一种复合生物除臭剂及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及生物制剂领域,具体地说,涉及一种复合生物除臭剂及其制备方法与应用。
背景技术
随着社会经济的发展,人们对生活所处的环境的要求也随之增高。恶臭作为一种重要的环境污染物,并且作为七大典型公害之一(大气污染、恶臭、噪音、水质污染、振动、土壤污染和地基下沉),其物质种类繁多,影响范围大,其治理也逐渐得到人们的重视。规模化垃圾中转站,畜禽养殖场及堆肥场是臭味产生的重要来源。因此,如何开发高效持续性强无污染的除臭剂成为目前研究的热点。
目前常规的除臭方法有:物理除臭法和化学除臭法,它们通过一些活性基团将臭气吸附或分解,或者是抑制产臭微生物的生长,从而达到消臭的目的。但缺点是用量大,有二次污染,污染环境。
生物除臭剂与其他除臭剂相比,有无污染、持续性强等特点,己成为环境工作者研究的热点之一,其中利用植物提取液与微生物除臭是广泛应用的一种经济高效环保的方式。
因此,植物提取液与微生物除臭是一个新兴的、值得推广应用的可靠方法,也因此,需要寻求一种高效的生物复合除臭剂。
植物除臭剂主要是从树木和花草等植被中抽取的精油、汁或浸膏,经微乳化或其他工艺后形成的天然植物提取液,其主要活性成分是酚类或鞣质类物质。作用机制主要源于化学反应和生物物理过程,一种是通过物理吸收或化学反应经臭味分子吸收或转化;另一种是酶抑制剂,比如脲酶抑制剂,能够抑制尿素转化为NH3等,是一种环境友好型的天然恶臭清除方法。微生物除臭的实质是运用特定功能的微生物将一些臭味物质分解转化为无臭的物质或者是抑制臭味物质的产生从而达到去除臭味的目的。近年来国内研究者大部分集中采用单一的方法,而将多种方法结合起来,比如将植物提取液通过某种方式与微生物结合组成复合生物除臭剂应用于实践中还很少有报道
现有市场除臭剂存在的主要问题,一是作用时间短,短时间内需要消耗大量的除臭剂,增加了除臭成本,二是除臭剂的适用性差,除臭效果受环境条件影响大不稳定。
发明内容
为了解决现有技术中存在的问题,本发明的目的在于提供一种应用于垃圾中转站,畜禽养殖场及堆肥场除臭的复合生物除臭剂及其制备方法与应用。
为了实现本发明的目的,本发明首先提供一种复合生物除臭剂,所述复合生物除臭剂包括:植物提取液,毕赤酵母,戊糖片球菌,乳酸片球菌、假丝酵母和巨大芽孢芽孢杆菌。
进一步地,所述复合生物除臭剂中的总菌数为7.6×108-9.84×108cfu/mL。
作为优选,所述植物提取液为木醋液。
作为优选,所述毕赤酵母为毕赤酵母J6(Saccharomycetes),其在所述复合生物除臭剂中的活菌数为3.9×107-7.2×107cfu/mL;
所述戊糖片球菌为戊糖片球菌FJ-13(Pediococcus pentosaceus),其在所述复合生物除臭剂中的活菌数为2.9×108-3.6×108cfu/mL;
所述乳酸片球菌为乳酸片球菌FJ-18(Pediococcus acidilactici),其在所述复合生物除臭剂中的活菌数为3.9×108-4.6×108cfu/mL;
所述假丝酵母为假丝酵母FJ-22(Candida mycoderma),其在所述复合生物除臭剂中的活菌数为4.7×107-8.2×107cfu/mL;
所述巨大芽孢杆菌为巨大芽孢杆菌LS-1(Bacillus megatherium),其在所述复合生物除臭剂中的活菌数为8×106-1×107cfu/mL。
以上所述菌株J6(Pediococcus pentosaceus),FJ-13(Pediococcuspentosaceus),FJ-18(Pediococcus acidilactici),FJ-22(Candida mycoderma),LS-1(Bacillus megatherium)均为北京沃土天地生物科技有限公司已出售的,本领域技术人员可购买的产品。
进一步地,本发明还提供了所述的复合生物除臭剂的制备方法,包括如下步骤:
1)将植物提取液原液用无菌水稀释100倍,得溶液A,备用;
2)固体斜面培养:将巨大芽孢杆菌接种于牛肉膏蛋白胨固体培养基中,毕赤酵母接种于土豆固体培养基中,戊糖片球菌、乳酸片球菌和假丝酵母接种于MRS固体培养基中,于30℃恒温培养1-2天,使菌株活化;
