CN104546853B - 吡嗪酰胺在制备抑制肿瘤细胞转移和扩散的药物中的应用 - Google Patents

吡嗪酰胺在制备抑制肿瘤细胞转移和扩散的药物中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN104546853B
CN104546853B CN201510067780.6A CN201510067780A CN104546853B CN 104546853 B CN104546853 B CN 104546853B CN 201510067780 A CN201510067780 A CN 201510067780A CN 104546853 B CN104546853 B CN 104546853B
Authority
CN
China
Prior art keywords
cell
pyrazinamide
medicine
diffusion
application
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN201510067780.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN104546853A (zh
Inventor
滕文臣
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
JIANGSU AOGEMU BIOLOGICAL TECHNOLOGY Co Ltd
Original Assignee
JIANGSU AOGEMU BIOLOGICAL TECHNOLOGY Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by JIANGSU AOGEMU BIOLOGICAL TECHNOLOGY Co Ltd filed Critical JIANGSU AOGEMU BIOLOGICAL TECHNOLOGY Co Ltd
Priority to CN201510067780.6A priority Critical patent/CN104546853B/zh
Publication of CN104546853A publication Critical patent/CN104546853A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN104546853B publication Critical patent/CN104546853B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4965—Non-condensed pyrazines

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明公开吡嗪酰胺在制备抑制肿瘤细胞转移和扩散的药物中的应用。本发明利用吡嗪酰胺制备的药物对肿瘤细胞的转移能力进行抑制，吡嗪酰胺为低毒药物，可在肿瘤扩散过程中起到较大的阻断作用，与此同时再采用其他相关肿瘤药物进行治疗，可以大量减少正常细胞的死亡量；而现有的肿瘤药物多为细胞毒药物，在杀死肿瘤细胞的同时大量正常细胞也一起死亡。

