘乙酸0.12～0.16mg/L、吲哚乙酸0.12～0.16mg/L、吲哚-3-乙酸0.08～0.10mg/L。
余量为蒸馏水。
每升继代培养基的组份及各组分的含量如下：
(1)大量元素：硝酸钾2000mg/L、硝酸铵1600mg/L、七水硫酸镁320mg/L、磷酸二氢钾160mg/L、二水氯化钙440mg/L；
(2)微量元素：碘化钾0.83mg/L、四水硫酸锰22.3mg/L、七水硫酸锌8.6mg/L、硼酸6.2mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、氯化钴0.025mg/L、二水钼酸钠0.25mg/L；
(3)铁盐：七水硫酸亚铁27.8mg/L与乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L(螯合剂)混合；
(4)有机附加物：盐酸硫胺素(VB1)0.1mg/L、盐酸吡哆辛(VB6)0.5mg/L、烟酸(VB5)0.5mg/L、维生素C80mg/L、甘氨酸2.0mg/L、肌醇100mg/L、蔗糖20000mg/L。
(5)植物生长调节剂：6-苄氨基腺嘌呤0.02～0.04mg/L、萘乙酸0.08～0.10mg/L、吲哚乙酸0.08～0.10mg/L、吲哚-3-乙酸0.12～0.16mg/L。
余量为蒸馏水。
所述壮苗培养基和所述生根培养基与所述继代培养基的组份及各组分的含量相同。
综上所述，由于采用上述技术方案，本发明的有益效果是：
本发明的优势在于：1、保持培养植物的优良特性；2、采用该培养基培养，增殖系数高、生根率高；3、采用该培养基培养不会出现性状分离，保持彩叶性状；4、本发明结合培养方法可以短期内大量规模化生产，繁殖效率高，生长速度快。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细说明。
实施例1
一种金焰彩栾组织培养培养基，包括初代培养基、继代培养基、壮苗培养基和生根培养基，其中：
每升初代培养基的组份及各组分的含量如下：
(1)大量元素：硝酸钾2000mg/L、硝酸铵1600mg/L、七水硫酸镁320mg/L、磷酸二氢钾160mg/L、二水氯化钙440mg/L；
(2)微量元素：碘化钾0.83mg/L、四水硫酸锰22.3mg/L、七水硫酸锌8.6mg/L、硼酸6.2mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、氯化钴0.025mg/L、二水钼酸钠0.25mg/L；
(3)铁盐：七水硫酸亚铁27.8mg/L与乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L(螯合剂)混合；
(4)有机附加物：盐酸硫胺素(VB1)0.1mg/L、盐酸吡哆辛(VB6)0.5mg/L、烟酸(VB5)0.5mg/L、维生素C80mg/L、甘氨酸2.0mg/L、肌醇100mg/L、蔗糖20000mg/L、卡拉胶6500mg/L。
(5)植物生长调节剂：6-苄氨基腺嘌呤0.05mg/L、萘乙酸0.15mg/L、吲哚乙酸0.15mg/L、吲哚-3-乙酸0.10mg/L。
余量为蒸馏水。
每升继代培养基的组份及各组分的含量如下：
(1)大量元素：硝酸钾2000mg/L、硝酸铵1600mg/L、七水硫酸镁320mg/L、磷酸二氢钾160mg/L、二水氯化钙440mg/L；
(2)微量元素：碘化钾0.83mg/L、四水硫酸锰22.3mg/L、七水硫酸锌8.6mg/L、硼酸6.2mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、氯化钴0.025mg/L、二水钼酸钠0.25mg/L；
(3)铁盐：七水硫酸亚铁27.8mg/L与乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L(螯合剂)混合；
(4)有机附加物：盐酸硫胺素(VB1)0.1mg/L、盐酸吡哆辛(VB6)0.5mg/L、烟酸(VB5)0.5mg/L、维生素C80mg/L、甘氨酸2.0mg/L、肌醇100mg/L、蔗糖20000mg/L、卡拉胶6500mg/L。
(5)植物生长调节剂：6-苄氨基腺嘌呤0.03mg/L、萘乙酸0.10mg/L、吲哚乙酸0.10mg/L、吲哚-3-乙酸0.15mg/L。
余量为蒸馏水。
所述壮苗培养基和所述生根培养基与所述继代培养基的组份及各组分的含量相同。
实施例2
一种金焰彩栾组织培养培养基，包括初代培养基、继代培养基、壮苗培养基和生根培养基，其中：
每升初代培养基的组份及各组分的含量如下：
(1)大量元素：硝酸钾2000mg/L、硝酸铵1600mg/L、七水硫酸镁320mg/L、磷酸二氢钾160mg/L、二水氯化钙440mg/L；
