CN104684871A - 加强植物生长的组合物和方法 - Google Patents

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CN104684871A CN201380050707.7A CN201380050707A CN104684871A CN 104684871 A CN104684871 A CN 104684871A CN 201380050707 A CN201380050707 A CN 201380050707A CN 104684871 A CN104684871 A CN 104684871A
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    • A01N43/00Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds
    • A01N43/02Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • A01N43/04Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms with one hetero atom
    • A01N43/14Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms with one hetero atom six-membered rings
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Abstract

本文记载了用于加强植物生长的包含一种或多种葡糖酸内酯的组合物,以及用一种或多种葡糖酸内酯来处理植物、植物部分或土壤以加强植物生长的方法。

Description

加强植物生长的组合物和方法
技术领域
包含一种或多种葡糖酸内酯的组合物以及使用这种组合物来加强植物生长的方法。
背景技术
内酯是以由两个或更多个碳原子、一个氧原子和与氧原子邻接的酮基构成的闭合环为特征的环状酯。内酯的类型包括带有表明内酯环尺寸的前缀的α-、β-、γ-和δ-内酯(即,α-内酯具有三元环,β-内酯具有四元环,γ-内酯具有五元环,且δ-内酯具有六元环等)。存在有α-和β-内酯,但不常见。例如,β-内酯只能采用特殊方法才能制备,而α-内酯通常在质谱实验中检测为短暂存在的种类。
无疑,γ-和δ-内酯是最常见的。双乙烯酮和β-丙内酯分别用于合成乙酰乙酸衍生物和β-取代的丙酸,且十五酸内酯和黄葵内酯环十六烯被用作香料成分。其他内酯包括维生素C和抗生素酒霉素、红霉素和卡波霉素。
某些内酯已被认识到在农业中有潜在的用途。例如,一些内酯已被认为在调节植物生长中有效。
Kakisawa,H等人(1973).Biosynthesis of a C16-Terpenoid Lactone,a Plant Growth Regulator.J.C.S.Chem.Comm.20:802-803(已公开萜类内酯作为植物生长调节剂)。
Yonema,K等人.Strigolactones as new plant growth regulator.该出版物可以通过万维网在niaes.affrc.go.jp/macro/macro2009/english/W3-04_Yoneyama_Koichi.pdf得到。
美国专利申请2004/0209778(已公开独脚金内酯作为新的植物生长调节剂)。
美国专利申请2004/0209778公开了一种显示出极好的发根活性的内酯衍生物以及含有该衍生物作为活性成分的植物生长调节剂。
Fung,S.&Siddall,J.(1980).Steroselective synthesis of brassinolide:a plant growth promoting steroidal lactone.J.Am.Chem.Soc.102(21):6580-6581,已公开促进植物生长的甾体内酯布拉西诺内酯。
然而,仍然存在对促进植物生长的组合物和方法的需求。
发明内容
本文记载的是包含一种或多种葡糖酸内酯的组合物。发明人已经发现,葡糖酸内酯能够促进植物生长。还发现,当与某些其他能够促进植物生长的植物信号分子相组合时,葡糖酸内酯对植物生长提供协同作用。
在一个实施方式中,本文记载的组合物包含载体以及一种或多种葡糖酸内酯。如本发明所记载的,葡糖酸内酯包括其异构体、盐或溶剂化物。
在另一个实施方式中,组合物包含一种或多种葡糖酸内酯、载体、以及一种或多种农业上有益的成分,该农业上有益的成分为例如一种或多种生物活性成分、一种或多种微量营养素、一种或多种生物刺激素、一种或多种防腐剂、一种或多种聚合物、一种或多种润湿剂、一种或多种表面活性剂、一种或多种除草剂、一种或多种杀真菌剂、一种或多种杀虫剂、或其组合。
在一个实施方式中,本文记载的组合物包含一种或多种葡糖酸内酯、载体、以及一种或多种生物活性成分。生物活性成分可以包括一种或多种植物信号分子。在特定实施方式中,该一种或多种生物活性成分可以包括一种或多种脂壳寡糖(LCO)、一种或多种壳寡糖(CO)、一种或多种几丁质化合物、一种或多种类黄酮和其衍生物、一种或多种非类黄酮nod基因诱导物和其衍生物、一种或多种karrikin和其衍生物、或其任意信号分子组合。
进一步在本文记载的是加强植物或植物部分的生长的方法,包括使植物或植物部分与一种或多种葡糖酸内酯接触以加强植物生长。如本文所记载,葡糖酸内酯包括其异构体、盐或溶剂化物。该方法还可以包括使植物或植物部分接受与一种或多种葡糖酸内酯同时或相继施用的一种或多种农业上有益成分的处理。一种或多种农业上有益的成分可以包括一种或多种生物活性成分、一种或多种微量营养素、一种或多种生物刺激素、或其组合。在一个实施方式中,该方法还包括使植物或植物部分接受一种或多种生物活性成分的处理。生物活性成分可以是一种或多种植物信号分子。在特定实施方式中,一种或多种生物活性成分可以包括一种或多种LCO、一种或多种几丁质化合物、一种或多种CO、一种或多种类黄酮和其衍生物、一种或多种非类黄酮nod基因诱导物和其衍生物、一种或多种karrikin和其衍生物、或其任意信号分子组合。
在特定实施方式中,本文记载了用于加强植物或植物部分的生长的方法,包括使种子与一种或多种葡糖酸内酯接触以加强植物生长。如本文所记载,葡糖酸内酯包括其异构体、盐或溶剂化物。该方法还可以包括使种子接受与一种或多种葡糖酸内酯同时或相继地施用的一种或多种农业上有益成分的处理。
更进一步,记载了用于加强植物或植物部分的生长的方法,包括用一种或多种葡糖酸内酯或其盐处理土壤。之后,在所处理的土壤中的植物或植物部分将接触葡糖酸内酯。处理步骤可以在种植之前、之中或之后,或者在使植物或植物部分生长之前或之中的任何时间进行(例如,在植物或植物部分开始生长之前处理土壤,在植物或植物部分生长时处理土壤)。如本文所记载,葡糖酸内酯包括其异构体、盐或溶剂化物。生长步骤还可以包括使植物在具有一种或多种农业上有益成分的土壤中生长。一种或多种农业上有益的成分可以包括一种或多种生物活性成分、一种或多种微量营养素、一种或多种生物刺激素、或其组合。在一个实施方式中,生长步骤还包括使植物在具有一种或多种生物活性成分的土壤中生长。生物活性成分可以包括一种或多种植物信号分子。在特定实施方式中,一种或多种生物活性成分可以包括一种或多种LCO、一种或多种几丁质化合物、一种或多种CO、一种或多种类黄酮和其衍生物、一种或多种非类黄酮nod基因诱导物和其衍生物、一种或多种karrikin和其衍生物、或其任意信号分子组合。
最后,本文记载了涂覆有一种或多种葡糖酸内酯的种子。实施方式包括涂覆有任意本文记载的组合物的种子。
具体实施方式
所公开的实施方式涉及用于加强植物生长的组合物和方法。
定义:
本文所用的单数形式的“一”、“一个”、和“该”意在也包括复数形式,除非上下文明确地指出相反情况。
本文所用的术语“农业上有益的成分”意在表示能够在农业中引起或提供有益效果和/或有用效果的任何作用剂或作用剂组合。
本文所用的“生物活性成分”意在表示除本文记载的一种或多种葡糖酸内酯之外的生物活性成分(例如,植物信号分子、其他微生物等)。
本文所用的术语“葡糖酸内酯”意在包括以下葡糖酸内酯结构的所有异构体、溶剂化物、水合物、多晶型、晶形、非晶形和盐变体:
本文所用的术语“异构体”意在包括本文所指化合物和/或分子(例如,葡糖酸内酯、LCO、CO、几丁质化合物、类黄酮、茉莉酸或其衍生物、亚油酸或其衍生物、亚麻酸或其衍生物、karrikin等)的所有立体异构体,包括对映体、非对映体,以及所有构象异构体、旋转异构体和互变异构体,除非另有说明。本文公开的化合物和/或分子包括处于基本纯的左旋或右旋形式、或外消旋混合物、或任意比例对映体状态的所有对映体。当实施方式公开(D)-对映体时,该实施方式也包含(L)-对映体;当实施方式公开(L)-对映体时,该实施方式也包含(D)-对映体。当实施方式公开(+)-对映体时,该实施方式也包含(-)-对映体;当实施方式公开(-)-对映体时,该实施方式也包含(+)-对映体。当实施方式公开(S)-对映体时,该实施方式也包含(R)-对映体;当实施方式公开(R)-对映体时,该实施方式也包含(S)-对映体。实施方式意在包括本文所指化合物和/或分子的非对映异构纯(diastereomerically pure)的形式以及处于所有比率的混合物形式的任意非对映异构体。除非在化学结构或化学名称中明确指出立体化学,化学结构或化学名称意在包括所描述化合物和/或分子的所有可能的立体异构体、构象异构体、旋转异构体和互变异构体。
本文所用的术语“有效量”、“有效浓度”或“有效剂量”意在表示足以引起加强的植物生长的一种或多种葡糖酸内酯的量、浓度或剂量。以绝对值表示的实际有效剂量取决于以下因素,包括但不限于,应用一种或多种葡糖酸内酯的土地的尺寸(例如,面积、总英亩数等)、可以增加或降低一种或多种葡糖酸内酯的生长加强作用的其他活性成分或助剂之间的协同或对抗作用、以及一种或多种葡糖酸内酯在组合物中的稳定性和/或作为种子处理剂的稳定性。一种或多种葡糖酸内酯的“有效量”、“有效浓度”或“有效剂量”可以例如通过常规剂量响应实验来确定。
本文所用的术语“载体”意在指代“农艺上可接受的载体”。“农艺上可接受的载体”意在指代能够用于递送活性成分(例如,本文记载的葡糖酸内酯、农业上有益的成分、生物活性成分等)至植物、植物部分(例如,种子)或土壤的任何材料,并且优选该载体能够添加而对植物生长、土壤结构、土壤排水等没有不利作用。
本文所用术语“土壤相容的载体”意在指代能够添加到土壤中而对植物生长、土壤结构、土壤排水等不造成/不具有不利作用的任何材料。
本文所用术语“种子相容的载体”意在指代能够添加到种子而对种子、从种子长成的植物、种子萌芽等不造成/不具有不利作用的任何材料。
本文所用术语“叶相容的载体”意在指代能够添加到植物或植物部分而对植物、植物部分、植物生长、植物健康等不造成/不具有不利作用的任何材料。
本文所用术语“微量营养素”意在指代植物生长、植物健康和/或植物发育所需的营养。
本文所用术语“生物刺激素”意在指代能够加强植物和土壤中的代谢或生理过程的任何作用剂或作用剂组合。
本文所用术语“除草剂”意在指代能够杀灭杂草和/或抑制杂草生长(在某些情况下该抑制是可逆的)的任何作用剂或作用剂组合。
本文所用术语“杀真菌剂”意在指代能够杀灭真菌和/或抑制真菌生长的任何作用剂或作用剂组合。
本文所用术语“杀虫剂”意在指代能够杀灭一种或多种昆虫和/或抑制一种或多种昆虫生长的任何作用剂或作用剂组合。
本文所用术语“加强的植物生长”意在指代增加的植物产出(例如,以每英亩蒲式耳测定的增加的生物质、增加的果实数量或其组合)、增加的根数量、增加的根质量、增加的根体积、增加的叶面积、增加的植物占地面积、增加的植物强健度或其组合。