Description

吡嗪酰胺在制备抑制肿瘤细胞转移和扩散的药物中的应用
技术领域
本发明涉及吡嗪酰胺在制药领域新的用途，具体涉及吡嗪酰胺在制备抑制肿瘤细胞转移和扩散的药物中的应用。
背景技术
吡嗪酰胺是类似烟酰胺，进入细胞可起杀菌作用。在pH较低的条件下，抗菌活性较强，该品为二线抗结核药的主要成分，与其它抗结核药无交叉耐药性，主要用于经一线药物治疗无效的病例。单用该品易产生耐药性需与其它抗结核药物联合应用。
作用机制可能为PZA渗入含结核杆菌的巨噬细胞内，转化为吡嗪酸而发挥抗菌作用。该品为烟酰胺的衍生物，具有抑菌或杀菌作用，取决于药物浓度和细菌敏感度。该品仅在pH偏酸时有抗菌活性。
现有公开文献中尚未发现吡嗪酰胺的其他药理作用。
发明内容
发明目的：本发明目的在于提供一种吡嗪酰胺在制备抑制肿瘤细胞转移和扩散的药物中的应用。
技术方案：吡嗪酰胺在制备抑制肿瘤细胞转移和扩散的药物中的应用。
优选地，所述肿瘤细胞为结肠癌细胞。
优选地，其中吡嗪酰胺的浓度为0.5～1uM。
发明人通过细胞层面的实验研究发现，吡嗪酰胺对肿瘤细胞的转移能力有一定的抑制作用。目前针对现有的一般服用方法为口服：每6小时按体重5～8.75mg/kg或每8小时按体重6.7～11.7mg/，最高每日3g。口服后由胃肠道迅速吸收。口服后广泛分布至全身组织中，血脑屏障通透好，在肝、肺、脑脊液中的药物浓度与同期血药浓度相近。
本发明需要根据现有的制剂服用方法为参考依据，在现有的细胞层面实验基础上根据新的适应症疗效以及后续相关实验设计确定新的临床给药方法及剂量。
本发明通过将肿瘤细胞采集培养后，再利用药物刺激细胞，观察细胞形态、并定量分析细胞层的面积，即细胞能够与其他细胞接触的面积，从而判断肿瘤细胞的扩散能力。细胞层面积越大越有利于与其他细胞形成连接。细胞迁移需要内外因素的配合。外部的因素指的是细胞外的信号分子。内部因素则指细胞的信号传导系统和执行运动的细胞骨架和分子马达，还有参与粘着斑形成的各种分子。细胞外信号结合胞膜受体完成其使命后，需要细胞内信号分子接力，将运动信息进一步传给细胞迁移的执行单位一一细胞骨架和分子马达。种类繁多的细胞内信号分子会相互作用，影响后述这两种分子的分布，结构和活性，达到精细调整细胞运动的目的。由此可见，肿瘤细胞的转移，与细胞本身以及细胞之间的关系紧密。
癌细胞与其同源正常组织相比，细胞间的粘着性降低，故癌细胞在体内容易分散和转移。在正常细胞外被中的纤粘连蛋白是一种细胞外粘着糖蛋白，它增强了细胞与细胞外基质间的粘着。癌细胞的纤粘连蛋白显著减少或缺失，钙粘蛋白合成发生障碍，从而破坏了细胞与基质之间和细胞与细胞之间的粘着，因此癌细胞具有易于侵润组织和转移的属性。癌细胞的面积的增大增强了各个细胞之间的接触面积更利于相互之间的粘连和附着。
虽然肿瘤细胞的转移是由多种因素共同形成导致的，但是以细胞层的面积，即细胞能够与其他细胞接触的面积作为细胞转移能力大小的依据，以此作为细胞间连接强度的测定的方法，具有成本低廉、操作简便、结果易判的优点，其表现出来的细胞面积增大是最容易直接观察辨别的，主要就是通过加药刺激后对细胞间连接分子E-cadherin蛋白质进行免疫染色，继而进行定量测定。细胞层面积越大越有利于与其他细胞形成连接。
本发明以为吡嗪酰胺为实验对象，评估考量其在抑制肿瘤细胞转移的能力评价。具体以药物刺激前后细胞面积的变化为主要依据。
有益效果：1、本发明利用吡嗪酰胺制备的药物对肿瘤细胞的转移能力进行抑制，吡嗪酰胺为低毒药物，可在肿瘤扩散过程中起到较大的阻断作用，与此同时再采用其他相关肿瘤药物进行治疗，可以大量减少正常细胞的死亡量；而现有的肿瘤药物多为细胞毒药物，在杀死肿瘤细胞的同时大量正常细胞也一起死亡；2、本发明所使用的吡嗪酰胺为成药库的现有药物化合物，研发周期与新药研发的周期相比可明显减少。
附图说明
图1为0.5uM浓度吡嗪酰胺处理后的结肠癌细胞图；