(2)微量元素：碘化钾0.83mg/L、四水硫酸锰22.3mg/L、七水硫酸锌8.6mg/L、硼酸6.2mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、氯化钴0.025mg/L、二水钼酸钠0.25mg/L；
(3)铁盐：七水硫酸亚铁27.8mg/L与乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L(螯合剂)混合；
(4)有机附加物：盐酸硫胺素(VB1)0.1mg/L、盐酸吡哆辛(VB6)0.5mg/L、烟酸(VB5)0.5mg/L、维生素C80mg/L、甘氨酸2.0mg/L、肌醇100mg/L、蔗糖20000mg/L、卡拉胶6500mg/L。
(5)植物生长调节剂：6-苄氨基腺嘌呤0.04mg/L、萘乙酸0.12mg/L、吲哚乙酸0.12mg/L、吲哚-3-乙酸0.08mg/L。
余量为蒸馏水。
每升继代培养基的组份及各组分的含量如下：
(1)大量元素：硝酸钾2000mg/L、硝酸铵1600mg/L、七水硫酸镁320mg/L、磷酸二氢钾160mg/L、二水氯化钙440mg/L；
(2)微量元素：碘化钾0.83mg/L、四水硫酸锰22.3mg/L、七水硫酸锌8.6mg/L、硼酸6.2mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、氯化钴0.025mg/L、二水钼酸钠0.25mg/L；
(3)铁盐：七水硫酸亚铁27.8mg/L与乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L(螯合剂)混合；
(4)有机附加物：盐酸硫胺素(VB1)0.1mg/L、盐酸吡哆辛(VB6)0.5mg/L、烟酸(VB5)0.5mg/L、维生素C80mg/L、甘氨酸2.0mg/L、肌醇100mg/L、蔗糖20000mg/L、卡拉胶6500mg/L。
(5)植物生长调节剂：6-苄氨基腺嘌呤0.02mg/L、萘乙酸0.08mg/L、吲哚乙酸0.08mg/L、吲哚-3-乙酸0.12mg/L。
余量为蒸馏水。
其他与实施例1相同。
实施例3
一种金焰彩栾组织培养培养基，包括初代培养基、继代培养基、壮苗培养基和生根培养基，其中：
每升初代培养基的组份及各组分的含量如下：
(1)大量元素：硝酸钾2000mg/L、硝酸铵1600mg/L、七水硫酸镁320mg/L、磷酸二氢钾160mg/L、二水氯化钙440mg/L；
(2)微量元素：碘化钾0.83mg/L、四水硫酸锰22.3mg/L、七水硫酸锌8.6mg/L、硼酸6.2mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、氯化钴0.025mg/L、二水钼酸钠0.25mg/L；
(3)铁盐：七水硫酸亚铁27.8mg/L与乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L(螯合剂)混合；
(4)有机附加物：盐酸硫胺素(VB1)0.1mg/L、盐酸吡哆辛(VB6)0.5mg/L、烟酸(VB5)0.5mg/L、维生素C80mg/L、甘氨酸2.0mg/L、肌醇100mg/L、蔗糖20000mg/L、卡拉胶6500mg/L；
(5)植物生长调节剂：6-苄氨基腺嘌呤0.06mg/L、萘乙酸0.16mg/L、吲哚乙酸0.16mg/L、吲哚-3-乙酸0.10mg/L。
余量为蒸馏水。
每升继代培养基的组份及各组分的含量如下：
(1)大量元素：硝酸钾2000mg/L、硝酸铵1600mg/L、七水硫酸镁320mg/L、磷酸二氢钾160mg/L、二水氯化钙440mg/L；
(2)微量元素：碘化钾0.83mg/L、四水硫酸锰22.3mg/L、七水硫酸锌8.6mg/L、硼酸6.2mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、氯化钴0.025mg/L、二水钼酸钠0.25mg/L；
(3)铁盐：七水硫酸亚铁27.8mg/L与乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L(螯合剂)混合；
(4)有机附加物：盐酸硫胺素(VB1)0.1mg/L、盐酸吡哆辛(VB6)0.5mg/L、烟酸(VB5)0.5mg/L、维生素C80mg/L、甘氨酸2.0mg/L、肌醇100mg/L、蔗糖20000mg/L、卡拉胶6500mg/L；
(5)植物生长调节剂：6-苄氨基腺嘌呤0.04mg/L、萘乙酸0.10mg/L、吲哚乙酸0.10mg/L、吲哚-3-乙酸0.16mg/L。
余量为蒸馏水。
其他与实施例1相同。
实验方案：
选取生长较整齐的金焰彩栾茎段，冲洗干净后分别选用实施例1-3的初代培养基进行培养，每组试验培养200株，光照时间、光照强度、温度控制等培养参数完全一致，40天后取经初代培养诱导出来的健康小芽转入继代增殖培养基中进行增殖培养，增殖培养周期为30天，增殖培养后统计并测量增殖系数和生长高度，增殖系数＝一个周期内形成的有效苗数/接种苗数，如下表1所示：
表1金焰彩栾茎芽的增殖培养情况
增殖系数 生长高度cm 生长状态
实施例1 3.82 4.42 芽健壮，叶片正常，生长较快
实施例2 4.05 4.64 芽健壮，叶片正常，生长快
实施例3 4.13 4.82 芽健壮，叶片正常，生长快
由表1可知，通过增殖培养基培养后，金焰彩栾在增殖过程中生长良好，增殖系数和生长高度值都很高。
将增殖培养基中培养后的芽在壮苗培养基中培养后，继续接种到生根培养基中进行生根培养，培养30天后查看并计算生根率和平均根长，其中生根率＝生根的外植体数/接种的外植体数×100％，平均根长＝根的总长度/根的总数；结果如下表2所示，
表2金焰彩栾的生根培养情况
生根率 平均根长cm 生长状态
实施例1 89.23 2.83 芽健壮，生根较快，叶色正常
实施例2 90.98 3.12 芽健壮，生根快，叶色正常
实施例3 91.73 3.45 芽健壮，生根快，叶色正常
由表2可知，通过生根培养基的培养，金焰彩栾的芽生根率高，根长，体现出了良好的生长特性。
经生根培养基培养后的茎芽移栽入种植地，该地块的光照时间、光照强度、温度控制、水分供给量等环境因素完全一致，30天后观察移栽成活率，移栽成活率＝成活株数/移栽总株数；结果如表3所示，
表3金焰彩栾的移栽后成活情况
移栽成活率 生长状态
实施例1 94.52 芽健壮，生长较快，叶色正常
实施例2 95.03 芽健壮，生长快，叶色正常
实施例3 95.47 芽健壮，生长快，叶色正常
由表3可知，通过组织培养无性繁殖获得的金焰彩栾的茎芽移栽成活率高。
综上所述，通过本发明的培养基能大大提高金焰彩栾的生根率、生长高度和存活率，易于短期内大量规模化生产，满足市场大批量的需求。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (1)

1.一种金焰彩栾组织培养培养基，包括初代培养基、继代培养基、壮苗培养基和生根培养基，其特征在于：
每升初代培养基的组份及各组分的含量如下：
(1)大量元素：硝酸钾2000mg/L、硝酸铵1600mg/L、七水硫酸镁320mg/L、磷酸二氢钾160mg/L、二水氯化钙440mg/L；
(2)微量元素：碘化钾0.83mg/L、四水硫酸锰22.3mg/L、七水硫酸锌8.6mg/L、硼酸6.2mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、氯化钴0.025mg/L、二水钼酸钠0.25mg/L；
(3)铁盐：七水硫酸亚铁27.8mg/L与乙二胺四乙酸二钠(螯合剂)37.3mg/L混合；
(4)有机附加物：盐酸硫胺素(VB1)0.1mg/L、盐酸吡哆辛(VB6)0.5mg/L、烟酸(VB5)0.5mg/L、维生素C 80mg/L、甘氨酸2.0mg/L、肌醇100mg/L、蔗糖20000mg/L、卡拉胶6500mg/L；
(5)植物生长调节剂：6-苄氨基腺嘌呤0.04～0.06mg/L、萘乙酸0.12～0.16mg/L、吲哚乙酸0.12～0.16mg/L、吲哚-3-乙酸0.08～0.10mg/L；
余量为水；
每升继代培养基的组份及各组分的含量如下：
(1)大量元素：硝酸钾2000mg/L、硝酸铵1600mg/L、七水硫酸镁320mg/L、磷酸二氢钾160mg/L、二水氯化钙440mg/L；
(2)微量元素：碘化钾0.83mg/L、四水硫酸锰22.3mg/L、七水硫酸锌8.6mg/L、硼酸6.2mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、氯化钴0.025mg/L、二水钼酸钠0.25mg/L；
(3)铁盐：七水硫酸亚铁27.8mg/L与乙二胺四乙酸二钠(螯合剂)37.3mg/L混合；
(4)有机附加物：盐酸硫胺素(VB1)0.1mg/L、盐酸吡哆辛(VB6)0.5mg/L、烟酸(VB5)0.5mg/L、维生素C 80mg/L、甘氨酸2.0mg/L、肌醇100mg/L、蔗糖20000mg/L；
(5)植物生长调节剂：6-苄氨基腺嘌呤0.02～0.04mg/L、萘乙酸0.08～0.10mg/L、吲哚乙酸0.08～0.10mg/L、吲哚-3-乙酸0.12～0.16mg/L；
余量为蒸馏水；
所述壮苗培养基和所述生根培养基与所述继代培养基的组份及各组分的含量相同。
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