CN104569435B - 一种无标记光电化学甲胎蛋白免疫传感器的制备方法 - Google Patents

一种无标记光电化学甲胎蛋白免疫传感器的制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN104569435B
CN104569435B CN201510036402.1A CN201510036402A CN104569435B CN 104569435 B CN104569435 B CN 104569435B CN 201510036402 A CN201510036402 A CN 201510036402A CN 104569435 B CN104569435 B CN 104569435B
Authority
CN
China
Prior art keywords
solution
fetoprotein
alpha
electrode
refrigerators
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN201510036402.1A
Other languages
English (en)
Other versions
CN104569435A (zh
Inventor
张勇
庞雪辉
魏琴
胡丽华
马洪敏
范大伟
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
University of Jinan
Original Assignee
University of Jinan
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by University of Jinan filed Critical University of Jinan
Priority to CN201510036402.1A priority Critical patent/CN104569435B/zh
Publication of CN104569435A publication Critical patent/CN104569435A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN104569435B publication Critical patent/CN104569435B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/689—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to pregnancy or the gonads
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
    • G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Pregnancy & Childbirth (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Electrochemistry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Powder Metallurgy (AREA)

Abstract

本发明公开了一种无标记光电化学甲胎蛋白免疫传感器的制备方法，属于新型纳米功能材料和生物传感器领域。本发明首先在二氧化钛纳米颗粒基底上，利用光电化学合成方法，制备枝晶纳米棒状的三金属合金纳米材料，进而制得了成本低、灵敏度高、特异性好、检测快速、制备简单的检测甲胎蛋白的无标记光电化学免疫传感器。

Description

一种无标记光电化学甲胎蛋白免疫传感器的制备方法
技术领域
本发明涉及一种无标记光电化学甲胎蛋白免疫传感器的制备方法。属于新型纳米功能材料与生物传感器技术领域。
背景技术
肿瘤标志物的检测可反映肿瘤的生物学特性，是对肿瘤患者的临床治疗及诊断的关键环节。甲胎蛋白是一种肿瘤标志物，被用来作为诊断原发性肝癌的一个特异性临床指标。目前，检测甲胎蛋白的方法主要有放射免疫法、质谱法等。此类方法仪器贵重、操作复杂，化验人员需要专业培训后才能进行检测。因此，研发灵敏度高、特异性强、检测速度快的甲胎蛋白传感器具有重要意义。
光电化学传感器由于灵敏度高、检测成本低等特点，近几年被越来越多的研究者所关注。光电化学传感器是基于外加光源激发光电敏感材料导致电子-空穴对进行分离，在合适的偏电位条件下，实现电子在电极、半导体及修饰物和分析物上的快速传递，并形成光电流。在最优条件下，分析物浓度的变化会直接影响光电流的大小，再利用生物免疫结合，就可以根据光电流的变化实现对分析物的定性定量分析。
光电化学传感器最关键技术就是对光电流的大小及稳定性等性能的提高。基于单一半导体纳米材料构建的光电化学传感器的灵敏度普遍不高，不利于实际应用。这是由于单一的半导体纳米材料的光生电子-空穴对易复合，从而导致光电信号的减弱，如二氧化钛、氧化锌、镉系硫族化合物等。但是，在半导体纳米材料上修饰或复合特殊的纳米材料，可以有效提高光生载流子对的有效浓度，提高光电转换效率，并大大提高检测灵敏度。因此，设计、制备高效、稳定的半导体及修饰物是制备光电化学传感器的关键技术。
发明内容
本发明的目的在于提供一种制备简单、灵敏度高、检测快速、特异性强的无标记光电化学甲胎蛋白免疫传感器的制备方法，所制备的传感器，可用于甲胎蛋白的快速、灵敏检测。基于此目的，本发明先后使用二氧化钛纳米粒子溶胶TiO2 NPs和金银纳米棒溶胶AuAg NRs对电极进行修饰，然后利用光电化学合成方法，直接快速地制备了金银钯合金纳米棒材料AuAg-Pd NDRs，通过戊二醛的交联作用固定甲胎蛋白抗体，在进行检测时，利用抗体与抗原的特异性定量结合，使得光电流强度相应降低，从而实现了采用无标记的光电化学方法检测甲胎蛋白的免疫传感器的构建。
本发明采用的技术方案如下：
1. 一种无标记光电化学甲胎蛋白免疫传感器的制备方法，其特征在于，制备步骤为：
（1）以ITO导电玻璃为工作电极，在电极表面滴涂8~12 uL 二氧化钛纳米粒子溶胶TiO2 NPs，室温下晾干后，滴涂8~12 uL 金银纳米棒溶胶AuAg NRs，并在室温下晾干；
（2）将步骤（1）中得到的电极表面滴涂8~12 uL 0.01 mol/L 的氯钯酸溶液H2PdCl4，接着使用高压汞灯照射30~90秒，制得TiO2 NPs负载的金银钯合金纳米棒材料AuAg-Pd NDRs修饰的工作电极，室温下晾干；
（3）将步骤（2）中得到的电极用超纯水清洗，室温下晾干后，在电极表面滴涂2~4 μL 戊二醛溶液GA，4 ℃ 冰箱中保存晾干；
（4）将步骤（3）中得到的电极用超纯水清洗，4 ℃ 冰箱中保存晾干后，在电极表面滴涂8~12 μL 10 μg/mL的甲胎蛋白抗体溶液，4 ℃ 冰箱中保存晾干；
（5）将步骤（4）中得到的电极用超纯水清洗，4 ℃ 冰箱中保存晾干后，继续在电极表面滴涂8~12 μL 100 μg/mL的牛血清白蛋白BSA溶液，4 ℃ 冰箱中保存晾干，超纯水清洗，4 ℃ 冰箱中晾干成膜，制得无标记光电化学甲胎蛋白免疫传感器；
所述的TiO2 NPs为1mg/mL 的二氧化钛纳米粒子水溶液；
所述的AuAg NRs为金银核壳纳米棒水溶液，所述金银核壳纳米棒是以棒状金纳米粒子为核、以银纳米粒子为壳层的核壳结构的棒状纳米粒子，所述棒状纳米粒子的长度为20~50nm；
所述的H2PdCl4为pH值为1~2的氯钯酸水溶液；
所述的AuAg-Pd NDRs 为金银钯核壳枝晶状的纳米棒，所述金银钯核壳枝晶状的纳米棒是以棒状金纳米粒子为核、以枝晶状银钯合金纳米粒子为壳层的核壳结构的纳米粒子，所述纳米棒的长度为20~50nm；
所述的GA为体积比为2.5%的戊二醛水溶液。
2. 本发明所述的一种无标记光电化学甲胎蛋白免疫传感器的制备方法，其特征在于，所述的AuAg NRs制备步骤为：
将20mL 金纳米棒溶胶Au NRs和20mL 0.05~0.2 mol/L的十六烷基三甲基溴化铵CTAB溶液混合，在30~45℃下搅拌，并顺序加入3~6 mL 0.1 mol/L的 L-抗坏血酸AA溶液、0.5~1 mL 0.05 mol/L的硝酸银AgNO3溶液和 3~6 mL 0.1 mol/L的氢氧化钠NaOH溶液，停止搅拌，静置1~3h，离心分离，将产品重新分散到20mL 水中，得到AuAg NRs；
所述的Au NRs是金纳米棒水溶液，所述金纳米棒是棒状的金纳米粒子，所述金纳米棒的长度为20~40nm。
3. 本发明所述的一种无标记光电化学甲胎蛋白免疫传感器的制备方法所制备的传感器，应用于甲胎蛋白的检测，步骤如下：
