CN104721173B - 一种包溴丁苯酞plga纳米颗粒及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种包药纳米颗粒的制备方法，涉及包溴丁苯酞PLGA纳米颗粒及其制备方法，属于生物医用高分子材料领域。其由如下重量百分比组分制备而成：溴丁苯酞0.03‑0.07%聚乳酸羟基乙酸共聚物（PLGA）0.3‑0.6%泊洛沙姆（poloxamer 407）0.3‑0.5%乙腈12‑17%去离子水余量其粒径范围从80.32 nm到331.7 nm，溴丁苯酞的包封率为98.7%，而载药量为5%。与现有技术相比，本发明制备的包药PLGA纳米粒子粒径更小，更有利于药物在生物体内的缓释。本发明工艺简单，产品易得，成本低，在药物的制备方面具有广阔的应用前景。

Description

一种包溴丁苯酞PLGA纳米颗粒及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种包药纳米颗粒的制备方法，尤其涉及包溴丁苯酞PLGA纳米颗粒及其制备方法，属于生物医用高分子材料领域。

背景技术

聚乳酸羟基乙酸共聚物(PLGA)是由两种单体-乳酸和羟基乙酸随机聚合而成，是目前最好的生物可降解聚合物之一。在众多用来制备聚合体纳米颗粒的聚合物中，PLGA因其良好的性能而备受关注，如：(1)生物降解和生物相容性；(2)良好的成囊和成膜的性能；(3)良好的配方和生产方法，适应不同种类的药物，如亲水性或疏水性的小分子或大分子；(4)可持续缓释；(5)可进行表面修饰定向传递等。在美国，PLGA已通过FDA认证，被正式作为药用辅料收录进美国药典。

不同单体比例可制备出不同类型的PLGA，例如PLGA(50:50)表示该聚合物由50％乳酸和50％羟基乙酸组成。所有的PLGA都是非定型的，其玻璃化温度在40-60℃之间。它能够溶于大多数有机溶剂中，如：氯化溶剂类、四氢呋喃、丙酮、乙酸乙酯等。

PLGA的制备方法有：乳化-蒸发法；盐析法；纳米沉淀法；错流过滤法；乳化-溶剂挥发法。然而当采用有些方法制备纳米粒子时，却遇到了一些问题，如使用有毒性的有机溶剂、使用与生物不相容活性化合物稳定剂和盐以及较低的产率和包封率。同时，这些技术不能降低纳米粒子的大小，也不可能制备出粒径小于100nm的纳米粒子。

最常用制备PLGA纳米颗粒的方法是乳化-溶剂挥发法，这种方法可以用于包埋疏水性药物。将共聚物和待包药物溶于有机溶剂(如二氯甲烷、乙酸乙酯、乙腈等)中制成有机相，并将有机相加入到含表面活性剂(如泊洛沙姆404，双十二烷基二甲基溴化铵DMAB等)的水溶液中，形成O/W的乳化液体系，通过声波溶解法和均匀化作用得到纳米颗粒。将O/W乳化方法进行改进的双乳化技术(W/O/W),可用来包裹一些亲水性药物，如多肽类、蛋白质、核酸。首先，配制含有有机相溶剂的常见O/W乳化液体系，继续向体系中加入水使有机溶剂扩散到外相水中，形成纳米颗粒。但是纳米颗粒平均粒径的大小对纳米粒子与细胞膜的相互作用的影响是非常重要的，生物体不同部位的细胞和组织有不同的适宜吸收纳米粒子的最佳粒径，因此研究PLGA纳米颗粒大小一直受到大家的关注。目前控制PLGA纳米颗粒粒径的因素有：搅拌速度、稳定剂浓度和种类、PLGA有机相浓度和种类、温度、制备方法等。传统方法所制备的PLGA纳米颗粒的粒径偏大，包埋药物后，作为注射药剂，不利于其直接注射并送入细胞内部。因此，开发一种小粒径的PLGA纳米颗粒，不仅有利于其包埋药物后在生物体内的缓释，还有利于直接注射并送入细胞内部，提高疗效。

发明内容

本发明目的在于提供一种小粒径的包溴丁苯酞PLGA纳米颗粒，有利于其包埋药物后在生物体内的缓释；另一目的在于提供其制备方法。

为实现本发明目的，所述包溴丁苯酞PLGA纳米颗粒，由如下重量百分比组分制备而成：

各组分重量百分比优选如下：

采用乳化-溶剂挥发法(O/W)制备包溴丁苯酞PLGA纳米颗粒，粒径范围从80.32nm到331.7nm，其包封率为98.7％，载药量为5％。

具体制备方法为：称取溴丁苯酞和聚乳酸羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米颗粒溶于乙腈，定容，制成有机相待用。称取泊洛沙姆(poloxamer407)溶于水制成水溶液。将所制备有机相滴入poloxamer407水溶液中，搅拌，40℃-45℃下旋蒸，即可得纳米颗粒悬浮液。然后再在10℃-15℃下，高速离心，分出上层清液，得到包药纳米颗粒沉淀。随后，将所得包药纳米颗粒沉淀分散于去离子水中，加入蔗糖，超声波超生，冷冻后冻干，得包药纳米颗粒。

取约冻干的包药纳米颗粒分散于水中，超声波处理使纳米颗粒分散均匀，低离心后取上层清液，做DLS，测其粒径和Zeta电位。

本发明制备的包溴丁苯酞PLGA纳米颗粒粒径小，其粒径范围80.32nm-331.7nm，有利于药物在生物体内的缓释。制备工艺简单，产品易得，成本低，可广泛应用于药物控释制剂的研究，在药物的制备方面具有广阔的应用前景。

附图说明

图1-1为本发明制备的包溴丁苯酞PLGA纳米颗粒粒径分布图(实施例1)

图1-2为本发明制备的包溴丁苯酞PLGA纳米颗粒Zeta电位分布图(实施例1)

图2-1为本发明放大实验制备的包溴丁苯酞PLGA纳米颗粒粒径分布图(实施例2)

图2-2为本发明放大实验制备的包溴丁苯酞PLGA纳米颗粒Zeta电位分布图(实施例2)

图3-1为本发明放大实验制备的包溴丁苯酞PLGA纳米颗粒粒径分布图(实施例3)

图3-2为本发明放大实验制备的包溴丁苯酞PLGA纳米颗粒Zeta电位分布图(实施例3)

图4为本发明制备的包溴丁苯酞PLGA纳米颗粒药物缓释趋势图(实施例4)。

具体实施方案

为对本发明进行更好地说明，举实施例如下：

实施例1小试实验

[处方组成]

[制备方法]称取处溴丁苯酞和PLGA纳米颗粒溶于乙腈，定容至10ml，制成有机相待用。称取poloxamer407溶于10ml水制成水溶液。将所制备有机相(2mL)以1mL/min的速度用注射器加入poloxamer407水溶液中，搅拌15h，40℃下旋蒸30min，即可得纳米颗粒悬浮液。然后再在10℃、以25000rpm高速离心30min，分出上层清液，得到包药纳米颗粒沉淀。随后，将所得包药纳米颗粒沉淀分散于10ml去离子水，加入0.42g蔗糖，超声波5min，冷冻几小时后冻干(24小时)，得白色包药纳米颗粒。

取约1/4勺冻干的包药纳米颗粒分散于5-8ml水，超声波处理5min使纳米颗粒分散均匀。4000rpm低速离心5min后取上层清液3-5ml，做DLS，测其粒径和Zeta电位。所得包药PLGA纳米颗粒的包封率为98.7％，载药量为5％。粒径为331.7nm，Zeta电位为-31.88eV。

实施例2放大实验

处方组成

[制备方法]步骤同实施例1.。所得包溴丁苯酞PLGA纳米颗粒的粒径为299.7nm，Zeta电位为-0.0869eV。包封率为65.4％，载药量为9.24％。

实施例3放大实验

制备方法同实施例2。所得冻干包药纳米颗粒用0.9wt％的NaCl水溶液分散，其他步骤同实施例1，进行DLS测试.。所得包溴丁苯酞PLGA纳米颗粒的粒径为414.7nm和90.21nm，Zeta电位为-0.351eV。

实施例4：药物缓释研究

将实施例1所得包溴丁苯酞PLGA冻干样品，经水化重建后，于室温静置，分别于不同时间(天)，取出30ml，在10℃、以25000rpm高速离心30min，分出上层清液，做UV分析上清液中所含包药PLGA纳米颗粒释放出的药量。结果见附图4。

Claims (3)

1.包溴丁苯酞PLGA纳米颗粒，其特征在于，由如下重量百分比组分制备而成：其粒径范围80.32 nm-331.7 nm；

溴丁苯酞 0.03-0.07%

聚乳酸羟基乙酸共聚物 0.3-0.6%

泊洛沙姆 0.3-0.5%

乙腈 12-17%

去离子水 余量

制备方法如下：

称取溴丁苯酞和聚乳酸羟基乙酸共聚物纳米颗粒溶于乙腈，定容，制成有机相待用；称取泊洛沙姆溶于水制成水溶液；将所制备有机相滴入泊洛沙姆水溶液中，搅拌，40 ℃-45℃下旋蒸，即可得纳米颗粒悬浮液；然后再在10 ℃-15℃下，高速离心，分出上层清液，得到包药纳米颗粒沉淀；随后，将所得包药纳米颗粒沉淀分散于去离子水中，加入蔗糖，超声波超声，冷冻后冻干，得包药纳米颗粒。

2.如权利要求1所述的包溴丁苯酞PLGA纳米颗粒，其特征在于，各组分重量百分比优选如下：

溴丁苯酞 0.056%

聚乳酸羟基乙酸共聚物 0.43%

泊洛沙姆 0.43%

乙腈 13.5%

去离子水 余量。

3.制备权利要求1或2所述包溴丁苯酞PLGA纳米颗粒的方法，其特征在于，通过以下方式实现：

称取溴丁苯酞和聚乳酸羟基乙酸共聚物纳米颗粒溶于乙腈，定容，制成有机相待用；称取泊洛沙姆溶于水制成水溶液；将所制备有机相滴入泊洛沙姆水溶液中，搅拌，40 ℃-45℃下旋蒸，即可得纳米颗粒悬浮液；然后再在10 ℃-15℃下，高速离心，分出上层清液，得到包药纳米颗粒沉淀；随后，将所得包药纳米颗粒沉淀分散于去离子水中，加入蔗糖，超声波超声，冷冻后冻干，得包药纳米颗粒。