图2为1uM浓度吡嗪酰胺处理后的结肠癌细胞图；
图3为5uM浓度吡嗪酰胺处理后的结肠癌细胞图；
图4为10uM浓度吡嗪酰胺处理后的结肠癌细胞图；
图5为阳性对照组，由10uM浓度nocodazole处理后的结肠癌细胞图；
图6为阴性对照组。
具体实施方式
下面通过附图对本发明技术方案进行详细说明，但是本发明的保护范围不局限于所述实施例。
实施例1：吡嗪酰胺在制备抑制结肠癌细胞转移和扩散的药物中的应用。具体实验方案如下：
1、实验材料
本发明实验阶段采用的是结肠癌细胞(HT29)，阳性对照采用的药物是nocodazole(实验浓度为10uM)。阴性对照组没有经过任何处理。
其中实验采用吡嗪酰胺化合物C5H5N3O，CAS NO.为98-96-4，浓度分别为10uM，5uM，1uM，0.5uM。
2、实验方法
对培养24小时的结肠癌细胞(细胞密度：105)进行药物刺激2小时处理：
(1)将培养皿中状态较好的结肠癌细胞离心，加入适量培养液制成细胞悬浮液；
(2)取细胞悬液计数，按照105的密度加入24孔盘中，放入37℃的CO2培养箱中培养；
(3)24小时后，换液，培养液中加入相应量的吡嗪酰胺化合物配置到实验所需浓度，以及阳性对照药物，然后继续培养2小时；
(4)培养2小时后将细胞于2％的PFA溶液下37℃固定10分钟，再进行荧光染色。
3、实验结果处理
对荧光染色后的结肠癌细胞观察，将观察的图片用Image J处理并计算其细胞面积在加药前后的数据，Ratio是实验组与阴性对照组的比值。结果见表1。
表1 吡嗪酰胺对HT29细胞刺激2小时后的面积大小
经过实验数据证明，吡嗪酰胺在浓度0.5uM下使结肠癌细胞表面积明显增大比例，其中效果较好的为0.5uM～1uM，证明吡嗪酰胺可以在制备抑制结肠癌细胞转移和扩散的药物中的应用。
实施例2：Transwell细胞迁移实验测定吡嗪酰胺对结肠癌细胞迁移能力影响。
将1×105的HT29细胞接种在Transwell小室，底部采用12.0μm膜，继续培养。待细胞贴壁后上层小室加入不同浓度吡嗪酰胺的DMEM完全培养基，为维持渗透压，需加入0.05％-0.2％BSA，下层小室加入含15％FBS的DMEM完全培养基并继续培养24h。用棉签小心擦去膜上表面未发生迁移的细胞，迁移至膜下表面的细胞经2％PFA在37℃固定10分钟后用Giemsa染色。在高倍显微镜下随机选取10个视野，计数迁移细胞。
细胞迁移率＝[实验组细胞数平均值/空白对照组细胞数平均值]×100％。
结果显示吡嗪酰胺化合物对结肠癌细胞HT29有剂量依赖性的抑制迁移的作用，与对照组比较迁移细胞相对百分数显著降低(P＜0.05)。见表2。
表2 Transwell法检测吡嗪酰胺对HT29细胞迁移的影响(n＝3x±s)
实施例3：损伤修复实验检测吡嗪酰胺对肿瘤细胞迁移能力影响。
取对数生长期的HT29细胞，于24孔板中每孔加细胞1×105，待细胞长成单层后，划“一”字形划痕，PBS冲洗，对照组和实验组分别加吡嗪酰胺不同浓度并拍照，培养22h后同一部位再次拍照，测量迁移距离。实验重复3次，细胞迁移率＝[(实验组0h平均值-实验组22h平均值)/(空白对照组0h平均值-空白对照组22h平均值)]×100％。
吡嗪酰胺在不同浓度下(0.5-10μg/ml)对LTEP、A549细胞作用22h后的抑制迁移检测，结果显示吡嗪酰胺对结肠癌细胞HT29有剂量依赖性的抑制迁移的作用。与对照组比较细胞迁移率显著降低(P＜0.05)。见表3。
表3 损伤修复实验检测吡嗪酰胺对结肠癌细胞HT29迁移率影响(n＝3x±s)
结论：吡嗪酰胺能够显著抑制结肠癌细胞的迁移，可以用来治病抗结肠癌转移药物。
如上所述，尽管参照特定的优选实施例已经表示和表述了本发明，但其不得解释为对本发明自身的限制。在不脱离所附权利要求定义的本发明的精神和范围前提下，可对其在形式上和细节上作出各种变化。