1）将已知浓度的甲胎蛋白抗原标准溶液加入到40~60 μL、pH=7.0~8.0的PBS缓冲溶液中，制得抗原混合溶液，取5~10 μL抗原混合溶液滴涂到所制备的无标记光电化学甲胎蛋白免疫传感器的工作电极上，在4 ℃ 冰箱中保存晾干，pH=7.0~8.0的PBS缓冲溶液清洗后，4 ℃ 冰箱中保存晾干；
2）以Ag/AgCl电极作为参比电极、铂丝电极作为对电极，与1）中组装的工作电极组成三电极系统，连接到光电化学检测设备上；在电解槽中先后加入10~25mL pH=7.0~8.0的PBS缓冲溶液和10mL 0.1~0.3 mol/L的AA溶液；采用i-t测试手段，根据所得的光电流值与甲胎蛋白抗原标准溶液浓度之间的关系，绘制工作曲线；
3）将待测样品溶液代替甲胎蛋白抗原的标准溶液，按照所述甲胎蛋白抗原的工作曲线的绘制方法进行检测。
本发明的有益成果
（1）本发明所述的甲胎蛋白免疫传感器制备简单，操作方便，实现了对样品的快速、灵敏、高选择性检测，具有市场发展前景；
（2）本发明首次采用光电化学方法制备了AuAg-Pd NDRs并将其应用于光电化学免疫传感器的制备中，通过TiO2 NPs与AuAg-Pd NDRs的共同作用，显著提高了光生载流子的有效浓度，大大提高了光电化学传感器的检测灵敏度，具有重要的科学意义和应用价值。
具体实施方式
实施例1  AuAg NRs的制备
将20mL 金纳米棒溶胶Au NRs和20mL 0.05 mol/L的十六烷基三甲基溴化铵CTAB溶液混合，在30℃下搅拌，并顺序加入3 mL 0.1 mol/L的 L-抗坏血酸AA溶液、0.5 mL 0.05 mol/L的硝酸银AgNO3溶液和 3 mL 0.1 mol/L的氢氧化钠NaOH溶液，停止搅拌，静置1h，离心分离，将产品重新分散到20mL水中，得到AuAg NRs；
所述的Au NRs是金纳米棒水溶液，所述金纳米棒是棒状的金纳米粒子，所述金纳米棒的长度为20nm。
实施例2  AuAg NRs的制备
将20mL Au NRs和20mL 0.1 mol/L的CTAB溶液混合，在40℃下搅拌，并顺序加入5 mL 0.1 mol/L的AA溶液、0.7 mL 0.05 mol/L的AgNO3溶液和 5 mL 0.1 mol/L的NaOH溶液，停止搅拌，静置2h，离心分离，将产品重新分散到20mL水中，得到AuAg NRs；
所述的Au NRs是金纳米棒水溶液，所述金纳米棒是棒状的金纳米粒子，所述金纳米棒的长度为30nm。
实施例3  AuAg NRs的制备
将20mL Au NRs和20mL 0.2 mol/L的CTAB溶液混合，在45℃下搅拌，并顺序加入6 mL 0.1 mol/L的 AA溶液、1 mL 0.05 mol/L的AgNO3溶液和 6 mL 0.1 mol/L的NaOH溶液，停止搅拌，静置3h，离心分离，将产品重新分散到20mL水中，得到AuAg NRs；
所述的Au NRs是金纳米棒水溶液，所述金纳米棒是棒状的金纳米粒子，所述金纳米棒的长度为40nm。
实施例4  无标记光电化学甲胎蛋白免疫传感器的制备方法
（1）将宽为1cm、长为4cm的ITO导电玻璃作为工作电极，在电极表面滴涂8 uL 1mg/mL的二氧化钛纳米粒子溶胶TiO2 NPs，室温下晾干后，滴涂8 uL 金银纳米棒溶胶AuAg NRs，并在室温下晾干；
（2）将步骤（1）中得到的电极表面滴涂8 uL 0.01 mol/L pH值为1的氯钯酸溶液H2PdCl4，接着使用高压汞灯照射30秒，制得TiO2 NPs负载的金银钯合金纳米棒材料AuAg-Pd NDRs修饰的工作电极，室温下晾干；
（3）将步骤（2）中得到的电极用超纯水清洗，室温下晾干后，在电极表面滴涂2 μL 2.5%的戊二醛溶液GA，4 ℃ 冰箱中保存晾干；
（4）将步骤（3）中得到的电极用超纯水清洗，4 ℃ 冰箱中保存晾干后，在电极表面滴涂8 μL 10 μg/mL的甲胎蛋白抗体溶液，4 ℃ 冰箱中保存晾干；
（5）将步骤（4）中得到的电极用超纯水清洗，4 ℃ 冰箱中保存晾干后，继续在电极表面滴涂8 μL 100 μg/mL的牛血清白蛋白BSA溶液，4 ℃ 冰箱中保存晾干，超纯水清洗，4 ℃ 冰箱中晾干成膜，制得无标记光电化学甲胎蛋白免疫传感器；
所述的AuAg NRs由实施例1得到；
所述的AuAg-Pd NDRs的长度为20nm。
实施例5  无标记光电化学甲胎蛋白免疫传感器的制备方法
（1）将宽为1cm、长为4cm的ITO导电玻璃作为工作电极，在电极表面滴涂10 uL 1mg/mL的TiO2 NPs，室温下晾干后，滴涂10 uL AuAg NRs，并在室温下晾干；
