CN104546995B - 一种余甘子提取物的药物用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了余甘子的药物用途,具体地说是一种余甘子提取物在制备治疗高尿酸血症药物中的应用。余甘子提取物具有治疗高尿酸血症的作用,可有效的降低血液中的尿酸浓度,对与高尿酸血症相关的代谢性病症:急性痛风、慢性痛风、痛风关节炎、痛风发作、尿酸性肾石病和痛风性肾病等病症可起到较好的疗效。
Description
技术领域
本发明涉及余甘子的新适应症,具体地说是余甘子提取物在制备治疗高尿酸血症的药物中的应用。
背景技术
在化学医药领域中,尿酸是人类嘌呤化合物的终末代谢产物。嘌呤代谢紊乱导致高尿酸血症。在正常嘌呤饮食状态下,非同日两次空腹血尿酸水平男性高于420μmol/L,女性高于360μmol/L,即称为高尿酸血症(hyperuricemia)。本病患病率受到多种因素的影响,与遗传、性别、年龄、生活方式、饮食习惯、药物治疗和经济发展程度等有关。根据近年各地高尿酸血症患病率的报道,目前我国约有高尿酸血症者1.2亿,约占总人口的10%,高发年龄为中老年男性和绝经后女性,但近年来有年轻化趋势。随着人们饮食结构的改变和生活水平的提高,高尿酸血症的发病率逐年提高,据报道称,目前约有两成的成年男性处于高尿酸血症的状态。通常,单纯的处于高尿酸血症状态并没有自觉症状,但是如果长时间放任该状态,血液中的尿酸盐将发生结晶,结晶的尿酸盐将沉积在关节、皮下组织、肾脏等部位,进而出现痛风、关节炎、皮下痛风结石、肾脏结石或痛风性肾病等一系列临床表现。因此,适当控制血液中的尿酸值是预防、改善以痛风为代表的高尿酸血症的根本。
目前,对血液中尿酸的控制主要是通过以下两种途径实现的:(1)抑制尿酸的生成。尿酸是由次黄嘌呤和黄嘌呤经黄嘌呤氧化酶的作用而生成的。黄嘌呤氧化酶是催化上述反应、进而生成尿酸所必须的酶,因此,抑制黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XO)活性可有效的抑制尿酸的形成,进而起到治疗痛风等症状的作用。目前常用的抑制尿酸生成的药物有别嘌呤醇、非布索坦等;(2)促进尿酸的排泄。目前常用的促进尿酸排泄的药物有丙磺舒、苯溴马龙等。
上述两种方式均可起到降低血液中尿酸的作用,进而对高尿酸血症引发的痛风、关节炎、皮下痛风结石、肾脏结石或痛风性肾病等病症产生疗效,但是上述药物毒副作用通常较大,例如,别嘌呤醇可引发变态反应(发病率10-15%)、超敏综合症、骨髓抑制等严重的毒副作用;丙磺舒、苯溴马隆则具有刺激胃肠道、引发肾绞痛、激发痛风急性发作等副作用,在一定程度上限制了这些药物的临床应用。因此,寻找新型的高效低毒的高尿酸血症药物依然是目前药学研究的一个热点。
余甘子,学名为Phyllanthus emblica L.,为大戟科(Euphorbiaceae),叶下珠属(Phyllanthus)植物,是一种十分独特的生长在中国亚热带、热带部分地区,特别是干热河谷地区的落叶乔木或灌木资源植物。余甘子的原产地是印度、巴基斯坦、斯里兰卡、马来西亚、菲律宾、泰国等地,目前已引种到埃及、南非、肯尼亚、古巴、澳大利亚、美国等地,其中,以印度和中国分布面积最大、产量最多。根据世界各国传统药物体系中余甘子的临床药用资料,全世界有近20个国家或民族在自己的传统药物体系中使用余甘子,作为一味重要的传统草药,余甘子已被载入《中国药典》。根据现代研究,余甘子的化学成分主要为含单宁成分,具体为柯子酸、柯黎勒酸、鞣云实素、原柯子酸、柯子裂酸、没食子酸等,另外还有Vc、有机酸、黄酮类成分,具有抗微生物感染、抗氧化、抗肿瘤、降血脂和血糖、降压、补益等多种生物活性,且无明显的毒副作用,在临床上已有多种应用。但是,对于余甘子在治疗高尿酸血症和痛风方面的研究和利用非常少,中国专利文献CN102441081A公开了一种治疗痛风的药物及其制备方法,是一种含有十四味药材的复方组合物,余甘子是其中一味并非君药的药材,而且只是将药材组合物进行粉碎,并未涉及到任何可能的活性成分或活性部位的提取。