本文所用术语“植物”和“植物部分”意在指代所有植物和植物群落,例如期望的和不期望的野生植物或作物(包括自然出现的作物)。作物可以是可通过常规植物培育以及优化法、或通过生物技术和遗传工程方法、或通过这些方法的组合而得到的植物,包括转基因植物并且包括受到植物培育者权利保护或不受保护的植物培育品种。植物部分理解为表示植物在地上和地下的所有部位和器官,诸如幼苗、叶、花和根,可以提及的实例是叶、针叶、茎、树干、花、子实体、果实、种子、根、块茎和根茎。植物部分还包括收获的材料以及无性和有性繁殖材料(例如插枝、块茎、根茎、旁枝和种子等)。
本文所用的术语“接种物”意在指代任何形式的微生物细胞或孢子,其在温度、湿度等条件对微生物生长有利时能够在土壤表面或土壤中繁殖。
本文所用术语“固氮有机体”意在指代能够将大气中的氮(N2)转化为氨(NH3)的任何有机体。
本文所用术语“解磷有机体”意在指代能够将不溶磷酸盐转化为可溶磷酸盐形式的任何有机体。
本文所用术语“孢子”具有本领域技术人员熟知并理解的其通常含义。本文所用的术语孢子是指处于其休眠、保护状态的微生物。
本文所用术语特定元素的“来源”意在表示该元素的化合物至少在处于研究中的土壤条件下无法使该元素完全用于植物摄取。
组合物
所公开的组合物包含载体以及本文记载的一种或多种葡糖酸内酯。在某些实施方式中,组合物可以是液体、凝胶、浆状物、固体或粉末(可湿性粉末或干粉)的形式。在另一个实施方式中,组合物可以是种子涂层的形式。液体、浆状物或粉末(例如,可湿性粉末)形式的组合物可以适用于种子涂覆。当用于涂覆种子时,组合物可以施用于种子并给予干燥。在组合物是粉末(例如,可湿性粉末)的实施方式中,在施用至种子之前,液体例如水可能需要添加至粉末。
葡糖酸内酯:
如全文上下所公开的,本文记载的组合物包含一种或多种葡糖酸内酯。该一种或多种葡糖酸内酯可以是天然的葡糖酸内酯(即,非合成制备的)、合成的葡糖酸内酯(例如,化学合成的葡糖酸内酯)、或其组合。
在一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯具有分子式C6H10O6以及约178.14gmol-1的摩尔质量。在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯可以包括具有结构(Ι)的葡糖酸内酯及其异构体、盐和溶剂化物。
在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯可以包括具有结构(I-A)的葡糖酸内酯及其盐和溶剂化物。
在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯可以包括具有结构(I-B)的葡糖酸内酯及其盐和溶剂化物。
在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯可以包括具有结构(I-C)的葡糖酸内酯及其盐和溶剂化物。
在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯可以包括具有结构(I-D)的葡糖酸内酯及其盐和溶剂化物。
在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯可以包括具有结构(I-E)的葡糖酸内酯及其盐和溶剂化物。
在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯可以包括具有结构(I-F)的葡糖酸内酯及其盐和溶剂化物。
在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯可以包括具有结构(I-G)的葡糖酸内酯及其盐和溶剂化物。
在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯可以包括具有结构(I-H)的葡糖酸内酯及其盐和溶剂化物。
在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯可以包括具有结构(I-I)的葡糖酸内酯及其盐和溶剂化物。
在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯可以包括具有结构(I-J)的葡糖酸内酯及其盐和溶剂化物。
在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯可以包括具有结构(I-K)的葡糖酸内酯及其盐和溶剂化物。
在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯可以包括具有结构(I-L)的葡糖酸内酯及其盐和溶剂化物。
在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯可以包括具有结构(I-M)的葡糖酸内酯及其盐和溶剂化物。
在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯可以包括具有结构(I-N)的葡糖酸内酯及其盐和溶剂化物。
在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯可以包括具有结构(I-O)的葡糖酸内酯及其盐和溶剂化物。
在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯可以包括具有结构(I-P)的葡糖酸内酯及其盐和溶剂化物。
在一个实施方式中,用在本文所记载组合物中的一种或多种葡糖酸内酯可以是上述葡糖酸内酯中的至少两种(即,I-A、I-B、I-C、I-D、I-E、I-F、I-G、I-H、I-I、I-J、I-K、I-L、I-M、I-N、I-O和I-P中的至少两种)、上述葡糖酸内酯中的至少三种、上述葡糖酸内酯中的至少四种、上述葡糖酸内酯中的至少五种、上述葡糖酸内酯中的至少六种、上述葡糖酸内酯中的至少七种、上述葡糖酸内酯中的至少八种、上述葡糖酸内酯中的至少九种、上述葡糖酸内酯中的至少十种、上述葡糖酸内酯中的至少十一种、上述葡糖酸内酯中的至少十二种、上述葡糖酸内酯中的至少十三种、上述葡糖酸内酯中的至少十四种、上述葡糖酸内酯中的至少十五种、上述葡糖酸内酯中的至少十六种、最高为包括所有上述葡糖酸内酯,包括其盐和溶剂化物。
载体:
本文记载的载体将使一种或多种葡糖酸内酯保持有效(例如,能够增加植物生长)。本文记载的载体的非限制性实例包括液体、凝胶、浆状物或固体(包括可湿性粉末或干粉)。载体材料的选择将取决于意向应用。载体可以例如是土壤相容的载体、种子相容的载体、和/或叶相容的载体。在实施方式中,载体是土壤相容的载体。在另一个实施方式中,载体是种子相容的载体。在另一个实施方式中,载体是叶相容的载体。
在一个实施方式中,载体是液体载体。用作本文所记载组合物载体的液体的非限制性实例包括水、水性溶液或非水性溶液。在一个实施方式中,载体为水。在另一个实施方式中,载体为水性溶液。在另一个实施方式中,载体为非水性溶液。如果使用液体载体,液体(例如,水)载体还可以包括用来培养本文所记载组合物中使用的一种或多种微生物菌株的生长介质。用于微生物菌株的适当生长介质的非限制性实例包括YEM培养基、甘露醇酵母提取物、甘油酵母提取物、察多(Czapek-Dox)培养基、马铃薯右旋糖肉汤、或本领域技术人员已知与可能包含在本文所记载组合物中的微生物菌株相容和/或为其提供生长营养的任何介质。
葡糖酸内酯易溶于水,在特定实施方式中,载体是水。在另一特定实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯以0.5~500.0mg/L的浓度添加至水载体。在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯以1.0~100.0mg/L的浓度添加至水载体。在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯以500.0mg/l的浓度添加至水载体。在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯以400.0mg/l的浓度添加至水载体。在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯以300.0mg/l的浓度添加至水载体。在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯以250.0mg/l的浓度添加至水载体。在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯以200.0mg/l的浓度添加至水载体。在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯以175.0mg/l的浓度添加至水载体。在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯以150.0mg/l的浓度添加至水载体。在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯以125.0mg/l的浓度添加至水载体。在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯以100.0mg/l的浓度添加至水载体。在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯以75.0mg/l的浓度添加至水载体。在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯以50.0mg/l的浓度添加至水载体。在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯以25.0mg/l的浓度添加至水载体。在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯以15.0mg/l的浓度添加至水载体。在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯以12.5mg/l的浓度添加至水载体。在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯以10.0mg/l的浓度添加至水载体。在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯以7.5mg/l的浓度添加至水载体。在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯以5.0mg/l的浓度添加至水载体。在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯以2.5mg/l的浓度添加至水载体。在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯以2.0mg/l的浓度添加至水载体。在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯以1.75mg/l的浓度添加至水载体。在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯以1.50mg/l的浓度添加至水载体。在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯以1.25mg/l的浓度添加至水载体。在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯以1.0mg/l的浓度添加至水载体。在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯以0.75mg/l的浓度添加至水载体。在另一个实施方式中,一种或多种葡糖酸内酯以0.5mg/L的浓度添加至水载体。