（2）将步骤（1）中得到的电极表面滴涂10 uL 0.01 mol/L pH值为1的H2PdCl4，接着使用高压汞灯照射60秒，制得TiO2 NPs负载的AuAg-Pd NDRs修饰的工作电极，室温下晾干；
（3）将步骤（2）中得到的电极用超纯水清洗，室温下晾干后，在电极表面滴涂3 μL 2.5%的GA，4 ℃ 冰箱中保存晾干；
（4）将步骤（3）中得到的电极用超纯水清洗，4 ℃ 冰箱中保存晾干后，在电极表面滴涂10μL 10 μg/mL的甲胎蛋白抗体溶液，4 ℃ 冰箱中保存晾干；
（5）将步骤（4）中得到的电极用超纯水清洗，4 ℃ 冰箱中保存晾干后，继续在电极表面滴涂10 μL 100 μg/mL的BSA溶液，4 ℃ 冰箱中保存晾干，超纯水清洗，4 ℃ 冰箱中晾干成膜，制得无标记光电化学甲胎蛋白免疫传感器；
所述的AuAg NRs由实施例2得到；
所述的AuAg-Pd NDRs的长度为40nm。
实施例6  无标记光电化学甲胎蛋白免疫传感器的制备方法
（1）将宽为1cm、长为4cm的ITO导电玻璃作为工作电极，在电极表面滴涂12 uL 1mg/mL的TiO2 NPs，室温下晾干后，滴涂12 uL AuAg NRs，并在室温下晾干；
（2）将步骤（1）中得到的电极表面滴涂12 uL 0.01 mol/L pH值为2的H2PdCl4，接着使用高压汞灯照射90秒，制得TiO2 NPs负载的AuAg-Pd NDRs修饰的工作电极，室温下晾干；
（3）将步骤（2）中得到的电极用超纯水清洗，室温下晾干后，在电极表面滴涂4 μL 2.5%的GA，4 ℃ 冰箱中保存晾干；
（4）将步骤（3）中得到的电极用超纯水清洗，4 ℃ 冰箱中保存晾干后，在电极表面滴涂12 μL 10 μg/mL的甲胎蛋白抗体溶液，4 ℃ 冰箱中保存晾干；
（5）将步骤（4）中得到的电极用超纯水清洗，4 ℃ 冰箱中保存晾干后，继续在电极表面滴涂12 μL 100 μg/mL的BSA溶液，4 ℃ 冰箱中保存晾干，超纯水清洗，4 ℃ 冰箱中晾干成膜，制得无标记光电化学甲胎蛋白免疫传感器；
所述的AuAg NRs由实施例3得到；
所述的AuAg-Pd NDRs的长度为50nm。
实施例7  实施例1~6制备的无标记光电化学甲胎蛋白免疫传感器，用于甲胎蛋白的检测，步骤如下：
（1）将已知浓度的甲胎蛋白抗原标准溶液加入到40 μL、pH=7.0的PBS缓冲溶液中，制得抗原混合溶液，取5 μL抗原混合溶液滴涂到所制备的无标记光电化学甲胎蛋白免疫传感器的工作电极上，在4 ℃ 冰箱中保存晾干，pH=7.0的PBS缓冲溶液清洗后，4 ℃ 冰箱中保存晾干；
（2）以Ag/AgCl电极作为参比电极、铂丝电极作为对电极，与1）中组装的工作电极组成三电极系统，连接到光电化学检测设备上；在电解槽中先后加入10mL pH=7.0的PBS缓冲溶液和10mL 0.1 mol/L的AA溶液；采用i-t测试手段，根据所得的光电流值与甲胎蛋白抗原标准溶液浓度之间的关系，绘制工作曲线；甲胎蛋白的线性检测范围为：0.004~39 ng/mL，检出限为：2.5 pg/mL；
（3）将待测样品溶液代替甲胎蛋白抗原的标准溶液，按照所述甲胎蛋白抗原的工作曲线的绘制方法进行检测。
实施例8  实施例1~6制备的无标记光电化学甲胎蛋白免疫传感器，用于甲胎蛋白的检测，步骤如下：
（1）将已知浓度的甲胎蛋白抗原标准溶液加入到50 μL、pH=7.4的PBS缓冲溶液中，制得抗原混合溶液，取8 μL抗原混合溶液滴涂到所制备的无标记光电化学甲胎蛋白免疫传感器的工作电极上，在4 ℃ 冰箱中保存晾干，pH=7.4的PBS缓冲溶液清洗后，4 ℃ 冰箱中保存晾干；
（2）以Ag/AgCl电极作为参比电极、铂丝电极作为对电极，与1）中组装的工作电极组成三电极系统，连接到光电化学检测设备上；在电解槽中先后加入20mL pH=7.4的PBS缓冲溶液和10mL 0.2mol/L的AA溶液；采用i-t测试手段，根据所得的光电流值与甲胎蛋白抗原标准溶液浓度之间的关系，绘制工作曲线；甲胎蛋白的线性检测范围为：0.004~39 ng/mL，检出限为：2.5 pg/mL；
（3）将待测样品溶液代替甲胎蛋白抗原的标准溶液，按照所述甲胎蛋白抗原的工作曲线的绘制方法进行检测。
实施例9  实施例1~6制备的无标记光电化学甲胎蛋白免疫传感器，用于甲胎蛋白的检测，步骤如下：
（1）将已知浓度的甲胎蛋白抗原标准溶液加入到60 μL、pH=8.0的PBS缓冲溶液中，制得抗原混合溶液，取10 μL抗原混合溶液滴涂到所制备的无标记光电化学甲胎蛋白免疫传感器的工作电极上，在4 ℃ 冰箱中保存晾干，pH=8.0的PBS缓冲溶液清洗后，4 ℃ 冰箱中保存晾干；
