CN104606260A - 用于辅助化疗药物的医药组合物及其用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种用于辅助化疗药物的医药组合物及其用途,是以热水浸泡及低极性溶剂萃取等步骤获得的有效剂量的牛樟芝子实体萃取物,并可搭配医药学上可接受的载剂作成医药组合物,而能够用于提升化疗药物顺铂(cisplatin)及健择(gemcitabine)对癌症的治疗效果,同时,可改善治疗癌症过程中所导致的掉毛发、肌肉降解与萎缩、肠胃道损伤和肾发炎损伤等副作用。
Description
技术领域
本发明是有关于一种牛樟芝萃取物及其应用,特别是指一种用于辅助化疗药物的医药组合物及其用途。
背景技术
牛樟芝(或称牛樟菇;Antrodia cinnamomea)为台湾特有种菇菌类,仅生长于台湾中高海拔(400~2000公尺)山区特有的牛樟树上,为原住民习知具保肝与解酒等用途的珍贵菇类。公元1995年迄今的研究结果显示牛樟芝子实体具有抗发炎、增强免疫力与体力、抗病毒、抗氧化、抗癌与保肝等多种功效,并有多篇文献直接以动物模型(in vivo)进行抗癌研究,包括肝癌、肺癌、大肠癌及卵巢癌等证实牛樟芝子实体乙醇萃取物具显著抗癌效果。然而牛樟椴木取得不易,导致子实体原料成本太高,此外,仍存在无法稳定大量供货、易有杂菌与重金属污染等疑虑考虑,因此尚缺乏药物开发诱因,致使台湾特有牛樟芝开发为植物新药的进程迟迟无法推展。因此,可大量、稳定、无杂菌与重金属污染的高质量牛樟芝子实体原料量产技术开发是目前迫切的议题。
正常身体组织,以糖类、蛋白质、脂肪来作为能量的需求;然而,癌细胞/组织生长迅速且单纯以葡萄糖作为热量的唯一来源,因此癌细胞生长将会消耗大量葡萄糖,所以在癌症患者体内会大量将蛋白质及脂肪被转换为葡萄糖,以提供癌细胞生长所需的能量。此外,癌组织会影响人体内蛋白质的生合成,致肌肉组织降解流失,病人的味觉、嗅觉和胃口会大幅降低。最终,则会造成大部份癌患者出现严重营养不良,器官功能受损与免疫功能低下等恶病质病征。
肺癌是目前全球盛行率与死亡率最高的癌种之一。主要可区分为“小细胞肺癌”(发生率约16.8%)和“非小细胞肺癌”(发生率约80.4%)二种。治疗肺癌最常采用手术治疗、放射线治疗与药物治疗(含化疗与标靶药物)等;其中,化疗药已是医生治疗肺癌的首要选择之一,目前第一线治疗的药物是健择(gemcitabine)及顺铂(cisplatin),第一线化疗组合的效果平均可维持半年以上,之后肿瘤如果无法控制,须改用第二线化疗药物(单一种药物),例如注射型的健泽或紫杉醇,或有口服及静脉注射的温诺平等,皆是肺癌患者可选择的第二线用药。化疗法虽然可以成功杀死癌细胞,但却会没有选择性地一并杀死正常细胞,通常会对病人的免疫、造血系统造成严重损伤,致使好的细胞和坏的细胞“同归于尽”,此外,化疗对一般增殖也较快的正常细胞包括口腔和胃肠道的表层上皮、骨髓的造血细胞以及产生毛发的毛囊细胞等亦造成影响,因此,常有乏力、恶心、呕吐、血细胞减少、脱发、口腔溃疡和疼痛等严重副作用。
鉴于化疗副作用的产生会造成癌症患者身体不适,进而影响癌症患者是否能持续完成整个疗程,因此在进行化疗同时,搭配辅助治疗的介入,可以让癌症患者在进行化疗的同时,可以减轻及改善化疗所造成的身体不适,进而顺利完成整个疗程。近来以西药为主的开发不断遭遇瓶颈,甚至部份在临床使用上常见严重的副作用,因此逐渐转往以天然植物药为主的研发。而利用牛樟芝为辅助治疗改善化疗所产生的不适应性,也有包括减缓小鼠由顺铂产生肝毒性、小鼠发炎性肠病及肠癌恶病质减缓作用及辅助乳癌用药等研究报导,证实牛樟芝可能具有辅助化疗药物进而达到增效减毒的效果。
发明内容