Claims (2)

1.吡嗪酰胺在制备抑制肿瘤细胞转移和扩散的药物中的应用；其中肿瘤细胞为结肠癌细胞。
2.根据权利要求1所述的应用，其中吡嗪酰胺的浓度为0.5~1 μM。
CN201510067780.6A 2015-02-09 2015-02-09 吡嗪酰胺在制备抑制肿瘤细胞转移和扩散的药物中的应用 Expired - Fee Related CN104546853B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510067780.6A CN104546853B (zh) 2015-02-09 2015-02-09 吡嗪酰胺在制备抑制肿瘤细胞转移和扩散的药物中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510067780.6A CN104546853B (zh) 2015-02-09 2015-02-09 吡嗪酰胺在制备抑制肿瘤细胞转移和扩散的药物中的应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN104546853A CN104546853A (zh) 2015-04-29
CN104546853B true CN104546853B (zh) 2016-08-17

Family

ID=53064629

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201510067780.6A Expired - Fee Related CN104546853B (zh) 2015-02-09 2015-02-09 吡嗪酰胺在制备抑制肿瘤细胞转移和扩散的药物中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN104546853B (zh)

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Enhancement of cyclophosphamide cytotoxicity in vivo by the benzamide analogue pyrazinamide;M.R.Horsman等;《Br.J.Cancer》;19941231;第69卷;第648-654页 *
Modification of tumour radiation response in vivo by the benzamide analogue pyrazinamide;D.J.Chaplin等;《Br.J.Cancer》;19901231;第62卷;第561-566页 *
吡嗪酰胺的研究进展;李亚飞等;《中国现代应用药学》;20100430;第27卷(第4期);第307-312页 *
吡嗪酰胺研究进展;周立山等;《化学推进剂与高分子材料》;20021231(第4期);第4-6页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN104546853A (zh) 2015-04-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Charoo et al. Ophthalmic delivery of ciprofloxacin hydrochloride from different polymer formulations: in vitro and in vivo studies
CN103316343B (zh) 双胍类药物在延缓或逆转egfr-tki治疗nsclc获得性耐药的药物中的应用
CN104367584A (zh) 多西环素在制备抗肿瘤药物中的应用
CN104523666B (zh) 盐酸溴己新在制备抑制肿瘤细胞转移和扩散的药物中的应用
CN104546863B (zh) 头孢噻吩钠在制备抑制肿瘤细胞转移和扩散的药物中的应用
CN104546853B (zh) 吡嗪酰胺在制备抑制肿瘤细胞转移和扩散的药物中的应用
Li et al. Ginkgolic acid inhibits proliferation and migration of glioblastoma cells by inducing cell cycle arrest and apoptosis
CN105535003A (zh) 金盏花苷e在制备治疗抗肿瘤药物中的用途
CN102366627B (zh) 一种肿瘤化疗药物的蛋白增敏剂
CN104666284B (zh) 枸橼酸托瑞米芬在制备抑制肿瘤细胞转移和扩散的药物中的应用
CN104161765A (zh) 桔梗皂苷d在制备抑制血管生成药物中的应用
CN104606207A (zh) 磺胺甲恶唑在制备抑制肿瘤细胞转移和扩散的药物中的应用
CN107028935A (zh) 汉黄芩素在制备治疗肾细胞癌药物中的应用
CN104546845A (zh) 雷贝拉唑钠在制备抑制肿瘤细胞转移和扩散的药物中的应用
CN102697757A (zh) 对羟基苄叉丙酮在制备预防和/或治疗脑病药物中的应用
CN104887692A (zh) 桔梗皂苷d在制备治疗黑色素瘤转移药物中的用途
CN107693509A (zh) Sb‑fi‑26在制备治疗乳腺癌药物中的应用
CN105434358A (zh) 含牛磺酸的药物组合物及其应用
Sun et al. Application of the myocardial tissue/silicon substrate microelectrode array technology on detecting the effection of Zhigancao decoction medicated serum on cardiac electrophysiology
CN112494490A (zh) 匹莫范色林酒石酸盐在制备治疗胶质瘤药物中的应用
CN104490890A (zh) 6-巯基嘌呤在制备抑制肿瘤细胞转移和扩散的药物中的应用
CN104788457B (zh) 新型抗寄生虫吡嗪异喹啉衍生物
CN104586824A (zh) 甲酚在制备抑制肿瘤细胞转移和扩散的药物中的应用
CN104644636A (zh) 盐酸氟桂利嗪在制备抑制肿瘤细胞转移和扩散的药物中的应用
CN104606200A (zh) 氯噻嗪在制备抑制肿瘤细胞转移和扩散的药物中的应用

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
PE01 Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right

Denomination of invention: Application of pyrazinamide in preparation of medicines for inhibiting tumor cell metastasis and spread

Effective date of registration: 20181116

Granted publication date: 20160817

Pledgee: Bank of Nanjing, Limited by Share Ltd, Nanjing branch

Pledgor: Jiangsu Aogemu Biological Technology Co., Ltd.

Registration number: 2018320000307

PE01 Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right
PC01 Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right

Date of cancellation: 20211208

Granted publication date: 20160817

Pledgee: Bank of Nanjing Limited by Share Ltd. Nanjing branch

Pledgor: JIANGSU AOGEMU BIOLOGICAL TECHNOLOGY Co.,Ltd.

Registration number: 2018320000307

PC01 Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20160817

Termination date: 20210209

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee