CN104586860A - 达玛烷型三萜衍生物的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一类具有通式I表示的达玛烷型三萜衍生物或其药学上可接受的盐的用途，以及包含该衍生物或其药学上可接受的盐的药物组合物、植物提取物的用途。所述的达玛烷型三萜衍生物、药物组合物以及植物提取物具有在分子水平上激活AMPKα2β1γ1的作用，可用于AMPK小分子激活剂的制备，进而用于制备预防或治疗与AMPK相关的疾病的药物。
Description
技术领域
本发明涉及达玛烷型三萜衍生物的用途，具体涉及达玛烷型三萜皂甙、达玛烷型三萜及以达玛烷型三萜为母体结构进行改造的衍生物、包含该类衍生物的组合物和植物提取物在制备AMPK激动剂中的用途，以及在制备用于治疗或预防与AMPK相关的疾病的药物中的用途。
背景技术
目前，II型糖尿病已经成为威胁人类健康的主要疾病，其主要发病机制为胰岛素抵抗。因此，通过非胰岛素依赖机制促进葡萄糖的摄取和脂肪酸的氧化成为II型糖尿病防治的重要途径。近年来研究发现单磷酸腺苷激活的蛋白激酶（AMP-activated protein kinase,AMPK）是一个重要的Ser/ThrD蛋白激酶，它能感应细胞和整体的能量代谢状态并调节其平衡(Zhang B.B.,et al.,AMPK:anemerging drug target for diabetes and the metabolic syndrome.Cell Metabolism.9,407-416(2009))。AMPK被激活时，分解代谢途径启动并促进ATP的生成，比如，葡萄糖酵解和脂肪酸氧化；代谢途径降低节约ATP的消耗，例如，甘油三酯和胆固醇的合成。由于其在全身能量平衡中的重要作用（包括调节血浆葡萄糖、脂肪酸氧化和糖原合成等），AMPK已经成为II型糖尿病领域研究的热点。AMPK激动剂也因被认为是一类有潜力的治疗II型糖尿病的制剂而受到广泛研究。除此之外，由于AMPK在能量调节方面的重要作用，AMPK激动剂也也被广泛用于与AMPK相关的各种疾病的预防和治疗，包括代谢性疾病、癌症、心血管疾病、肝炎、肝硬化等（符庆瑛，高钮琪。蛋白激酶AMPK的研究进展。生命科学，17，147-152（2005）；薛洁，郭茂娟，姜希娟，马东明。AMPK与动脉粥样硬化关系的研究进展。天津中医药大学学报。31,126-128（2012）；葛斌，谢梅林，顾振纶，周文轩，郭次仪。AMPK作为治疗2型糖尿病新靶点的研究进展。中国药理学报。24,580-583（2008））。但是目前关于AMPK直接激动剂的研究报道非常少。因此，对AMPK激动剂的发现研究具有重要意义。
达玛烷(dammarane)型三萜为四环三萜，由环氧鲨烯按照椅式-椅式-椅式构象闭环形成。达玛烷型三萜多以皂苷形式存在，达玛烷型三萜皂苷是人参、西洋参、绞股蓝和三七等名贵中药材中的重要生物活性成分。由于达玛烷三萜及其皂苷，特别是人参皂苷具有明显的生理活性，因而从本世纪初开始就引起了广泛地关注，其各种药理活性也被大量报道(Qi,L.W.,et al.,Ginsenoside fromAmerican ginseng:chemical and pharmacological diversity.Phytochemistry.72,689-699(2011))。其药理活性主要有：抗肿瘤、降血糖、对神经系统和心血管系统的作用、抗氧化、抗抑郁、增加免疫力等(Attele,A.S.,et al.,Ginsengpharmacology:multiple constituents and multiple actions.Biochem.Pharmacol.58,1685-1693(1999))。尽管如此，仅有少量文献报道了为数不多的达玛烷三萜或其皂苷具有AMPK激动活性（Nuyen,P.H.,et al.,New dammarane-type glucosides aspotential activators of AMP-activated protein kinase(AMPK)from Gynostemmapentaphyllum.Bioorg.Med.Chem.19,6254-60(2011)）。因此，我们对该类化合物的AMPK激动活性进行了详细研究。
发明内容
本申请的发明人通过建立一个新颖的基于均相时间分辨荧光共振能量转移原理(HTRF)的筛选模型，在重组人源AMPK三亚基蛋白α2β1γ1分子模型上对惠州绞股蓝标准提取物和陕西绞股蓝标准提取物进行了筛选，发现这两个提取物可以剂量依赖性地激活AMPKα2β1γ1。随后对西洋参、惠州绞股蓝和陕西绞股蓝中的主要成分进行分离，并以其中的活性达玛烷型三萜为先导化合物进行结构修饰，发现了一系列达玛烷型三萜类衍生物可以很好激活AMPKα2β1γ1磷酸化，可用于AMPK直接激动剂的制备。
因此，本发明的目的是提供了通式I表示的化合物或其药学上可接受的盐在制备AMPK激活剂中的用途。
其中：
R1为OH、或表示连接到通式I中的位点；
R2为H或者OH；
R3为C1-C6直链或支链烷基、C1-C6直链或支链烷基羰基或者-CHO；优选C1-C4直链或支链烷基、C1-C4直链或支链烷基羰基或-CHO；更优选为C1-C2烷基、C1-C2烷基羰基或-CHO；最优选为甲基或者-CHO；
R4为H或者OH；
R5为H或者OH；
R6为或其中，表示连接到通式I中的位点；
R7为C1-C6直链或支链烷基、-(CH2)n-OH或n为1、2、3、4、5或6；优选地，R7为C1-C4直链或支链烷基、-(CH2)n-OH或n为1、2、3或4；更优选地，R7为C1-C2烷基、-(CH2)n-OH或n为1或2；最优选地，R7为甲基、羟甲基或
R8为羟基、或
R9为或者
其中，R10和R11各自独立地为H、C1-C6直链或支链的烷基、C3-C6环烷基、羟基C1-C6亚烷基、C1-C6直链或支链烷基氧基取代的苯基或-A-B；
A为C1-C4亚烷基、C1-C4直链或直链烷基取代的C1-C4亚烷基或羰基，B为取代或未取代的C6-C14芳基或含有1-2个杂原子的饱和或不饱和的5-9元杂环基；
所述取代的苯基的取代基为C1-C6直链或支链烷基氧基、-F、-Cl、-Br、-I或硝基，所述杂原子为O、N或S；
优选地，R10和R11各自独立地为H、C1-C4直链或支链的烷基、C3-C4环烷基、羟基C1-C4亚烷基、C1-C4直链或支链烷基氧基取代的C6-C10芳基或-A-B；
A为C1-C3亚烷基、C1-C3直链或直链烷基取代的C1-C3亚烷基或羰基，B为取代或未取代的苯基或含有1-2个杂原子的饱和或不饱和的5元、6元或9元杂环基；
所述取代的苯基的取代基为C1-C4直链或支链烷基氧基、-F、-Cl、-Br、-I或硝基，所述杂原子为O或N；
更优选地，R10和R11各自独立地为H、C1-C4直链或支链的烷基、环丙基、羟基C1-C3亚烷基、C1-C3直链或支链烷基氧基取代的苯基、C1-C3直链或支链烷基氧基取代的萘基、C1-C3直链或支链烷基氧基取代的联苯基或-A-B；
A为C1-C2亚烷基、C1-C2烷基取代的C1-C2亚烷基或羰基，B为取代或未取代的苯基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、噁唑基、咪唑基或吡唑基和吡啶基；
所述取代的苯基的取代基为C1-C2烷基氧基、-F、-Cl、-Br、-I或硝基。
最优选地，所述通式I的化合物为下列化合物中的一种：
其中，表示连接到通式I中的位点。
本发明中的术语“药学上可接受的盐”是指所述通式I的化合物与磷酸、硫酸、盐酸等无机酸，或醋酸、酒石酸、柠檬酸、苹果酸等有机酸，或天冬氨酸、谷氨酸等酸性氨基酸形成的盐，或与上述酸成酯或酰胺后再与无机碱形成的盐，如钠盐、钾盐、钙盐、铝盐和铵盐。
本发明的另一目的为提供所述通式I的化合物或其药学上可接受的盐以及包含通式I的化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物或植物提取物在用于制备预防或治疗与AMPK相关的疾病的药物中的用途。其中，所述药物组合物包含任选地药学上可接受的载体；所述植物提取物例如为惠州绞股蓝提取物和陕西绞股蓝提取物。
所述疾病选自糖尿病、糖尿病慢性并发症、高脂血症、肥胖、高胰岛素血症、胰岛素抵抗、心肌肥大、心律失常、X综合症、动脉粥样硬化、心力衰竭、缺血性心脏病、上呼吸道感染、慢性阻塞性肺病、慢性支气管炎、肺纤维化、哮喘、高血压、肝炎、肝硬化、脂肪肝、肝纤维化、酒精肝、前列腺炎、胰腺炎、肾炎、慢性肾功能不全、肾病综合症、风湿性关节炎、类风湿性关节炎、骨性关节炎、炎症性肠病、肿瘤、放化疗不敏感、放化疗毒性反应中的一种或多种。（吴巍，滕厚雷。芒果苷钙盐作为AMPK激动剂的用途。CN101919839A；符庆瑛，高钮琪。蛋白激酶AMPK的研究进展。生命科学，17，147-152（2005）；薛洁，郭茂娟，姜希娟，马东明。AMPK与动脉粥样硬化关系的研究进展。天津中医药大学学报。31,126-128（2012）；葛斌，谢梅林，顾振纶，周文轩，郭次仪。AMPK作为治疗2型糖尿病新靶点的研究进展。中国药理学报。24,580-583（2008））。
所述糖尿病并发症为糖尿病性心脏病、II型糖尿病并发脑梗塞、II型糖尿病并发酒精性脂肪肝、糖尿病肾病、糖尿病视网膜病变、糖尿病性周围神经病变等。
附图说明
图1为惠州绞股蓝提取物中主要成分（HPLC-ELSD(蒸发光散射)图）；
图2为陕西绞股蓝提取物中主要成分（HPLC-ELSD(蒸发光散射)图）。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步阐述，但不限制本发明的范围。本发明的实验操作具有通用性，不限于发明中提到的化合物。
下述制备例中，1H-NMR用Varian Mercury AMX300型仪测定。MS用VGZAB-HS或VG-7070型以及Esquire3000plus-01005测定。所有溶剂在使用前均经过重新蒸馏。除说明外，所有反应均是在氮气保护下进行并用TLC跟踪，后处理时均经饱和食盐水洗和无水硫酸钠干燥过程。产品的纯化除说明外均使用硅胶(200-300目)的柱色谱法，所使用的硅胶包括200-300目，GF254为青岛海洋化工厂或烟台缘博硅胶公司生产。
制备实施实例
惠州绞股蓝提取物和陕西绞股蓝提取物
惠州绞股蓝提取物和陕西绞股蓝提取物购买于惠州市东方植物保健科技有限公司，两者提取中主要成分为达玛烷型三萜皂甙。通过HPLC-ELSD对这两种提取物进行成分分析，其成分图如图1和图2所示。
实施例1化合物1的制备
在2L三口反应瓶中，加入西洋参总皂甙（购于抚松县大自然生物工程有限公司）100g和正丁醇1300ml，搅拌10分钟后，分批加入40g金属钠，搅拌至无氢气放出，然后加入过氧化苯甲酰10g，通入氧气，加热至120℃反应24小时。TLC检测反应完全后，将反应液冷却到室温，减压除去正丁醇后，用水溶解，然后依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，减压蒸馏乙酸乙酯部分，得到含有化合物1的浸膏，经过硅胶柱层析（石油醚：乙酸乙酯=2:1（体积比)洗脱），得到化合物1(7g，7%)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ5.19(t,J=7.3Hz,1H),3.63(td,J=10.4,5.1Hz,1H),3.22(dd,J=11.2,5.0Hz,1H),1.72(s,3H),1.66(s,3H),1.22(s,3H),1.01(s,3H),1.00(s,3H),0.91(s,3H),0.90(s,3H),0.80(s,3H),0.74(d,J=10.6Hz,1H);ESI-MS461.3[M+H]+。
实施例2化合物2的制备
