CN1047034A - 一种制备含有药物组成物的冷冻干燥方法 - Google Patents

Abstract

在用于生产干燥的药物成分或制品的冷冻干燥方法中，冷冻第一种液体；将第二液体加到第一液体冻层之上然后冷冻；将第一和第二液体的冻层一起进行冷冻干燥；上述两种液体中至少有一种含有溶解或悬浮于其中的药物成分或制品；其余的一种或多种液体可以是纯溶剂(一般是水)或含有一种或多种其它物质。

Description

本发明涉及一种制备含有药物的或混有药物的组成物的冷冻干燥（或真空冷冻状态下干燥）方法，它可以在许多至今尚不能实际应用冷冻干燥的情况下使用冷冻干燥技术，例如在一种在单一溶液中难以冷冻干燥的药品，或者当两种或更多组分混入一种溶液中其稳定性下降的情况下使用本方法。

用冷冻干燥方法制备干燥的组成物已广泛地应用于药物的制备，人们做了许多研究试图克服各种有关的技术问题。在“药品的真空冷冻干燥：一个文献回顾专集中可以看到由N.A.Williame和G.P.Polli，发表在《非肠道给药科学和技术》杂志38期，48-55页（1976）上介绍的一种用于药品的冷冻干燥技术的总体构思，此后所公开内容被用作参考文献。其它专用冷冻干燥特殊药品的技术或方法公开在日本专利申请，公开号为68412/1986，《非肠道给药科学与技术》杂志42期47-52页（1988）的欧洲专利申请，申请号为211257，所公开内容在以后用作参考文献。

基本上，冷冻干燥至少由两个步骤组成：

1、将要冷冻干燥的材料的溶液或悬浮液（几乎总是象水一样）冷冻;并且

2、将冷冻的材料的温度升高，使冷冻的溶剂（几乎总是象冰一样）升华而不溶化。

冷冻干燥的组成物经常混有两种或更多的活性成分，及各种其它成分，如载色剂，稳定剂，等渗压溶剂等，除活性成分外，在许多情况下也可加入其它成分，但是，该系统的低共熔温度随添加剂的特性在冷冻时发生改变，而且特别是加入无机物添加剂将会低共熔点明显下降[Arimoto    et    al，《冷冻和干燥研究学会会刊》22期48-55页（1976）]。同样，如果主要的药品水溶液的低共熔点较低，包括加入添加剂的后果是会使其熔点进一步降低[出处见上括号]。

一般地说，通过在下高于低共熔点的成品温度下冷冻干燥冷冻的混合物可制备一种冷冻干燥的混合物，这样了得到外观好的冷冻干燥产品（N.A.Williame    et    al.，op.cit），但是如果在高于低共熔点的温度下进行冷冻干燥，冷冻干燥产品的外观则不尽人意，甚至可能呈糖浆状[Koji    Ito    et    al，Farumashia，5，99（1969）]，这将明显地降低其商业价值。在实际中，为了提高冷冻干燥的速度，希望干燥搁板温度（在此指产品温度）应设在尽可能高的温度上，但当要干燥的溶液含有几种不同类的溶质时，由于低共熔点的降低，提高干燥温度不是很容易的。因此，较低的低共熔点药品的冷冻干燥要在低温下进行，但这意味着一次干燥过程要较长时间，直接影响了冷冻干燥过程的经济性。

为提高冷冻干燥速度人们提出了各种设计方案。例如，在冷冻期间，经过一特定的热力处理，增加冷冻冰晶体的尺寸，从而明显增加干燥速度[见日本专利申请公开号68412/1986和《非肠道给药科学与技术》杂志42期，47-52（1988）]。增加冷冻干燥速度的另一种方法是增加可利用的表面以蒸发水份。在制备药品时，冷冻干燥通常在瓶内进行，瓶内药品用于出售（提高消毒效果），为增加表面区域使盛有要冷冻干燥液的瓶子保持水平，通过冷冻整个瓶子的壁面并使用其它几种技术中的任一个实现冷冻干燥，例如，通过使用一种自动套式冷冻器（Virtis）;冷冻瓶子表面并使其高速旋转，如使用离心冷冻干燥器EF6（Edwards）;或者通过把要冷却干燥的水状溶液滴入很冷的致冷剂中（如氟里昂）或液氮中冷冻干燥形成颗粒，例如日本专利申请公开号29513/1987中所述。