中国文献《余甘子提取物对尿酸钠诱导大鼠急性痛风性关节炎的作用研究》(中国药房2011年第22卷第47期,4425-4427)中,报道了余甘子提取物对痛风性关节炎的作用,但其主要机理是通过抑制局部组织和血清炎症介质(PGE2和TNF-α)的释放而减轻炎症反应。而发明人通过具体实验,发现余甘子提取物以及经过富集之后的余甘子总多酚具有明显降低高尿酸血症模型小鼠血清尿酸的作用,有助于高尿酸血症以及高尿酸血症并发症的治疗和预防,并且安全性高,具有良好的应用前景。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是现有技术中对于高尿酸血症的治疗都需要采用具有毒副作用的药物,为此,本发明提供了一种新的可用于治疗高尿酸血症的天然植物提取物,即余甘子提取物在制备治疗高尿酸血症的药物中的应用。
本发明提供了余甘子提取物在制备治疗高尿酸血症药物中的应用。
余甘子提取物在制备治疗由于高尿酸血症而导致的急性痛风、慢性痛风、痛风关节炎、痛风发作、尿酸性肾石病和痛风性肾病药物中的应用。
余甘子总多酚在制备治疗高尿酸血症药物中的应用。
余甘子总多酚在制备治疗由于高尿酸血症而导致的急性痛风、慢性痛风、痛风关节炎、痛风发作、尿酸性肾石病和痛风性肾病药物中的应用。
上述所述余甘子总多酚由以下方法制备得到:将余甘子浸于溶剂中提取活性成分即可。进一步的,所述余甘子总多酚由以下方法制备得到:将余甘子浸于溶剂中,在20-80℃下回流提取1h以上,过滤,得到余甘子提取液,浓缩所述余甘子提取液,得到含余甘子总多酚的余甘子提取物。当然,在余甘子浸于溶剂中后,本领域技术人员还可根据实际情况将余甘子浸于溶剂中一定时间,优选的,将余甘子浸于溶剂中后,浸泡3-5h。
优选的,所述溶剂为水、甲醇、乙醇中的一种或多种的混合液。
所述余甘子总多酚的制备方法还包括将所述余甘子提取物加水溶解、精制提纯的步骤。优选的,所述精制提纯为大孔吸附树脂层析。
所述大孔吸附树脂层析包括以下步骤:分取大孔吸附树脂层析,将提取得到的活性成分依次用水、30v%-50v%的乙醇溶液洗脱,再用70v%-100v%的乙醇溶液洗脱,得到精制提纯的余甘子提取物。
所述余甘子总多酚占所述余甘子提取物的含量为10%-86%。
本发明的用于治疗高尿酸血症的药物,所述药物以余甘子总多酚为活性成分,向余甘子提取物中加入常规辅料按照常规工艺制成临床上可接受的胶囊剂、片剂、丸剂、颗粒剂、膏剂、合剂、混悬剂。
所述的药物在制备治疗高尿酸血症的药物中的用途。
本发明中所述的“常规辅料”是指药学上可接受的材料、组合物或媒介物,例如液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂(如可可脂和栓蜡)、溶剂或包装材料。药学上可接受的载体是与组合物的其他成分、与施用的模式相容的并且对患者无害。药学上可接受的载体可以是水性或非水性的。常规辅料包括胶质,例如明胶;淀粉,例如玉米淀粉、马铃薯淀粉;糖,例如乳糖、葡萄糖和蔗糖;纤维素材料及其混合物,例如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和醋酸纤维素。可用作药学上可接受的载体的材料包括但不限于,西黄蓍胶粉、麦芽、滑石粉、油(如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油、大豆油等)、醇类(如丙二醇、乙醇、甘油、山梨糖醇、甘露醇、聚乙二醇等)、酯类(如油酸乙酯、月桂酸乙酯、琼脂)、缓冲剂(如氢氧化镁、氢氧化铝、硼酸和硼酸钠以及磷酸盐缓冲液)、褐藻酸、无热源的水、等渗盐水、林格氏液。
本领域技术人员可以使用本领域中已知的任何方式施用本发明的药物化合物,包括但不限于口服、经鼻、胃肠外、局部、经皮或直肠的施用途径。本发明的药物组合物优选适用于口服或局部施用的剂型,例如,片剂、胶囊(包括硬胶囊、软胶囊)、丸剂、溶液、粉末或粒料、悬浮液、贴片等。且本发明的药物可以采用本领域中公知的方法制为相应剂型。