在50ml三口反应瓶中，将化合物1（200mg，0.435mmol）溶于15ml CH2Cl2中，-78℃条件下搅拌10min后，通入O3反应2min。然后升温至-3℃，加入甲胺（0.1ml）、NaBH(OAc)3（368.8mg,1.7mmol）和CH3OH（8ml），搅拌过夜，反应完全后，加入15ml水，用CH2Cl2（30ml）萃取2次，无水硫酸钠干燥、减压浓缩CH2Cl2，经硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，40:1:0.5(体积比)），得到化合物2，产率为85%。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.12(m,1H),3.52(td,J=13.0,6.2Hz,1H),3.21(dd,J=10.9,5.0Hz,1H),2.94(m,1H),2.62(m,1H),2.47(s,3H),1.13(s,3H),0.99(s,3H),0.98(s,3H),0.88(s,6H),0.78(s,3H),0.73(d,J=11.0Hz,1H);ESI-MS450.7[M+H]+。
实施例3化合物3的制备
除了用乙胺代替甲胺之外，与实施例2相同的方式制备化合物3；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，45:1:0.5(体积比)），产率为86%。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.55(td,J=12.9,6.3Hz,1H),3.19(dd,J=10.9,4.9Hz,1H),2.93(m,1H),2.72(m,1H),2.58(m,1H),2.48(m,1H),2.09(m,1H),1.15(s,3H),1.11(t,J=7.2Hz,3H),0.99(s,3H),0.98(s,3H),0.89(s,3H),0.88(s,3H),0.78(s,3H),0.73(d,J=10.7Hz,1H);ESI-MS464.7[M+H]+。
实施例4化合物4的制备
除了用丙胺代替甲胺之外，与实施例2相同的方式制备化合物4；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，50:1:0.5(体积比)），产率为87%。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.55(td,J=12.7,6.2Hz,1H),3.20(dd,J=10.8,5.2Hz,1H),2.94(m,1H),2.67(m,1H),2.52(m,2H),2.11(m,1H),1.14(s,3H),0.99(s,3H),0.97(s,3H),0.93(t,J=7.3Hz,3H),0.89(s,3H),0.88(s,3H),0.78(s,3H),0.73(d,J=10.9Hz,1H);ESI-MS478.7[M+H]+。
实施例5化合物5的制备
除了用丁胺代替甲胺之外，与实施例2相同的方式制备化合物5；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，50:1:0.5(体积比)），产率为88%。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.54(td,J=12.6,6.1Hz,1H),3.20(dd,J=10.7,5.3Hz,1H),2.95(m,1H),2.66(m,4H),1.14(s,3H),0.97(s,3H),0.95(s,3H),0.90(t,J=7.3Hz,3H),0.87(s,3H),0.86(s,3H),0.76(s,3H),0.73(d,J=10.5Hz,1H);ESI-MS492.6[M+H]+。
实施例6化合物6的制备
除了用异丙胺代替甲胺之外，与实施例2相同的方式制备化合物6；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺,50:1:0.5(体积比)），产率为88%。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.57(td,J=12.5,6.0Hz,1H),3.19(dd,J=10.8,5.2Hz,1H),2.95(d,J=12.6Hz,1H),2.85(m,1H),2.50(m,1H),2.10(m,1H),1.14(s,3H),1.13(d,J=7.2Hz,6H),0.97(s,3H),0.95(s,3H),0.87(s,3H),0.86(s,3H),0.76(s,3H),0.73(d,J=10.9Hz,1H);ESI-MS478.6[M+H]+。
实施例7化合物7的制备
除了用叔丁胺代替甲胺之外，与实施例2相同的方式制备化合物7；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，50:1:0.5(体积比)），产率为88%。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ5.30(s,1H),3.57(td,J=12.3,6.1Hz,1H),3.19(dd,J=10.7,5.3Hz,1H),2.93(d,J=10.8Hz,1H),2.44(t,J=11.5Hz,1H),2.09(m,1H),1.13(s,12H),0.97(s,6H),0.88(s,6H),0.77(s,3H),0.72(d,J=10.8Hz,1H);ESI-MS492.7[M+H]+。
实施例8化合物8的制备
除了用正丙醇胺代替甲胺之外，与实施例2相同的方式制备化合物8；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，40:1:0.5(体积比)），产率为80%。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.74(t,J=5.7Hz,2H),3.54(td,J=12.6,5.8Hz,1H),3.20(dd,J=10.8,5.4Hz,1H),2.89(m,2H),2.77(m,1H),2.60(m,1H),1.15(s,3H),0.98(s,3H),0.97(s,3H),0.88(s,3H),0.86(s,3H),0.78(s,3H),0.72(d,J=10.7Hz,1H);ESI-MS494.4[M+H]+。
实施例9化合物9的制备
除了用对甲氧基苯胺代替甲胺之外，与实施例2相同的方式制备化合物9；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，50:1:0.5(体积比)），产率为90%。1H NMR(CD3OD,300MHz)δ6.76(d,J=9.0Hz,2H),6.68(d,J=9.0Hz,2H),3.71(s,3H),3.54(td,J=12.8,6.3Hz,1H),3.14(dd,J=11.0,5.2Hz,1H),3.05(t,J=6.4Hz,2H),2.04(m,1H),1.14(s,3H),0.99(s,3H),0.96(s,3H),0.91(s,6H),0.78(s,3H),0.75(d,J=10.6Hz,1H);ESI-MS542.6[M+H]+。
实施例10化合物10的制备
除了用苄胺代替甲胺之外，与实施例2相同的方式制备化合物10；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，50:1:0.5(体积比)），产率为90%。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.32(m,5H),3.74(s,2H),3.57(td,J=12.9,6.0Hz,1H),3.20(dd,J=10.8,5.2Hz,1H),2.97(d,J=12.3Hz,1H),2.78(dd,J=12.3,7.2Hz,1H),2.52(t,J=11.0Hz,1H),2.12(m,1H),1.15(s,3H),0.99(s,3H),0.97(s,3H),0.90(s,3H),0.89(s,3H),0.78(s,3H),0.73(d,J=10.7Hz,1H);ESI-MS526.8[M+H]+。
实施例11化合物11的制备
除了用(S)-1-苯乙胺代替甲胺之外，与实施例2相同的方式制备化合物11；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，50:1:0.5(体积比)），产率为86%。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.29(m,5H),3.82(q,J=6.7Hz,1H),3.56(td,J=12.8,5.9Hz,1H),3.19(dd,J=10.8,5.3Hz,1H),2.69(m,1H),2.40(m,1H),2.11(m,1H),1.40(d,J=6.7Hz,3H),1.18(s,3H),0.97(s,3H),0.96(s,3H),0.89(s,3H),0.87(s,3H),0.77(s,3H),0.77(d,J=10.8Hz,1H);ESI-MS540.9[M+H]+。
实施例12化合物12的制备
除了用对甲氧基苄胺代替甲胺之外，与实施例2相同的方式制备化合物12；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，50:1:0.5(体积比)），产率为91%。1H NMR(CDCl3,300MHz)δ7.21(dd,J=8.6,4.2Hz,2H),6.87(dd,J=8.6,4.2Hz,2H),3.80(s,3H),3.79(s,2H),3.69(s,1H),3.57(td,J=12.8,6.1Hz,1H),3.20(dd,J=10.8,5.3Hz,1H),2.96(d,J=12.0Hz,1H),2.52(t,J=11.0Hz,1H),2.11(m,1H),1.14(s,3H),0.99(s,3H),0.98(s,3H),0.90(s,3H),0.89(s,3H),0.78(s,3H),0.73(d,J=10.9Hz,1H);ESI-MS556.6[M+H]+。
实施例13化合物13的制备
除了用对氯苄胺代替甲胺之外，与实施例2相同的方式制备化合物13；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，50:1:0.5(体积比)），产率为87%。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.29(d,J=6.1Hz,2H),7.20(d,J=6.1Hz,2H),3.84(s,1H),3.71(s,2H),3.56(td,J=12.9,5.9Hz,1H),3.19(dd,J=10.9,5.3Hz,1H),2.94(m,1H),2.52(t,J=10.1Hz,1H),2.10(m,1H),1.13(s,3H),0.98(s,3H),0.97(s,3H),0.89(s,3H),0.87(s,3H),0.77(s,3H),0.74(d,J=10.7Hz,1H);ESI-MS560.7[M+H]+。
实施例14化合物14的制备
除了用对氟苄胺代替甲胺之外，与实施例2相同的方式制备化合物14；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，50:1:0.5(体积比)），产率为88%。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.32(dd,J=8.6,5.4Hz,2H),7.03(dd,J=8.6,5.4Hz,2H),5.30(s,1H),3.84(s,2H),3.53(td,J=12.9,6.0Hz,1H),3.20(dd,J=11.0,5.2Hz,1H),2.98(m,1H),2.65(m,1H),2.09(m,1H),1.12(s,3H),0.98(s,6H),0.88(s,6H),0.78(s,3H),0.73(d,J=10.8Hz,1H);ESI-MS544.6[M+H]+。
