CN104606275B - 一种防治脂肪肝的中药有效组分组合物 - Google Patents

Abstract

一种防治脂肪肝的中药有效组分组合物，其特征在于：由红景天苷，绞股蓝总苷，姜黄素和白术多糖制成，各有效组分的用量为红景天苷5.77mg/kg，绞股蓝总苷17.68mg/kg，姜黄素4.35mg/kg，白术多糖69.75mg/kg。所述防治脂肪肝的中药有效组分组合物的剂型为片剂、胶囊剂、丸剂、口服液或混悬剂。本发明防治脂肪肝的中药有效组分组合物安全有效且作用物质明确，与组分组合物中单一组分及西药多烯磷脂酰胆碱胶囊相比，本发明中药有效组分组合物对脂肪肝具有更为显著的防治效果。

Description

一种防治脂肪肝的中药有效组分组合物

技术领域

本发明涉及一种防治脂肪肝的药物，尤其是一种防治脂肪肝的中药有效组分组合物。

背景技术

1、现有产品技术的基本概况：

(1)非酒精性脂肪肝的流行病学、发病机制及西医治疗现状

非酒精性脂肪性肝病(Nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)是指除外酒精和其他明确的损肝因素所致的，以弥漫性肝细胞大泡性脂肪变为主要特征的临床病理综合征。近年来，作为代谢性疾病在肝脏的病理表现，已成为临床密切监测和研究的目标，其相关的疾病谱包括单纯性脂肪肝(simple fatty liver,SFL)、脂肪性肝炎(Nonalcoholicsteatohepatitis,NASH)、肝硬化甚至肝细胞癌。各种原因导致肝内脂肪堆积超过5％或肝活检中发现单位肝细胞有1/3以上有脂肪滴被称为脂肪肝。在脂肪肝中，非酒精性脂肪肝可占80％。随着人们生活方式的改变和生活水平面的提高，脂肪肝的发病率逐年提升，全球流行病学研究料显示，西方国家NAFLD患病率约20-30％，亚太地区约12-24％；儿童发病率约2.6％，肥胖儿童可达52.8％。在20世纪90年代，我国大多地区的流行病学普查结果显示脂肪肝发病率在10％左右或不到10％。而在2005年，以上海市为例，一项针对3175例成人的调查发现，脂肪肝患病率为17.3％，其中NAFLD患病率达到15.4％。NAFL有12-40％患者在8-13年内进展为NASH，后可发展为肝硬化，与其他肝病引起的肝硬化患肝癌危险性无明显差异。NAFLD已经成为病毒性肝炎之后第二大慢性肝病，实行肝移植的第三大适应症。为此，防治本病已成为全球普遍关注的医学和社会问题。

NAFLD是遗传--环境--代谢相关性疾病，与胰岛素抵抗及相关代谢综合症和遗传易感性密切相关。其具体机制还不十分清楚，学说众多，其中“二次打击”学说相对来说可以较完善的解释其复杂的发病机制，得到大部分学者认同。初次打击主要为胰岛素抵抗(insulineresistence，IR)，各种病因所致NAFLD几乎普遍存在胰岛素抵抗现象。胰岛素抵抗通过促使外周脂解增加和高胰岛素血症引起肝细胞脂肪储积，并诱致对内外性损害因子敏感性增高；二次打击主要为反应性氧化代谢产物增多，导致脂质过氧化及其异常细胞因子的作用，进而引起坏死、甚至进展性肝纤维化。“二次打击”学说只是脂肪性肝病发生的经典机制，现在对其发病机制的研究，从大体逐渐深入到细胞、分子、信号传导、网络调节等领域。

尽管目前对脂肪肝的机理研究已逐步重视，但西方医学对脂肪肝的治疗仍缺乏有效手段。主要原因在于NAFLD作为代谢综合症的一部分，发病机制较为复杂，西方医学单一途径、单一靶点的作用方式难以取得较好疗效。而在目前的临床实践中，中医药基于其多途径、多靶点的整合效应，显示出优势，成为我国临床脂肪肝治疗的重要手段之一。其临床治疗的有效性已被广泛认同并得到广大患者的欢迎。

(2)中医药防治脂肪肝研究概况

目前，脂肪肝的中医药治疗在临床上已越来越广泛，虽然临床上有关脂肪肝辩证分型等尚不统一，如韩加强等将脂肪肝分为3型论治：痰湿内积型，肝郁脾虚型，痰瘀交阻型。陈姝娴等将脂肪肝分为4型论治：痰浊壅阻型，肝气郁结型，湿热内蕴型，痰瘀互结型。如罗军将本病按5型论治：脾虚痰湿型，肝郁气滞型,湿热蕴结型，瘀血阻络型，肝肾亏虚型,等等，但中医药治疗脂肪肝的有效性已不断地达到共识，并展示了良好的前景。

鉴于脂肪肝的高患病率以及对其危害性的进一步深入认识，近年来，有关脂肪肝治疗的中药复方或验方临床观察报道和实验研究以及对单药和中药有效组分的研究已成为肝病研究领域的一大热点。有关临床验方不胜枚举，其主要治法在于祛湿化痰、活血化瘀等等。也发现了一些对防治脂肪肝有药理效应的中药如赤芍、决明子、五味子、山豆根、泽泻、荷叶、茵陈等，也初步发现了一些中药有效组分或成分如：人参茎叶皂苷、姜黄素、葛根素、白芍总苷、山楂叶总黄酮、虎杖苷、蛇床子素、枸杞多糖、槲皮素、雷公藤多甙、大黄酸、荔枝核皂苷、绿原酸等。此外，用于临床治疗的中成药也不断推出，如胆宁片、壳脂胶囊、当飞利肝宁胶囊等等。

2、与发明最密切的背景技术的叙述：

(1)中药有效成分(有效组分)研究概述除临床治疗实践以及脂肪肝防治的中药复方研究之外，近年来，有关对脂肪肝防治有效的中药有效组分或成分也在不断探寻中，初步发现了一些能减轻肝脏脂肪沉积的有效成分，主要有以下几种，

1)姜黄素，为中药姜黄的萃取成分，具有降脂、抗炎、利胆、抗氧化等作用。有报道，大鼠NAFLD模型经过姜黄素治疗后，可逆转肝脏脂肪变性，改善肝功能，并能够降低H0MA胰岛素抵抗指数(H0MA-IRI)，升高脂联素水平，降低血清TG、TC、LDL-C含量。研究还提示姜黄素可能通过改善胰岛素抵抗(IR)、纠正低脂联素血症和脂质代谢紊乱等多种途径逆转大鼠NAFLD模型的肝脂肪变性。其改善IR的作用机制是抑制JNK激酶的活性，同时提高血浆代谢相关酶的活性。任永丽等通过复制家鸭脂肪肝模型并用姜黄素干预，发现姜黄素具有降低家鸭脂肪肝模型肝脂、血脂的作用，且具有剂量依赖性。认为其作用机制可能与增加肝脂酶活性，促进脂质代谢，保护肝细胞有关。

2)山楂叶总黄酮，是从山楂叶中提取的总黄酮组分，含有多种黄酮苷、荭草素、葡荆牡黄酮等成分，具有降压、降脂，纠正心肌缺血和脑缺血，防止血管内皮细胞氧化的作用。刘江等通过高糖高脂饲料建立胰岛素抵抗大鼠模型，观察FHB对血清中血糖、血脂、胰岛素含量、脂质过氧化指标和肝功能指标的作用。结果显示，FHB组较模型组可以显著降低胰岛素抵抗大鼠血清FFA和TG含量，提高HDL-C水平，降低ALT和AST活性，降低肝指数，防止肝脏组织脂肪性病变，同时可提高总抗氧化能力和肝脏组织中SOD活性，降低MDA含量。由此得出FHB对胰岛素抵抗大鼠高血脂和氧化损伤起到了良好的防治作用，能够改善病鼠胰岛素抵抗状态，增强其胰岛素敏感性，具有良好的防治脂肪肝作用。