但是，尽管通过上述方法能实现低温干燥，干燥产品的外观经常达不到要求或得到部分是浆状的干燥产品。这里所说的“浆状的”产品是其内部仍保留少量水分的产品，因此，部分地类似于浆状或胶状。

在冷冻干燥中经常会遇到的另一个问题是某些在用于有生命体时PH值是不稳定的药品，而在酸性或碱性溶液中却是稳定的，这些药品必须在酸性或碱性状态下制成成品，然后在使用时必须复还到中性。因此，这种冷冻干燥的药品在其溶解时，PH值会在能安全或舒适地用于人体的范围之外，而为了使该药品能达到合适的PH值，经常要为最终的使用者提供一种分别含必要量碱或酸的水溶液。这种制品的实例包括：涉及到腺乙硫氨酸（见后文例2），就要提供一种含有磷酸-氢钠的水溶液制品;对一种卡巴醌冷冻干燥产品，也要提供该水溶液制品，这种提供一种补偿酸或碱的溶液的方法同样增加成品费用，药品总体积的增加导致贮存空间的增加，对销售及使用者均带来不便。

现有技术中已知的克服上述缺陷的唯一方法是避免使用冷冻干燥方法并把药物和中性剂制成粉未状，分成很小的部分装入瓶内或其它容器。但这种粉未分装制备与冷冻干燥制备比较有许多缺点。例如：（1）反复精确测量一个很小的量很困难;（2）易发生掺杂;（3）由于处于粉未状态增加了不同成分的接触，使其稳定性下降;（4）难于除去吸水性强的粉未。

从上述论述可以看出，为了减少生产成本，得到高质量制品，提高冷冻干燥产品的外观，要缩短冷冻干燥制备的干燥时间。

同样，对于因组成物中一种或几种成分相互作用导致不稳定的药品，目前使用的技术尚依赖于分组的制备，但是考虑到粉未分组制备的问题，应优先考虑冷冻干燥制备。

特别是在大规模药物生产情况下，要求无菌操作，这些问题必须克服。

现在我们已经发现了一种新的和改进的冷冻干燥方法，当按下文所述较佳实施例该方法时，能够克服现有技术过程中的上述缺陷。

根据本发明，提供一种制备冷冻干燥制品的方法，其中，冷冻第一种液体，将第二种液体加到冷冻的第一种液体之上然后冷冻，将冷冻的第一和第二种液体一起进行冷冻干燥，其中所述第一和第二种液体中至少一种含有溶解或悬浮在其中的药物成分或制品。

在本发明中所用过程中，对所用药物成分或制品的特性没有限制，本发明基本上可用于任何治疗学的或其它生理学的活性化合物，包括许多种药（如，抗菌素，消炎药、抗癌药、镇痛药及其它药），维生素及类似的。这些仅是简单地作为例子指出，该方法可用于许多其它药物性化合物和制品。

这样，我们现已发现，通过冷冻处于几种分开的溶液中的溶质成分可以显著提高专用的冷冻干燥溶液系统的冷冻干燥速度。更特别的是，我们发现如果将几种冷冻溶液或其它液体分几层冷冻干燥时，冷冻干燥温度可调到比所有成分都溶入一种溶液中的温度高，这当然提高干燥速度。在混合几种成分时也能发现其优点：通过把一种或更多的成分放入每个冷冻层中就可以形成冷冻干燥制品，不必分别制备分装制品。而且，本发明方法能比常规方法提供更好稳定性的药物制品，常规方法下要求在6个月时间内40℃温度下药品稳定性为90%或更低，实际当中常不能再使用，而本发明方法却能，在试验情况下，提供了较好稳定性的药物组合物，并使之能满足实际使用中所要的稳定性。