有鉴于此,本发明的主要目的是提供一种用于辅助化疗药物的医药组合物及其用途,将牛樟芝子实体萃取物用来辅助化疗药物顺铂及健择提高治疗癌症的效果,并且,可有效减轻化学治疗癌症后的掉毛发、肌肉降解与萎缩、肠胃道与肾发炎损伤等副作用。
为实现上述目的,本发明提供一种用于辅助化疗药物的牛樟芝子实体萃取物,其包含有效剂量的牛樟芝子实体萃取物和医药学上可接受的载剂,以通过牛樟芝子实体萃取物达到辅助化疗药物治疗癌症及改善癌症副作用,化疗药物为顺铂及健择。
本发明所采用的牛樟芝子实体萃取物的主要成份包含具有结构式(I)的樟菇酸K(antcin K)、樟菇酸C(antcin C)、樟菇酸H(antcin H)及其化学衍生物:
其中,R1为-OH、=O或-O-糖基(可为单糖或双糖或多糖类)或C1-3酯基;
R2为-H、-OH或-O-糖基(可为单糖或双糖或多糖类)或C1-3酯基;
R3为-OH、=O或-O-糖基(可为单糖或双糖或多糖类)或C1-3酯基;
R4为-H、-OH或-O-糖基(可为单糖或双糖或多糖类)或C1-3酯基;及
R5为C1-3羧基或C1-3酯基。
又者,牛樟芝子实体萃取物的成份也包含具有结构式(II)的去氢硫色多孔菌酸(dehydrosulphurenic acid)与去氢齿孔酸(Dehydroeburicoic acid)及其化学衍生物:
其中,R1为-H、-OH或-O-糖基(可为单糖或双糖或多糖类)或C1-3酯基;
R2为-OH或-O-糖基(可为单糖或双糖或多糖类)或C1-3酯基;及R3系为C1-3羧基或C1-3酯基。
再者,牛樟芝子实体萃取物的成份还包含具有结构式(III)的樟菇酸B(antcin B)与樟菇酸A(antcin A)及其化学衍生物:
其中,R1为-H或=O;及
R2为C1-3羧基或C1-3酯基。
另外,牛樟芝子实体萃取物的成份更包含具有结构式(IV)的单酚类化合物(4,7-dimethoxy-5-methyl-1,3-benzodioxole,DMB)及其化学衍生物:
其中,R1为-OH、=O或-O-糖基(可为单糖或双糖或多糖类)或C1-3酯基;
R2为-H、-OH、=O或-O-糖基(可为单糖或双糖或多糖类)或C1-3酯基;
R3为-H、-OH或-O-糖基(可为单糖或双糖或多糖类)或C1-3酯基;
R4为-H或甲基;
R5为-H、-OH、甲基或-O-糖基(可为单糖或双糖或多糖类)或C1-3酯基;及R6为-H或甲基。
另一方面,本发明也提供一种医药组合物的用途,此医药组合物包含有效剂量的牛樟芝子实体萃取物及医药学上可接受的载剂,其用途是用以辅助化疗药物治疗癌症及改善癌症副作用。其中,化疗药物为顺铂及健择。较佳地,牛樟芝子实体萃取物的有效剂量为5.06~18.75毫克/公斤(mg/kg)。
动物模型结果证实,本发明的牛樟芝子实体萃取物合并化疗药物(顺铂及健择)治疗组可显著降低肺癌组肺重量达69.4%(p<0.005),并较单独化疗药物组肺重量显著降低30.6%(p<0.01);肺肿瘤结节数方面,牛樟芝子实体萃取物合并化疗药物(顺铂及健择)治疗组较肺癌组降低55.4%;改善肌肉降解与萎缩方面,牛樟芝子实体萃取物合并化疗药物(顺铂及健择)治疗组较单独化疗药物组试验鼠大腿肌肉重量增加42%(p<0.01),且明显抑制化疗药物(顺铂及健择)试验鼠肌肉中蛋白酶(proteasome)酵素活性,包括糜蛋白酶(chymotrypsin)、胰蛋白酶(trypsin)与半胱氨酸蛋白酶(caspase)等,分别达28%(p<0.01)、26.1%(p<0.01)与11.1%。改善肠胃道损伤方面,牛樟芝子实体萃取物可大幅改善化疗药物(顺铂及健择)造成的肠绒毛破坏与胃部溃疡等副作用,且可明显改善小肠中白胺酸胺基酵素(LAP)、脂解酵素(LIP)与淀粉分解酵素(amylase)等酵素活性;改善肾发炎与损伤方面,牛樟芝子实体萃取物可有效降低化疗后肾炎指数,如肌酐(creatinine)、尿素氮(BUN)与血清白蛋白(serum albumin)等。