实施例15化合物15的制备
除了用3,4-二甲氧基苄胺代替甲胺之外，与实施例2相同的方式制备化合物15；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，50:1:0.5(体积比)），产率为92%。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ6.93(s,1H),6.86(d,J=8.4Hz,1H),6.84(d,J=8.4Hz,1H),5.30(s,1H),3.89(s,3H),3.87(s,3H),3.82(s,2H),3.53(td,J=12.8,6.0Hz,1H),3.20(dd,J=10.8,5.3Hz,1H),2.96(m,1H),2.69(m,1H),2.08(m,1H),1.12(s,3H),0.98(s,6H),0.88(s,6H),0.78(s,3H),0.71(d,J=10.8Hz,1H);ESI-MS586.6[M+H]+。
实施例16化合物16的制备
除了用苯乙胺代替甲胺之外，与实施例2相同的方式制备化合物16；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，50:1:0.5(体积比)），产率为90%。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.23(m,5H),3.56(td,J=13.1,6.1Hz,1H),3.20(dd,J=10.9,4.9Hz,1H),2.83(m,5H),2.54(m,1H),2.07(m,1H),1.13(s,3H),0.98(s,3H),0.97(s,3H),0.89(s,3H),0.88(s,3H),0.77(s,3H),0.71(d,J=10.9Hz,1H);ESI-MS540.8[M+H]+。
实施例17化合物17的制备
除了用对氯苯乙胺代替甲胺之外，与实施例2相同的方式制备化合物17；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，50:1:0.5(体积比)），产率为84%。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.29(d,J=6.2Hz,2H),7.17(d,J=6.2Hz,2H),3.58(td,J=12.7,5.9Hz,1H),3.19(dd,J=10.8,5.2Hz,1H),2.73(m,4H),2.38(m,1H),2.11(m,1H),1.16(s,3H),0.98(s,3H),0.97(s,3H),0.88(s,3H),0.87(s,3H),0.77(s,3H),0.72(d,J=10.9Hz,1H);ESI-MS574.7[M+H]+。
实施例18化合物18的制备
除了用对硝基苯乙胺代替甲胺之外，与实施例2相同的方式制备化合物18；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，50:1:0.5(体积比)），产率为83%。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.16(d,J=8.8Hz,2H),7.40(d,J=8.8Hz,2H),3.47(m,2H),3.18(m,2H),3.08(m,4H),2.80(m,1H),1.10(s,3H),1.00(s,3H),0.97(s,3H),0.88(s,6H),0.77(s,3H),0.72(d,J=11.0Hz,1H);ESI-MS585.9[M+H]+。
实施例19化合物19的制备
除了用3,4-二甲氧基苯乙胺代替甲胺之外，与实施例2相同的方式制备化合物19；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，50:1:0.5(体积比)），产率为93%。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ6.80(d,J=8.2Hz,1H),6.73(d,J=8.2Hz,1H),6.71(s,1H),5.30(s,1H),3.86(s,3H),3.85(s,3H),3.56(td,J=12.8,6.0Hz,1H),3.20(dd,J=10.9,5.3Hz,1H),2.80(m,5H),2.52(t,J=9Hz,1H),1.13(s,3H),0.98(s,3H),0.97(s,3H),0.90(s,3H),0.89(s,3H),0.77(s,3H),0.73(d,J=11.0Hz,1H);ESI-MS600.7[M+H]+。
实施例20化合物20的制备
除了用胡椒乙胺代替甲胺之外，与实施例2相同的方式制备化合物20；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，50:1:0.5(体积比)），产率为92%。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ6.72(d,J=7.8Hz,1H),6.65(d,J=1.6Hz,1H),6.61(dd,J=7.8,1.6Hz,1H),5.91(s,2H),3.56(td,J=12.8,5.8Hz,1H),3.19(dd,J=10.9,5.3Hz,1H),2.78(m,6H),2.47(m,1H),2.09(m,1H),1.13(s,3H),0.98(s,3H),0.97(s,3H),0.89(s,3H),0.87(s,3H),0.77(s,3H),0.73(d,J=10.7Hz,1H);ESI-MS584.9[M+H]+。
实施例21化合物21的制备
除了用苯丙胺代替甲胺之外，与实施例2相同的方式制备化合物21；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，50:1:0.5(体积比)），产率为90%。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.22(m,5H),3.53(td,J=13.1,6.5Hz,1H),3.19(dd,J=10.8,5.3Hz,1H),2.90(m,1H),2.66(m,6H),2.07(m,1H),1.10(s,3H),0.98(s,3H),0.97(s,3H),0.88(s,3H),0.87(s,3H),0.72(s,3H),0.72(d,J=10.7Hz,1H);ESI-MS554.4[M+H]+。
实施例22化合物22的制备
除了用2-氨甲基吡啶代替甲胺之外，与实施例2相同的方式制备化合物22；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，50:1:0.5(体积比)），产率为82%。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.53(d,J=4.9Hz,1H),7.64(t,J=4.9Hz,1H),7.20(d,J=4.9Hz,1H),7.16(t,J=4.9Hz,1H),3.85(s,1H),3.83(s,1H),3.55(d,J=12.8,5.9Hz,1H),3.19(dd,J=11.0,5.1Hz,1H),2.92(m,1H),2.47(m,1H),2.06(m,1H),1.15(s,3H),0.98(s,3H),0.97(s,3H),0.88(s,6H),0.77(s,3H),0.73(d,J=10.9Hz,1H);ESI-MS527.8[M+H]+。
实施例23化合物23的制备
除了用3-氨甲基吡啶代替甲胺之外，与实施例2相同的方式制备化合物23；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，50:1:0.5(体积比)），产率为81%。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ8.52(s,1H),8.43(d,J=4.7Hz,1H),7.85(d,J=7.4Hz,1H),7.41(dd,J=7.4,4.7Hz,1H),3.79(s,2H),3.53(d,J=13.1,5.7Hz,1H),3.14(dd,J=10.8,5.2Hz,1H),2.63(m,2H),2.02(m,1H),1.14(s,3H),1.00(s,3H),0.96(s,3H),0.91(s,6H),0.77(s,3H),0.74(d,J=10.7Hz,1H);ESI-MS527.8[M+H]+。
实施例24化合物24的制备
除了用4-氨甲基吡啶代替甲胺之外，与实施例2相同的方式制备化合物24；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，50:1:0.5(体积比)），产率为81%。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.56(dd,J=4.4,1.6Hz,2H),7.23(dd,J=4.4,1.6Hz,2H),3.77(s,2H),3.58(td,J=12.9,5.8Hz,1H),3.21(dd,J=11.0,5.3Hz,1H),2.96(m,1H),2.56(m,1H),2.13(m,1H),1.17(s,3H),0.99(s,3H),0.98(s,3H),0.89(s,3H),0.87(s,3H),0.78(s,3H),0.78(d,J=10.8Hz,1H);ESI-MS527.8[M+H]+。
实施例25化合物25的制备
除了用环丙胺代替甲胺之外，与实施例2相同的方式制备化合物25；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，50:1:0.5(体积比)），产率为80%。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.54(td,J=12.6,6.2Hz,1H),3.20(dd,J=10.7,5.3Hz,1H),3.05(m,1H),2.95(dd,J=11.0,7.2Hz,1H),2.56(t,J=11.0Hz,1H),2.11(m,1H),2.07(m,1H),1.11(s,3H),0.97(s,3H),0.96(s,3H),0.87(s,6H),0.76(s,3H),0.72(d,J=10.9Hz,1H);ESI-MS476.6[M+H]+。
实施例26化合物26的制备
除了用1-(3-氨基丙基)咪唑代替甲胺之外，与实施例2相同的方式制备化合物26；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，50:1:0.5(体积比)），产率为90%。1H NMR(CDCl3,300MHz)δ7.49(s,1H),7.05(s,1H),6.92(s,1H),4.00(m,2H),3.55(td,J=12.7,6.0Hz,1H),3.19(dd,J=11.0,5.2Hz,1H),2.88(m,1H),2.68(m,1H),2.52(m,2H),1.13(s,3H),0.98(s,3H),0.97(s,3H),0.89(s,6H),0.78(s,3H),0.72(d,J=10.9Hz,1H);ESI-MS544.7[M+H]+。
实施例27化合物27的制备