3)一级种子培养:将步骤2)中活化的巨大芽孢杆菌菌株接种于牛肉膏蛋白胨培养基中,活化的毕赤酵母菌株接种于土豆培养基中,活化的戊糖片球菌、乳酸片球菌和假丝酵母菌株接种于MRS培养基中,于30℃,180rpm下培养2天,当液体培养菌密度OD600值达到0.6-0.8时停止培养,即得一级种子;
4)二级种子培养:将步骤3)所得一级种子以5%的接种量分别接种于发酵培养基中,混合发酵培养2-3天,即得二级种子液;
5)将步骤4)中获得的巨大芽孢杆菌种子液以10-20%的接种量接种于发酵培养基中,于30℃,120rpm,通气量1.5vvm下进行高密度发酵培养,获得溶液B;
6)步骤4)中获得的毕赤酵母、戊糖片球菌和乳酸片球菌的种子液以10-20%的接种量接种于发酵培养基中,于30℃,120rpm,通气量1.0vvm下进行高密度发酵培养,获得溶液C;
7)将步骤5)及步骤6)中获得的溶液B和溶液C以体积比1:1混合,得溶液D;
8)将步骤1)及步骤7)中获得的溶液A和溶液D以体积比1:1混合,即得复合生物除臭剂。
作为优选,所述发酵培养基的配方按质量百分比为:糖蜜2.5%、玉米粉0.12%、硫酸铵0.33%,磷酸二氢钾0.07%,硫酸镁0.05%,氯化钙0.05%,余量为水。
进一步地,在步骤4)中,所述混合发酵培养为有氧培养:通气量1.0-1.5vvm,搅拌转速120r/min,温度30℃。
本发明还进一步提供了前述复合生物除剂在垃圾中转站,畜禽养殖场和堆肥场除臭中的应用。
具体为,在垃圾中转站及畜禽养殖场中,将除臭剂用水稀释100倍,按0.1Kg/m2对所用场合进行喷洒;
在堆肥场中,将除臭剂以0.1%接种量接种于堆肥发酵车间始料中。
本发明的有益效果在于:
本发明将植物提取液与不同功能的除臭微生物进行复合,既运用了植物提取液除臭的快速性这一特点,又利用了微生物除臭持续强这一特点,得到具有普遍适应性的复合生物除臭剂。
本发明所述复合生物除臭剂是经过配方优化后,组成的植物提取液与微生物复合剂,对垃圾中转站,畜禽养殖场及堆肥场具有良好的除臭作用。
利用本发明提供的复合生物除臭剂处理垃圾中转站,畜禽养殖场,堆肥场,可使NH3去除率分别达到65.2-71.6,63.4-73.7%,53.42-75.77%;H2S去除率达到53.5-60.1%,35.5-45.9%,47.2-53.8;厂区臭气浓度有明显的下降,有效的改善了堆肥场周边的空气环境,有利于堆肥场环境效益的提高。
本发明提供的复合生物除臭剂的除臭机理。利用植物提取液中的酚类或鞣质类物质,通过化学反应和生物物理过程,将臭味分子吸收或转化;二是利用植物提取液中所含的是抑制剂,比如脲酶抑制剂,能够抑制尿素转化为NH3等。利用微生物功能菌群将臭味分子吸收分解转化为无臭物质,同时通过微生物的拮抗作用抑制产臭微生物的生长,从而达到消除或抑制臭味产生的目的。本发明兼具了植物提取液除臭的快速性和微生物除臭的持续性强特点。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明,但不用来限制本发明的范围。
所述植物提取液为木醋液;
所述毕赤酵母(Saccharomycetes)为毕赤酵母J6;
所述戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)为戊糖片球菌FJ-13;
所述乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)为乳酸片球菌FJ-18;
所述假丝酵母(Candida mycoderma)为假丝酵母FJ-22;
所述巨大芽孢杆菌(Bacillus megatherium)为巨大芽孢杆菌LS-1。
以上所述菌株J6(Pediococcus pentosaceus),FJ-13(Pediococcuspentosaceus),FJ-18(Pediococcus acidilactici),FJ-22(Candida mycoderma),LS-1(Bacillus megatherium)均为北京沃土天地生物科技有限公司已出售的,本领域技术人员可购买的产品。
实施例1复合生物除臭剂
1、组成:
植物提取液;
毕赤酵母J6(Saccharomycetes),3.9×107-7.2×107cfu/mL;
戊糖片球菌FJ-13(Pediococcus pentosaceus),2.9×108-3.6×108cfu/mL;