因此,本发明已经证实利用此牛樟芝子实体萃取物可应用于辅助化疗药物,并可进一步调制为各种不同剂型的医药组成物,来提高癌症治疗效果及减轻化疗副作用。
以下通过具体实施例详加说明,当更容易了解本发明的目的、技术内容、特点及其所达成的功效。
附图说明
图1为本发明所提供的用于辅助化疗药物的牛樟芝子实体萃取物的制作方法的步骤流程图;
图2为本发明的牛樟芝子实体萃取物的HPLC分析图谱;
图3显示本发明的牛樟芝子实体萃取物改善化疗药物造成小鼠体重下降的效果;
图4显示本发明的牛樟芝子实体萃取物改善化疗药物造成小鼠进食量下降的效果;
其中(a)为Normal组,(b)为Cancer组,(c)为CGC组,(d)为CGCA组,而(e)为CA组;
图5显示本发明的牛樟芝子实体萃取物降低肺癌鼠肺重量的效果;
其中(a)为Normal组,(b)为Cancer组,(c)为CGC组,(d)为CGCA组,而(e)为CA组;
图6显示本发明的牛樟芝子实体萃取物降低肺癌鼠肺肿瘤结节数的效果;
其中(a)为Normal组,(b)为Cancer组,(c)为CGC组,(d)为CGCA组,而(e)为CA组;
图7显示本发明的牛樟芝子实体萃取物改善化疗药物造成试验鼠肌肉降解与萎缩的效果;
其中(a)为Normal组,(b)为Cancer组,(c)为CGC组,(d)为CGCA组,而(e)为CA组;
图8显示本发明的牛樟芝子实体萃取物抑制化疗药物试验鼠肌肉中蛋白酶酵素活性的效果;
图9a~9b分别显示本发明的牛樟芝子实体萃取物可抑制肌肉降解因子表现及促进肌肉生成因子表现的效果;
其中(a)为Normal组,(b)为Cancer组,(c)为CGC组,(d)为CGCA组,而(e)为CA组;
图10a~10c显示本发明的牛樟芝子实体萃取物抑制癌症化疗药物造成血液发炎因子上升的效果;
其中(a)为Normal组,(b)为Cancer组,(c)为CGC组,(d)为CGCA组,而(e)为CA组;
图11a~11c显示本发明的牛樟芝子实体萃取物改善使用癌症化疗药物后小肠中酵素表现的效果;
其中(a)为Normal组,(b)为Cancer组,(c)为CGC组,(d)为CGCA组,而(e)为CA组;
图12a~12c显示本发明的牛樟芝子实体萃取物改善使用癌症化疗药物造成肾发炎损伤的效果;
其中(a)为Normal组,(b)为Cancer组,(c)为CGC组,(d)为CGCA组,而(e)为CA组;
图13显示不同剂量的牛樟芝子实体萃取物合并癌症化疗药物对试验鼠体重的影响。
具体实施方式
以下数个实施例将进一步说明本发明如何制备牛樟芝子实体萃取物及其动物试验方法和流程,并同时用以验证本发明的功效和目的。
实施例1:牛樟芝子实体萃取物的制备方式与高效液相层析分析
1、本发明所采用的牛樟芝子实体符合CNS15654草案的规格标准,菇体直径约达13公分,以解剖显微镜观察表面可清楚分辨具牛樟芝子实体特有的多孔化特征,且单片菇体干重约6~15公克。
2、牛樟芝子实体萃取物的制备
请参照图1,说明牛樟芝子实体萃取物的萃取分离过程,其步骤包含:首先,如步骤S10,取牛樟芝子实体干燥粉末,如步骤S20,第一道萃取过程是以30倍体积的80~100℃热水浸泡1~3小时,如步骤S30,以1号滤纸(#1)抽气过滤后,去除浸泡液,如步骤S40,在进行第二道萃取过程,以低极性溶剂,如5倍95%乙醇溶液,萃取8小时共3次,如步骤S50,收集萃取液,将所得萃取液经减压浓缩干燥后,即得牛樟芝子实体萃取物。
其中低极性溶剂可选自石油醚、正己烷、乙酸乙酯、丙酮、乙醇及其组合所组成的群组;以乙醇为例,其可为25~100重量%乙醇溶液。
3、高效液相色层析分析