农业上有益的成分:
本文公开的组合物可以包含一种或多种农业上有益的成分。农业上有益成分的非限制性实例包括一种或多种生物活性成分、微量营养素、生物刺激素、防腐剂、聚合物、润湿剂、表面活性剂、灭草剂、杀真菌剂、杀虫剂、或其组合。
生物活性成分:
除本文记载的一种或多种葡糖酸内酯外,本文记载的组合物可以任选地包含本文记载的一种或多种生物活性成分。生物活性成分的非限制性实例包括植物信号分子(例如,脂壳寡糖(LCO)、壳寡糖(CO)、几丁质化合物、类黄酮、茉莉酸或其衍生物、亚油酸或其衍生物、亚麻酸或其衍生物、karrikin等)和有益微生物(例如,根瘤菌(Rhizobiumspp.)、慢生根瘤菌(Bradyrhizobium spp.)、中华根瘤菌(Sinorhizobiumspp.)、固氮根瘤菌(Azorhizobium spp.)、球囊霉(Glomus spp.)、巨孢囊霉(Gigaspora spp.)、Hymenoscyphous spp.、树粉孢(Oidiodendronspp.)、蜡蘑(Laccaria spp)、豆马勃(Pisolithus spp.)、须腹菌(Rhizopogonspp.)、硬皮马勃(Scleroderma spp.)、丝核菌(Rhizoctonia spp.)、不动杆菌(Acinetobacter spp.)、节杆菌(Arthrobacter spp.)、节丛孢(Arthrobotrys spp.)、曲霉(Aspergillus spp.)、固氮螺菌(Azospirillumspp.)、芽孢杆菌(Bacillus spp.)、伯克霍尔德氏菌(Burkholderia spp.)、假丝酵母(Candida spp.)、金色单胞菌(Chryseomonas spp.)、肠杆菌(Enterobacter spp.)、正青霉菌(Eupenicillium spp.)、微小杆菌(Exiguobacterium spp.)、克雷伯氏菌(Klebsiella spp.)、克吕沃尔菌(Kluyvera spp.)、微杆菌(Microbacterium spp.)、毛霉(Mucor spp.)、拟青霉(Paecilomyces spp.)、类芽孢杆菌(Paenibacillus spp.)、青霉(Penicillium spp.)、假单胞菌(Pseudomonas spp.)、沙雷氏菌(Serratiaspp.)、寡养单胞菌(Stenotrophomonas spp.)、链霉菌(Streptomyces spp.)、链孢囊菌(Streptosporangium spp.)、Swaminathania spp.、硫杆菌(Thiobacillus spp.)、孢圆酵母(Torulospora spp.)、弧菌(Vibrio spp.)、黄色杆菌(Xanthobacter spp.)、黄单胞菌(Xanthomonas spp.)等)。
植物信号分子:
在实施方式中,本文记载的组合物包含一种或多种植物信号分子。在一个实施方式中,一种或多种植物信号分子是一种或多种LCO。在另一个实施方式中,一种或多种植物信号分子是一种或多种CO。在另一个实施方式中,一种或多种植物信号分子是一种或多种几丁质化合物。在另一个实施方式中,一种或多种植物信号分子是一种或多种类黄酮或其衍生物。在另一个实施方式中,一种或多种植物信号分子是一种或多种非类黄酮nod基因诱导物(例如,茉莉酸、亚油酸、亚麻酸、及其衍生物)。在另一个实施方式中,一种或多种植物信号分子是一种或多种karrikin或其衍生物。在另一个实施方式中,一种或多种植物信号分子是一种或多种LCO、一种或多种CO、一种或多种几丁质化合物、一种或多种类黄酮及其衍生物、一种或多种非类黄酮nod基因诱导物及其衍生物、一种或多种karrikin及其衍生物、或其任意信号分子组合。
LCO:
在领域内也称为共生Nod信号或Nod因子的脂壳寡糖化合物(LCO)由在非还原端缩合有N-连接的脂酰链的β-l,4-连接的N-乙酰基-D-葡糖胺(“GlcNAc”)残基的寡糖骨架构成。LCO在骨架中GlcNAc残基的数量、脂酰链的长度和饱和度、以及还原和非还原糖残基的取代方面会有不同。LCO意在包括所有LCO及其异构体、盐和溶剂化物。LCO的实例在以下呈现为式I:
其中:
G是己糖胺,其可以例如在氮上被乙酰基取代,在氧上被硫酸根、乙酰基和/或醚基取代,
R1、R2、R3、R5、R6和R7可以相同或不同,为H、CH3CO--、CxHyCO--(其中x是0~17的整数,且y是1~35的整数)、或任何其他酰基例如氨甲酰基,
R4为含有至少12个碳原子的单、二或三不饱和脂肪链,且n是1~4的整数。
LCO可以从例如根瘤菌的细菌中获得(分离和/或纯化),诸如根瘤菌、慢生根瘤菌、中华根瘤菌和固氮根瘤菌。LCO结构对于各个这些细菌物种是特有的,并且各个菌株可以产生多种具有不同结构的LCO。例如,来自苜蓿中华根瘤菌(S.meliloti)的特定LCO已记载于美国专利5,549,718中,具有式II:
其中,R为H或CH3CO--,且n等于2或3。
更具体的LCO包括NodRM、NodRM-1、NodRM-3。当被乙酰化时(R=CH3CO--),它们分别成为AcNodRM-1和AcNodRM-3(美国专利5,545,718)。
来自大豆慢生根瘤菌(Bradyrhizobium japonicum)的LCO记载于美国专利5,175,149和5,321,011中。大体而言,它们是包括甲基岩藻糖的五糖植物激素。大量的这些大豆慢生根瘤菌来源的LCO被记载:BjNod-V(C18:1);BjNod-V(AC,C18:1)、BjNod-V(C16:1);和BjNod-V(AC,C16:0),其中“V”表示存在五个N-乙酰基葡糖胺;“Ac”表示乙酰化;“C”后面的数字表明脂肪酸侧链中碳的数量;且“:”后面的数字表示双键的数量。
在本发明组合物中使用的LCO可以从生产LCO的细菌菌株中获得(即,分离和/或纯化),这些细菌菌株为例如固氮根瘤菌属、慢生根瘤菌属(包括大豆慢生根瘤菌)、中慢生根瘤菌属(Mesorhizobium)、根瘤菌属(包括豌豆根瘤菌(R.leguminosarum))、中华根瘤菌属(包括苜蓿中华根瘤菌)的菌株以及遗传工程改造为生产LCO的细菌菌株。
本发明还包括,使用从菌根真菌例如球囊菌(Glomerocycota)的真菌(如丛枝菌根真菌(Glomus intraradicus))中得到(即,分离和/或纯化)的LCO的组合物。从这些真菌得到的代表性LCO的结构记载于WO 2010/049751和WO 2010/049751(本文记载的LCO也称为“Myc因子”)。
本发明的组合物还包括,合成型LCO化合物例如记载于WO 2005/063784中的那些、以及通过遗传工程产生的重组LCO的用途。基本的天然出现的LCO结构可以含有在天然出现的LCO中发现的修饰或取代,例如记载于Spaink,Crit.Rev.Plant Sci.54:257-288(2000)和D'Haeze等人,Glycobiology 12:79R-105R(2002)中的那些。用于构建LCO的前体寡糖分子(CO,在以下说明,也用作本发明中的植物信号分子)也可以通过遗传工程有机体来合成,例如,如Samain等人,Carb.Res.302:35-42(1997);Samain等人,J.Biotechnol.72:33-47(1999)中所述。
LCO可以以多种纯度形式进行利用,并且可以单独使用或以产LCO细菌或真菌的培养物的形式进行使用。提供基本纯的LCO的方法包括,简单地从LCO与微生物的混合物中去除微生物细胞,或通过LCO溶剂相分离以及之后的HPLC色谱而继续分离并纯化LCO分子,例如在美国专利5,549,718中所记载的。纯化可以通过反复的HPLC进行加强,且纯化的LCO分子可以冻干以长期存储。
CO:
壳寡糖(CO)在领域内已知是被识别为几丁质寡聚体的β-1-4连接的N-乙酰基葡糖胺结构,也已知为N-乙酰基壳寡糖。CO具有独特且不同的侧链修饰,这使其不同于几丁质分子[(C8H13NO5)n,CASNo.1398-61-4]和壳聚糖分子[(C5H11NO4)n,CAS No.9012-76-4]。描述CO的结构和生产的代表性文献如下所示:Van der Holst等人,CurrentOpinion in Structural Biology,11:608-616(2001);Robina等人,Tetrahedron 58:521-530(2002);Hanel等人,Planta 232:787-806(2010);Rouge等人Chapter 27,"The Molecular Immunology of ComplexCarbohydrates",Advances in Experimental Medicine and Biology,Springer Science;Wan等人,Plant Cell 21:1053-69(2009);PCT/F100/00803(9/21/2000);以及Demont-Caulet等人,Plant Physiol.120(1):83-92(1999)。CO可以是合成的或者重组的。制备重组CO的方法在领域内已知。参见,例如,Samain等人(同上);Cottaz等人,Meth.Eng.7(4):311-7(2005)和Samain等人,J.Biotechnol.72:33-47(1999)。CO意在包括其异构体、盐和溶剂化物。
几丁质化合物:
作为真菌细胞壁以及昆虫和甲壳类动物的外骨骼的主要成分的几丁质和壳聚糖也由GlcNAc残基构成。几丁质化合物包括几丁质(IUPAC:N-[5-[[3-乙酰氨基-4,5-二羟基-6-(羟甲基)四氢吡喃-2基]甲氧基甲基]-2-[[5-乙酰氨基-4,6-二羟基-2-(羟甲基)四氢吡喃-3-基]甲氧基甲基]-4-羟基-6-(羟甲基)四氢吡喃-3-基]乙酰胺)、和壳聚糖(IUPAC:5-氨基-6-[5-氨基-6-[5-氨基-4,6-二羟基-2(羟甲基)四氢吡喃-3-基]氧-4-羟基-2-(羟甲基)四氢吡喃-3-基]氧-2(羟甲基)四氢吡喃-3,4-二醇)、及其异构体、盐和溶剂化物。
这些化合物可以商购自例如Sigma-Aldrich,或者可以从昆虫、甲壳类动物的壳或真菌细胞壁制得。制备几丁质和壳聚糖的方法为领域内已知,并已记载于例如美国专利4,536,207(从甲壳纲动物的壳制备)、Pochanavanich等人,Lett.Appl.Microbiol.35:17-21(2002)(从真菌细胞壁制备)和美国专利5,965,545中(从蟹壳以及市售壳聚糖的水解中进行制备)。去乙酰化的几丁质和壳聚糖可以以小于35%至大于90%的去乙酰化获得,且涵盖较广范围的分子量,例如小于15kD的低分子量壳聚糖寡聚体和0.5~2kD的几丁质寡聚体;分子量为约15kD的“试剂级(practical grade)”壳聚糖;和高至70kD的高分子量壳聚糖。配制用于种子处理的几丁质和壳聚糖组合物也市售可得。市售产品包括,例如(Plant Defense Boosters,Inc.)和BEYONDTM(Agrihouse,Inc.)。
类黄酮:
类黄酮是具有两个芳族环由三碳桥连接的大体结构的酚类化合物。类黄酮由植物产生并具有很多功能,例如,作为有益的信号通路分子,以及作为对抗昆虫、动物、真菌和细菌的保护物质。类黄酮的分类包括查耳酮、花青素、香豆素、黄酮、黄烷醇、黄酮醇、黄烷酮和异黄酮。参见,Jain等人,J.Plant Biochem.&Biotechnol.11:1-10(2002);Shaw等人,Environmental Microbiol.11:1867-80(2006)。