乳酸片球菌FJ-18(Pediococcus acidilactici)3.9×108-4.6×108cfu/mL;
假丝酵母FJ-22(Candida mycoderma),4.7×107-8.2×107cfu/mL;
巨大芽孢杆菌LS-1(Bacillus megatherium)8×106-1×107cfu/mL;
总菌数为7.6×108-9.84×108cfu/mL。
2、制备方法:
1)将植物提取液原液用无菌水稀释100倍,得溶液A,备用。
2)固体斜面培养:将巨大芽孢杆菌LS-1接种于牛肉膏蛋白胨固体培养基中,毕赤酵母J6接种于土豆固体培养基中,戊糖片球菌FJ-13和乳酸片球菌FJ-18及假丝酵母FJ-22接种于MRS固体培养基中,于30℃恒温培养1-2天,使菌株活化;MRS培养基为:蛋白胨10g,牛肉膏10g,酵母膏5g,葡萄糖20g,吐温801.0mL,磷酸氢二钾2g,醋酸钠5g,柠檬酸二铵2g,七水硫酸镁0.58g,四水硫酸锰0.25g,蒸馏水1000mL,pH6.2-6.6,MRS固体培养基为在液体培养基中加入2%琼脂;牛肉膏蛋白胨为:牛肉膏5g,蛋白胨10g,NaCl 5g,蒸馏水1000mL,固体加琼脂20g,pH 7.0-7.2;土豆培养基为:土豆200g,葡萄糖20g,蒸馏水1000mL,固体加琼脂20g,pH 7.0-7.2。
3)一级种子培养:将步骤2)活化的菌株,用接种环挑取菌落分别接种于上述相对应的液体培养基中,于30℃,180rpm下培养2天,当液体培养菌密度OD600值达到0.6-0.8时停止培养,即得一级种子;
4)二级种子培养:将步骤3)所得一级种子以5%的接种量分别接种于装有上述相应液体培养基的5L的三角瓶中中,30℃条件下,培养2-3天,即得二级种子液;
5)将步骤4)中获得的巨大芽孢杆菌LS-1种子液以10-20%的接种量接种于300L发酵罐中,于30℃,120rpm,通气量1.5vvm下进行高密度发酵培养,获得溶液B。
6)步骤4)中获得的毕赤酵母J6,戊糖片球菌FJ-13,乳酸片球菌FJ-18种子液分别以10-20%的接种量接种于300L发酵罐中,于30℃,120rpm,通气量1.0vvm下进行高密度发酵培养,获得溶液C。
7)将步骤5)及步骤6)中获得的溶液B和溶液C以体积比1:1混合,得溶液D。
8)将步骤1)及步骤7)中获得的溶液A和溶液D以体积比1:1混合,得复合生物除臭剂。
实验例1复合生物除臭剂对新鲜猪粪的除臭效果试验
对新鲜猪粪的除臭效果进行测定,具体检测方法如下:
1、试验样品:新鲜猪粪,复合生物除臭剂,水,市场上已有除臭产品A。
2、检测方法:将50g拌有25%锯末的新鲜猪粪放入1000mL烧杯中,调节含水量到50%左右,121℃下消毒30min,按10%接种量接入复合生物除臭剂,水及市场上已有除臭产品A,并充分混匀,分别将盛有20mL稀硫酸溶液的50mL小烧杯和装有20mL乙酸锌-乙酸钠溶液的50mL小烧杯置于杯中。用双层塑料薄膜密封后,置于30℃恒温室中发酵培养。每个处理重复3次,培养过程中每隔3d,取出小烧杯检测氨气和硫化氢的释放量。
结果表明:见表1
表1:对新鲜猪粪的除臭效果
|
实施例1 |
实施例2 |
实施例3 |
NH<sub>3</sub>的去除率(%) |
58.95 |
23.1 |
43.2 |
H<sub>2</sub>S的去除率(%) |
69.20 |
3.5 |
37.8 |
表1结果显示:实施例1提供的复合生物除臭剂对NH3的去除率达到58.95%,对H2S的去除率达到69.20%,臭气浓度有明显的降低;对照组实施例2对臭气的去除为0;选取的市场上已有的除臭剂产品对NH3和H2S的去除率分别为43.2%,37.8%。结果表明本复合生物除臭剂对猪粪臭味的去除有明显的作用。
实验例2复合生物除臭剂对垃圾中转站的除臭效果
应用于北京某垃圾中转站的除臭效果进行测定,具体方法为:
1、试验样品:中转站新鲜生活垃圾;复合生物除臭剂;对照:水;已有市场除臭产品A。
2、试验方法:将除臭微生物复合菌剂用水稀释100倍,按0.1Kg/m2对所用场合进行喷洒。采样工具有NH3、H2S吸收仪和大气采样器,记录采样时温度,大气压,湿度。样品送往北京是畜禽养殖环境监测中心测定,分别用硼酸吸收-盐酸滴定法和锌氨络盐吸收-比色法测定NH3和H2S含量。
3、通过连续15d的取样分析,结果见表2
表2:对垃圾中转站的除臭效果
|
实施例1 |
实施例2 |
实施例3 |
NH<sub>3</sub>的去除率(%) |
65.2-71.6 |
23.1-24.5 |
34.8-42.1 |
H<sub>2</sub>S的去除率(%) |
53.5-60.1 |
1.3-3.8 |
24.8-29.3 |
表2结果显示:实施例1提供的复合生物除臭剂对NH3的去除率达到65.2-71.6%;对H2S的去除率达到53.5-60.1%,场区空气环境有明显改善。实施例2中的对照水对对NH3的去除率达到23.1-24.5%;对H2S的去除率达到1.3-3.8%。实施例3提供的市场已有除臭产品A对NH3的去除率达到34.8-42.1%;对H2S的去除率达到24.8-29.3%。试验结果表明,实施例1提供的复合生物除臭剂对垃圾中转站中臭味消除具有较好的作用。
实验例3复合生物除臭剂对畜禽养殖场的除臭效果
应用于北京昌平某生猪养殖场的除臭效果进行测定,具体方法为:
1、试验样品:1200m2密闭猪舍;复合生物除臭剂;对照:水;已有市场除臭产品A。
2、试验方法:将除臭微生物复合菌剂用水稀释100倍,按0.1Kg/m2对所用场合进行喷洒。采用五点法采样。采样工具有NH3、H2S吸收仪和大气采样器,记录采样时温度,大气压,湿度。样品送往北京是畜禽养殖环境监测中心测定,分别用硼酸吸收-盐酸滴定法和锌氨络盐吸收-比色法测定NH3和H2S含量。
3、通过连续15d的取样分析,结果见表2
表3:对畜禽养殖场的除臭效果
|
实施例1 |
实施例2 |
实施例3 |
NH<sub>3</sub>的去除率(%) |
63.4-73.7 |
19.1-21.5 |
44.8-50.1 |
H<sub>2</sub>S的去除率(%) |
35.5-45.9 |
1.5-3.9 |
27.8-29.3 |
表3结果显示:实施例1提供的复合生物除臭剂对NH3的去除率达到63.4-73.7%;对H2S的去除率达到35.5-45.9%,场区空气环境有明显改善。实施例2中的对照水对对NH3的去除率达到19.1-21.5;对H2S的去除率达到1.5-3.9%。实施例3提供的市场已有除臭产品A对NH3的去除率达到44.8-50.1%;对H2S的去除率达到27.8-29.3%。试验结果表明,实施例1提供的复合生物除臭剂对畜禽养殖场的臭味有明显的改善作用。
实验例4复合生物除臭剂对堆肥场的除臭效果
应用于威海某堆肥场的除臭效果进行测定,具体方法为:
1、试验样品:堆肥发酵车间;复合生物除臭剂;对照:水;已有市场除臭产品A。
2、试验方法:将除臭菌剂以0.1%的接种量接种于堆肥发酵车间的始料中,采用五点法(发酵车间选取5个点)采样。采样工具有NH3、H2S吸收仪和大气采样器,记录采样时温度,大气压,湿度。样品送往北京是畜禽养殖环境监测中心测定,分别用硼酸吸收-盐酸滴定法和锌氨络盐吸收-比色法测定NH3和H2S含量。
3、通过一个发酵周期连续15d的取样分析,结果见表4
表4:对畜禽养殖场的除臭效果
|
实施例1 |
实施例2 |
实施例3 |
NH<sub>3</sub>的去除率(%) |
53.42-75.77 |
10.1-11.5 |
41.8-50.2 |
H<sub>2</sub>S的去除率(%) |
47.2-53.8 |
1.5-3.9 |
23.7-27.2 |
表4结果显示:实施例1提供的复合生物除臭剂对NH3的去除率达到53.42-75.77%;对H2S的去除率达到47.2-53.8%,场区空气环境有明显改善。实施例2中的对照水对对NH3的去除率达到10.1-11.5%;对H2S的去除率达到1.5-3.9%。实施例3提供的市场已有除臭产品A对NH3的去除率达到41.8-50.2%;对H2S的去除率达到23.7-27.2%。试验结果表明,实施例1提供的复合生物除臭剂对畜禽养殖场的臭味有明显的改善作用。
虽然,上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验,对本发明作了详尽的描述,但在本发明基础上,可以对之作一些修改或改进,这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此,在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进,均属于本发明要求保护的范围。