在进行本发明的方法中，至少要两个不同液体的冷冻层，然而也可超过两层，这取决于要制备产品的特殊要求。例如，如果产品含有两种成分，则可以是两层（其中每层含一种成分）或三层（其中含有一种成分的冻层由第三层分开，如纯水，用于提高冷冻干燥过程的速度）。如果产品中含有三种成分，则可以是两层（三种成分都在一层，另一层是纯水），三层（每种成分为一层，或两种成分在一层，剩下一种在一层，纯水在第三层），或四层（每种成分在一层、纯水在第四层）。显然其它组合能够并且是在本发明范围之内的。理论上没有最多层数限制，唯一要考虑层数的限制要看实际情况：为有效冷冻干燥，每层最小厚度和各层组合最大厚度在后面要详细。但总的来说，我们认为不要超过三层，这将给实际操作带来困难。

本发明冷冻干燥方法通常在一个容器内进行，为了方便，一般或最好用原来装材料的容器，一般是瓶子或类似的医用容器。然而，容器特性与本发明方法无关，而且在选择容器时，与传统冷冻干燥过程中所要考虑因素一致。

在本发明的一个较佳实施例中，按比例将适量的第一种液体加入要用来冷冻干燥的容器中，如瓶子或类似的容器，进行冷冻，冷冻方法可以是任何公知的方法，例如放入冷冻器或冷冻干燥器，或者放入致冷剂中，如丙酮/干冰或液氮中。第一种液体被冷冻的温度应该使第一种液体冻层不融化并当第二种液体加入时不与第二种液体混合。一般在-10℃～-50℃温度范围较好，也可以使用更低的温度，只要对药物无害。温度范围-30℃～-50℃更好一些，最好是大约-40℃。

在加入第二层之后进行冷冻，同样可采用公知的方法，如在第一种液体冷冻时建议的任一种方法或简单地使用在传统冷冻干燥过程中所用的常规方法。

如果要形成三层或更多的冷冻层，随后加入的一种或更多液体及随后的冷冻可以用类似的方法完成，但一定要保证以前冷冻的一种或更多液体冻层没有融化或无可见的融化即可。

当只有两层时，无需对第二层使用特殊的冷冻技术或温度，仅使用常规冷冻干燥过程中的技术和温度即可。若为三层或更多层，对最后一层也采用相同方法。

对每层要加入和冷冻的液量无特殊限制，这明显取决于所要加入药品或其它材料的量，以及对应溶液中的浓度。实际上，由于干燥需要一定时间（取决于所用容器底面积，如瓶底），冻层总厚度最好是40mm或更小。因此，对每层最大厚度的选择最好要使总厚度不超过40mm。另一方面，冻层的最小厚度取决于所用材料的量，以及溶液的浓度，由于实际上精确加入少量液体较困难，一般，我们认为每层最小厚度为1mm，最好不小于2mm。

当冷冻多于一种液体以形成层状冷冻结构时，对要加入液体的最好的先后顺序没有一般性的规定。如果在实际中特定情况下发现加入顺序对产品质量或干燥速度等因素有影响，则要按要求改变加入顺序，但这作为普通技术的一部分易于完成。

一旦所有要加入液体加完后，盛有冷冻液的容器放入冷冻干燥器内，冷冻干燥的条件可与传统冷冻干燥的相同，对本发明方法而言无特殊限制。

本发明中所要冷冻的液体不必都是溶液，可以有一种或更多的（不是所有的）是纯溶剂（一般且最好是水）。当不含溶质的纯水被冷冻成层状后，把要的溶液放在其上进行冷冻干燥，我们很偶然地发现这样的干燥速度明显增加了。