以高效液相色层析分析仪分析牛樟芝子实体萃取物的成分。高效液相层析的条件如下:高效液相层析仪帮浦为Spectra SYSTEM P1000;自动取样器为SpectraSYSTEM AS3000;侦测器为Surveyor PDA Plus;高效液相层析管柱为Thermo,BDSHYPERSIL C18,4.6*250mm;流速为1.0mL/min;管柱温度为室温;侦测波长为254nm。溶媒系统条件如下表1:
表1
时间 | 0.1%FA | 0.1%FA/ACN |
0 | 70 | 30 |
40 | 50 | 50 |
60 | 50 | 50 |
80 | 0 | 100 |
120 | 0 | 100 |
122 | 70 | 30 |
130 | 70 | 30 |
图2为本发明的牛樟芝子实体萃取物的HPLC分析图谱。结果显示本发明所使用的牛樟芝子实体具有与原生牛樟芝子实体相符的8个化学指针成份:樟菇酸A((R,S)Antcin A)、樟菇酸B((R,S)Antcin B;Zhankuic acid A)、樟菇酸C((R,S)AntcinC)、樟菇酸K((R,S)Antcin K)、樟菇酸H((R,S)Antcin H)、单酚类化合物(4,7-dimethoxy-5-methyl-1,3-benzodioxole,DMB)、去氢硫色多孔菌酸(Dehydrosulphurenic acid)与去氢齿孔酸(Dehydroeburicoic acid)。
实施例2:本发明的牛樟芝子实体萃取物辅助化疗药物(顺铂及健择)提升肺癌治疗效果的动物试验
本试验采用LLC(Lewis Lung Carcinoma)/C57BL/6肺癌动物模型,试验中所使用动物为male C57BL/6mice 8周大,体重约为25克。饲养环境提供12小时光照周期(AM7:00-PM 7:00),并有适当温度及湿度控管,并充份供应飼料与饮水。所使用的癌细胞株为小鼠肺癌细胞LLC,培养在含有10%heat-inactivated fetal bovine serium(FBS)、100unit/mL Penicillin-Streptomycin(P/S)的Dulbecco's Modified eagle medium(DMEM medium)环境中。将LLC细胞,利用0.05%Trypsin-EDTA将细胞收下。使用FBS稀释调整细胞浓度到2×107cells/mL,将调整好浓度的细胞利用软针将癌细胞原位注射0.1mL到8周大的C57BL/6mice气管内,并沿气管滑落肺腔内(即每只小鼠转植2×106cells)。
于接种完肿瘤后一周,小鼠以5只为一组,随机分籠,共区分为5组:
1.正常组(代号Normal组):正常小鼠,喂食生理食盐水;
2.肿瘤组(代号Cancer组):接种癌细胞小鼠,喂食生理食盐水;
3.肿瘤+化疗药物组(代号CGC组):接种癌细胞小鼠:施打顺铂与健择的临床化疗药物;
4.肿瘤+牛樟芝子实体萃取物+化疗药物组(代号CGCA组):接种癌细胞小鼠:施打顺铂与健择的临床化疗药物,合并喂食牛樟芝子实体萃取物300mg/kg/day;及
5.肿瘤+牛樟芝子实体萃取物(代号CA组):喂食牛樟芝子实体萃取物300mg/kg/day。
于肿瘤接种诱发后十天,开始予以待测药物。于实验中每天观察小鼠存活及生理状况(体重及进食量)。连续给药三周(或四周,依实验设计)后终止实验,并牺牲动物,取出各器官后秤重、拍照记录并进行病理分析;将剩余各器官放置1.5mL离心管中,置于-80℃冰箱保存进行后续分析。试验结果展示于图3~6。