（2）以Ag/AgCl电极作为参比电极、铂丝电极作为对电极，与1）中组装的工作电极组成三电极系统，连接到光电化学检测设备上；在电解槽中先后加入25mL pH=8.0的PBS缓冲溶液和10mL 0.3 mol/L的AA溶液；采用i-t测试手段，根据所得的光电流值与甲胎蛋白抗原标准溶液浓度之间的关系，绘制工作曲线；甲胎蛋白的线性检测范围为：0.004~39 ng/mL，检出限为：2.5 pg/mL；
（3）将待测样品溶液代替甲胎蛋白抗原的标准溶液，按照所述甲胎蛋白抗原的工作曲线的绘制方法进行检测。
实施例10  人血清中甲胎蛋白的检测
准确移取人血清样品，加入一定质量浓度的甲胎蛋白抗原标准溶液，以未加入甲胎蛋白抗原的人血清为空白，进行加标回收实验，按照实施例7~9的步骤进行检测，测定样品中甲胎蛋白的回收率，检测结果见表1。
表1 人血清中甲胎蛋白的检测结果
表1检测结果可知，结果的相对标准偏差（RSD）小于3.0 %，回收率为99.6 ~ 105%，表明本发明可用于人血清中甲胎蛋白的检测，方法的灵敏度高、特异性强，结果准确可靠。

Claims (2)

1. 一种无标记光电化学甲胎蛋白免疫传感器的制备方法，其特征在于，制备步骤为：
（1）以ITO导电玻璃为工作电极，在电极表面滴涂8~12 μL 二氧化钛纳米粒子溶胶TiO2 NPs，室温下晾干后，滴涂8~12 μL 金银纳米棒溶胶AuAg NRs，并在室温下晾干；
（2）将步骤（1）中得到的电极表面滴涂8~12 μL 0.01 mol/L 的氯钯酸溶液H2PdCl4，接着使用高压汞灯照射30~90秒，制得TiO2 NPs负载的金银钯合金纳米棒材料AuAg-Pd NDRs修饰的工作电极，室温下晾干；
（3）将步骤（2）中得到的电极用超纯水清洗，室温下晾干后，在电极表面滴涂2~4 μL 戊二醛溶液GA，4 ℃ 冰箱中保存晾干；
（4）将步骤（3）中得到的电极用超纯水清洗，4 ℃ 冰箱中保存晾干后，在电极表面滴涂8~12 μL 10 μg/mL的甲胎蛋白抗体溶液，4 ℃ 冰箱中保存晾干；
（5）将步骤（4）中得到的电极用超纯水清洗，4 ℃ 冰箱中保存晾干后，继续在电极表面滴涂8~12 μL 100 μg/mL的牛血清白蛋白BSA溶液，4 ℃ 冰箱中保存晾干，超纯水清洗，4 ℃ 冰箱中晾干成膜，制得无标记光电化学甲胎蛋白免疫传感器；
所述的TiO2 NPs为1 mg/mL 的二氧化钛纳米粒子水溶液；
所述的AuAg NRs为金银核壳纳米棒水溶液，所述金银核壳纳米棒是以棒状金纳米粒子为核、以银纳米粒子为壳层的核壳结构的棒状纳米粒子，所述棒状纳米粒子的长度为20~50 nm；
所述的H2PdCl4为pH值为1~2的氯钯酸水溶液；
所述的AuAg-Pd NDRs 为金银钯核壳枝晶状的纳米棒，所述金银钯核壳枝晶状的纳米棒是以棒状金纳米粒子为核、以枝晶状银钯合金纳米粒子为壳层的核壳结构的纳米粒子，所述纳米棒的长度为20~50 nm；
所述的GA为体积比为2.5%的戊二醛水溶液。
2.如权利要求1所述的一种无标记光电化学甲胎蛋白免疫传感器的制备方法，其特征在于，所述的AuAg NRs制备步骤为：
将20mL 金纳米棒溶胶Au NRs和20 mL 0.05~0.2 mol/L的十六烷基三甲基溴化铵CTAB溶液混合，在30~45℃下搅拌，并顺序加入3~6 mL 0.1 mol/L的 L-抗坏血酸AA溶液、0.5~1 mL 0.05 mol/L的硝酸银AgNO3溶液和 3~6 mL 0.1 mol/L的氢氧化钠NaOH溶液，停止搅拌，静置1~3 h，离心分离，将产品重新分散到20 mL水中，得到AuAg NRs；
所述的Au NRs是金纳米棒水溶液，所述金纳米棒是棒状的金纳米粒子，所述金纳米棒的长度为20~40 nm。
CN201510036402.1A 2015-01-25 2015-01-25 一种无标记光电化学甲胎蛋白免疫传感器的制备方法 Expired - Fee Related CN104569435B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510036402.1A CN104569435B (zh) 2015-01-25 2015-01-25 一种无标记光电化学甲胎蛋白免疫传感器的制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510036402.1A CN104569435B (zh) 2015-01-25 2015-01-25 一种无标记光电化学甲胎蛋白免疫传感器的制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN104569435A CN104569435A (zh) 2015-04-29
CN104569435B true CN104569435B (zh) 2015-10-21

Family

ID=53085986

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201510036402.1A Expired - Fee Related CN104569435B (zh) 2015-01-25 2015-01-25 一种无标记光电化学甲胎蛋白免疫传感器的制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN104569435B (zh)

Families Citing this family (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104931478B (zh) * 2015-06-11 2017-07-07 江南大学 基于银纳米粒子三聚体的表面增强拉曼散射效应超灵敏检测甲胎蛋白的方法
CN105044099B (zh) * 2015-07-27 2016-04-20 济南大学 一种基于比色分析的免疫传感器的制备方法及应用
CN105588865B (zh) * 2016-01-28 2019-05-21 南京大学 一种基于双活性工作电极的光电化学检测装置
CN105738447B (zh) * 2016-02-25 2018-03-27 济南大学 一种电化学氯霉素生物传感器的制备方法及应用
CN105717180B (zh) * 2016-02-25 2018-03-27 济南大学 一种基于二维纳米复合材料的光电化学黄曲霉毒素生物传感器的制备方法及应用
CN105717181B (zh) * 2016-02-25 2018-02-27 济南大学 一种基于双金属原位复合二维纳米材料的电化学马拉硫磷生物传感器的制备方法及应用
CN105717179B (zh) * 2016-02-25 2018-03-23 济南大学 一种光电化学有机氯农药生物传感器的制备方法及应用
CN106198502B (zh) * 2016-07-05 2019-02-22 济南大学 一种基于铁掺杂二维纳米复合材料的莱克多巴胺传感器的制备方法
CN106018514B (zh) * 2016-07-05 2019-04-05 济南大学 一种基于铜掺杂纳米光电材料的光电化学己烯雌酚传感器的制备方法
CN106053566B (zh) * 2016-07-05 2019-03-22 济南大学 一种基于二维磁性纳米光电材料的光电化学沙丁胺醇传感器的制备方法
CN106198500B (zh) * 2016-07-05 2019-03-05 济南大学 一种检测有机氯农药的电致化学发光生物传感器的制备方法
CN106198683B (zh) * 2016-07-05 2019-04-05 济南大学 一种基于二维纳米光电材料的光电化学氯霉素生物传感器的制备方法
CN106198668B (zh) * 2016-07-05 2019-03-12 济南大学 一种基于钴掺杂二维纳米光电材料的光电化学内吸磷传感器的制备方法
CN106124589B (zh) * 2016-07-05 2019-03-12 济南大学 一种基于铁掺杂二维纳米材料构建的电化学生物传感器的制备方法
CN106198501B (zh) * 2016-07-05 2019-03-01 济南大学 一种检测黄曲霉毒素的电致化学发光传感器的制备方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20130127998A (ko) * 2012-04-20 2013-11-25 중국농업과학원유료작물연구소 하이브리도머 세포주 10g4 및 그가 생성하는 항아플라톡신 b1, b2, g1, g2 총량 모노클론 항체
CN104133069A (zh) * 2014-08-20 2014-11-05 济南大学 一种双功能标记光电化学传感器的制备方法及应用