3)红景天苷，为中药红景天中提取的有效成分，有研究表明，红景天苷抑制脂肪细胞内脂质的积聚，抑制前脂肪细胞向成熟脂肪细胞分化。

4)绞股蓝总苷，是从中药绞股蓝中提取出的有效成分群，由80余种具有人参皂甙基本结构的单体皂甙组成。有实验研究表明，其可下调ICAM-1及MCP-1的表达，抑制实验性大鼠动脉粥样硬化病变的形成,其机制可能与其抗氧化进而抑制NF-κB的激活有关。有临床研究表明，高血脂症合并脂肪肝、肝功能异常者,在常规护肝和同时,给予绞股蓝总甙治疗疗效好,可明显降低TC、TG、LDL-C,提高HDL-C,并促进ALT、AST恢复，且不会导致肾功能和血糖异常。

5)白术多糖：白术多糖(PAM)为白术中主要成分之一，现代药理研究证明白术具有保肝、抑制脂质过氧化作用、降血糖、增强机体免疫功能等作用。白术多糖可减轻自体肝移植大鼠肝脏IRI，其作用机制可能与其抑制NF-κB表达、干扰氧自由基对肝细胞膜的破坏，促进降酶及减轻形态学损伤有关。

(2)均匀设计在中药配方筛选的方法学上的价值

为了突破传统研究方法的局限性，一些学者将数学方法应用到中药复方研究中来。因为中药复方研究中存在大量的模糊性概念、理论和经验，采用模糊数学和计算机技术进行量化研究，可以突破定性研究方法的局限性，尽量排除人为主观因素的干扰，使研究结果更具科学性和说服力。正交设计、均匀设计、主因子分析、聚类分析等统计方法是目前中医药研究运用相对较多的数学方法。

正交设计是广泛应用于多因素、多水平试验的设计方法。但由于受正交表的限制，在因素水平的比较多的时候，其安排试验次数太多，工作量亦大。为解决此类问题，我国数学工作者方开泰等将数论和多元统计结合，在正交设计的基础上，创造出适应于多因素、多水平试验的均匀设计方法。均匀设计法将试验有关因素的各水平数均匀分散在实验范围内，使每一个试验点都有更好的代表性，减少了实验次数，且实验结果可用计算机处理，因而被大量运用于中药小复方遴选和最佳剂量配比研究中。

3、现有背景技术存在的工艺、方法、性能等方面的缺陷或不足(中药有效组分复方研究的必要性及意义)

中药复方是中药应用的基本形式，通过合理配伍提高了临床疗效，几千年来对人类健康发挥了积极作用。中药复方的君、臣、佐、使配伍理论在体现中医整体观念的同时，也体现了近年来反复证明的中药多途径综合药理效应特点以及针对复杂性疾病治疗的优势。但传统复方的中药配伍停留在饮片层次，成分复杂，质量难以控制。因此，中药复方如何“去粗取精”是中药现代化研究的一大方向。

中药有“天然组合化学库”之称，中药复方的化学实体是活性物质群。近数十年来，以“还原法”思路为核心，研究并发现了许多中药的活性成分甚至单体，揭示了许多中药作用的物质基础，取得了显著的成绩。但人们也发现，有些单体/组分由于丢失过多有效物质往往达不到原药或原方的效果，并失去中医整体观治疗复杂疾病的特色和优势。单一有效成分的研究固然是十分重要的，但从中医药理论体系来说，单一有效成分的研究不是最终的落脚点，而是在物质成分不断被揭示的基础上如何遵循中药复方配伍理论回归到“整体组装(配伍)”。通过传统“中药复方——有效部位/组分/成分——有效组分/成分的复方”这样一个认识论上的螺旋式循环，可以实现中药复方制剂和理论的突破，是未来中药现代研究的重要方法和内容。近年来，有关中药有效组分/成分复方的研究，业已取得了一些成绩。具代表性的如张伯礼院士复方丹参方的研究、姜廷良教授课题组桂枝汤的研究等等。尤其是陈竺院士课题组的“中药方剂复方黄黛治疗急性早幼粒白血病的机理剖析”成功发表于国际著名刊物PANS(2008,105:4826-4831)，该研究从复方中药中的3个化合物(四硫化四砷、靛玉红、丹参酮IIA)配伍，从“整体-器官-细胞-分子-基因”水平全面观察，固定比例的药物相互作用设计，发现并阐述了其“有效成分复方”的作用机理，产生了重要的国内外影响。