体重观察方面,请参照图3,试验结果显示连续三个星期的喂食牛樟芝子实体萃取物后,Normal组试验鼠体重平均为25.43克;Cancer组试验鼠体重仅19.03克,较Normal组体重减轻约25.2%;CGC组试验鼠体重最轻仅17.82克,较Cancer组体重再减轻约6.4%;而CGCA组试验鼠体重因喂食牛樟芝子实体萃取物平均体重达20.01克,较Cancer组体重增加约5.1%;CA组因喂食牛樟芝子实体萃取物平均体重达22.21克,较Cancer组体重增加约16.7%。
进食量观察方面,请参照图4,试验结果显示Normal组试验鼠每日进食量约3.55±0.24克,Cancer组试验鼠每日进食量约2.59±0.60克,较Normal组试验鼠进食量下降约27%,CGC组试验鼠每日进食量仅2.51±0.76克,较Cancer组试验鼠进食量再下降约3.0%,而喂食牛樟芝子实体萃取物的CGCA组与CA组的进食量分别为2.65±0.64克及3.02±0.38克,较Cancer组试验鼠进食量分别提升了2.3%与16.6%,具有明显改善化疗药物造成试验进食量下降的效果。
降低试验鼠原位肺癌生长方面,由外观观察结果显示CGCA组明显较CGC组具降低肺癌生长效果;再由肺重量分析结果,请参照图5,其显示Normal组试验鼠肺重量约为0.16±0.01克,Cancer组肺重量明显变重达1.11±0.14克,较Normal组试验鼠肺重量增加约593.8%,CGC组肺重量降低至0.49±0.07克,较Cancer组试验鼠肺重量减少约55.9%,而化疗药物加牛樟芝子实体萃取物的CGCA组肺重量仅约0.34±0.05克,较Cancer组试验鼠肺重量减少约69.4%,与CGC组具显著差异(p<0.01);此外,喂食牛樟芝子实体萃取物的CA组,较Cancer组试验鼠肺重量减少约42.3%,明显较具降低肺癌鼠肺重量的效果(p<0.005)。
图6为肺癌鼠肺肿瘤结节数结果,Cancer组肺癌结节数达53.4±3.39颗,而喂食牛樟芝子实体萃取物的CA肺癌结节数为38.2±3.48颗,较Cancer组试验鼠肺结节数减少约28.5%,与Cancer组具明显差异(p<0.005)。此外,CGCA组肺癌结节数仅为23.8±3.68颗,较Cancer组试验鼠肺结节数减少约55.4%,亦比单纯CGC组为31.4±4.13颗为低。
实施例3:牛樟芝子实体萃取物改善化疗药物(顺铂及健择)造成掉毛发的效果
试验方法同实施例2,试验鼠于连续给药三周后终止实验,观察并拍照各组试验鼠的掉毛发情形,此试验结果显示CGC组明显较Normal组产生掉毛发现象,此外,CGC组掉毛发情形严重,喂食牛樟芝子实体萃取物的CGCA组可明显改善CGC组掉毛发情形。
实施例4:牛樟芝子实体萃取物改善癌症化疗药物(顺铂及健择)造成肌肉降解与萎缩的效果
试验方法同实施例2。试验鼠于连续给药三周后终止实验并牺牲动物,以统计分析各组腓肠肌(Gastrocnemius muscle)及比目鱼肌(Soleus muscle)重量变化,并利用病理组织切片染色观察肌肉组织atrophy改善情况,此外,分析肌肉中主要蛋白酶(proteasome)包括糜蛋白酶(chymotrypsin)、胰蛋白酶(trypsin)与半胱氨酸蛋白酶(caspase)等活性变化。由各组试验牺牲后大腿肌肉比较结果,其显示Cancer组与CGC组明显较Normal组细小,喂食牛樟芝子实体萃取物的CGCA组与CA组具可明显改善大腿肌肉降解与萎缩情形。