可以用在本发明组合物中的代表性类黄酮包括木樨草素、芹菜素、红橘素、槲皮素、山萘酚、杨梅素、漆黄素、异鼠李素、藿香黄酮醇、甲基鼠李素、橙皮素、柚皮素、芒柄花黄素、圣草酚、高圣草素、紫杉叶素、二氢槲皮素、二氢山萘酚、染料木黄酮、大豆甙元、大豆黄素、儿茶素、没食子儿茶素、儿茶素-3-没食子酸酯、没食子儿茶素-3-没食子酸酯、表儿茶素、表没食子儿茶素、表儿茶素-3-没食子酸酯、表没食子儿茶素-3-没食子酸酯、花青素(cyaniding)、飞燕草素、锦葵色素、天竺葵色素、芍药素、一甲翠雀花色素、或其衍生物。类黄酮化合物例如从Natland International Corp.,Research Triangle Park,NC;MP Biomedicals,Irvine,CA;LC Laboratories,Woburn MA商购得到。类黄酮化合物可以从植物或种子中分离,例如,如在美国专利5,702,752;5,990,291;和6,146,668中所记载。类黄酮化合物也可以通过遗传工程有机体例如酵母来生产,如Ralston等人,Plant Physiology 137:1375-88(2005)中所记载。类黄酮化合物意在包括所有类黄酮化合物及其异构体、盐和溶剂化物。
非类黄酮Nod基因诱导物:
茉莉酸(JA,[1R-[1α,2β(Z)]]-3-氧代-2-(戊烯基)环戊烷乙酸)和其衍生物、亚油酸((Z,Z)-9,12-十八碳二烯酸)和其衍生物、以及亚麻酸((Z,Z,Z)-9,12,15-十八碳三烯酸)和其衍生物也可以用在本文记载的组合物中。非类黄酮nod基因诱导物意在不仅包括本文记载的非类黄酮nod基因诱导物,还包括其异构体、盐和溶剂化物。
茉莉酸及其甲酯(茉莉酸甲酯(MeJA))(统称为茉莉酮酸酯)是在植物中天然出现的十八烷(octadecanoid)类化合物。茉莉酸由小麦幼苗的根部产生,通过真菌微生物例如可可球二孢菌(Botryodiplodiatheobromae)和藤仓赤霉(Gibbrella fujikuroi)、酵母(酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae))以及大肠杆菌(Escherichia coli)的致病性菌株和非致病性菌株产生。亚油酸和亚麻酸在茉莉酸的生物合成过程中产生。茉莉酮酸酯、亚油酸和亚麻酸(及其衍生物)被报道为根瘤菌nod基因表达或LCO产生的诱导物。参见,例如Mabood,Fazli,Jasmonates induce the expression of nod genes in Bradyrhizobiumjaponicum,May 17,2001;和Mabood,Fazli,"Linoleic and linolenic acidinduce the expression of nod genes in Bradyrhizobium japonicum,"USDA3,May 17,2001。
亚油酸、亚麻酸和茉莉酸的可以用在本发明组合物中的有用衍生物包括酯、酰胺、糖苷和盐。代表性的酯是亚油酸、亚麻酸或茉莉酸的羧基已被--COR基团取代的化合物,其中R是--OR1基,且其中R1为:烷基,例如C1~C8无支链或支链的烷基,如甲基、乙基或丙基;烯基,例如C2~C8无支链或支链的烯基;炔基,例如C2~C8无支链或支链的炔基;具有例如6~10个碳原子的芳基;或具有例如4~9个碳原子的杂芳基,其中杂芳基中的杂原子可以是例如N、O、P或S。代表性的酰胺是亚油酸、亚麻酸或茉莉酸的羧基已被--COR基取代的化合物,其中R是NR2R3基,且其中R2和R3独立地为:氢;烷基,例如C1~C8无支链或支链的烷基,如甲基、乙基或丙基;烯基,例如C2~C8无支链或支链的烯基;炔基,例如C2~C8无支链或支链的炔基;具有例如6~10个碳原子的芳基;或具有例如4~9个碳原子的杂芳基,其中杂芳基中的杂原子可以是例如N、O、P或S。酯可以通过已知方法进行制备,例如酸催化的亲核加成,其中羧酸与醇在催化量的无机酸的存在下进行反应。酰胺也可以通过已知方法进行制备,例如通过使羧酸与合适的胺于中性条件下在偶联剂比如二环己基碳二亚胺(DCC)的存在下进行反应。亚油酸、亚麻酸和茉莉酸的合适的盐包括,例如碱加成盐。可以用作制备这些化合物的代谢上可接受的碱盐的试剂的碱包括得自阳离子例如碱金属阳离子(例如钾和钠)和碱土金属阳离子(例如钙和镁)的那些。这些盐可以通过将亚油酸、亚麻酸或茉莉酸的溶液与碱溶液混合在一起而容易地制备。盐可以从溶液中沉淀出,并通过过滤收集或可以通过其他方法例如通过溶剂蒸发而回收。
karrikin:
karrikin是插烯4H-吡喃酮,例如2H-呋喃并[2,3-c]吡喃-2-酮,包括其衍生物和类似物。karrikin意在包括其异构体、盐和溶剂化物。这些化合物的实例由以下结构表示,或其生物学可接受的盐:
其中:Z是O、S或NR5;R1、R2、R3和R4各自独立地为H、烷基、烯基、炔基、苯基、苄基、羟基、羟烷基、烷氧基、苯氧基、苄氧基、CN、COR6、COOR=、卤素、NR6R7或NO2;且R5、R6和R7各自独立地为H、烷基或烯基。这些化合物的生物学可接受的盐的实例可以包括与生物学可接受的酸形成的酸加成盐,其实例包括盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐或硫酸氢盐、磷酸盐或磷酸氢盐、乙酸盐、苯甲酸盐、琥珀酸盐、富马酸盐、马来酸盐、乳酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、葡糖酸盐;甲磺酸盐、苯磺酸盐和对甲苯磺酸。其他生物学可接受的金属盐可以包括与碱形成的碱金属盐,其实例包括钠盐和钾盐。该结构所包含的且可以适用于本发明的化合物的实例包括以下:3-甲基-2H-呋喃并[2,3-c]吡喃-2-酮(其中R1=CH3,R2、R3、R4=H)、2H-呋喃并[2,3-c]吡喃-2-酮(其中R1、R2、R3、R4=H)、7-甲基-2H-呋喃并[2,3-c]吡喃-2-酮(其中R1、R2、R4=H,R3=CH3)、5-甲基-2H-呋喃并[2,3-c]吡喃-2-酮(其中R1、R2、R3=H,R4=CH3)、3,7-二甲基-2H-呋喃并[2,3-c]吡喃-2-酮(其中R1、R3=CH3,R2、R4=H)、3,5-二甲基-2H-呋喃并[2,3-c]吡喃-2-酮(其中R1、R4=CH3,R2、R3=H)、3,5,7-三甲基-2H-呋喃并[2,3-c]吡喃-2-酮(其中R1、R3、R4=CH3,R2=H)、5-甲氧基甲基-3-甲基-2H-呋喃并[2,3-c]吡喃-2-酮(其中R1=CH3,R2、R3=H,R4=CH2OCH3)、4-溴-3,7-二甲基-2H-呋喃并[2,3-c]吡喃-2-酮(其中R1、R3=CH3,R2=Br,R4=H)、3-甲基呋喃并[2,3-c]吡啶-2(3H)-酮(其中Z=NH,R1=CH3,R2、R3、R4=H)、3,6-二甲基呋喃并[2,3-c]吡啶-2(6H)-酮(其中Z=N-CH3,R1=CH3,R2、R3、R4=H)。参见,美国专利7,576,213。这些分子也称为karrikin。参见,Halford,"Smoke Signals,"Chem.Eng.News(April 12,2010),37-38页(报道了在森林火灾之后烟雾中含有的karrikin或丁烯羟酸内酯作为生长刺激物并刺激种子的萌芽,并且能够使贮存后的种子如玉米、西红柿、莴苣和洋葱更健壮)。这些分子是美国专利7,576,213的主题。
有益微生物:
在实施方式中,本文记载的组合物可以包含一种或多种有益微生物。一种或多种有益微生物可以是孢子形式、营养体形式、或其组合。一种或多种有益微生物可以包括任意数目的具有一种或多种有益特征(例如,产生本文记载的一种或多种植物信号分子、加强营养和水分摄取、促进和/或加强氮固定、加强生长、加强种子萌芽、加强出苗、打破植物的休眠和不动期等)的微生物。
在一个实施方式中,有益微生物包括一种或多种细菌。在另一个实施方式中,细菌是固氮生物(即,作为共生固氮菌的细菌)。在另一个实施方式中,细菌是以下属的细菌及其组合:根瘤菌(例如,R.cellulosilyticum、R.daejeonense、菜豆根瘤菌(R.etli)、羊豆根瘤菌(R.galegae)、高卢根瘤菌(R.gallicum)、贾氏根瘤菌(R.giardinii)、海南根瘤菌(R.hainanense)、胡特根瘤菌(R.huautlense)、R.indigoferae、豌豆根瘤菌(R.leguminosarum)、R.loessense、羽扇豆根瘤菌(R.lupini)、R.lusitanum、苜蓿根瘤菌(R.meliloti)、蒙古根瘤菌(R.mongolense)、R.miluonense、岩黄芪根瘤菌(R.sullae)、热带根瘤菌(R.tropici)、居水根瘤菌(R.undicola)、和/或杨陵根瘤菌(R.yanglingense))、慢生根瘤菌(例如,B.bete、B.canariense、埃氏慢生根瘤菌(B.elkanii)、B.iriomotense、大豆慢生根瘤菌(B.japonicum)、B.jicamae、辽宁慢生根瘤菌(B.liaoningense)、B.pachyrhizi、和/或圆明慢生根瘤菌(B.yuanmingense))、固氮根瘤菌(例如,茎瘤固氮根瘤菌(A.caulinodans)和/或多氏固氮根瘤菌(A.doebereinerae))、中华根瘤菌(例如,S.abri、S.adhaerens、美洲中华根瘤菌(S.americanum)、S.aboris、费氏中华根瘤菌(S.fredii)、S.indiaense、柯斯第中华根瘤菌(S.kostiense)、鸡眼草中华根瘤菌(S.kummerowiae)、苜蓿中华根瘤菌(S.medicae)、草木樨中华根瘤菌(S.meliloti)、墨西哥中华根瘤菌(S.mexicanus)、莫雷兰中华根瘤菌(S.morelense)、萨赫勒中华根瘤菌(S.saheli)、多宿中华根瘤菌(S.terangae)、和/或新疆中华根瘤菌(S.xinjiangense))、中慢生根瘤菌(山合欢中慢生根瘤菌(M.albiziae)、紫穗槐中慢生根瘤菌(M.amorphae)、查克中慢生根瘤菌(M.chacoense)、鹰嘴豆中慢生根瘤菌(M.ciceri)、华葵中慢生根瘤菌(M.huakuii)、百脉根中慢生根瘤菌(M.loti)、地中海中慢生根瘤菌(M.mediterraneum)、M.pluifarium、北方中慢生根瘤菌(M.septentrionale)、温带中慢生根瘤菌(M.temperatum)、和/或天山中慢生根瘤菌(M.tianshanense))。在特定实施方式中,有益微生物选自大豆慢生根瘤菌、豌豆根瘤菌、苜蓿根瘤菌、草木樨中华根瘤菌、及其组合。在另一个实施方式中,有益微生物是大豆慢生根瘤菌。在另一个实施方式中,有益微生物是豌豆根瘤菌。在另一个实施方式中,有益微生物是苜蓿根瘤菌。在另一个实施方式中,有益微生物是草木樨中华根瘤菌。