经第一次干燥和第二次干燥后的冷冻干燥制品清楚地显示出两种或更多分层的外形。

一般来说，用本发明方法得到的冷冻干燥产品的外观是很好的。

现参考下列非限制的实施例对本发明作进一步描述。

例1

通常干燥困难的冷冻干燥药品的制备

5ml含N-苯甲酰-β-丙氨酸（一种辅药）（具有-36℃的低共熔点）10%W/V的水溶液加入-20ml的瓶中，在-40℃的冷冻室内冷冻60分钟形成底层。5ml含（5R，6S，8R）-2-[（3S）-1-亚氨代乙酰基吡咯烷-3-基-硫]-6-（1-羟乙基）-2-Carbapenem-3-羧酸（主药，抗菌素）被冷却到5℃，然后，冷却后的该溶液加到冷冻后的N-苯甲酰-β-丙氨酸冻层上，如上述方法制备，然后立即将瓶送冷冻干燥室内在-40℃充分冷冻60分钟以得到两层的冷冻产品，然后在3小时时间内将温度升到10℃，第一次干燥是在10℃下保持24小时，随后，在3小时时间内将温度升到50℃，第二次干燥是在50℃下保持10小时，冷冻干燥最终制品的外观很好。

另一方面，作为对比，分别将5ml含N-苯甲酸-β-丙氨酸10%W/V水溶液和5ml含（5R，6S，8R）-2-[（3S）-1-亚氨代乙酰基吡咯烷-3-基-硫]-6-（1-羟乙基）-2-Carbapenem-3-羧酸10%W/V的水溶液混合，把总共10ml都倒入20ml的瓶中。在-40℃冷冻干燥器中冷冻60分钟，经历3小时时间将温度升到10℃，第一次干燥在10℃下要经历64小时才能完全干燥，此后，经历3小时时间将温度升到50℃，第二次干燥在50℃下经历10小时，但也不能使得到的冷冻干燥制品有好的外观。

这些制品与粉未分装产品（通过简单混合两种成分进行制备）要经可比的评价，结果见表1。从表1可明显看出，根据本发明的两层的冷冻过程生产产品时，冷冻干燥所需时间，干燥产品的外观及整个时间内的稳定性（主要药物的剩余百分比）比用混合方法（对比组）生产的药品的值要好得多。同样，本发明的方法生产的干燥产品在整个时间的稳定性（主要药物的剩余百分比）比粉未分装的产品（对比组）好得多。

表1

冷冻干燥    稳定性

所需时间    干燥产品外观    主药在40℃6个月

剩余百分比

双层冷冻

干燥产品    40小时    好    97%

混合冷冻

干燥产品    80小时    底部有浆状物    93%

（对比组）

粉未分装    -    -    88%

产品（对比组）

例2

混合时稳定性较差的药品制备

10ml含S-腺苷基-L-甲硫氨酸甲苯硫酸盐30%    W/V的水溶液（是主药，为传统名称，此后将其称为腺乙硫氨酸，其低共熔点为-35℃）加到30ml的瓶中。在-40℃的冷冻室内冷冻60分钟，形成底部冻层。将10ml含磷酸一氢钠0.18摩尔的水溶液冷却到5℃，然后加到腺乙硫氨酸冻层之上，然后立即放入-40℃冷冻室内冷冻60分钟，得以双层制品。将瓶子放入冷冻干燥器内，在10℃下进行第一次干燥，时间为48小时，第二次干燥温度为40℃，历时10小时。最终的冷冻干燥制品外观很好。

另一方面，作为对比，分别将10ml含腺乙硫氨酸30%W/V的水溶液和10ml含磷酸一氢内0.18摩尔的水溶液混合，总量20ml溶液加入30ml的瓶中，在-40℃冷冻室内冷冻，在同样条件下干燥结果如表2所示。