肌肉外观与重量分析方面,请参照图7,结果显示Normal组腓肠肌(Gastrocnemiusmuscle)及比目鱼肌(Soleus muscle)重量约为1.28±0.07克,Cancer与CGC组重量分别降低至0.6±0.03克(较Normal组降低53.1%)与0.57±0.05克(较Normal组降低55.5%),明显较其他各组萎缩;然而,喂食牛樟芝子实体萃取物的CGCA组及CA组其肌肉重量分别可达0.81±0.11(较Cancer组增加35%)及0.90±0.04克(较Cancer组增加50%),可明显改善CGC组肌肉降解与萎缩现象(p<0.01)。由肌肉病理组织切片H&E染色结果,其显示喂食牛樟芝子实体萃取物的CGCA组与CA组可明显改善化疗药物造成肌肉降解的效果。图8的试验结果显示化疗药物组(CGC组)肌肉中的糜蛋白酶与胰蛋白酶等蛋白酶酵素活性为所有试验组中最高,喂食牛樟芝子实体萃取物的CGC组可明显降低其活性(p<0.01);而执行细胞凋亡机制的半胱氨酸蛋白酶酵素活性于CGC组最高,喂食牛樟芝子实体萃取物有助于降低肌肉中因化疗药物处理后蛋白酶酵素活性。其作用机制推测可能是透过抑制肌肉降解因子(myostatin)与促进肌肉生成因子(IGF-1)表达来达成(第9a~9b图)。
实施例5:牛樟芝子实体萃取物抑制癌症化疗药物(顺铂及健择)造成血液发炎因子上升的效果
试验方法同实施例2。试验鼠于连续给药三周(或四周,依实验设计)后终止实验并牺牲动物,抽取血液并分析各组血液中介白素6(IL-6)、介白素1β(IL-1β)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的变化。图10a~10c的试验结果显示各组血液中IL-6、IL-1β及TNF-α等发炎因子浓度以CGC组最高,而喂食牛樟芝子实体萃取物的CGCA组则可明显降低血液中IL-6、IL-1β及TNF-α等发炎因子浓度(p<0.01)。
实施例6:牛樟芝子实体萃取物改善癌症化疗药物(顺铂及健择)造成肠胃道损伤的效果
试验方法同实施例2。试验鼠于连续给药三周(或四周,依实验设计)后终止实验并牺牲动物,以制作小肠绒毛病理切片并以H&E染色观察绒毛破坏情形,结果显示牛樟芝子实体萃取物可大幅改善化疗药物(顺铂及健择)造成的肠绒毛破坏与胃部溃疡等副作用,且可明显改善小肠中白胺酸胺基酵素(LAP)、脂解酵素(LIP)与淀粉分解酵素(amylase)等酵素活性(第11a~11c图)。
实施例7:牛樟芝子实体萃取物改善癌症化疗药物(顺铂及健择)造成肾发炎损伤的效果
试验方法同实施例2。试验鼠于连续给药三周(或四周,依实验设计)后终止实验并牺牲动物,抽取血液并分析各组血液中肌酐(creatinine)、尿素氮(BUN)及血清白蛋白(serum albumin)等浓度,结果显示牛樟芝子实体萃取物可显著降低化疗药物(顺铂及健择)试验鼠血中肾炎指数的肌酐(creatinine)、尿素氮(BUN)及血清白蛋白(serum albumin)(图12a~12c)。
实施例8:牛樟芝子实体萃取物辅助化疗药物(顺铂及健择)治疗肺癌的剂量试验
本试验通过皮下癌细胞注射模型评估肿瘤生长恶化情况。实验中所使用动物为male C57BL/6mice 8周大,体重约为25克。饲养环境提供12小时光照周期(AM7:00-PM 7:00),并有适当温度及湿度控管,并充份供应饲料与饮水。所使用的癌细胞株为小鼠肺癌细胞LLC。
鼠肺癌细胞株(LLC)培养在含有10%heat-inactivated fetal bovine serium(FBS)、100unit/ml Penicillin-Streptomycin(P/S)的Dulbecco's Modified eagle medium(DMEM medium)环境中,并将细胞培养于5%CO2,37℃及湿度90%恒温的二氧化碳培养箱内,使细胞密度维持在2×105~1×106(八至九分满)。每二至三天固定更换一次新鲜培养基。
将LLC细胞,利用0.05%Trypsin-EDTA将细胞收下。使用FBS稀释调整细胞浓度到1×107cells/mL,取用调整好浓度的细胞利用胰岛针将癌细胞皮下注射0.1mL到8周大的C57BL/6mice右背侧皮下内(即每只小鼠转植1×106cells)。