除了用N-氨乙基哌嗪代替甲胺之外，与实施例2相同的方式制备化合物27；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，50:1:0.5(体积比)），产率为80%。1H NMR(CDCl3,300MHz)δ5.31(d,J=1.4Hz,1H),3.57(td,J=13.0,5.6Hz,1H),3.20(dd,J=10.9,5.3Hz,1H),2.80(t,J=6.0Hz,2H),2.47(m,12H),1.14(s,3H),0.98(s,6H),0.89(s,6H),0.78(s,3H),0.73(d,J=10.9Hz,1H);ESI-MS548.3[M+H]+。
实施例28化合物28的制备
除了用4-氨基吗啉代替甲胺之外，与实施例2相同的方式制备化合物28；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，50:2:0.5(体积比)），产率为80%。1H NMR(CDCl3,300MHz)δ7.08(s,1H),5.30(s,1H),3.80(t,J=4.4Hz,4H),3.69(m,1H),3.57(td,J=13.1,5.7Hz,1H),3.19(dd,J=10.9,5.3Hz,1H),2.94(d,J=5.1Hz,4H),2.71(m,1H),2.48(m,2H),1.16(s,3H),0.97(s,6H),0.88(s,6H),0.77(s,3H);ESI-MS519.5[M+H]+。
实施例29化合物29的制备
反应式2
在50ml圆底烧瓶中加入化合物1（700mg，1.52mmol）和20ml CH2Cl2，搅拌溶解后，在-78℃条件下通入O3反应4min，反应完全后加入NH2OH.HCl（213mg，3.04mmol）和CH3ONa（300mg,5.5mmol），并在室温下搅拌3h。反应完全后加入20ml水，再用60ml CH2Cl2萃取3次，无水硫酸钠干燥、减压浓缩CH2Cl2，得到化合物1-1(500mg)。1H NMR(CDCl3,300MHz)δ7.35(t,J=6.8Hz,1H),3.43(td,J=12.5,7.1Hz,1H),3.15(dd,J=10.3,5.8Hz,1H),1.14(s,3H),1.05(s,3H),0.92(s,3H),0.90(s,3H),0.88(s,3H),0.74(s,3H),0.72(d,J=10.9Hz,1H);ESI-MS450.3[M+H]+。
把化合物1-1500mg用10ml甲醇溶解在50ml圆底烧瓶中，加入NaBH3CN（1.450g，0.023mol），NH4OAc（1.345g，0.017mol），在氮气保护下，慢慢滴加TiCl3溶液（2.4ml），反应6h，反应结束后用5N NaOH溶液中和至pH=7，过滤，滤渣用甲醇淋洗，滤液经减压浓缩后，用大量乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯层经无水硫酸钠干燥、和减压浓缩后，经硅胶柱层析，得到白色固体化合物29（120mg，30%）。1H NMR(CDCl3,300MHz)δ3.46(td,J=13.0,7.0Hz,1H),3.12(dd,J=10.7,5.5Hz,1H),2.91(t,J=7.0Hz,2H),1.13(s,3H),1.00(s,3H),0.94(s,3H),0.90(s,3H),0.89(s,3H),0.75(s,3H),0.72(d,J=10.9Hz,1H);ESI-MS436.5[M+H]+。
实施例30化合物30的制备
将化合物29（70mg，0.16mmol）溶于4ml甲醇溶液中，加入0.4ml甲醛溶液、NaBH(OAc)3(67.84mg，0.32mmol)搅拌过夜，反应完全后，加入15ml水，然后用30ml CH2Cl2萃取2次，收集有机相，无水硫酸钠干燥、减压浓缩CH2Cl2，经硅胶柱层析，得到化合物30，产率为90%。1H NMR(CDCl3,300MHz)δ3.53(td,J=13.0,6.0Hz,1H),3.19(dd,J=11.0,5.2Hz,1H),2.71(m,2H),2.50(s,6H),1.11(s,3H),1.01(s,3H),0.97(s,3H),0.88(s,3H),0.77(s,3H),0.71(s,3H),0.70(d,J=10.9Hz,1H);ESI-MS464.6[M+H]+。
实施例31化合物31的制备
除了使用苯甲醛代替甲醛之外，与实施例30相同的方式制备化合物31；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，70:1:0.5(体积比)），产率为95%。1H NMR(CDCl3,300MHz)δ7.39(m,10H),4.06(d,J=7.1Hz,2H),3.89(d,J=7.1Hz,2H),3.55(td,J=12.7,6.1Hz,1H),3.19(dd,J=10.6,5.1Hz,1H),1.16(s,3H),1.00(s,3H),0.98(s,3H),0.89(s,6H),0.79(s,3H),0.71(d,J=10.8Hz,1H);ESI-MS616.5[M+H]+。
实施例32化合物32的制备
除了使用3-甲氧基苯甲醛代替甲醛之外，与实施例30相同的方式制备化合物32；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，80:1:0.5(体积比)），产率为94%。1H NMR(CDCl3,300MHz)δ7.36(t,J=8.0Hz,2H),7.26(s,2H),6.96(d,J=8.0Hz,4H),5.30(s,1H),4.12(d,J=7.1Hz,2H),3.93(dd,J=7.1Hz,2H),3.84(s,6H),3.51(d,J=12.9Hz,1H),3.20(dd,J=10.8,5.3Hz,1H),1.18(s,3H),1.06(s,3H),0.89(s,3H),0.88(s,6H),0.78(s,3H),0.72(d,J=10.9Hz,1H);ESI-MS676.6[M+H]+。
实施例33化合物33的制备
除了使用对氟苯甲醛代替甲醛之外，与实施例30相同的方式制备化合物33；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，75:1:0.5(体积比)），产率为93%。1H NMR(CDCl3,300MHz)δ7.26(t,J=6.8Hz,4H),7.05(t,J=6.8Hz,4H),5.30(s,1H),4.77(s,1H),3.66(d,J=7.2Hz,2H),3.60(d,J=7.2Hz,2H),3.51(m,2H),3.20(dd,J=10.9,5.1Hz,1H),2.09(m,1H),1.15(s,3H),0.98(s,6H),0.89(s,6H),0.78(s,3H),0.71(d,J=10.9Hz,1H);ESI-MS652.3[M+H]+。
实施例34化合物34的制备
将化合物29（60mg，0.138mmol）加到25ml圆底烧瓶中，在氮气保护下加入3ml CH2Cl2和0.1ml三乙胺，最后加入0.2ml丙酰氯，搅拌5min，反应完全后加水淬灭。用10ml CH2Cl2萃取2次，收集有机相，无水硫酸钠干燥、减压浓缩CH2Cl2，经硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇，70:1(体积比)），得到产物34，产率为90%。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ5.96(br s,1H),3.60(td,J=13.2,6.5Hz,1H),3.37(dd,J=10.9,5.0Hz,1H),3.20(m,2H),2.21(q,J=7.6Hz,2H),2.05(m,1H),1.15(s,3H),1.14(t,J=7.6Hz,3H),0.98(s,6H),0.88(s,6H),0.78(s,3H),0.72(d,J=10.6Hz,1H);ESI-MS492.3[M+H]+。
实施例35化合物35的制备
除了使用环丙酰氯代替丙酰氯之外，与实施例34相同的方式制备化合物35；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇，80:1(体积比)），产率为88%。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ6.18(s,1H),5.30(s,1H),3.58(td,J=12.8,6.1Hz,1H),3.39(dd,J=10.9,5.0Hz,1H),3.19(m,2H),2.05(m,1H),1.15(s,3H),0.98(s,6H),0.88(s,6H),0.78(s,3H),0.71(m,4H);ESI-MS504.3[M+H]+。
实施例36化合物36的制备
除了使用苯甲酰氯代替丙酰氯之外，与实施例34相同的方式制备化合物36；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇，90:1(体积比)），产率为87%。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.80(m,2H),7.43(m,3H),6.92(s,1H),5.30(s,1H),3.60(m,2H),3.36(td,J=12.8,6.0Hz,1H),3.20(dd,J=11.0,5.1Hz,1H),2.09(m,1H),1.17(s,3H),0.98(s,3H),0.95(s,3H),0.88(s,3H),0.86(s,3H),0.78(s,3H),0.72(d,J=10.8Hz,1H);ESI-MS540.6[M+H]+。
实施例37化合物37的制备
除了使用甲氧基苯甲酰氯代替丙酰氯之外，与实施例34相同的方式制备化合物37；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇，100:1(体积比)），产率为89%。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.77(d,J=8.7Hz,2H),6.91(d,J=8.7Hz,2H),6.78(br s,1H),5.30(s,1H),3.84(s,3H),3.62(m,2H),3.33(td,J=12.6,5.9Hz,1H),3.20(dd,J=10.6,5.3Hz,1H),2.09(m,1H),1.17(s,3H),0.98(s,3H),0.95(s,3H),0.88(s,3H),0.87(s,3H),0.78(s,3H),0.71(d,J=10.9Hz,1H);ESI-MS570.7[M+H]+。
实施例38化合物38的制备
除了使用氯甲酸苄酯代替丙酰氯之外，与实施例34相同的方式制备化合物38；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇，90:1(体积比)），产率为79%。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.35(m,5H),5.12(s,2H),3.60(td,J=13.1,6.2Hz,1H),3.22(m,3H),2.06(m,1H),1.15(s,3H),0.99(s,6H),0.89(s,6H),0.79(s,3H),0.73(d,J=10.8Hz,1H);ESI-MS570.4[M+H]+。
实施例39和40化合物39和40的制备
将化合物1（200mg，0.420mmol）用二氯甲烷（10ml）溶于50ml圆底烧瓶中，加入mCPBA（1.5eq），室温搅拌2小时，TLC检测反应完全后，加入15ml水，二氯甲烷萃取2次，减压浓缩二氯甲烷，经硅胶柱层析得到白色固体39和40.