本发明所述的方案以余甘子提取物作为制备治疗高尿酸血症药物的活性成分,探讨并验证了余甘子提取物可降低血液中尿酸的浓度,在治疗高尿酸血症上具有显著的效果。
具体实施方式
实施例1余甘子提取物的制备
取2000g余甘子(购买自亳州药材市场),粉碎后,用16L的70v%乙醇室温浸泡24h后,在20℃下回流提取60min,滤出提取液,向滤渣中再加入12L的70v%乙醇,回流提取40分钟,过滤,合并两次提取液,得到余甘子提取液,真空浓缩至干,得到700g余甘子粗提取物(编号为PEE-1),得率为35%。
实施例2余甘子提取物的制备
取2000g余甘子(购买自亳州药材市场),粉碎后用16L的水室温浸泡24h后,在80℃下提取40min,滤出提取液,向滤渣中再加入12L的水,在80℃下提取40min,过滤,合并两次提取液,得到余甘子提取液,真空浓缩至干,得到900g余甘子提取物(编号为PEE-2),得率为45%。
实施例3余甘子提取物的制备
采用与实施例1相同的方法制备余甘子提取物,取制备得到的余甘子粗提取物200g,加水溶解,用D101型大孔吸附树脂进行层析。提取物的质量与树脂的质量比为1:20。依次用水、50v%乙醇,95v%乙醇进行梯度洗脱,每个梯度洗脱4倍的柱体积,流速为3倍柱体积/小时。洗脱结束后,将水洗脱液、50v%乙醇洗脱液、95v%乙醇洗脱液浓缩至干,即得到精制提纯的余甘子提取物。
其中,水洗脱部位共得到精制提纯的余甘子提取物102g(编号为PEW),50v%乙醇洗脱部位共得到精制提纯的余甘子提取物72g(编号为PE50),95v%乙醇洗脱部位共得到精制提纯的余甘子提取物13g(编号为PE95)。
实施例4余甘子提取物的制备
采用与实施例2相同的方法制备余甘子提取物,取制备得到的余甘子粗提取物200g,加水溶解,用Diaion-HP20型大孔吸附树脂进行层析。提取物的质量与树脂的质量比为1:20。依次用水、30v%乙醇,70v%乙醇进行梯度洗脱,每个梯度洗脱5倍的柱体积,流速为2倍柱体积/小时。洗脱结束后,将水洗脱液、30v%乙醇洗脱液、70v%乙醇洗脱液浓缩至干,即得到精制提纯的余甘子提取物。
其中,水洗脱部位共得到精制提纯的余甘子提取物105g(编号为PEDW),30v%乙醇洗脱部位共得到精制提纯的余甘子提取物64g(编号为PE30),70v%乙醇洗脱部位共得到精制提纯的余甘子提取物24g(编号为PE70)。
本发明所述实施例中,D101型大孔吸附树脂购自西安蓝晓科技新材料股份有限公司,Diaion-HP20型大孔吸附树脂购自日本三菱化学株式会社。D101大孔吸附树脂和DiaionHP-20是一种聚苯乙烯型树脂,同样类型其它厂家的树脂,比如AB-8,HPD-200,XAD-1600等树脂也会有类似的效果,并无差异。需要说明的是,所述的精制提纯,包括但不限于层析提纯,只要能实现将余甘子粗提取物中的总多酚进一步富集即可。
实施例5余甘子提取物的制备
取2000g余甘子(购买自新疆余甘子生物科技有限公司),用20L的50v%乙醇室温浸泡4h后,在50℃下提取60min,滤出提取液,得到余甘子提取液,真空浓缩至干,得到余甘子提取物。
实施例6含有余甘子提取物的胶囊剂
本实施例的胶囊剂包括以下成分:
实施例1中制备得到的余甘子提取物20g;助悬剂微晶纤维素60g;防腐剂叔丁基—4—羟基苯甲醚0.04g;润滑剂硬脂酸镁2g;填充剂乳糖加至200g。
其制备方法包括以下步骤:
称取上述处方量的余甘子提取物和各药用辅料,混合均匀,过60目筛三次,装入胶囊即得。
实施例7含有余甘子提取物的片剂
本实施例的片剂包括以下成分:
实施例4中制备得到的编号为PEDW的余甘子提取物25g;填充剂淀粉32g;崩解剂羟丙基纤维素(L-HPC)6g;润滑剂微粉硅胶4.5g;润滑剂硬脂酸镁1.5g;粘合剂淀粉浆(10%)适量;填充剂乳糖加至200g。
其制备方法包括以下步骤:
称取上述处方量的余甘子提取物、淀粉和L-HPC混合均匀,过60目筛三次,再向其中加入适量的10%淀粉浆制软材,再制粒,干燥,整粒后,加入微粉硅胶、硬脂酸镁、乳糖混合均匀,压片,包薄膜衣即得。