于种完肿瘤后一周,小鼠以5只为一组,随机分籠,组别分为5组:
1.肿瘤组(代号Cancer组):接种癌细胞;
2.肿瘤+化疗药物组(代号CGC组):接种癌细胞,施打顺铂与健择的临床化疗药物;
3.肿瘤+牛樟芝子实体萃取物+化疗药物组(代号CGCA300组):接种癌细胞,施打顺铂与健择的临床化疗药物,合并喂食牛樟芝子实体萃取物300mg/kg/day;
4.肿瘤+牛樟芝子实体萃取物+化疗药物组(代号CGCA150组):接种癌细胞,施打顺铂与健择的临床化疗药物,合并喂食牛樟芝子实体萃取物150mg/kg/day;及
5.肿瘤+牛樟芝子实体萃取物+化疗药物组(代号CGCA75组):接种癌细胞,施打顺铂与健择的临床化疗药物,合并喂食牛樟芝子实体萃取物75mg/kg/day。
于肿瘤种植诱发后十天,开始予以待测药物。每三天观察肿瘤的生长情形,并测量肿瘤大小(体积),计算肿瘤大小的计算公式:0.53x长x宽2。投药两周后停止给予药物,隔天牺牲老鼠,并于实验过程中评估观察肿瘤大小、掉毛发体重改善及喂食量等。数据的表示方法为mean±SEM。使用SigmaPlot来进行数据处理、分析及绘图。
体重与掉毛发观察方面,请参照图13,结果显示试验结束后Cancer组试验鼠体重可达26.2克,化疗药物组(CGC组)试验鼠体重仅18.3克(较Cancer组体重减轻30%),而不同剂量的牛樟芝子实体萃取物的CGCA75组、CGCA150组及CGCA300组的试验鼠体重分别为21.7、21.9与22.1克,即较CGC组体重分别增加18.6%、19.6%与20.8%。结果显示只要使用75mg/kg牛樟芝子实体萃取物即可显著改善化疗药物(顺铂及健择)造成的体重减轻现象。由各组试验鼠掉毛发情形的观察,结果显示牛樟芝子实体萃取物的使用剂量为75mg/kg以上时,即可显著改善化疗药物(顺铂及健择)造成试验鼠毛色偏灰与掉毛现象。
降低试验鼠肺癌生长方面,由外观观察结果显示Cancer组肿瘤最重,与CGC组具极显著差异(p<0.001),而CGCA150组与CGCA300组相对于CGC组亦达极显著差异(p<0.001),结果显示牛樟芝子实体萃取物可显著提升化疗药物(顺铂及健择)对肺癌的治疗效果。
根据上述实施例,本发明所提供的牛樟芝子实体萃取物能够有效用于辅助化疗药物(如顺铂及健择)提高抑制肺癌效果并可改善化学治疗后的掉毛发、肌肉降解与萎缩、肠胃道与肾发炎损伤等用途,将可进一步调制为各种不同剂型的医药组合物,以应用于辅助化疗药物的治疗。
此医药组合物至少包含有效剂量的牛樟芝子实体萃取物及医药学上可接受的载剂,且可制作成口服药剂型式,包含但不限定于药锭、胶囊、滴丸、乳剂、冲剂、水性悬浮液、分散液与其他溶液,可应用于辅助化疗药物治疗癌症及改善癌症副作用。再者,基于本发明的实施例中,牛樟芝子实体萃取物所使用的剂量范围为75~300毫克/公斤(mg/kg),但考虑含水率约25%,则其小鼠动物模型有效剂量较佳为56~225mg/kg。
简而言之,根据本发明所揭露的用于辅助化疗药物的医药组合物及其用途,确实非常适合搭配化疗药物一并投予癌症患者来提高治疗效果及减轻化疗副作用,对于未来临床上癌症治疗将提供实质上的帮助。
唯以上所述者,仅为本发明的较佳实施例而已,并非用来限定本发明实施的范围。故即凡依本发明申请范围所述的特征及精神所为的均等变化或修饰,均应包括于本发明的申请专利范围内。
Claims (22)
1.一种用于辅助化疗药物的医药组合物,包含:
一有效剂量的牛樟芝子实体萃取物;及
一医药学上可接受的载剂;
其中,该牛樟芝子实体萃取物系辅助该化疗药物治疗癌症及改善癌症副作用,该化疗药物为顺铂(cisplatin)及健择(gemcitabine)。