化合物39：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.74(s,1H),3.87(dd,J=10.8,5.4Hz,1H,H-24),3.52(td,J=10.3,4.7Hz,1H,H-12),3.19(dt,J=10.6,5.1Hz,1H,H-3),2.25(td,J=10.4,4.4Hz,1H,H-17),1.27(s,3H),1.23(s,3H),1.10(s,3H),1.00(s,3H),0.97(s,3H),0.91(s,3H),0.88(s,3H),0.77(s,3H),0.73(dd,J=10.9,2.6Hz,1H);ESI-MS477.4[M+H]+.
化合物40：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.84(dd,J=8.9,6.6Hz,1H,H-24),3.50(td,J=10.5,4.5Hz,1H,H-12),3.18(dd,J=11.3,4.9Hz,1H,H-3),2.18(td,J=10.3,9.7,3.6Hz,1H,H-17),1.27(s,3H),1.26(s,3H),1.09(s,3H),0.97(s,3H),0.94(s,3H),0.89(s,3H),0.84(s,3H),0.76(s,3H),0.72(dd,J=11.2,2.7Hz,1H);ESI-MS477.4[M+H]+.
实施例41和42化合物41和42的制备
惠州绞股蓝总皂甙(购于抚松县大自然生物工程有限公司)（含量90%）10g，二氯甲烷-甲醇（15:1-1:1）经硅胶柱层析梯度洗脱得到3个组分Fr.1-3。Fr.2(2.3g)经硅胶柱层析和凝胶sephadex LH-20得到化合物41（562mg），Fr.3（3.1g）经硅胶柱层析得到化合物42（758mg）。
化合物41：13C NMR(400MHz,pyridine-d5)δ15.6,17.1,17.2,17.4,17.5,18.2,22.0,23.0,25.6,26.3,28.0,30.5,30.8,34.8,35.9,37.6,39.8,40.7,47.6,49.2,50.0,51.2,51.4,56.0,62.1,62.6,66.5,62.7,69.9,71.0,71.3,71.6,74.8,76.4,77.9,78.0,78.1,78.2,78.3,79.1,82.0,83.0,95.3,98.0,104.2,105.3,125.7,130.7;ESI-MS985.6[M+Na]+。
化合物42：13C NMR(400MHz,pyridine-d5)δ15.8,17.2,17.4,17.7,18.2,18.9,21.9,22.9,25.6,26.4,28.0,30.4,30.7,34.8,35.9,37.6,39.8,40.7,47.6,49.2,50.0,51.1,51.4,55.9,62.1,62.6,66.5,66.7,69.7,69.8,70.8,71.0,71.1,71.6,74.5,76.4,76.6,77.7,77.8,78.0,78.1,78.2,78.3,79.1,81.8,82.3,95.3,97.8,104.2,105.2,105.5,125.7,130.8;ESI-MS1117.7[M+Na]+。
实施例43化合物43的制备
除了用惠州绞股蓝总皂甙代替西洋参总皂甙之外，与实施例1相同的方式制备化合物43；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇，25:1(体积比)），产率为10%。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ5.18(t,J=7.1Hz,1H),3.68(m,2H),3.02(d,J=9.4Hz,1H),1.72(s,3H),1.66(s,3H),1.21(s,3H),1.05(s,3H),1.01(s,3H),0.98(s,3H),0.92(s,3H),0.85(s,3H);ESI-MS477.4[M+H]+.
实施例44化合物44的制备
在50ml三口反应瓶中，将化合物43（200mg，0.420mmol）溶于15ml CH2Cl2中，-78℃条件下搅拌10min后，通入O3反应2min。然后升温至-3℃，加入甲胺（0.1ml）、NaBH(OAc)3（368.8mg,1.7mmol）和CH3OH（8ml），搅拌过夜，反应完全后，加入15ml水，用CH2Cl2（30ml）萃取2次，无水硫酸钠干燥、减压浓缩CH2Cl2，经硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，20:1:0.5），得到产物44，产率为70%。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ3.61(m,1H),2.80(m,2H),2.57(m,1H),2.04(m,1H),1.889(m,3H),1.15(s,3H),1.01(s,3H),1.00(s,3H),0.97(s,3H),0.93(s,3H),0.80(s,3H);ESI-MS466.7[M+H]+。
实施例45化合物45的制备
除了用乙胺代替甲胺之外，与实施例44相同的方式制备化合物45；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，20:1:0.5(体积比)），产率为69%。1H NMR(400MHz,MeOD)δ3.63(m,1H),2.93(d,J=9.6Hz,1H),2.84(m,2H),2.06(m,2H),1.91(m,2H),1.77(s,3H),1.04(m,3H),1.03(s,3H),1.00(s,3H),0.95(s,3H),0.83(s,3H);ESI-MS480.3[M+H]+。
实施例46化合物46的制备
除了用乙胺代替甲胺之外，与实施例44相同的方式制备化合物46；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，20:1:0.5(体积比)），产率为71%。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ3.61(m,1H),3.18(m,2H),2.94(m,3H),2.05(m,1H),1.29(t,J=7.2Hz,3H),1.01(s,6H),1.00(s,3H),0.97(s,3H),0.93(s,3H),0.80(s,3H);ESI-MS493.6[M+H]+。
实施例47化合物47的制备
除了用异丙胺代替甲胺之外，与实施例44相同的方式制备化合物47；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺,20:1:0.5(体积比)），产率为68%。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.32(s,1H),3.69(m,1H),3.59(td,J=10.3,5.1Hz,1H),2.99(d,J=9.6Hz,1H),2.95(m,1H),2.82(m,1H),2.47(td,J=11.5,2.5Hz,1H),2.11(m,2H),1.16(s,3H),1.12(d,J=6.3Hz,3H),1.10(d,J=6.3Hz,3H),1.03(s,3H),0.99(s,3H),0.97(s,3H),0.91(s,3H),0.83(s,3H);ESI-MS494.5[M+H]+。
实施例48化合物48的制备
除了用叔丁胺代替甲胺之外，与实施例44相同的方式制备化合物48；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，20:1:0.5(体积比)），产率为70%。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ3.58(m,3H),2.90(d,J=9.6Hz,1H),2.04(m,2H),1.35(s,9H),1.14(s,3H),1.01(m,3H),1.00(m,3H),0.97(s,3H),0.92(s,3H),0.80(s,3H);ESI-MS508.4[M+H]+。
实施例49化合物49的制备
除了用苄胺代替甲胺之外，与实施例44相同的方式制备化合物49；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，25:1:0.5(体积比)），产率为68%。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.31(m,5H),3.72(m,4H),2.96(t,J=9.9Hz,2H),2.55(t,J=11.1Hz,1H),2.11(s,2H),1.14(s,3H),1.04(s,3H),0.98(s,3H),0.95(s,3H),0.90(s,3H),0.81(s,3H);ESI-MS542.6[M+H]+。
实施例50化合物50的制备
除了用对甲氧基苄胺代替甲胺之外，与实施例44相同的方式制备化合物50；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，25:1:0.5(体积比)），产率为67%。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.23(d,J=6.3Hz,2H),6.89(d,J=6.3Hz,2H),3.842(s,3H),3.70(m,2H),3.61(td,J=10.3,5.2Hz,1H),2.98(m,2H),2.53(t,J=11.3Hz,1H),2.14(dt,J=12.8,4.6Hz,2H),1.16(s,3H),1.03(s,3H),1.00(s,3H),0.97(s,3H),0.92(s,3H),0.83(s,3H);ESI-MS572.4[M+H]+。
实施例51化合物51的制备
除了用对氟苄胺代替甲胺之外，与实施例44相同的方式制备化合物51；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，25:1:0.5(体积比)），产率为70%。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.26(m,2H),7.08(m,2H),3.71(m,3H),3.61(td,J=10.4,5.0Hz,1H),2.98(m,2H),2.68(m,1H),2.54(m,1H),2.13(m,2H),1.89(m,2H),1.16(s,3H),1.02(s,3H),1.00(s,3H),0.97(s,3H),0.92(m,3H),0.83(s,3H);ESI-MS560.4[M+H]+。
实施例52化合物52的制备
除了用苯乙胺代替甲胺之外，与实施例44相同的方式制备化合物52；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，25:1:0.5(体积比)），产率为71%。1H NMR(400MHz,MeOD)δ7.29(m,5H),3.62(m,1H),2.90(m,3H),2.74(m,2H),2.06(m,2H),1.91(m,2H),1.16(s,3H),1.03(s,6H),1.00(s,3H),0.95(s,3H),0.83(s,3H);ESI-MS556.3[M+H]+.