在另一个实施方式中,一种或多种有益微生物包括一种或多种解磷微生物。解磷微生物包括真菌菌株和细菌菌株。在实施方式中,解磷微生物包括选自以下属的物种及其组合:不动杆菌(例如,乙酸钙不动杆菌(Acinetobacter calcoaceticus)等)、节杆菌、节丛孢(例如,少孢节丛孢(Arthrobotrys oligospora)等)、曲霉(例如,黑曲霉(Aspergillus niger)等)、固氮螺菌(例如,Azospirillum halopraeferans等)、芽孢杆菌(例如,解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)、萎缩芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus)、环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)等)、伯克霍尔德氏菌(例如,洋葱伯克霍尔德氏菌(Burkholderiacepacia)、越南伯克霍尔德氏菌(Burkholderia vietnamiensis)等)、假丝酵母(例如,克瑞斯假丝酵母(Candida krissii)等)、金色单胞菌(例如,浅黄金色单胞菌(Chryseomonas luteola)等)、肠杆菌(例如,产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)、阿氏肠杆菌(Enterobacterasburiae)、肠杆菌(Enterobacter spp.)、泰洛肠杆菌(Enterobactertaylorae)等)、正青霉菌(例如,微细正青霉菌(Eupenicillium parvum)等)、微小杆菌、克雷伯氏菌、克吕沃尔菌(例如,栖冷克吕沃尔菌(Kluyvera cryocrescens)等)、微杆菌、毛霉(例如,多枝毛霉菌(Mucorramosissimus)等)、拟青霉(例如,蝙蝠蛾拟青霉(Paecilomyceshepialid)、马昆德拟青霉(Paecilomyces marquandii)等)、类芽孢杆菌(例如,浸麻类芽孢杆菌(Paenibacillus macerans)、胶质类芽孢杆菌(Paenibacillus mucilaginosus)等)、青霉(例如,拜赖青霉(Penicilliumbilaiae)(之前称为Penicillium bilaii)、微白青霉(Penicillium albidum)、桔灰青霉(Penicillium aurantiogriseum)、产黄青霉(Penicilliumchrysogenum)、黄暗青霉(Penicillium citreonigrum)、桔青霉(Penicilliumcitrinum)、指状青霉(Penicillium digitatum)、常现青霉(Penicilliumfrequentas)、褐青霉(Penicillium fuscum)、Penicillium gaestrivorus、光孢青霉(Penicillium glabrum)、灰黄青霉(Penicillium griseofulvum)、纠缠青霉(Penicillium implicatum)、微紫青霉(Penicillium janthinellum)、淡紫青霉(Penicillium lilacinum)、微黄青霉(Penicillium minioluteum)、蒙大拿青霉(Penicillium montanense)、黑青霉(Penicillium nigricans)、草酸青霉(Penicillium oxalicum)、Penicillium pinetorum、嗜松青霉(Penicillium pinophilum)、产紫青霉(Penicillium purpurogenum)、Penicillium radicans、放射青霉(Penicillium radicum)、雷斯青霉(Penicillium raistrickii)、皱褶青霉(Penicillium rugulosum)、简青霉(Penicillium simplicissimum)、离生青霉(Penicillium solitum)、变幻青霉(Penicillium variabile)、毡毛青霉(Penicillium velutinum)、鲜绿青霉(Penicillium viridicatum)、灰绿青霉(Penicillium glaucum)、Penicillium fussiporus和扩展青霉(Penicillium expansum)等)、假单胞菌(例如,Pseudomonas corrugate、荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)、Pseudomonas lutea、草假单胞菌(Pseudomonas poae)、恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)、斯氏假单胞菌(Pseudomonasstutzeri)、平凡假单胞菌(Pseudomonas trivialis)等)、沙雷氏菌(例如,粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)等)、寡养单胞菌(例如,嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)等)、链霉菌、链孢囊菌、Swaminathania(例如,Swaminathania salitolerans等)、硫杆菌(例如,氧化亚铁硫杆菌(Thiobacillus ferrooxidans)等)、孢圆酵母(例如,球有孢圆酵母(Torulospora globosa)等)、弧菌(例如,解蛋白弧菌(Vibrioproteolyticus)等)、黄色杆菌(例如,敏捷黄色杆菌(Xanthobacter agilis)等)、黄单胞菌(例如,野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)等)。
在特定实施方式中,一种或多种解磷微生物是真菌青霉菌的菌株。在另一个实施方式中,一种或多种青霉菌种是拜赖青霉、P.gaestrivorus、或其组合。
在另一个实施方式中,有益微生物是一种或多种菌根。具体地,一种或多种菌根是内生菌根(也称为泡囊丛枝菌根、VAM、丛枝菌根或AM)、外生菌根、或其组合。
在一个实施方式中,一种或多种菌根是球囊菌门(Glomeromycota),球囊霉属(Glomus)和巨孢囊霉属(Gigaspora)的内生菌根。在另一实施方式中,内生菌根是聚丛球囊霉(Glomusaggregatum)、Glomus brasilianum、明球囊霉(Glomus clarum)、沙漠球囊霉(Glomus deserticola)、幼套球囊霉(Glomus etunicatum)、集球囊霉(Glomus fasciculatum)、根内球囊霉(Glomus intraradices)、单孢球囊霉(Glomus monosporum)、或摩西球囊霉(Glomus mosseae)、珍珠巨孢囊霉(Gigaspora margarita)的菌株、或其组合。
在另一个实施方式中,一种或多种菌根是担子菌门(Basidiomycota)、子囊菌门(Ascomycota)和结合菌门(Zygomycota)的外生菌根。在另一实施方式中,外生菌根是双色蜡蘑(Laccariabicolor)、红蜡蘑(Laccaria laccata)、彩色豆马勃(Pisolithus tinctorius)、Rhizopogon amylopogon、Rhizopogon fulvigleba、浅黄根须腹菌(Rhizopogon luteolus)、Rhizopogon villosuli、光硬皮马勃(Sclerodermacepa)、黄硬皮马勃(Scleroderma citrinum)的菌株或其组合。
在另一个实施方式中,一种或多种菌根是杜鹃花类(ecroid)菌根、浆果鹃类(arbutoid)菌根、或水晶兰类(monotropoid)菌根。灌木和外生菌根与许多属于杜鹃花目的植物形成杜鹃花类菌根,而一些杜鹃花形成浆果鹃类菌根和水晶兰类菌根。所有兰科植物在其生命周期中的某些阶段是菌媒介异营的并与一系列担子菌类真菌形成兰科菌根。在一个实施方式中,菌根可以是杜鹃花类菌根,优选为Hymenoscyphousericae或树粉孢(Oidiodendron sp.)的菌根。在另一个实施方式中,菌根也可以是浆果鹃类菌根,优选为担子菌门的菌根。在另一个实施方式中,菌根可以是水晶兰类菌根,优选为担子菌门的菌根。在另一实施方式中,菌根可以为兰科菌根,优选为丝核菌属的菌根。
微量营养素:
在另一实施方式中,本文记载的组合物可以包含一种或多种有益微量营养素。用于本文所记载组合物中的微量营养素的非限制性实例包括维生素(例如,维生素A、复合维生素B(即,维生素B1、维生素B2、维生素B3、维生素B5、维生素B6、维生素B7、维生素B8、维生素B9、维生素B12、胆碱)、维生素C、维生素D、维生素E、维生素K)、类胡萝卜素(α-胡萝卜素、β-胡萝卜素、隐黄质、叶黄素、番茄红素、玉米黄质等)、常量矿物质(例如,磷、钙、镁、钾、钠、铁等)、微量矿物质(例如,硼、钴、氯、铬、铜、氟、碘、铁、锰、钼、硒、锌等)、有机酸(例如,乙酸、柠檬酸、乳酸、苹果酸、牛磺酸等)、及其组合。在特定实施方式中,组合物可以包含磷、硼、氯、铜、铁、锰、钼、锌或其组合。
在某些实施方式中,当本文记载的化合物包含磷时,预见到可以提供任何合适的磷源。在一个实施方式中,磷可以得自磷源。在另一个实施方式中,合适的磷源包括能够被一种或多种微生物(例如,拜赖青霉等)溶解的磷源。
在一个实施方式中,磷可以得自磷酸岩来源。在另一个实施方式中,磷可以得自包含一种或多种磷源的肥料。市售制备的磷肥为多种类型。一些常见的是含有磷酸岩、磷酸二氢铵、磷酸氢二铵、磷酸钙、过磷酸钙、重钙、和/或多磷酸铵的那些。所有这些肥料通过不溶性天然磷酸岩在大型肥料制造设备中的化学工艺而制备并且产品较为昂贵。通过本发明的方法,可以减少这些肥料施用到土壤的量并仍然保持从土壤摄取相同量的磷。
在另一实施方式中,磷可以得自有机磷源。在另一特定实施方式中,磷源可以包括有机肥料。有机肥料是指得自天然来源的至少保证最低百分比的氮、磷酸盐和碳酸钾的土壤改良剂。有机肥料的非限制性实例包括植物和动物副产物、岩石粉末、海草、接种菌和调节剂。这些通常可以在花卉商店以及通过园艺供应商得到。具体而言,有机磷源来自骨粉、肉粉、动物粪便、堆肥、污水污泥、或鸟粪、或其组合。
在另一个实施方式中,磷可以得自磷源的组合,包括但不限于,磷酸岩、包含一种或多种磷源(例如,磷酸二氢铵、磷酸氢二铵、磷酸钙、过磷酸钙、重钙、多磷酸铵等)的肥料、一种或多种有机磷源、及其组合。
生物刺激素:
在一个实施方式中,本文记载的组合物可以包含一种或多种有益生物刺激素。生物刺激素可以加强代谢或生理过程,如呼吸作用、光合作用、核酸摄取、离子摄取、营养递送、或其组合。生物刺激素的非限制性实例包括海草提取物(例如,泡叶藻(ascophyllum nodosum)、腐殖酸(例如,腐植酸钾)、棕黄酸、肌醇、甘氨酸及其组合)。在另一个实施方式中,组合物包含海草提取物、腐植酸、棕黄酸、肌醇、甘氨酸、及其组合。
聚合物:
在一个实施方式中,本文记载的组合物还可以包含一种或多种聚合物。聚合物在农业中的非限制性用途包括农用化学品输送、重金属去除、水分保持和/或供水及其组合。Pouci等人,Am.J.Agri.&Biol.Sci.,3(1):299-314(2008)。在一个实施方式中,一种或多种聚合物是天然聚合物(例如,琼脂、淀粉、藻酸盐、胶质、纤维素等)、合成聚合物、可生物降解的聚合物(例如,聚已酸内酯、聚交酯、聚(乙烯醇)等)、或其组合。
对于用于本文所记载组合物的聚合物的非限制性列表,参见Pouci等人,Am.J.Agri.&Biol.Sci.,3(1):299-314(2008)。在一个实施方式中,本文记载的组合物包含纤维素、纤维素衍生物、甲基纤维素、甲基纤维素衍生物、淀粉、琼脂、藻酸盐、胶质、聚乙烯吡咯烷酮、及其组合。
润湿剂:
在一个实施方式中,本文记载的组合物还可以包含一种或多种润湿剂。润湿剂通常用于土壤,特别是疏水性土壤,以改善水对土壤的渗透和/或穿透。润湿剂可以是佐剂、油、表面活性剂、缓冲剂、酸化剂、或其组合。在实施方式中,湿润剂是表面活性剂。在实施方式中,润湿剂是一种或多种非离子表面活性剂、一种或多种阴离子表面活性剂、或其组合。在另一个实施方式中,润湿剂是一种或多种非离子表面活性剂。
适用于本文所记载组合物的表面活性剂在“表面活性剂”部分给出。
表面活性剂:
适用于本文所记载组合物的表面活性剂可以是非离子表面活性剂(例如,半极性和/或阴离子和/或阳离子和/或两性离子)。表面活性剂能够润湿并乳化土壤和/或泥土。预见到用于所记载组合物的表面活性剂对包含在配方中的任何微生物具有低毒性。进而预见到用于所记载组合物的表面活性剂具有低的植物毒性(即,物质或物质组合对植物的毒性程度)。可以使用单独的表面活性剂或若干种表面活性剂的混合物。
阴离子表面活性剂
阴离子表面活性剂、或阴离子表面活性剂与非离子表面活性剂的混合物也可以用在组合物中。阴离子表面活性剂是在水溶液中于阴离子或带负电荷状态下具有亲水部分的表面活性剂。本文记载的组合物可以包含一种或多种阴离子表面活性剂。阴离子表面活性剂可以是水溶性阴离子表面活性剂、水不溶性阴离子表面活性剂、或是水溶性阴离子表面活性剂与水不溶性阴离子表面活性剂的组合。阴离子表面活性剂的非限制性实例包括磺酸、硫酸酯、羧酸、及其盐。水溶性阴离子表面活性剂的非限制性实例包括烷基硫酸盐、烷基醚硫酸盐、烷基氨酰醚硫酸盐、烷基芳基聚醚硫酸盐、烷基芳基硫酸盐、烷基芳基磺酸盐、单甘油硫酸盐、烷基磺酸盐、烷基酰胺磺酸盐、烷基芳基磺酸盐、苯磺酸盐、甲苯磺酸盐、二甲苯磺酸盐、枯烯磺酸盐、烷基苯磺酸盐、烷基二苯氧磺酸盐、α-烯烃磺酸盐、烷基萘磺酸盐、烷烃磺酸盐、木质素磺酸盐、烷基磺基琥珀酸盐、乙氧基磺基琥珀酸盐、烷基醚磺基琥珀酸盐、烷基酰胺磺基琥珀酸盐、烷基磺基琥珀酰胺酸盐、烷基磺基乙酸盐、烷基磷酸盐、磷酸酯盐、烷基醚磷酸盐、酰基肌氨酸盐、酰基羟乙基磺酸盐、N-酰基牛磺酸盐、N-酰基-N-烷基牛磺酸盐、烷基羧酸盐、或其组合。
非离子表面活性剂
非离子表面活性剂是当溶解或分散于水性介质中时不具有电荷的表面活性剂。在本文所记载组合物的至少一个实施方式中,使用一种或多种非离子表面活性剂,因为其提供所需的润湿和乳化作用,并且不会显著抑制孢子稳定性和活性。非离子表面活性剂可以是水溶性非离子表面活性剂、水不溶性非离子表面活性剂、或水溶性非离子表面活性剂与水不溶性非离子表面活性剂的组合。
水不溶性非离子表面活性剂
水不溶性非离子表面活性剂的非限制性实例包括烷基和芳基:甘油醚、乙二醇醚、乙醇胺、磺胺、醇、酰胺、醇乙氧基化物、甘油酯、乙二醇酯、甘油酯和乙二醇酯的乙氧基化物、糖类烷基糖苷、聚氧乙烯脂肪酸、链烷醇胺缩合物、链烷醇胺、叔炔二醇(tertiary acetylenicglycol)、聚氧乙烯硫醇、羧酸酯、聚氧乙烯聚氧丙稀乙二醇、山梨糖醇酐脂肪酸酯、或其组合。还包括EO/PO嵌段共聚物(EO为乙烯氧基,PO为丙烯氧基)、EO聚合物和共聚物、聚胺和聚乙烯吡咯烷酮。
水溶性非离子表面活性剂
水溶性非离子表面活性剂的非限制性实例包括山梨糖醇酐脂肪酸醇乙氧基化物和山梨糖醇酐脂肪酸酯乙氧基化物。
非离子表面活性剂的组合
在一个实施方式中,本文记载的组合物包含至少一种或多种非离子表面活性剂。在一个实施方式中,组合物包含至少一种水不溶性非离子表面活性剂和至少一种水溶性非离子表面活性剂。在另一个实施方式中,组合物包含烃链基本上等长的非离子表面活性剂的组合。
其他表面活性剂
在另一个实施方式中,本文记载的组合物还可以包含有机硅表面活性剂,在硅酮类和矿物油类消泡剂中用作表面活性剂的硅酮类消泡剂。在另一个实施方式中,本文记载的组合物还可以包含脂肪酸的碱金属盐(例如,脂肪酸的水溶性碱金属盐和/或脂肪酸的水不溶性碱金属盐)。
除草剂:
在一个实施方式中,本文记载的组合物还可以包含一种或多种除草剂。在特定实施方式中,除草剂可以是出土前除草剂、出土后除草剂、或其组合。
合适的除草剂包括化学除草剂、天然除草剂(例如,生物除草剂、有机除草剂等)、或其组合。合适的除草剂的非限制性实例包括苯达松(bentazon)、氟锁草醚(acifluorfen)、氯嘧磺隆(chlorimuron)、乳氟禾草灵(lactofen)、广灭灵(clomazone)、吡氟禾草灵(fluazifop)、草铵膦(glufosinate)、草甘膦(glyphosate)、稀禾定(sethoxydim)、咪唑乙烟酸(imazethapyr)、甲氧咪草烟(imazamox)、氟磺胺草醚(fomesafe)、氟烯草酸(flumiclorac)、灭草喹(imazaquin)、和烯草酮(clethodim)。含有这些化合物中的每一种的市售产品容易可得。组合物中除草剂的浓度将通常与所标记的对于特定除草剂的使用量相对应。
杀真菌剂:
在一个实施方式中,本文记载的组合物还可以包含一种或多种杀真菌剂。可用于本文所记载组合物的杀真菌剂将对大范围病原体适宜地表现出活性,病原体包括但不限于疫霉属(Phytophthora)、丝核菌属(Rhizoctonia)、镰孢菌属(Fusarium)、腐霉菌属(Pythium)、拟茎点霉属(Phomopsis)或核盘菌属(Selerotinia)和层锈菌属(Phakopsora)及其组合。
可以适用于本文所记载组合物的市售杀真菌剂的非限制性实例包括RIVAL或ALLEGIANCE FL或LS(Gustafson,Plano,TX),WARDEN RTA(Agrilance,St.Paul,MN),APRON XL、APRON MAXXRTA或RFC、MAXIM 4FS或XL(Syngenta,Wilmington,DE),CAPTAN(Arvesta,Guelph,Ontario)和PROTREAT(Nitragin Argentina,BuenosAres,Argentina)。在这些和其他市售杀真菌剂中的活性成分包括,但不限于,咯菌腈(fludioxonil)、精甲霜灵(mefenoxam)、嘧菌酯(azoxystrobin)和甲霜林(metalaxyl)。市售杀真菌剂最适合根据制造商的说明以推荐的浓度进行使用。
杀虫剂:
在一个实施方式中,本文记载的组合物还可以包含一种或多种杀虫剂。可用于本文所记载组合物的杀虫剂将针对大范围昆虫适宜地表现出活性,昆虫包括但不限于,线虫、切根虫、蛴螬、玉米根虫、种蝇、跳甲、麦长蝽、蚜虫、叶甲、椿象及其组合。
可适用于本文所记载组合物的市售杀虫剂的非限制性实例包括CRUISER(Syngenta,Wilmington,DE),GAUCHO和PONCHO(Gustafson,Plano,TX)。在这些和其他市售杀虫剂中的活性成分包括噻虫嗪(thiamethoxam)、噻虫胺(clothianidin)、和吡虫啉(imidacloprid)。市售杀虫剂最适合根据制造商的说明以推荐浓度进行使用。
方法
另一方面,公开了使用葡萄糖内酯来增加和/或加强植物生长的方法。在特定实施方式中,方法包括加强植物或植物部分的生长,包括使植物或植物部分与本文记载的一种或多种葡萄糖内酯及其异构体、盐或溶剂化物接触。在特定实施方式中,接触步骤包括使植物或植物部分与本文记载的一种或多种组合物接触。在一个实施方式中,接触步骤包括使植物或植物部分与有效量的本文记载的一种或多种葡糖酸内酯接触。在特定实施方式中,接触步骤包括使植物或植物部分与1.0mg/L~100.0mg/L浓度的本文记载的一种或多种葡糖酸内酯接触。
接触步骤可以通过任何本领域已知的方法进行(包括叶施用和非叶施用两者)。接触植物或植物部分的非限制性实例包括对植物或植物部分喷雾、使植物或植物部分湿透、滴灌于植物或植物部分、撒粉于植物或植物部分、和/或涂覆种子。在一个实施方式中,重复该接触步骤(例如,多于一次,如在接触步骤中重复两次、三次、四次、五次、六次、七次、八次、九次、十次等)。
在另一个实施方式中,方法还包括使植物或植物部分接受本文所记载的一种或多种农业上有益成分的处理。植物或植物部分可以接受作为本文所记载组合物的一部分、或独立于本文所记载一种或多种葡糖酸内酯的一种或多种农业上有益成分的处理。在一个实施方式中,植物或植物部分接受作为本文所记载组合物的一部分的一种或多种农业上有益成分的处理。在另一个实施方式中,植物或植物部分接受独立于本文所记载一种或多种葡糖酸内酯的一种或多种农业上有益成分的处理。在一个实施方式中,使植物或植物部分接受一种或多种农业上有益成分的处理的步骤发生在使植物或植物部分与本文所记载的一种或多种葡糖酸内酯接触之前、之中、之后或同时。
另一方面,公开了加强植物或植物部分的生长的方法,包括用本文记载的一种或多种葡糖酸内酯及其异构体、盐或溶剂化物处理土壤,并且使植物或植物部分在处理过的土壤中生长。
在实施方式中,处理步骤可以通过任何本领域已知的方法实施(包括叶施用和非叶施用两者)。处理土壤的非限制性实例包括对土壤喷雾、使土壤湿透、滴灌于土壤、和/或撒粉于土壤。在一个实施方式中,重复处理步骤(例如,多于一次,如在处理步骤中重复两次、三次、四次、五次、六次、七次、八次、九次、十次等)。在特定实施方式中,处理步骤包括将本文记载的一种或多种组合物引至土壤。
处理步骤可以发生在植物或植物部分生长过程中的任何时间。在一个实施方式中,处理步骤发生在植物或植物部分开始生长之前。在另一个实施方式中,处理步骤发生在植物或植物部分已经开始生长之后。
在另一个实施方式中,方法还包括种植植物或植物部分的步骤。种植步骤可以发生在处理步骤之前、之后或之中。在一个实施方式中,种植步骤发生在处理步骤之前。在另一个实施方式中,种植步骤发生在处理步骤之中(例如,种植步骤与处理步骤同时发生、种植步骤与处理步骤基本上同时发生等)。在另一个实施方式中,种植步骤发生在处理步骤之后。
在另一个实施方式中,方法还包括使土壤接受本文记载的一种或多种农业上有益成分的处理的步骤。土壤可以接受作为本文所记载组合物的一部分或独立于本文所记载的一种或多种葡糖酸内酯的一种或多种农业上有益成分的处理。在一个实施方式中,土壤接受作为本文所记载组合物的一部分的一种或多种农业上有益成分的处理。在另一个实施方式中,土壤接受独立于本文记载的一种或多种葡糖酸内酯的一种或多种农业上有益成分的处理。在一个实施方式中,使土壤接受一种或多种农业上有益成分的处理的步骤发生在处理步骤之前、之中、之后或同时。在一个实施方式中,使土壤接受本文记载的一种或多种农业上有益成分的处理的步骤发生在处理步骤之前。在另一个实施方式中,使土壤接受本文记载的一种或多种农业上有益成分的处理的步骤发生在处理步骤过程中。在另一个实施方式中,使土壤接受本文记载的一种或多种农业上有益成分的处理的步骤发生在处理步骤之后。在另一个实施方式中,使土壤接受本文记载的一种或多种农业上有益成分的处理的步骤与处理步骤(例如,用本文记载的一种或多种组合物处理土壤等)同时发生。
本发明的方法同时适用于和非豆科植物或植物部分。在特定实施方式中,植物或植物部分选自苜蓿、稻谷、小麦、大麦、黑麦、燕麦、棉花、油菜、向日葵、花生、玉米、马铃薯、甘薯、菜豆、豌豆、鹰嘴豆、小扁豆、菊苣、莴苣、苦苣、甘蓝、抱子甘蓝、甜菜、欧洲防风草、芜青、花椰菜、西兰花、芜菁、萝卜、菠菜、洋葱、大蒜、茄子、辣椒、芹菜、胡萝卜、西葫芦、南瓜、绿皮密生西葫芦、黄瓜、苹果、梨、甜瓜、柑橘、草莓、葡萄、覆盆子、菠萝、大豆、烟草、番茄、高梁和甘蔗。
种子涂覆
另一方面,种子用本文记载的一种或多种组合物涂覆。
在一个实施方式中,种子可以用本文记载的组合物以若干种方式进行处理,但是优选通过喷雾或滴灌的方式。喷雾和滴灌处理可以通过配制本文记载的组合物并经由连续处理系统(其被校准至以与种子的连续流成比例的预定速率实施处理)如鼓式处理器将组合物喷雾或滴灌于种子上而进行。也可以采用批量系统,其中预定批量尺寸的种子和本文所记载组合物被输送至混合器中。用于实施这些工艺的系统和设备从许多供应商处市售可得,例如Bayer CropScience(Gustafson).