CN104155445A (zh) * 2014-07-14 2014-11-19 济南大学 无标记电化学发光肿瘤标志物免疫传感器的制备和应用
CN104165913A (zh) * 2014-05-19 2014-11-26 上海大学 检测骨桥蛋白的电化学传感器及其构建方法

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101900728A (zh) * 2010-08-05 2010-12-01 中国农业科学院油料作物研究所 半定量化检测黄曲霉毒素b1的多检测线免疫层析试纸条及其制备方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20130127998A (ko) * 2012-04-20 2013-11-25 중국농업과학원유료작물연구소 하이브리도머 세포주 10g4 및 그가 생성하는 항아플라톡신 b1, b2, g1, g2 총량 모노클론 항체
CN104165913A (zh) * 2014-05-19 2014-11-26 上海大学 检测骨桥蛋白的电化学传感器及其构建方法
CN104155445A (zh) * 2014-07-14 2014-11-19 济南大学 无标记电化学发光肿瘤标志物免疫传感器的制备和应用
CN104133069A (zh) * 2014-08-20 2014-11-05 济南大学 一种双功能标记光电化学传感器的制备方法及应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
光沉积法合成纳米金属Pd负载的MCM-TiO2及其光催化性质研究;郑珊 等;《高等学校化学学报》;20020630;第23卷(第6期);摘要，1126-1129页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN104569435A (zh) 2015-04-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104569435B (zh) 一种无标记光电化学甲胎蛋白免疫传感器的制备方法
Lin et al. Dopamine-loaded liposomes for in-situ amplified photoelectrochemical immunoassay of AFB1 to enhance photocurrent of Mn2+-doped Zn3 (OH) 2V2O7 nanobelts
Zhang et al. Plasmon enhanced photoelectrochemical sensing of mercury (II) ions in human serum based on Au@ Ag nanorods modified TiO2 nanosheets film
CN109507174B (zh) 基于姜黄素复合ZnO纳米粒子猝灭鲁米诺电化学发光传感器的制备
Chen et al. A facile fluorescence lateral flow biosensor for glutathione detection based on quantum dots-MnO2 nanocomposites
CN104502593B (zh) 一种电化学胃癌肿瘤标志物无标记免疫传感器的制备方法
Feng et al. A competitive-type photoelectrochemical immunosensor for aflatoxin B1 detection based on flower-like WO3 as matrix and Ag2S-enhanced BiVO4 for signal amplification
Su et al. Recent advances in analytical applications of nanomaterials in liquid-phase chemiluminescence
Li et al. Silver nanoparticles as labels for applications in bioassays