表2

双层冷冻干燥产品    混合冷冻干燥产品（对比组）

被调整的溶

液的PH    上层    8.6    4.0

下层    0.7

干燥后产品PH    4.0    4.0

冷冻干燥时间    60小时    60小时

干燥产品外观    好    差

主药剩余百分比    98%    5%

从表2中可明显看出，根据本发明的双层冷冻方法得到的干燥产品的外观得到明显改善，而且在整个时间的稳定性与混合冷冻干燥方法相比也得到提高。

例3

稳定性较差的钠盐药品的制备

2ml含L-抗坏血酸10%W/V的水溶液加入10ml瓶内，在-40℃冷冻室内冷冻60分钟形成底部冻层。将2ml含碳酸氢钠4.8%W/V的水溶液冷却到5℃，加入抗坏血酸冷冻层上，此后立即将其放入-40℃冷冻干燥器中得到一双层冷冻制品。该瓶在10℃下经历24小时的第一次干燥，然后在40℃下经历5小时的第二次干燥，最终的冷冻干燥产品外观很好。

同时作为比较，分别将2ml含L-抗坏血酸钠10%W/V的水溶液和2ml含碳酸氢钠4.8%W/V的水溶液、总共4ml，倒入10ml的瓶内，在冷冻干燥器内冷冻到-40℃，然后与本发明所用条件相同情况下冷冻干燥。

这些制剂和简单地把抗坏血酸进行粉末分装的产品要经过可比的评价，结果在表3中表示。表3中，被试验的产品被标记如下：

产品1是本发明双层冷冻干燥的产品;

产品2是冷冻干燥混合溶液得到的产品（对照）;

产品3是由抗坏血酸组成的粉未分装产品（对照）。

表3

产品    1    2    3

被调整溶液的PH    上层9.8    7.5    -

3.6

干燥产品的PH    7.5    7.5    7.5

冷冻干燥时间    30小时    30小时    -

干燥产品的外观    好    微变色偏黄    差

主药剩余百分比    98%    90%    88%

40℃6个月后外观    好    变色，黄色    变色黄色

从表3中可明显看出，用本发明双层冷冻法生产产品的外观及整个时间的稳定性都优于用混合冷冻方法生产的产品，同样用本发明双层冷冻法生产的产品在整个时间内的稳定性更优于粉未分装方法的产品。抗坏血酸钠自身不稳定性便已是公知的。

例4

三层的制备

本例是一个含有通常认为互不相容的多种维生素的多元维生素制品，当然本发明的方法也可生产相容的多层产品。

第一层由“溶液1”形成，其制法见表4。更进一步说，一种非离子型表面活化剂HCO-60（商标名;由Nikko化学有限公司出口）被加到规定量的维生素A棕榈酸酯、维生素D₃、醋酸维生素E和维生素K₂以有效地溶解在蒸馏水中，此外，要加入甘露醇在其中溶解，加入蒸馏水直至总量为50ml。

第二层由“溶液2”形成，其制法见表5，其中，预定量的维生素B₁盐酸盐，核黄素磷酸酯钠、维生素B₆盐酸盐、维生素Bc、维生素PP，泛酰醇和维生素H在蒸馏水中溶解，通过加入碳酸氢钠使溶液的PH值调整到5.5到6.5，然后加入蒸馏水使其达到50ml。

第三层由“溶液3”形成，制法见表6，其中规定量的抗坏血酸溶于蒸馏水中，加入蒸馏水直到20ml。

表4

维生素A棕榈酸酯    50，000IU

维生素D₃4，000IU

醋酸维生素E    50mg

维生素K₂40mg

表面活化剂HCO-60    2000mg

甘露醇    2000mg

蒸馏水    总量50ml

上述表中所列成分，前4个是亲酯的，表面活化剂是用于使它们溶于水中。

表5

维生素B₁50mg

核黄素磷酸酯钠    50mg

维生素B₆盐酸盐 75mg

维生素Bc    4mg

维生素PP    600mg

泛酰醇    50mg

维生素H    2mg

蒸馏水    总量50ml

上表中所列成分均能溶于水。

表6

抗坏血酸    2000mg

蒸馏水    总量20ml

抗坏血酸水溶液的最佳PH不同于表5所列的最佳PH值。

5ml的溶液1加入25ml的瓶中，在-40℃下的冷冻室内冷冻60分钟。5ml溶液2加入溶液1的冷冻层上重新在-40℃冷冻室内冷冻。2ml溶液3加入冷冻层上在-40℃冷冻室内冷冻为第三层。