实施例53化合物53的制备
反应式6
如反应式6，将化合物43（200mg，0.420mmol）用二氯甲烷（10ml）溶于50ml圆底烧瓶中，加入Pd/C（32mg），在H2环境下室温搅拌过夜，TLC检测反应完全后，过滤、减压浓缩二氯甲烷，经硅胶柱层析（CH2Cl2/MeOH,60:1(体积比)）得到白色固体化合物53，产率为85%。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.66(m,2H),2.99(d,J=9.4Hz,1H),1.15(s,3H),1.02(s,3H),0.98(s,3H),0.94(s,3H),0.89(d,J=3.6Hz,6H),0.86(s,3H),0.81(s,3H);ESI-MS479.4[M+H]+。
实施例54和55化合物54和55的制备
将化合物43（200mg，0.420mmol）用二氯甲烷（10ml）溶于50ml圆底烧瓶中，加入mCPBA（1.5eq），室温搅拌2小时，TLC检测反应完全后，加入15ml水，二氯甲烷萃取2次，减压浓缩二氯甲烷，经硅胶柱层析（CH2Cl2/MeOH,30:1(体积比)）得到白色固体化合物54和化合物55，产率分别为43%和40%。
化合物54：1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.88(m,1H),3.61(m,1H),3.52(m,1H),2.98(d,J=9.6Hz,1H),2.70(s,1H),1.26(s,3H),1.21(s,3H),1.10(s,3H),1.01(s,3H),0.99(s,3H),0.95(s,3H),0.91(s,3H),0.81(s,3H);13C NMR(75MHz,CDCl3)δ87.8,87.3,83.6,70.7,70.6,69.1,56.2,52.4,50.4,49.1,48.9,47.6,40.0,39.4,38.8,34.9,32.4,31.9,31.8,29.8,29.1,28.7,27.9,25.5,24.1,18.4,18.0,17.8,16.7,15.7;ESI-MS493.4[M+H]+。
化合物55：1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.83(t,J=8.4Hz,1H),3.71(m,1H),3.68(m,1H),3.50(s,1H),2.96(d,J=4.2Hz,1H),1.28(s,3H),1.26(s,3H),1.09(s,3H),1.01(s,3H),0.97(s,3H),0.92(s,3H),0.90(s,3H),0.81(s,3H);13C NMR(75MHz,CDCl3)δ86.6,85.3,83.4,71.1,70.5,68.8,56.2,52.2,50.5,49.3,48.0,47.6,39.9,39.4,38.6,34.9,32.6,31.6,31.2,28.7,28.1,27.5,26.1,25.1,18.4,18.3,17.7,16.7,15.6;ESI-MS493.4[M+H]+。
实施例56化合物56的制备
在50ml三口反应瓶中，将化合物43（200mg，0.420mmol）溶于二氯甲烷（15ml）中，-78℃条件下搅拌10min后，通入臭氧反应3-5min。然后升温至0℃，搅拌1h，TLC检测反应完全后，加入15ml水，用CH2Cl2（30ml）萃取2次，无水硫酸钠干燥、减压浓缩二氯甲烷，经硅胶柱层析（CH2Cl2/MeOH,20:1(体积比)）得到化合物56，产率为75%。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ5.54(d,J=6.3Hz,1H),5.43(s,1H),5.29(s,1H),5.02(s,1H),3.66(m,1H),3.47(m,1H),3.45(s,3H),2.98(dd,J=9.6,3.0Hz,1H),1.01(s,6H),0.96(s,3H),0.93(s,3H),0.90(s,3H),0.82(s,3H);ESI-MS465.3[M+H]+。
实施例57化合物57的制备
将惠州绞股蓝总皂甙（含量90%）30g加入600mL10%的盐酸水溶液，在70℃下搅拌回流6小时。将反应液冷却至室温，用乙酸乙酯萃取3次，有机层用无水硫酸钠干燥，在过滤减压蒸馏的粗产物6.7g。粗产物(6.7g)经硅胶柱层析分离，用二氯甲烷-甲醇（160:1-40:1）梯度洗脱，得到三个组分Fr.1-3。Fr.2（1.6g）用二氯甲烷-甲醇90:1洗脱，得到一个组分，重结晶得到化合物57（102mg）。1H NMR(400MHz,pyridine-d5)δ6.35(1H,s),3.70(1H,m),3.55(1H,td,J=10.4,5.2Hz),3.01(1H,dd,J=9.6,3.6Hz),1.28(3H,s),1.24(3H,s),1.20(3H,s),1.03(3H,s),0.99(3H,s),0.97(3H,s),0.90(3H,s),0.84(3H,s);13C NMR(400MHz,CDCl3)δ88.4,73.3,69.9,68.9,59.9,54.6,51.3,49.8,49.0,47.3,39.8,39.1,38.5,36.4,35.7,34.7,33.0,31.2,30.6,28.6,27.1,25.2,19.4,18.2,17.4,17.1,16.6,16.3,15.7;ESI-MS477.6[M+H]+。
实施例58-61化合物58-的制备
陕西绞股蓝总皂苷(购于抚松县大自然生物工程有限公司)（含量40%）40g，二氯甲烷-甲醇（15:1-1:1）经硅胶柱层析梯度洗脱得到3个组分Fr.1-3。Fr.2（2.7g）经多次反相C-18柱（甲醇-水）得到化合物58（72mg）、59（35mg）和60（43mg）；Fr.3（2.2g）经多次反相C-18柱（甲醇-水）得到化合物61（53mg）。
化合物58：13C NMR(100MHz,pyridine-d5)δ17.0,17.8,17.9,18.7,19.1,19.7,19.9,23.1,24.6,26.0,27.1,28.2,28.3,29.1,32.8,36.9,37.8,38.2,39.9,41.0,42.0,43.0,47.4,51.7,52.3,57.9,64.1,68.5,71.0,71.1,71.9,73.0,73.7,73.8,73.9,75.1,76.1,76.7,77.6,77.7,78.2,79.3,79.5,79.8,79.9,89.5,90.2,103.0,106.2,106.3,107.5,127.3,132.1;ESI-MS1085.6[M+Na]+。
化合物59：13C NMR(100MHz,pyridine-d5)δ15.6,16.5,16.6,16.8,17.7,18.4,18.5,21.6,23.3,24.6,25.8,26.7,26.8,27.6,31.4,36.0,36.5,36.8,39.5,39.7,40.6,41.7,46.1,50.3,50.9,56.5,62.4,62.7,62.8,69.7,69.8,71.4,71.5,72.3,72.4,73.7,75.0,75.4,76.1,76.1,76.8,77.6,78.0,78.1,78.2,78.3,88.6,89.3,101.1,103.9,104.8,106.0,126.0,130.7;ESI-MS1093.2[M+H]+。
化合物60：13C NMR(100MHz,pyridine-d5)δ17.3,17.7,18.4,18.9,19.0,19.8,23.5,24.6,25.9,27.1,27.7,28.9,29.0,33.2,34.8,35.9,37.9,41.3,41.7,42.8,47.2,51.6,54.0,54.1,56.1,64.0,66.4,68.3,69.7,71.3,72.2,73.0,73.7,73.8,75.1,75.7,75.8,76.7,77.5,77.6,79.0,79.8,79.9,83.0,88.4,103.3,106.0,106.5,107.4,127.2,132.2,206.8;ESI-MS1069.7[M+Na]+。
化合物61：13C NMR(100MHz,pyridine-d5)δ15.8,15.9,16.4,17.0,17.5,17.6,18.3,22.2,23.0,24.5,25.6,26.2,27.3,27.7,31.9,33.4,34.4,36.4,40.2,41.4,45.9,50.1,52.6,52.7,54.6,64.9,66.4,66.8,68.2,69.8,70.7,72.2,72.3,73.7,74.2,74.4,76.3,77.5,81.5,86.9,101.8,104.6,105.0,125.6,130.6,205.4;ESI-MS907.5[M+Na]+。
实施例62和63化合物62和63的制备
除了用陕西绞股蓝总皂甙代替西洋参总皂甙之外，与实施例2相同的方式制备化合物62和63；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇，25:1(体积比)），产率分别为1%和0.5%。