然而，总体上基于中药有效成分的复方研究还比较少，在很多复杂的疾病领域还没有涉及。我们认为，单一有效成分的研究是十分重要的，但从中医药理论体系来说，单一有效成分的研究不是最终的落脚点，而是在物质成分不断被揭示的基础上如何遵循中药复方配伍理论回归到“整体组装(配伍)”。通过传统中药复方——有效部位/组分/成分——有效组分/成分的复方这样一个认识论上的螺旋式循环，可以实现中药复方制剂和理论的突破。

我们认为“饮片配伍深入到组分配伍”的研究大致有以下三条途径：其一针对有效中药复方，分离、分析、发现有效物质或有效物质群。其二对复方中已知的中药有效组分或成分进行组合研究，获得能提高疗效的复方。其三针对业已发现的对某一病种有良好治疗作用的中药有效组分或成分进行组合研究。针对若干中药有效成分，通过配伍研究，以病证结合为基础，针对关键病理环节与作用途径，优化不同组分配伍配比关系，强化主效应，减轻或避免副效应，形成针对特定病证结合证候的中药组分配伍方剂，实现从饮片配伍向组分配伍的发展是一重要发展方向。

鉴于此，本发明基于几种既往研究被证实有一定抗脂肪肝作用的中药有效成分或单体，运用均匀设计模型，通过动物实验设计开发出安全有效且作用物质较明确的防治NAFLD的中药有效成分组合物。

发明内容

本发明的目的在于提供一种对脂肪肝具有显著防治效果的中药有效组分组合物。

为达到以上目的，本发明提供了技术方案如下。一种防治脂肪肝的中药有效组分组合物，由红景天苷，绞股蓝总苷，姜黄素和白术多糖制成，各有效组分的用量为红景天苷5.77mg/kg，绞股蓝总苷17.68mg/kg，姜黄素4.35mg/kg，白术多糖69.75mg/kg。优选地，所述防治脂肪肝的中药有效组分组合物的剂型为片剂、胶囊剂、丸剂、口服液或混悬剂。

所述防治脂肪肝的中药有效组分组合物在制备治疗和/或预防脂肪肝药物中的应用。

所述防治脂肪肝的中药有效组分组合物在制备治疗和/或预防非酒精性脂肪肝药物中的应用。

本发明的有益效果：本发明防治脂肪肝的中药有效组分组合物安全有效且作用物质明确，与组分组合物中单一组分及西药多烯磷脂酰胆碱胶囊相比，本发明中药有效组分组合物对脂肪肝具有更为显著的防治效果。

本发明的这些目的，特点，和优点将会在下面的具体实施方式和权利要求中详细的揭露。

具体实施方式

各有效组分的选择及药物组合物的研制

实验方案1-运用均匀设计进行有效组分配方筛选

1.实验动物SD雄性大鼠60只，体重120-140g，清洁级，购自浙江省实验动物中心。宁波大学实验动物中心清洁级动物房饲养、造模与观察，自由饮水。实验动物批号：soxklfob20080033。

2药物与试剂红景天苷(含量98％)，批号：110906，得率：110:1；绞股蓝总苷(含量98％)，批号：ZL120920，得率：60:1；姜黄素(含量95％),批号：ZL20120810，得率：45:1；山楂总黄酮(含量95％)，批号：ZL120903，得率：95:1；白术多糖(含量50％)，批号：ZL1201015，得率：35:1。各有效组分均购自南京泽郎医药科技有限公司。游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)酶联免疫试剂盒购自上海基免生物科技公司，批号：DRY1198-201306；甘油三酯(triglyceride,TG)试剂盒，购自北京北化康泰临床试剂有限公司，批号：006304；总胆固醇(total cholesterol,TC)试剂盒，购自北京北化康泰临床试剂有限公司，批号：006301。血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)试剂盒购自南京建成生物工程公司，批号：20130724。