2.如权利要求1所述的医药组合物,其中该牛樟芝子实体萃取物的成份包含樟菇酸K(antcin K)、樟菇酸C(antcin C)、樟菇酸H(antcin H)及其化学衍生物。
3.如权利要求1所述的医药组合物,其中该牛樟芝子实体萃取物的成份包含去氢硫色多孔菌酸(dehydrosulphurenic acid)与去氢齿孔酸(Dehydroeburicoic acid)及其化学衍生物。
4.如权利要求1所述的医药组合物,其中该牛樟芝子实体萃取物的成份包含樟菇酸B(antcin B)、樟菇酸A(antcin A)及其化学衍生物。
5.如权利要求1所述的医药组合物,其中该牛樟芝子实体萃取物的成份包含单酚类化合物(4,7-dimethoxy-5-methyl-1,3-benzodioxole,DMB)及其化学衍生物。
6.如权利要求1所述的医药组合物,为药锭、胶囊、滴丸、乳剂、冲剂、水性悬浮液或分散液的口服药物剂型。
7.如权利要求1所述的医药组合物,其中该牛樟芝子实体萃取物的小鼠动物模型有效剂量为56~225毫克/公斤(mg/kg)。
8.如权利要求1所述的医药组合物,其中该牛樟芝子实体萃取物是由下列步骤所制得:
将牛樟芝子实体以80~100℃热水浸泡1~3小时,去取浸泡液后,再以低极性溶剂萃取,而获得该牛樟芝子实体萃取物。
9.如权利要求8所述的医药组合物,其中该低极性的溶剂是选自石油醚、正己烷、乙酸乙酯、丙酮、乙醇及其组合所组成的群组。
10.如权利要求1所述的医药组合物,其中该癌症为肺癌。
11.如权利要求1所述的医药组合物,其中该癌症副作用包含使用该化疗药物治疗癌症过程中所导致的掉毛发症状、肌肉降解与萎缩、肠胃道损伤或肾发炎损伤。
12.一种医药组合物的用途,该医药组合物包含一有效剂量的牛樟芝子实体萃取物及一医药学上可接受的载剂,该用途是用以辅助化疗药物治疗癌症及改善癌症副作用,该化疗药物为顺铂(cisplatin)及健择(gemcitabine)。
13.如权利要求12所述的用途,其中该癌症为肺癌。
14.如权利要求12所述的用途,其中该癌症副作用包含使用该化疗药物治疗癌症过程中所导致的掉毛发症状、肌肉降解与萎缩、肠胃道损伤或肾发炎损伤。
15.如权利要求12所述的用途,其中该牛樟芝子实体萃取物的小鼠动物模型有效剂量为56~225毫克/公斤(mg/kg)。
16.如权利要求12所述的用途,其中该牛樟芝子实体萃取物的成份包含樟菇酸K(antcin K)、樟菇酸C(antcin C)、樟菇酸H(antcin H)及其化学衍生物。
17.如权利要求12所述的用途,其中该牛樟芝子实体萃取物的成份包含去氢硫色多孔菌酸(dehydrosulphurenic acid)与去氢齿孔酸(Dehydroeburicoic acid)及其化学衍生物。
18.如权利要求12所述的用途,其中该牛樟芝子实体萃取物的成份包含樟菇酸B(antcin B)、樟菇酸A(antcin A)及其化学衍生物。
19.如权利要求12所述的用途,其中该牛樟芝子实体萃取物的成份包含单酚类化合物(4,7-dimethoxy-5-methyl-1,3-benzodioxole,DMB)及其化学衍生物。
20.如权利要求12所述的用途,其中该医药组合物为药锭、胶囊、滴丸、乳剂、冲剂、水性悬浮液或分散液的口服药物剂型。
21.如权利要求12所述的用途,其中该牛樟芝子实体萃取物是由下列步骤所制得:
将牛樟芝子实体以80~100℃热水浸泡1~3小时,去取浸泡液后,再将该牛樟芝子实体以低极性溶剂萃取,而获得该牛樟芝子实体萃取物。
22.如权利要求21所述的用途,其中该低极性的溶剂选自石油醚、正己烷、乙酸乙酯、丙酮、乙醇及其组合所组成的群组。
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