Wang et al. Photoelectrochemical immunosensor for detection of carcinoembryonic antigen based on 2D TiO2 nanosheets and carboxylated graphitic carbon nitride
Wang et al. Visible light photoelectrochemical aptasensor for chloramphenicol by using a TiO 2 nanorod array sensitized with Eu (III)-doped CdS quantum dots
CN104849331A (zh) 一种基于Ag2Se@CdSe标记的夹心型心肌肌钙蛋白T的光电化学传感器的制备方法与应用
Roushani et al. AgNPs/QDs@ GQDs nanocomposites developed as an ultrasensitive impedimetric aptasensor for ractopamine detection
Song et al. Using silver nanocluster/graphene nanocomposite to enhance photoelectrochemical activity of CdS: Mn/TiO2 for highly sensitive signal-on immunoassay
Yang et al. An aptamer-mediated CdSe/ZnS QDs@ graphene oxid composite fluorescent probe for specific detection of insulin
Han et al. Gold nanoparticles enhanced electrochemiluminescence of graphite-like carbon nitride for the detection of Nuclear Matrix Protein 22
CN109283235B (zh) 一种基于NSCQDs/Bi2S3的光电化学传感器及其制备方法
Wei et al. Ultrasensitive photoelectrochemical detection of microcystin-LR based on hybridization chain reaction assisted exciton-plasmon interaction and enzymatic biocatalytic precipitation
Han et al. A photoelectrochemical immunosensor for detection of α-fetoprotein based on Au-ZnO flower-rod heterostructures
CN108845015A (zh) 一种基于三氧化钨复合材料的光电化学黄曲霉毒素b1传感器的制备方法及应用
Wang et al. Resonance energy transfer between ZnCdHgSe quantum dots and gold nanorods enhancing photoelectrochemical immunosensing of prostate specific antigen
Yan et al. A highly sensitive dual-readout assay based on gold nanoclusters for folic acid detection
CN106066324A (zh) 一种电致化学发光生物传感器标记物的制备方法及应用
Wang et al. A visible light photoelectrochemical sensor for tumor marker detection using tin dioxide quantum dot–graphene as labels
Geng et al. ZnCuInSe/Au/TiO2 sandwich nanowires-based photoelectrochemical biosensor for ultrasensitive detection of kanamycin

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20151021

Termination date: 20210125