3肝组织病理：

肝组织常规HE染色，并依据非酒精性脂肪性肝病诊疗指南[1]，光镜下判定各个样本的肝脂肪变性程度(F0─F4)，由宁波美康生物科技公司完成。

4模型制备

高脂饮食大鼠脂肪肝模型(单纯饮食因素诱导)，给予高脂饮食饲料(10％猪油+2％胆固醇+88％基础饲料)饲养10周，饲料由上海斯莱克实验动物有限公司生产。

5均匀设计实验方案

根据均匀设计方案(表1)，以方中五味中药有效组分作为考察因子，以X1、X2、X3、X4、X5分别代表方中的五味中药有效组分，每个因子分别取5个水平(即呈梯度递增的5种不同剂量)，2次重复。按照均匀设计表格安排各因子及水平，进行组方设计，共10组。各有效组分剂量计算方法如下：先根据国家药典确定五味中药(红景天、山楂、白术、绞股蓝、姜黄)剂量范围，再根据所购每个有效成分的实际得率及规格换算确定各组有效成分的剂量范围，最后在剂量范围内取梯度递增的五种不同剂量。X1(红景天苷)的5个水平在1.15－5.77mg/kg之间，X2(绞股蓝总苷)的5个水平在3.54-17.68mg/kg之间，X3(姜黄素)的5个水平在4.35－21.76mg/kg之间，X4(山楂总黄酮)的5个水平在2.76-13.81mg/kg之间，X5(白术多糖)的5个水平在13.95-69.75mg/kg的剂量范围内。

表1均匀设计实验方案

6动物分组与用药

雄性SD大鼠60只，体重120-140g，自造模之日起，将大鼠随机分为正常组5只，造模组55只，造模第7周开始按大鼠体重梯度随机分为模型组及均匀设计配方组各5只，并灌胃给药或饮用水继续造模至第10周。各均匀设计配方组按均匀设计表配伍用药(表2)，各组药物均配制成相应浓度以10ml/kg大鼠体重进行灌胃给药。

表2“均匀设计实验给药方案及各配方用量(每日给药量mg/kg鼠重)

7检测指标与方法

造模结束,称取动物体重,用2％戊巴比妥钠3ml/kg腹腔注射麻醉,打开腹腔。经下腔静脉采血,离心后吸取血清,-70℃低温保存。在同一肝叶和位置切取小块组织,置入10％中性福尔马林缓冲液中固定，其余肝组织分装于离心管中低温保存。分别观测:(1)肝组织TG含量，匀浆制备：取200mg湿肝，加入乙醇-丙酮(1：1)3ml，匀浆10000转/分，20秒，2次，在有塞的试管中充分摇匀，放置过夜。然后离心3000rpm，4℃，20min，取上清液分装于1.5ml离心管中。全自动生化仪OLYMPUS AU2700检测；(2)肝组织常规HE染色，判定脂肪肝模型成功与否。

实验方案2-有效组分配方验证实验

1.模型制备

高脂饮食大鼠脂肪肝模型(单纯饮食因素诱导)，给予高脂饮食饲料(10％猪油+2％胆固醇+88％基础饲料)饲养12周，饲料由上海斯莱克实验动物有限公司生产。

2.试剂和药物

游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)酶联免疫试剂盒购自上海基免生物科技公司，批号：DRY1198-201306；甘油三酯(triglyceride,TG)试剂盒，购自北京北化康泰临床试剂有限公司，批号：006304；总胆固醇(totalcholesterol,TC)试剂盒，购自北京北化康泰临床试剂有限公司，批号：006301。血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)试剂盒购自南京建成生物工程公司，批号：20130724；红景天苷(含量98％)，批号：110906，得率：110:1，购自南京泽郎医药科技有限公司，制备成0.577mg/ml的混悬液备用。姜黄素(含量95％),批号：ZL20120810，得率：45:1，购自南京泽郎医药科技有限公司，制备成2.18mg/ml的混悬液备用。中药有效组分组合物：由姜黄素、绞股蓝总苷、姜黄素、白术多糖按1：3.06：0.75：12.09的比例制备成9.76mg/ml的混悬液备用。多烯磷脂酰胆碱胶囊，由北京安万特有限公司生产，配成浓度为22.8mg/ml的悬浊液。