实施例8含有余甘子提取物的丸剂
本实施例的丸剂包括以下成分:
实施例3中50v%乙醇洗脱部位得到的精制提纯的编号为PE50的余甘子提取物、葡萄糖液、乙醇。
其制备方法包括以下步骤:
称取上述余甘子提取物、以适量水,葡萄糖液以及乙醇作为赋型剂,采用泛制法制作水丸,即得。
需要说明的是,实施例6-8中所用的常规辅料包括但不限于填充剂、崩解剂、润滑剂、粘合剂、矫味剂、助悬剂、防腐剂中的一种或几种的混合物。
具体而言,所述填充剂还可替换为预胶化淀粉、甘露醇、甲壳素、微晶纤维素、蔗糖中的一种或多种的混合物;
所述崩解剂还可替换为淀粉、交联聚维酮、羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠中的一种或多种的混合物;
所述润滑剂还可替换为滑石粉、二氧化硅、十二烷基硫酸钠中的一种或多种的混合物;
所述助悬剂还可替换为聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、琼脂、羟丙基甲基纤维素中的一种或多种的混合物;
所述防腐剂还可替换为尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸、山梨酸盐中的一种或多种的混合物;
所述粘合剂还可替换为聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素中的一种或多种的混合物;
所述矫味剂还可替换为甜味剂和/或香精;所述甜味剂为糖精钠、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素中的一种或多种的混合物;
当然,所述常规辅料包括但不限于上述列举的范围,本领域技术人员可根据实际情况做适应性的选择及调整。
实验例
下面,为验证本发明的技术效果进行以下实验:
实验例1余甘子提取物的总多酚的测定
本实验例中,余甘子提取物(PEE-1、PEE-2、PEW、PE50、PE95、PEDW、PE30、PE70)中的总多酚的测定参考国标GBT 8313-2008茶叶中茶多酚含量的检测方法,用福林酚(Folin-Ciocalteu)试剂检测多酚含量。
具体包括以下步骤:
1、10v%的福林酚(Folin-Ciocalteu)试剂的配制:将20ml福林酚(Folin-Ciocalteu)试剂转移到200ml容量瓶中,用水定容并摇匀。
2、7.5w%的Na2CO3溶液的配制:称取37.50g的Na2CO3,加适量水溶解,转移至500ml容量瓶中,用水定容并摇匀。
3、没食子酸标准储备溶液(1000μg/ml)的配制:称取0.100g的没食子酸,于100ml容量瓶中溶解并定容至刻度,摇匀。
4、没食子酸工作液的配制:用移液管分别移取1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml的没食子酸标准储备液,置于100ml容量瓶中,分别用水定容至刻度,摇匀,即得浓度分别为10μg/ml、20μg/ml、30μg/ml、40μg/ml、50μg/ml的没食子酸工作液。
5、没食子酸标准曲线的制作:用移液管分别移取没食子酸工作液1.0ml于刻度管内,在每个试管内分别加入5.0ml福林酚(Folin-Ciocalteu),摇匀。反应3-8分钟内,加入4.0ml的Na2CO3溶液,加水定容至刻度,摇匀。室温下放置60分钟,用10mm的比色皿,在765nm波长条件下用分光光度计测定吸光度,根据没食子酸工作液浓度和相对应吸光度,制作标准曲线。
6、取余甘子提取物(PEE-1、PEW、PE50、PE95、PEE-2、PEDW、PE30、PE70)分别配成0.2mg/ml的样品溶液。取样品溶液1mL,按照步骤5中的制作方法,测定其吸光度,每个样品做三个平行实验,取平均值,计算样品中的多酚含量。
表1:余甘子提取物的总多酚含量
由表1可以看出,余甘子提取物经过两种不同富集工艺之后,总多酚含量均有非常大的提高,其中两种树脂洗脱工艺中,水洗脱部位的总多酚含量最高。