然后将瓶子放入冷冻干燥器内，在0℃搁板温度下保持30小时完成第一次干燥，在30℃进行第二次干燥10小时。最终的冷冻干燥制品的外观很好。

同时，作为对比，总量12ml（5ml溶液1、5ml溶液2和2ml溶液3）加入瓶中，混合后，在冷冻干燥器中冷冻到-40℃。在-30℃下经历60小时的第一次干燥（因为产品在-30℃以上干燥会变成浆状），在30℃下经历10小时第二次干燥。结果见表7。

表7

三层冷冻产品    混合的冷冻干燥产品

调整溶液的PH    上层    3.4

中层    6.0    5.8

底层    6.0

干燥产品的PH    5.8    5.8

所需冷冻干燥时间    45小时    75小时

干燥产品的外观    好    差

主药剩余百分比    维生素K    95%    82%

维生素H    99%    79%

抗坏血酸    98%    80%

40℃6个月后的外观    好    极差

从表7可明显看出，本发明的三层冷冻干燥法生产的产品的冷冻干燥所需的时间，干燥产品外观及整个时间的稳定性（外观和主药的稳定性）均比对照组的混合冷冻方法生产的产品的指标好得多。

例5

由水层分隔的制品

“溶液1”仅是蒸馏水，“溶液2”为表8中所示成分：

表8

维生素A棕榈酸酯    50，000IU

维生素D₃4，000IU

维生素K₂40mg

表面剂HCO-60    2000mg

葡聚糖40    500mg

蒸馏水    总量为50ml

通过把非离子型表面活化剂HCO-60（商标名，由Nikko化学有限公司出品）加入到定量的维生素A棕榈酸酯，维生素D₃和维生素K₂中以使它们在蒸馏水中溶解，并将葡聚糖40在溶液中溶解，然后加蒸馏水直至50ml。

将2ml蒸馏水作为溶液1加到20ml的瓶中，并在-40℃冷冻室内冷冻成底层。将5ml溶液2加在溶液1冻层上，并在-40℃冷冻干燥器中冷冻，在0℃搁板温度下进行第一次干燥，搁板温度为30℃下进行第二次干燥。

同时，作为对比，将表8所示配方的溶液5ml加入20ml的瓶内，把瓶放入冷冻干燥器内，冷冻到-40℃，此后，在相同条件下冷冻干燥。要测量出每一步骤所需时间。

结果列于表9中

从表9可以明显看出，双层冷冻干燥法所需时间明显比对照组的混合冷冻干燥法所需时间短。

表9

冷冻干燥时间

第一次干燥时间    第二次干燥时间

（0℃）    （30℃）

双层冷冻干燥产品    24小时    10小时

混合冷冻干燥产品

（对照组）    48小时    10小时

例6

由一个容器取代两个容器的制备

2.5ml含400μg/ml的卡巴醌（一种抗癌药）的水溶液被加到10ml的瓶内并在-40℃的冷冻室内冷冻60分钟形成底层。同时将1ml含0.1摩尔的磷酸一氢钠溶液（pH7.2）冷却，然后加到上述冻层上，在-40℃的冷冻干燥室内冷冻60分钟。

对其进行第一次干燥时，温度为0℃，保持24小时，然后进行第二次干燥，温度为30℃，保持10小时，最终的冷冻产品的外观很好。

同时，作为对比，3.5ml总量（含2.5ml上述抗癌药400μg/ml的溶液和1ml含0.1摩尔的磷酸一氢钠溶，PH值为7.2）被加入到10ml的瓶内，在上述本发明的方法同样条件下冷冻干燥。