3.动物分组与用药

SD雄性大鼠48只，体重150-180g，自造模之日起，将大鼠随机分为正常组8只、造模组40只，造模7周后，按大鼠体重梯度，将造模组分层随机分为模型组、姜黄素组、红景天苷组、中药有效组分组合物组和多烯磷脂酰胆碱组各8只。灌胃给药或饮用水1ml/100g鼠重。持续5周。

4.检测指标与方法

在造模和用药周期完成后，用2％戊巴比妥钠3ml/kg腹腔注射麻醉,打开腹腔。经下腔静脉采血，离心后吸取血清，-70℃低温保存。在同一肝叶和位置切取小块组织,置入10％中性福尔马林缓冲液中固定，另定位取肝组织分装于离心管中低温保存。分别观测：(1)体重、肝湿重变化；(2)肝组织TG含量及血清TC含量变化，生化试剂盒检测；(3)血清ALT、AST活性变化，生化试剂盒检测；(4)肝组织FFA含量，试剂盒ELISA法检测。(5)肝组织常规HE染色，并依据非酒精性脂肪性肝病诊疗指南[3]，光镜下判定各个样本的肝脂肪变性程度(F0─F4)；

5.统计处理

所有数据均使用SPSS16.0软件包进行统计学分析。计量资料均以平均数±标准差形式表示。组间比较采用单因素方差分析LSD检验(最小显著差t检验)。均匀设计实验采用多元逐步回归分析(以α＝0.05为显著水准进行统计检验)。等级资料用Ridit分析。

结果：

2.1筛选实验结果(有效组分配方筛选结果)

2.1.1筛选实验模型制备情况观察：

模型组大鼠肝组织HE染色显示肝细胞出现不同程度的脂肪变性和空泡样变，变性的肝细胞肿胀呈圆形，体积较正常增大。多数肝细胞内可见大小不等，数量不一的脂滴空泡，一些肝细胞核则被脂肪滴挤得明显偏位，肝索排列紊乱，可见点状坏死灶，坏死区及汇管区有少量炎性细胞浸润。肝组织TG含量检测显示，模型组达134.54±18.00mg/g，其均值达正常组(15.65±1.57mg/g)的8.60倍。提示本次模型制备成功。即均匀设计试验的实验模型基础良好。

2.1.2均匀设计多元回归分析：

以均匀设计各组大鼠肝组织TG含量为因变量，进行多元回归分析，得出回归方程为：Y＝114.124+0.445X1X3-0.008X1X2X5(F＝4.961，P<0.05)。根据此方程，提示当红景天苷、绞股蓝总苷、白术多糖取最大剂量，而姜黄素取最小剂量时出现降TG最佳效应，而山楂总黄酮对肝组织TG变化无明显影响。最佳有效组分配方为红景天苷5.77mg/kg+绞股蓝总苷17.68mg/kg+姜黄素4.35mg/kg+白术多糖69.75mg/kg。

表3均匀设计各组大鼠肝组织TG含量

2.2验证实验结果(中药有效组分组合物药效学效应)

2.2.1各组大鼠一般情况、体重、肝湿重的变化

8只正常大鼠起始体重为164±14g，之后状态保持良好。32只大鼠造模前体重为162±14g，实验过程中造模大鼠较正常组增长迅速，且性情较为温顺，不喜动。实验结束时模型组动物的体重较正常组显著升高(P<0.01)，红景天苷组、姜黄素组与模型组间体重比较无明显差异(P>0.05)。中药有效组分组合物组、多烯磷脂酰胆碱组体重均显著低于模型组(P<0.05)，以中药有效组分组合物组降低最为明显，显著低于多烯磷脂酰胆碱组(P<0.05)。此外，较之正常组，模型组大鼠肝湿重显著升高(P<0.01)，而中药有效组分组合物组、红景天苷组、姜黄素组肝湿重均显著低于模型组(P<0.05)，以中药有效组分组合物组降低最为明显，显著低于红景天苷组和多烯磷脂酰胆碱组(P<0.05)。(表4)。