化合物62：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.14(t,J=6.4Hz,1H),3.53(d,J=3.2Hz,2H),3.22(dd,J=11.2,5.0Hz,1H),1.70(s,3H),1.65(s,3H),0.99(s,3H),0.98(s,3H),0.90(s,3H),0.87(s,3H),0.79(s,3H),0.75(dd,J=11.4,2.0Hz,1H);13C NMR(100MHz,CDCl3)δ132.2,124.7,79.2,77.2,67.2,56.1,50.8,50.3,45.9,41.6,40.6,39.2,39.1,37.3,35.4,35.0,31.4,28.2,27.6,27.5,25.9,24.4,22.7,21.7,18.5,17.9,16.5,16.4,15.7,15.6;ESI-MS483.2[M+Na]+。
化合物63：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.15(s,1H),5.10(t,J=6.1Hz,1H),3.56(d,J=3.2Hz,2H),3.12(dd,J=11.4,5.0Hz,1H),1.69(s,3H),1.63(s,3H),0.98(s,3H),0.97(s,3H),0.91(s,3H),0.79(s,3H),0.72(dd,J=11.4,2.0Hz,1H);13C NMR(100MHz,CDCl3)δ206.1,132.3,124.6,78.2,77.0,67.2,54.4,53.1,50.3,45.7,41.3,40.3,39.5,34.9,34.3,33.4,32.4,31.7,28.3,27.4,26.5,26.2,25.4,24.7,22.7,21.9,17.9,17.7,17.4,16.7,14.6;ESI-MS497.4[M+Na]+。
实施例64化合物64的制备
除了用化合物62代替化合物1之外，与实施例4相同的方式制备化合物64；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，30:1:0.5(体积比)），产率为70%。1H NMR(400MHz,MeOD)δ3.43(s,1H),3.30(s,1H),3.09(dd,J=11.3,4.9Hz,1H),2.88(m,2H),1.85(s,1H),0.97(t,J=6.3Hz,3H),0.96(s,3H),0.91(s,3H),0.86(s,3H),0.84(s,3H),0.72(s,3H);ESI-MS478.6[M+H]+。
实施例65化合物65的制备
除了用化合物62代替化合物1之外，与实施例7相同的方式制备化合物65；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇/三乙胺，30:1:0.5(体积比)），产率为71%。1H NMR(400MHz,CDCl3):δ3.41(s,2H),3.19(dd,J=11.2,4.9Hz,1H),2.65(m,1H),2.51(m,1H),1.86(m,2H),1.11(s,9H),0.96(s,3H),0.95(s,3H),0.86(s,3H),0.83(s,3H),0.76(s,3H),0.72(m,1H);ESI-MS492.7[M+H]+。
实施例66-69化合物66-69的制备
陕西绞股蓝总皂苷（含量40%）40g，二氯甲烷-甲醇（15:1-1:1）经硅胶柱层析梯度洗脱得到3个组分Fr.1-3。Fr.1（841mg）经反相C-18柱（甲醇-水）得到化合物66（36mg）、67（53mg）、68（46mg）和69（62mg）。
化合物66：13C NMR(100MHz,pyridine-d5)δ15.4,16.1,16.4,16.7,17.9,18.2,18.4,21.4,25.3,25.6,26.7,27.1,27.7,31.5,35.5,36.7,39.5,39.6,40.4,40.5,43.0,45.5,50.4,50.9,56.4,62.4,67.0,69.6,69.7,70.3,72.2,72.3,73.7,74.0,74.5,76.6,77.8,78.0,78.8,88.0,88.7,101.5,104.7,104.8,125.3,138.2,179.3;ESI-MS935.6[M+Na]+。
化合物67：13C NMR(100MHz,pyridine-d5)δ15.4,16.1,16.4,16.7,18.0,18.2,18.4,21.5,25.4,26.0,26.7,27.6,27.8,31.5,35.5,36.8,38.8,39.5,39.6,40.4,44.7,45.1,50.0,50.9,56.4,62.4,67.0,69.6,69.7,70.4,72.2,72.3,73.7,74.6,75.0,76.7,77.8,78.0,80.9,88.0,88.7,101.6,104.7,104.8,123.7,139.2,178.1;ESI-MS935.6[M+Na]+。
化合物68：13C NMR(100MHz,pyridine-d5)δ15.4,16.1,16.2,16.5,17.7,18.1,18.3,20.5,21.5,25.3,25.4,26.5,27.1,27.4,31.4,35.3,36.9,39.4,39.5,40.2,40.4,43.0,45.6,50.3,50.9,56.4,63.6,66.7,69.5,69.6,70.1,71.7,72.2,73.4,74.0,74.1,74.4,76.3,77.8,79.8,87.4,89.0,101.4,104.5,104.6,125.0,138.2,170.4,179.0;ESI-MS957.2[M+H]+。
化合物69：13C NMR(100MHz,pyridine-d5)δ15.4,16.0,16.4,16.6,18.0,18.2,18.4,20.6,21.6,25.4,26.0,26.6,27.6,27.8,31.5,35.5,36.9,38.8,39.5,39.6,40.5,44.7,45.1,50.0,50.9,56.5,63.8,67.0,69.6,69.7,70.3,72.1,72.2,73.6,74.1,74.5,75.0,76.4,78.0,80.9,87.5,89.2,101.5,104.7,104.8,123.7,139.3,170.5,178.1;ESI-MS979.7[M+Na]+。
实施例70和71化合物70和71的制备
除了用陕西绞股蓝总皂甙代替西洋参总皂甙之外，与实施例1相同的方式制备化合物70和71；硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇，30:1(体积比)），产率分别为2%和3%。
化合物70：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.30(d,J=8.8Hz,1H),5.15(q,J=8Hz,1H),3.22(q,J=5.2Hz,1H),1.80(s,3H),1.78(s,3H),1.00(s,3H),0.99(s,3H),0.92(s,3H),0.87(s,3H),0.80(s,3H);13C NMR(100MHz,CDCl3)δ179.0,140.0,123.2,78.9,78.3,74.2,55.9,50.7,50.5,45.5,42.3,40.5,40.5,39.0,39.0,37.1,35.2,31.4,28.0,27.3,26.4,25.8,25.1,21.3,18.4,18.2,16.4,16.3,15.4,15.4;ESI-MS473.6[M+H]+。
化合物71：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.33-5.41(m,1H),5.22(d,J=8.8Hz,1H),3.23(q,J=5.2Hz,1H),1.82(s,3H),1.79(s,3H),1.00(s,3H),0.98(s,3H),0.93(s,3H),0.87(s,3H),0.80(s,3H);13C NMR(100MHz,CDCl3)δ177.7,140.4,122.5,81.2,78.9,75.3,55.8,50.7,49.9,45.3,44.4,40.4,39.1,38.9,37.8,35.3,31.4,28.0,27.3,27.3,25.8,25.6,21.4,18.5,18.2,16.2,16.1,15.4,15.4;ESI-MS(M/Z):473.5([M+H]+)。
实施例72化合物72的制备
与实施例1相同，经过硅胶柱层析（石油醚：乙酸乙酯=1:2（体积比)洗脱），得到化合物72(1g，1%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.14(t,J=7.1Hz,1H),3.99(td,J=9.7,5.5Hz,1H),3.58(td,J=10.4,5.0Hz,1H),2.72(ddd,J=15.3,12.0,6.5Hz,1H),2.32–2.22(m,1H),1.68(s,3H),1.62(s,3H),1.33(s,3H),1.31(s,3H),1.20(s,3H),1.03(s,3H),0.92(s,3H),0.78(s,3H);ESI-MS(M/Z):477.4([M+H]+)。
实施例73和74化合物73和74的制备
将化合物72（200mg，0.420mmol）用二氯甲烷（10ml）溶于50ml圆底烧瓶中，加入mCPBA（1.5eq），室温搅拌2小时，TLC检测反应完全后，加入15ml水，二氯甲烷萃取2次，减压浓缩二氯甲烷，经硅胶柱层析得到白色固体73和74.
化合物73：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.77(s,1H),4.17–4.05(m,1H,H-6),3.86(dd,J=10.8,5.2Hz,1H,H-24),3.51(td,J=10.3,4.8Hz,1H,H-6),3.17(brd,J=10.6Hz,1H,H-3),2.24(td,J=10.5,4.5Hz,1H,H-17),1.30(s,3H),1.26(s,3H),1.22(s,3H),1.09(s,3H),1.08(s,3H),0.97(s,3H),0.92(s,6H);ESI-MS(M/Z):493.4([M+H]+)。
化合物74：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.10(td,J=10.6,3.8Hz,1H,H-6),3.84(dd,J=8.7,6.6Hz,1H,H-24),3.50(td,J=10.5,4.5Hz,1H,H-12),3.16(dd,J=11.5,4.8Hz,1H,H-3),2.18(ddd,J=10.9,9.2,3.7Hz,1H,H-17),1.30(s,3H),1.263(s,3H),1.257(s,3H),1.08(s,3H),1.05(s,3H),0.96(s,3H),0.92(s,3H),0.88(s,3H);ESI-MS(M/Z):493.4([M+H]+)。
实施例75化合物10·HCl的制备
将化合物10(1mmol)溶于30mL1%的稀盐酸中，室温搅拌2h，反应结束后，经过滤得到的粗产品，出产品用乙醇重结晶，得到白色固体化合物10·HCl，产率80%。
所有其它化合物的盐酸盐，均可以用实施例75的方法将相应的化合物与稀盐酸反应进行制备。
本发明所提及的化合物的有机酸盐或无机酸盐均可用与实施例75类似的方法将所述化合物与相应的有机酸或无机酸反应进行制备。
试验实施例
试验实施例AMPKα2β1γ1分子模型上的活性实验
1、材料
利用大肠杆菌表达系统表达、纯化得到人源性AMPKα2β1γ1蛋白。（请描述得到人源性AMPKα2β1γ1蛋白的方法）
购买自Cisbio公司的HTRF KinEASE-STK S1kit用于在分子水平上检测小分子化合物对AMPK(α2β1γ1)的激活。
2、过程
HTRF KinEASE-STK S1kit试剂盒，其原理为：底物肽段上含有可被AMPK磷酸化的位点，在反应体系（含2mM MgCl2、400μM DTT、160nM底物肽、4μM ATP和1.6nM AMPK）中，经过45分钟的磷酸化反应之后，生成的磷酸化底物（即产物）便与识别该位点磷酸化的抗体（已标有Donor）结合，另一端上的生物素与streptavidin-XL665（受体）相连，使用PE公司的Evision来检测产生的FRET信号。最终AMPK活性表示为665nm波长读值和615nm波长读值的比值（665nm/615nm）。
3、样品处理
用DMSO溶解要测试的样品，低温保存。通常情况下，在最终体系中的DMSO浓度要控制在能够使化合物溶解不析出同时又不影响激酶活性的范围之内，经浓度优化定为2%。
4、数据处理
选择单浓度条件（例如20μg/ml）对样品的活性进行初步测试。对于在初步活性测试中表现出一定活性的化合物，比如激活倍数（Fold）大于2，需要进一步通过多浓度激活测定来测试其活性与剂量的依赖关系，即EC50值。通过将AMPK活性与化合物浓度进行非线性拟和得到EC50值，所用的计算软件为Graphpad Prism4，所使用的拟合模型是sigmoidal dose-response(varible slope)，大多数激动剂筛选模型的拟合曲线底部设为100。一般情况下，每个化合物在活性测试时都需要设置复孔（n≥2），测试所得结果均以标准偏差（StandardDeviation,SD）或者标准误差（Standard Error,SE）来表示。一般情况下，每次测试均有已报道的化合物作为参照。
5、实验结果
实验结果如表1所示，阳性对照化合物A-769662和AMP能够剂量依赖的激活AMPKα2β1γ1磷酸化，其中A-769662的激活倍数为6.7，EC50值为21.7nM，AMP的激活倍数为5.1，EC50值为320nM。惠州绞股蓝标准提取物和陕西绞股蓝标准提取物可以剂量依赖性地激活AMPKα2β1γ1的磷酸化，EC50值分别为1.32±0.25μg/ml和1.62±0.62μg/ml。大部分受试化合物显示出较好的激活AMPKα2β1γ1磷酸化的活性，其中活性最好的化合物为6、7、10、11、15、20、24和49。
表1达玛烷型三萜衍生物的AMPK直接激动活性评价（AMPKα2β1γ1）
Claims (12)
1.一种由通式I表示的化合物或其药学上可接受的盐在制备AMPK激活剂中的用途：
其中，
R1为OH、或表示连接到通式I中的位点；
R2为H或者OH；
R3为C1-C6直链或支链烷基、C1-C6直链或支链烷基羰基或者-CHO；
R4为H或者OH；
R5为H或者OH；
R6为或其中，表示连接到通式I中的位点；
R7为C1-C6直链或支链烷基、-(CH2)n-OH或n为1、2、3、4、5或6；
R8为羟基、或
R9为或者
其中，R10和R11各自独立地为H、C1-C6直链或支链的烷基、C3-C6环烷基、羟基C1-C6亚烷基、C1-C6直链或支链烷基氧基取代的苯基或-A-B；
A为C1-C4亚烷基、C1-C4直链或直链烷基取代的C1-C4亚烷基或羰基，B为取代或未取代的C6-C14芳基或含有1-2个杂原子的饱和或不饱和的5-9元杂环基；
所述取代的苯基的取代基为C1-C6直链或支链烷基氧基、-F、-Cl、-Br、-I或硝基，所述杂原子为O、N或S。
2.根据权利要求1所述的用途，其中，
R3为C1-C4直链或支链烷基、C1-C4直链或支链烷基羰基或-CHO；优选为C1-C2烷基、C1-C2烷基羰基或-CHO；更优选为甲基或者-CHO。
3.根据权利要求1所述的用途，其中，
R7为C1-C4直链或支链烷基、-(CH2)n-OH或n为1、2、3或4；优选地，R7为C1-C2烷基、-(CH2)n-OH或n为1或2；更优选地，R7为甲基、羟甲基或
4.根据权利要求1所述的用途，其中，
R10和R11各自独立地为H、C1-C4直链或支链的烷基、C3-C4环烷基、羟基C1-C4亚烷基、C1-C4直链或支链烷基氧基取代的C6-C10芳基或-A-B；
A为C1-C3亚烷基、C1-C3直链或直链烷基取代的C1-C3亚烷基或羰基，B为取代或未取代的苯基或含有1-2个杂原子的饱和或不饱和的5元、6元或9元杂环基；
所述取代的苯基的取代基为C1-C4直链或支链烷基氧基、-F、-Cl、-Br、-I或硝基，所述杂原子为O或N；
优选地，R10和R11各自独立地为H、C1-C4直链或支链的烷基、环丙基、羟基C1-C3亚烷基、C1-C3直链或支链烷基氧基取代的苯基、C1-C3直链或支链烷基氧基取代的萘基、C1-C3直链或支链烷基氧基取代的联苯基或-A-B；
A为C1-C2亚烷基、C1-C2烷基取代的C1-C2亚烷基或羰基，B为取代或未取代的苯基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、噁唑基、咪唑基或吡唑基和吡啶基；
所述取代的苯基的取代基为C1-C2烷基氧基、-F、-Cl、-Br、-I或硝基。
5.根据权利要求1所述的用途，其中，所述化合物为下列化合物中的一种：
其中，表示连接到通式I中的位点。
6.根据权利要求1所述的用途，其中，所述药学上可接受的盐为所述由通式I表示的化合物与无机酸、有机酸或酸性氨基酸形成的盐，或者为所述由通式I表示的化合物与所述无机酸、有机酸或酸性氨基酸形成相应的酯或酰胺后再与无机碱形成的盐；
优选地，所述无机酸为磷酸、硫酸或盐酸，所述有机酸为醋酸、酒石酸、柠檬酸或苹果酸，所述酸性氨基酸为天冬氨酸或谷氨酸，所述与无机碱形成的盐为钠盐、钾盐、钙盐、铝盐或铵盐。
7.根据权利要求1中所述的由通式I表示的化合物或其药学上可接受的盐在制备预防或治疗与AMPK相关的疾病的药物中的用途。
8.包含治疗有效量的根据权利要求1所述的达玛烷型三萜衍生物或其药学上可接受的盐的药物组合物在制备预防或治疗与AMPK相关的疾病的药物中的用途。
9.包含治疗有效量的根据权利要求1所述的达玛烷型三萜衍生物或其药学上可接受的盐的植物提取物在制备预防或治疗与AMPK相关的疾病的药物中的用途。
10.根据权利要求8或9所述的用途，其中，所述药物组合物还包含任选的药学上可接受的载体；所述植物提取物为惠州绞股蓝标准提取物或陕西绞股蓝标准提取物。
11.根据权利要求7-9中任一项所述的用途，其中，所述疾病选自糖尿病、糖尿病慢性并发症、高脂血症、肥胖、高胰岛素血症、胰岛素抵抗、心肌肥大、心律失常、X综合症、动脉粥样硬化、心力衰竭、缺血性心脏病、上呼吸道感染、慢性阻塞性肺病、慢性支气管炎、肺纤维化、哮喘、高血压、肝炎、肝硬化、脂肪肝、肝纤维化、酒精肝、前列腺炎、胰腺炎、肾炎、慢性肾功能不全、肾病综合症、风湿性关节炎、类风湿性关节炎、骨性关节炎、炎症性肠病、肿瘤、放化疗不敏感、放化疗毒性反应中的一种或多种。
12.根据权利要求11所述的用途，其中，所述糖尿病并发症为糖尿病性心脏病、II型糖尿病并发脑梗塞、II型糖尿病并发酒精性脂肪肝、糖尿病肾病、糖尿病视网膜病变和/或糖尿病性周围神经病变。
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