在另一个实施方式中,处理需要涂覆种子。一个此类工艺涉及用本文记载的组合物涂覆圆形容器的内壁,加入种子,然后旋转容器以使种子接触壁和组合物,本领域已知为“容器涂覆”的工艺。种子可以通过涂覆方法的组合来涂覆。浸泡通常需要使用液体形式的所记载组合物。例如,种子可以浸泡约1分钟至约24小时(例如,至少1分钟、5分钟、10分钟、20分钟、40分钟、80分钟、3小时、6小时、12小时、24小时)。
本发明通过以下编号的项进行进一步限定。
1.一种组合物,包含:
a)农艺上可接受的载体;以及
b)用于加强植物生长的有效量的一种或多种葡糖酸内酯或其盐。
2.项1的组合物,其中,组合物包含一种或多种农业上有益的成分。
3.项2的组合物,其中,一种或多种农业上有益的成分选自一种或多种生物活性成分、微量营养素、生物刺激素、及其组合。
4.项3的组合物,其中,一种或多种农业上有益的成分是一种或多种生物活性成分。
5.项4的组合物,其中,一种或多种生物活性成分选自一种或多种植物信号分子、一种或多种有益微生物、及其组合。
6.项2的组合物,其中,一种或多种农业上有益的成分是选自LCO、CO、几丁质化合物、类黄酮、茉莉酸、茉莉酸甲酯、亚油酸、亚麻酸、karrikin、及其组合中的一种或多种植物信号分子。
7.项2的组合物,其中,一种或多种农业上有益的成分包括一种或多种CO。
8.项2的组合物,其中,一种或多种农业上有益的成分包括一种或多种LCO。
9.项2的组合物,其中,一种或多种农业上有益的成分包括一种或多种类黄酮。
10.项2的组合物,其中,一种或多种农业上有益的成分包括一种或多种有益微生物。
11.项10的组合物,其中,一种或多种有益微生物包括一种或多种固氮微生物、一种或多种解磷微生物、一种或多种菌根真菌、或其组合。
12.项1的组合物,其中,农艺上可接受的载体是液体介质。
13.项1的组合物,其中,组合物还包含一种或多种微量营养素。
14.项13的组合物,其中,一种或多种微量营养素包括磷、铜、铁、锌、或其组合。
15.项1的组合物,其中,组合物包含浓度为0.5mg/L至500mg/L、优选为0.5mg/L至100mg/L的一种或多种葡糖酸内酯或其盐。
16.一种用于加强植物或植物部分的生长的方法,包括使植物或植物部分与有效量的一种或多种葡糖酸内酯或其盐接触。
17.项16的方法,其中,方法还包括使植物或植物部分接受一种或多种农业上有益的成分的处理。
18.项17的方法,其中,使植物或植物部分接受一种或多种农业上有益成分的处理的步骤发生在植物或植物部分与一种或多种葡糖酸内酯接触的步骤之前、之中、之后或同时。
19.项17的方法,其中,农业上有益的成分是一种或多种生物活性成分。
20.项19的方法,其中,一种或多种生物活性成分选自一种或多种植物信号分子、一种或多种有益微生物、及其组合。
21.项17的方法,其中,一种或多种农业上有益的成分是选自LCO、CO、几丁质化合物、类黄酮、茉莉酸、茉莉酸甲酯、亚油酸、亚麻酸、karrikin、及其组合中的一种或多种植物信号分子。
22.项17的方法,其中,一种或多种农业上有益的成分包括一种或多种CO。
23.项17的方法,其中,一种或多种农业上有益的成分包括一种或多种LCO。
24.项17的方法,其中,一种或多种农业上有益的成分包括一种或多种类黄酮。
25.项17的方法,其中,一种或多种农业上有益的成分包括一种或多种有益微生物。
26.项25的方法,其中,一种或多种有益微生物包括一种或多种固氮微生物、一种或多种解磷微生物、一种或多种菌根真菌、或其组合。
27.项17的方法,其中,一种或多种农业上有益的成分还包括一种或多种微量营养素。
28.项27的方法,其中,一种或多种微量营养素包括磷、铜、铁、锌、或其组合。
29.项16的方法,其中,接触步骤包括使植物或植物部分与包含一种或多种葡糖酸内酯或其盐的组合物接触。
30.项29的方法,其中,组合物包括项1~15中任意项的组合物。
31.项16~30中任意项的方法,其中,接触包括接触种子。
32.一种用于加强植物或植物部分的生长的方法,包括:
a.用有效量的一种或多种葡糖酸内酯或其盐处理土壤;
b.使植物或植物部分在处理后的土壤中生长。
33.项32的方法,其中,方法还包括在处理步骤之前、之中或之后种植植物或植物部分的步骤。
34.项32的方法,其中,方法还包括使土壤接受一种或多种农业上有益成分的处理的步骤。
35.项32的方法,其中,处理步骤包括引入一种或多种葡糖酸内酯或其盐作为组合物。
36.项32的方法,其中,处理步骤发生在生长步骤之前或之中。
37.项34的方法,其中,组合物包括项1~15中任意项的组合物。
38.一种种子,涂覆有项1~15中任意项的组合物。
本发明现在将在以下非限制性实施例的方面进行阐述。除非指出相反情况,水被用作对照(表示为“对照”或“CHK”)。
实施例
以下实施例出于示例说明的目的而提供,并不意在将本发明的范围限制成如本文所要求保护的那样。示例性实施例中对于本领域技术人员来说,出现的任何变形均意在落入本发明的范围内。
实施例1
进行实验以确定葡糖酸内酯对玉米幼苗根生长参数的作用。未灭菌的玉米种子(用杀真菌剂Acceleron预处理的Peterson杂交玉米98L90GTCBLL)用水(对照)和葡糖酸内酯溶液(1和10mg/L,蒸馏水)处理。在透明塑料袋(25cm×25cm)中,100克种子用500μl水处理(用于对照)。1和10mg/L葡糖酸内酯的处理包括250μl水+250μl葡糖酸内酯溶液加用力摇动。处理后4小时,10个种子铺在150mm×15mm聚苯乙烯陪替氏培养皿(Fisherband)的53/8”育苗纸圈(Anchor Paper Co.,Saint Paul,Mn)上并用12ml蒸馏水湿润。各个处理准备四个陪替氏培养皿以作为四个重复。然后将陪替氏培养皿在实验室低于实验台的橱柜中于24℃避光放置7天。7天之后,将幼苗从橱柜中拿出,暴露于光,切断其主根并用WinRhizo根系扫描仪(RegentInstruments Inc.,WinRhizo Pro 2007)测量多个根参数。对于所有统计分析,使用JMPv.9统计软件来应用student t检验。结果在表1中给出。
表1.葡糖酸内酯(GL)对玉米幼苗根生长参数的作用
由相同字母表示的平均值在0.05水平上为统计学不同
表1中的结果示出,低浓度的葡糖酸内酯具有根生长促进作用。对于1mg/L葡糖酸内酯,观察到显著的根生长加强;长度、根表面积和根体积显著高于对照,而更高的浓度(10mg/L)与对照相比未示出任何根生长参数方面的差别。
实施例2:
设计实验来评价是否在1.0~10mg/L之间和低于1.0mg/L的任何葡糖酸内酯浓度均具有影响幼苗根生长的最优作用。实施例2根据实施例1的操作方式进行。相应地,评价5.0mg/L、1.0mg/L和0.5mg/L的葡糖酸内酯浓度。结果在表2中给出。
表2.葡糖酸内酯(GL)浓度对玉米幼苗根生长的作用
由相同字母表示的平均值在0.05水平上为统计学不同
结果示出,当主根长度、根直径和根体积被比较时,在0.5mg/L和1.0mg/L反应之间没有显著差别。然而,当只考虑根长度时,1.0mg/L浓度(实施例#1和实施例#2)为最佳剂量。5.0mg/L的浓度是有效性最低的。
实施例3:
检验葡糖酸内酯对多种作物幼苗的生长的作用。根据实施例1的操作方式,用1.0mg/L葡糖酸内酯处理玉米、绿扁豆和黄豌豆种子(100g),并用蒸馏水处理对照种子。处理后,使种子干燥过夜。处理后一天,将种子放置在含有40ml的5%水-琼脂固化培养基的25×150mm玻璃试管中。将种子放置在各个试管的培养基表面。然后将试管放置在试管架上并在实验室中保持在漫射光下。由于处理过的种子未灭菌,琼脂培养基的灭菌未被保持,并且试管保持开盖。由于琼脂培养基不含任何糖,在高达10天的时间内,污染的发生极少。各个处理的种子数目为10。结果在表3中给出。
表3.葡糖酸内酯对多种作物幼苗在试管中的水-琼脂培养基中生长的作用。
由相同字母表示的平均值在0.05水平上为统计学不同
幼苗在种植后10天收获。玉米的平均植物干生物质为非显著性地高出6.3%,对于小扁豆为显著性地高出38.3%,以及对于豌豆为非显著性地高出5.0%。
实施例4:
评价葡糖酸内酯和壳寡糖配方对种子萌出和幼苗活力的作用。温室幼苗萌出实验使用玉米种子(用杀真菌剂Acceleron预处理的Peterson杂交玉米98L90GTCBLL)来进行。玉米种子(100g)根据实施例1的操作方式用水(对照)、10-8M的CO以及1mg/L和10mg/L葡糖酸内酯处理。CO和葡糖酸内酯组合混合物的制备通过将一定量的CO和葡糖酸内酯加入到蒸馏水中以得到10-8M的CO以及1mg/L和10mg/L的葡糖酸内酯。将种子种植在含有Fafard 3B土壤混合物的塑料育苗/起始盘中(96插穴)。种植4天后,对幼苗萌出进行计数。种植7天后,以1~4的等级记录幼苗活力,1表示最差的幼苗生长,以及4表示最好的幼苗生长。结果在表4中给出。
表4.CO和葡糖酸内酯的结合对玉米种子萌出和幼苗活力的作用。
处理 %萌芽 活力(1~5)
CHK 63 3
CO 63 3
1mg/L GL+10-8M CO 89 3
10mg/L GL+10-8M CO 87 4
对于1mg/L葡糖酸内酯+10-8M CO的处理,记录到第4天的最高幼苗萌出(89%)。对于10mg/L葡糖酸内酯+10-8M CO,观察到最好的幼苗活力。
实施例5:
评价葡糖酸内酯和壳寡糖配方对玉米幼苗生长的作用。根据实施例4的操作方式处理玉米种子(100g)。处理后的玉米种子生长在含有Fafard 3B无土混合物的播种盘中。各个处理为30个幼苗。五个幼苗成一组以作为1个重复,各个处理为6个重复。使幼苗生长12天并收获。将幼苗放在于80℃烘箱干燥2天的纸信封中。用工作台天平读取植物干重。结果在表5中给出。
表5.葡糖酸内酯加壳寡糖配方对玉米幼苗生长的作用
处理 干重(g)
Chk 1.928b
CO 1.688c
1mg/L葡糖酸内酯+10-8M CO 2.27a
10mg/L葡糖酸内酯+10-8M CO 1.978b
由相同字母表示的平均值在0.05水平上为统计学不同
结果显示,1mg/L葡糖酸内酯+CO 10-8M的处理优于10mg/L葡糖酸内酯+CO 10-8M的处理。1mg/L葡糖酸内酯+CO 10-8M处理之后的植物干重相比于对照是显著的(17.8%)。
实施例6:
CO和葡糖酸内酯对5周的玉米幼苗干重的作用在开放空间和温室条件下评价。根据实施例4的操作方式处理玉米种子(100g),除葡糖酸内酯的浓度为1mg/L外,用于温室条件的CO为2×10-8M,用于开放空间条件的CO为10-8M。处理后的玉米种子种植在含有Fafard 3B无土混合物的1加仑盆中。
对于开放空间实验,盆在正常日光下于温室外的开放空间条件下生长。开放空间实验持续5周,各个盆中为5棵植株,且各个处理为4盆。
温室实验持续16天。幼苗在塑料播种盘中生长。从这些播种盘中收获的植物以5棵植株为1组以作为1个重复,且为5个重复/处理。在收获时,植株在80℃烘箱中干燥3天。4周后从加仑盆中收获的植物在烘箱中干燥7天。开放空间和温室实验的结果在表6中给出。
表6.CO和葡糖酸内酯对玉米幼苗干重的作用(5周)
实验地点 收获日期 CHK CO 1mg/L GL+CO
开放空间 5周 9.14b 9.29b 10.65a
温室 2周 2.418a 2.394a 2.694a
由相同字母表示的平均值在0.05水平上为统计学不同
结果表明,葡糖酸内酯+CO相比于对照具有积极的植物生长作用。开放空间实验的结果示出,相比于对照,具有显著的植物干重增加(16.5%)。温室实验的结果示出,相比于对照,具有干重增加(11.4%)。
实施例7:
评价CO和多种浓度葡糖酸内酯对玉米的作用。进行陪替氏培养皿种子萌出实验。按照实施例4中所述的种子处理操作方式,用含有10mg/L、100mg/L和500mg/L葡糖酸内酯的2×10-8M CO来处理玉米种子(100g)。根据实施例1的处理操作方式处理对照种子。处理后4小时,将10个种子铺在150mm×15mm聚苯乙烯陪替氏培养皿(Fisherband)的53/8”育苗纸圈(Anchor Paper Co.,Saint Paul,Mn)上并用12ml蒸馏水湿润。各个处理准备四个陪替氏培养皿以作为四个重复。然后将陪替氏培养皿在实验室中低于实验台的橱柜中于24℃避光放置7天。7天之后,将幼苗从橱柜中拿出,暴露于光,并根据实施例1的操作方式测量其主根长度。结果在表7中给出。
表7.CO和多种浓度葡糖酸内酯对玉米的作用
由相同字母表示的平均值在0.05水平上为统计学不同
结果表明,10mg/L葡糖酸内酯+2×10-8M CO的处理产生最长的主根,其相比于对照为显著的增加(在0.1水平上,9.22%的增长)。
实施例8:
是可从Novozumes Biologicals Inc.购得的染料木黄酮/大豆甙元异黄酮(isoflavonoid)产品。被用作大豆种子处理物,并且评价葡糖酸内酯连同类黄酮的作用以观察是否可以使大豆生产得以加强。葡糖酸内酯与一起制备。大豆甙元(另一种异黄酮)相似地与葡糖酸内酯一起制备,其中大豆甙元具有与相同的异黄酮浓度。
用1mg/L葡糖酸内酯处理液和200μl豆类(Syngenta)杀真菌剂+170μl蒸馏水+30μl或大豆甙元来处理约100g的大豆种子。作为对照,总计200μl水与200μl的豆类杀真菌剂一起使用。种子处理后1天,将种子种植于温室中的含有无土混合物Fafard 3B的1加仑塑料盆中。3棵植株/盆,且4盆/处理。大豆植株偶尔用20-15-20NPK肥料进行施肥。6周后收获豆荚。平均豆荚鲜重用JUMP统计软件通过student-t检验来分析。
表8.葡糖酸内酯与异黄酮对大豆豆荚产量鲜重(g)的作用
结果示出,当被加至或大豆甙元时,葡糖酸内酯相比于单独的或单独的大豆甙元产生了额外的豆荚产量。当添加有时,葡糖酸内酯相比于在第1次、第2次和第3次试验分别产生6、9.7和0.6%的产量增加。类似地,当添加有大豆甙元时,葡糖酸内酯在3次试验中的2次中产生约2.5%的产量增加。
实施例9:
大豆甙元和葡糖酸内酯相比于的对大豆植株生长的作用在温室研究中进行评价。葡糖酸内酯与大豆甙元结合,并在三种不同土壤类型(Metro Mix、Fafard 3B和Garden Mix土壤)上相对于进行测试。幼苗由根据实施例8操作方式处理的种子在含有多种土壤介质的4”塑料盆中生长而来。各个盆有2棵幼苗,且各个处理为5个盆。18天后收获植株,并从烘箱干燥(80℃,3天)的样品读取其干重。结果在表9中给出。
表9.葡糖酸内酯+大豆甙元的处理相比于对温室中大豆植株生长的作用
结果表明,在植株干重方面,在对于各个土壤类型的葡糖酸内酯+大豆甙元处理和处理之间没有显著差别,然而,与单独的处理相比,葡糖酸内酯+大豆甙元的处理产生积极的干的生物质增长(9.41、2.44和12.35%)。
实施例10:
在对于大豆种子的根瘤菌接种物表现方面,葡糖酸内酯的作用被评价,以观察大豆生产能否得以加强。将1mg/L的葡糖酸内酯加至根瘤菌接种物产品(均来自NovozymesBiologicals Inc.)。按照产品标签上引述的说明来进行种子处理。当加入葡糖酸内酯时,到达大豆种子上的总液体剂量保持相同。对照种子用水处理。将约100g种子在透明塑料袋(25cm×25cm)中用处理液处理。处理后2小时将种子种植在温室中的含有Fafard无土混合物的1g塑料盆中。各个盆允许3棵植株生长,且各个处理为5个盆。种植6周后收获豆荚。
表10.葡糖酸内酯对于针对大豆种子的根瘤菌接种物表现的作用
结果示出,葡糖酸内酯的添加对产量增加具有积极影响。相对于单独的葡糖酸内酯的添加产生干豆荚产量的增加(3.36%和4.84%)。
实施例11:
评价抗氧化剂对于小扁豆幼苗在8℃下耐逆性的作用。用处理液以5ml/kg种子处理小扁豆种子。处理液制备为1.0mg/L葡糖酸内酯、100mg/L谷胱苷肽、100mg/L苯基吡喃葡糖苷(PADG),且水作为对照(CHK)。处理后的种子铺在大的陪替氏培养皿中的用去离子水湿润的育苗纸上。培养皿很容易地在8℃的冷的空间中孵育。铺板7天后,对幼苗根测量多种生长参数。
表11.葡糖酸内酯和其他抗氧化剂对小扁豆幼苗耐逆性的作用
由相同字母表示的平均值在0.05水平上为统计学不同
结果显示,当保持在低温(即,8℃)时,抗氧化剂对小扁豆幼苗具有积极作用。结果表明,与对照相比,葡糖酸内酯显著增加幼苗根长度、表面积、体积和侧根数目。相比于对照,谷胱苷肽增加幼苗根长度,并且,相比于对照,显著增加表面积、体积和侧根数目。相比于对照,PADG增加幼苗根长度和侧根数目,并且,相比于对照,显著增加表面积和体积。
将要理解的是,说明书和实施例示例说明当前的实施方式,并且在要求保护的实施方式的主旨和范围内的其他实施方式将使本领域技术人员想到它们。虽然本发明已经结合具体形式和其实施方式进行了描述,将意识到,除以上讨论的那些之外的多种修改可以被采用而不偏离所附权利要求中限定的本发明的主旨或范围。例如,等效物可以取代具体描述的那些,并且在某些情况下,步骤的特定应用可以被反转或被干预而全都不偏离所附权利要求限定的本发明的主旨或范围。

Claims (20)

1.一种组合物,包含:
a)农艺上可接受的载体;以及
b)有效量的用于加强植物生长的一种或多种葡糖酸内酯或其盐。
2.根据权利要求1所述的组合物,其中,所述组合物包含一种或多种农业上有益的成分。
3.根据权利要求2所述的组合物,其中,所述一种或多种农业上有益的成分是选自LCO、CO、几丁质化合物、类黄酮、茉莉酸、茉莉酸甲酯、亚油酸、亚麻酸、karrikin及其组合中的一种或多种植物信号分子。
4.根据权利要求2所述的组合物,其中,所述一种或多种农业上有益的成分包含一种或多种有益微生物。
5.根据权利要求4所述的组合物,其中,所述一种或多种有益微生物包含一种或多种固氮微生物、一种或多种解磷微生物、一种或多种菌根真菌、或其组合。
6.根据权利要求1所述的组合物,其中,所述组合物还包含一种或多种微量营养素。
7.根据权利要求6所述的组合物,其中,所述一种或多种微量营养素包含磷、铜、铁、锌、或其组合。
8.根据权利要求1所述的组合物,其中,所述组合物包含浓度为0.5mg/L至500mg/L、优选为0.5mg/L至100mg/L的所述一种或多种葡糖酸内酯或其盐。
9.一种用于加强植物或植物部分的生长的方法,包括使植物或植物部分与有效量的一种或多种葡糖酸内酯或其盐接触。
10.根据权利要求9所述的方法,其中,所述方法还包括使所述植物或所述植物部分接受一种或多种农业上有益的成分的处理。
11.根据权利要求10所述的方法,其中,所述一种或多种农业上有益的成分是选自LCO、CO、几丁质化合物、类黄酮、茉莉酸、茉莉酸甲酯、亚油酸、亚麻酸、karrikin及其组合中的一种或多种植物信号分子。
12.根据权利要求10所述的方法,其中,所述一种或多种农业上有益的成分包含一种或多种有益微生物。
13.根据权利要求12所述的方法,其中,所述一种或多种有益微生物包含一种或多种固氮微生物、一种或多种解磷微生物、一种或多种菌根真菌、或其组合。
14.根据权利要求9所述的方法,其中,所述接触步骤包括使所述植物或所述植物部分与包含所述一种或多种葡糖酸内酯或其盐的组合物接触。
15.根据权利要求14所述的方法,其中,所述组合物包括权利要求1~8中任一项所述的组合物。
16.根据权利要求9~15中任一项所述的方法,其中,所述接触包括接触种子。
17.一种用于加强植物或植物部分的生长的方法,包括:
a.用有效量的一种或多种葡糖酸内酯或其盐处理土壤;
b.使植物或植物部分在所处理的土壤中生长。
18.根据权利要求17所述的方法,其中,所述处理步骤包括引入所述一种或多种葡糖酸内酯或其盐作为组合物。
19.根据权利要求18所述的方法,其中,所述组合物包括权利要求1~8中任一项所述的组合物。
20.一种种子,涂覆有权利要求1~8中任一项所述的组合物。
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