表4各组大鼠体重和肝湿重的变化

注：*P<0.05，**P<0.01，vs模型组；##P<0.01，vs多烯磷脂酰胆碱组。

2.2各组大鼠肝组织TG、FFA含量的变化

与正常大鼠相比，模型大鼠肝组织TG、FFA含量大幅度升高，其均值分别达正常组的3.65倍和4.82倍(P<0.01)。中药有效组分组合物组、姜黄素组、红景天苷组和多烯磷脂酰胆碱组的肝组织TG和FFA含量均显著低于模型组(P<0.01)，其中中药有效组分组合物组的肝组织TG、FFA含量又显著低于红景天苷组、姜黄素组和多烯磷脂酰胆碱组(P<0.01)。(表5)。

表5各组大鼠肝组织TG和FFA含量的变化

注：**P<0.01，vs模型组；##P<0.01，vs多烯磷脂酰胆碱组；

2.2.3各组大鼠血清ALT、AST活性变化

模型组大鼠血清ALT、AST活性较之正常组显著升高(P<0.01)，中药有效组分组合物组、姜黄素组、红景天苷组和多烯磷脂酰胆碱组的血清ALT、AST活性显著低于模型组(P<0.05)，以中药有效组分组合物组降低最为明显，优于红景天苷组、姜黄素组和多烯磷脂酰胆碱组(P<0.01)。(表6)。

表6各组大鼠血清ALT、AST活性的变化

注：*P<0.05，**P<0.01，vs模型组；#P<0.05，##P<0.01，vs多烯磷脂酰胆碱组。

2.4各组大鼠血清TG、TC含量的变化

模型组大鼠血清TG、TC含量较之正常组有升高趋势，但无显著性差异。中药有效组分组合物组、姜黄素组、红景天苷组和多烯磷脂酰胆碱组与正常组、模型组比较也无统计学差异(表7)。

表7各组大鼠血清TG、TC含量的变化

注：各组之间比较均P>0.05，无统计学差异。

2.5各组大鼠肝组织HE染色变化比较

模型大鼠均出现不同程度的脂肪变性和空泡样变，变性的肝细胞极度肿胀呈圆形，体积较正常明显增大，胞浆内出现大量脂肪空泡，部分细胞可见细胞核挤向胞膜，可见散在的点状坏死灶，坏死区及少量汇管区有少量炎性细胞浸润。中药有效组分组合物组及多烯磷脂酰胆碱组大鼠脂肪变性程度及细胞肿胀明显减轻，胞内脂滴数量减少，体积变小，炎性细胞浸润及坏死灶较模型组少。根据肝脂肪沉积程度判定半定量分析，中药有效组分组合物组、红景天苷组、姜黄素组及多烯磷脂酰胆碱组脂肪变性程度均较模型组显著降低(P<0.01)，以中药有效组分组合物组降低最为显著，优于多烯磷脂酰胆碱组(P<0.01)。(表8)。

表8各组肝组织病理HE染色脂肪变性比较(只)

注：**P<0.01，vs模型组；##P<0.01，vs多烯磷脂酰胆碱组。

通过上述实施例，本发明的目的已经被完全有效的达到了。熟悉该项技艺的人士应该明白本发明包括但不限于上面具体实施方式中描述的内容。任何不偏离本发明的功能和结构原理的修改都将包括在权利要求书的范围中。

Claims (4)

1.一种防治脂肪肝的中药有效组分组合物，其特征在于：由红景天苷，绞股蓝总苷，姜黄素和白术多糖制成，各有效组分的用量为红景天苷5.77mg/kg，绞股蓝总苷17.68mg/kg，姜黄素4.35mg/kg，白术多糖69.75mg/kg。

2.根据权利要求1所述的防治脂肪肝的中药有效组分组合物，其特征在于：所述防治脂肪肝的中药有效组分组合物的剂型为片剂、胶囊剂、丸剂、口服液或混悬剂。

3.根据权利要求1所述的防治脂肪肝的中药有效组分组合物在制备治疗和/或预防脂肪肝药物中的应用。

4.根据权利要求1所述的防治脂肪肝的中药有效组分组合物在制备治疗和/或预防非酒精性脂肪肝药物中的应用。