对获得的每一种该抗癌药的含量要进行测量，结果见表10。

从表10可明显看出，由本例中双层冷冻干燥法所得产品的稳定性（主药的剩余百分比）比对照组的混合冷冻干燥法生产产品的稳定性好得多。

表10

该抗癌药含量^＊（%） 溶解后的PH值

双层冷冻干燥产品    100    7.2

混合冷冻干燥产品    85    7.2

＊剩余百分比基于每瓶2mg的量。

在已有技术中，发现该抗癌物的溶液在PH值为7.0到7.4之间稳定。但是，当该抗癌药在磷酸缓冲剂中PH值为7.2时进行冷冻干燥时，由于冷冻期间PH值的变化（从7.2到4.2），使该抗癌药分解[D.L.Willimq;《生物化学》杂志167期，593-600页（1977）]。因此，不能在同一容器内进行冷冻。而且，在已有技术，与PH值为7.2的磷酸缓冲剂结合的该抗癌药作为单独的冷冻干燥制品供使用。

因此，下面的优点可由本发明的方法来实现：

（1）在一个相对短的时间内得到不易冷冻干燥的药品的冷冻干燥制品。

（2）得到不易冷冻干燥药品的外观漂亮的冷冻干燥制品。

（3）与传统的混合两种或更多种的冷冻干燥制品相比，本发明产品在所有时间稳定性得到提高。

（4）能得到因两种或更多种组分相互作用使药品稳定性下降的药物的稳定的合成药品。

（5）可由一个容器的冷冻干燥产品代替现有技术中一种冷冻干燥材料要结合溶解它的溶液的合成制品。

Claims (18)

1、一种冷冻干燥制品的制备方法，其中：将第一液体冷冻；然后将第二液体加到第一液体冻层上进行冷冻；将二者一起进行冷冻干燥，其中所述第一和第二液体中至少一个含有溶解或悬浮其中的含药物的成分或制品。

2、如权利要求1所述方法，其中所述液体是水溶液。

3、如权利要求2所述方法，其中第一和第二液体中之一是水，另一种是所述含药物成分或制品的水溶液。

4、如权利要求2所述方法，其中所述第一和第二液体均是具有生理活性物质的水溶液。

5、如权利要求1所述方法，其中第三液体加到第一和第二液体冻层之上，并将两种液体冻层和第三液体一起进行冷冻干燥。

6、如权利要求5所述方法，其中所述液体均是水溶液。

7、如权利要求6所述方法，其中所述第一、第二和第三液体之一是水，其它是含有药物成分或制品的水溶液。

8、如权利要求6所述的方法，其中所述第一、第二和第三液体均是含有生理活化物质的水溶液。

9、如权利要求1-8中任一方法，其中所述第一液体在-10℃到-50℃温度下冷冻。

10、如权利要求9所述方法，其中所述冷冻温度为-30℃至-50℃。

11、如权利要求10所述方法，其中所述冷冻温度大约为-40℃。

12、如权利要求1-11所述任一方法，其中所有冷冻层的总厚度不超过40mm。

13、如权利要求12所述方法，其中每层厚度至少为1mm。

14、如权利要求13所述方法，其中每层厚度至少为2mm。

15、如权利要求1-14中所述任一方法，其中所述药物成分是一种药品。

16、如权利要求1-14中所述任一方法，其中所述药物成分是维生素。

17、一种制备冷冻干燥制品的方法，其中：第一水液在-10℃至-50℃温度下冷冻;第二水液加到第一液体冻层之上，并使第一液体冻层不溶化，然后一起冷冻;将第一及第二液体在一起冷冻干燥;其中第一和第二液体中至少一个要含有溶解或悬浮其中的药物成分或制品。

18、一种制备冷冻干燥制品的方法，其中：第一水液体在-10℃至-50℃下冷冻;第二水液体加到第一液体冻层之上，并使第一液体冻层不溶化，在-10℃至-50℃下冷冻;将第三液体加到第一和第二液体冻层之上并冷冻;将三种液体一起进行冷冻干燥;其中所述三种液体中至少一种含有溶解或悬浮其中的药物成分或制品。