实验例2余甘子提取物对高尿酸血症小鼠的影响实验
本实验为通过动物实验验证余甘子提取物对高尿酸血症小鼠的影响。
(1)实验方法
取健康雄性KM小鼠120只,体重为15-18g,由上海灵畅生物科技有限公司提供;按每笼5只进行分笼处理后,在苏州凯祥生物科技有限公司的屏障系统内适应性饲养4天,从120只小鼠中选取体重集中的110只小鼠按体重随机平均分为11组,每组10只,分别为空白对照组,高尿酸血症模型组,阳性对照组,受试样品组,其中受试样品组共8组,分别为编号PEE-1、PEE-2、PEW、PE50、PE95、PEDW、PE30、PE70的余甘子提取物。
高尿酸血症的造模:
适应期过后随即对小鼠进行灌胃给药,每天上午灌胃1次,其中受试样品组,样品用纯水进行混悬,按照30mg/kg进行灌胃;阳性对照组非布索坦用纯水进行混悬,按照1mg/kg进行灌胃;空白对照组和高尿酸血症模型组均用纯水灌胃进行对照,连续灌胃7天;
在第7天上午灌胃0.5小时后对小鼠进行腹腔注射造模,其中空白对照组腹腔注射0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液;高尿酸血症模型组、阳性对照组和受试样品组注射氧嗪酸钾(OA),用羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液进行溶解,注射量均为300mg/kg体重;
腹腔注射1.5小时后摘除小鼠的眼球进行采血,采血容量不低于0.5mL,血样采集后于室温放置约1小时,待血液完全凝固后于3500rpm/4℃条件下离心10分钟,取血清在同等条件下复离5分钟,而后取0.2mL血清使用生化分析仪检测尿酸值(UA);
用Excel和SPSS对数据进行统计分析,计算平均数和标准差(SD),经单因素方差分析后比较各实验组的组间差异,与空白对照组相比,高尿酸血症模型组、阳性对照组和受试样品组小鼠的血清尿酸水平显著提高,有显著性差异,表明造模成功。
(2)实验结果
表2 余甘子提取物对高尿酸血症模型小鼠血清尿酸含量的影响
*:与高尿酸血症模型组比,P<0.05;**:表示与高尿酸血症模型组比,P<0.01(t-test检验)
从表2看出,给予受试样品后,与高尿酸血症模型组相比余甘子粗提物具有一定的降低尿酸效果。比较经两种提取工艺获得的不同余甘子提取物的降低尿酸效果,不同溶剂提取物没有显著性差异。经过两种不同树脂的总多酚富集工艺之后,两个树脂富集之后的水洗脱部位具有非常显著的降低尿酸的效果,跟其它部位相比,效果更加明显。
上述结果可以证明,余甘子提取物具有降低尿酸的作用,而对余甘子总多酚富集后的余甘子提取物具有更为显著的降低尿酸的作用。
实验例3余甘子提取物体外对黄嘌呤氧化酶的影响
本实施例验证余甘子提取物(PEE-1、PEE-2、PEW、PE50、PE95、PEDW、PE30、PE70)体外对黄嘌呤氧化酶的影响。
(1)实验步骤
1、磷酸盐缓冲溶液的配制:称取19.48g的K2HPO4·3H2O和1.99g的KH2PO4溶于500mL蒸馏水中,配成浓度为0.2mmol/L的磷酸盐缓冲溶液(pH=7.5);
2、黄嘌呤底物溶液的配制:称取黄嘌呤15.2mg,溶解于250mL蒸馏水中,配成浓度为0.4mmol/L的黄嘌呤底物溶液;
3、黄嘌呤氧化酶溶液的配制:取黄嘌呤氧化酶5U,用上述磷酸盐缓冲溶液稀释至160mL,配成浓度为80U/L的黄嘌呤氧化酶溶液,4℃保存;
4、样品和阳性对照溶液的配制:精密称取样品组余甘子提取物(PEE-1、PEE-2、PEW、PE50、PE95、PEDW、PE30、PE70)、别嘌呤醇(作为阳性对照),分别用二甲亚砜溶解、蒸馏水稀释,配成浓度为0.05mg/mL的溶液进行测试(其中二甲亚砜的最终浓度小于1%)。
5、抑制作用测试:
样品组测试:在2mL离心管中依次加入黄嘌呤底物溶液200μL、样品溶液100μL和黄嘌呤氧化酶溶液200μL,涡旋震荡5秒后置于25℃水浴锅中反应5分钟,反应完毕后加入1.5mL无水乙醇,涡旋震荡5秒终止反应。反应液经3500rpm离心5分钟,吸取200μL到1.5mL离心管中,用生化分析仪分别检测每个样品的UA值,每个样品平行操作三次取平均值。
空白对照组测试:在2mL离心管中依次加入黄嘌呤底物溶液200μL、磷酸盐缓冲溶液100μL和黄嘌呤氧化酶溶液200μL,同法检测空白对照组的UA值,平行操作三次取平均值。
阳性对照组测试:在2mL离心管中依次加入黄嘌呤底物溶液200μL、阳性对照溶液100μL和黄嘌呤氧化酶溶液200μL,同法检测阳性对照组的UA值,平行操作三次取平均值。
(2)测试结果
根据黄嘌呤氧化酶抑制率=[(空白对照组UA值-样品组UA值)/空白对照组UA值]*100,计算抑制率;
表3 余甘子提取物抑制黄嘌呤氧化酶的活性
从表3可以看出,余甘子提取物(PEE-1、PEE-2、PEW、PE50、PE95、PEDW、PE30、PE70)对黄嘌呤氧化酶都有不同程度的抑制作用。其中总多酚含量越高的余甘子提取物抑制作用越强,这一结果跟本发明实施例4的动物实验结果比较吻合,验证了余甘子提取物中的总多酚可能为抑制高尿酸血症的关键活性部位。
综上所述,余甘子提取物(PEE-1、PEE-2、PEW、PE50、PE95、PEDW、PE30、PE70)可起到抑制黄嘌呤氧化酶活性的作用,进而可实现抑制尿酸形成的效果,对于高尿酸血症具有临床意义的疗效。
综上所述,余甘子提取物具有高尿酸血症的显著作用。
显然,上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例,而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说,在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。
Claims (2)
1.余甘子提取物在制备治疗高尿酸血症药物中的应用,所述余甘子提取物通过以下方法制备而成:
取2000g余甘子,粉碎后,用16 L的70v%乙醇室温浸泡24h后,在20℃下回流提取60min,滤出提取液,向滤渣中再加入12 L的70v%乙醇,回流提取40分钟,过滤,合并两次提取液,得到余甘子提取液,真空浓缩至干,得到余甘子粗提取物;取制备得到的余甘子粗提取物200g,加水溶解,用D101型大孔吸附树脂进行层析;提取物的质量与树脂的质量比为1:20,依次用水、50v%乙醇,95v%乙醇进行梯度洗脱,每个梯度洗脱4倍的柱体积,流速为3倍柱体积/小时;洗脱结束后,将水洗脱液浓缩至干,即得到精制提纯的余甘子提取物。
2.余甘子提取物在制备治疗高尿酸血症药物中的应用,所述余甘子提取物通过以下方法制备而成:
取2000g余甘子,粉碎后用16 L的水室温浸泡24h后,在80℃下提取40min,滤出提取液,向滤渣中再加入12 L的水,在80℃下提取40min,过滤,合并两次提取液,得到余甘子提取液,真空浓缩至干,得到余甘子粗提取物;取制备得到的余甘子粗提取物200g,加水溶解,用Diaion-HP20型大孔吸附树脂进行层析,提取物的质量与树脂的质量比为1:20;依次用水、30v%乙醇,70v%乙醇进行梯度洗脱,每个梯度洗脱5倍的柱体积,流速为2倍柱体积/小时;洗脱结束后,将水洗脱液浓缩至干,即得到精制提纯的余甘子提取物。
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CN201410811188.8A CN104546995B (zh) | 2014-12-23 | 2014-12-23 | 一种余甘子提取物的药物用途 |
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余甘子的化学成分和总酚提取工艺研究;徐义侠;《中国优秀硕士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》;20091115(第11期);第36页第1段 * |
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