CN104546538B - 一种壳聚糖包覆的vc-ve脂质体及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种壳聚糖包覆的VC‑VE脂质体及该脂质体的超临界二氧化碳制备方法。所述壳聚糖包覆的VC‑VE脂质体包含以下组份：卵磷脂、胆固醇、维生素C、维生素E及壳聚糖。本发明的脂质体具有包封率高、稳定性好、脂质体粒径均匀，单分散性高等优点。同时，本发明的超临界二氧化碳法，避免了产品中有机溶剂的残留，从而提高了所述VC‑VE脂质体在化妆品应用中的安全性。
Description
技术领域
本发明涉及药物制剂及化妆品领域，具体而言是一种壳聚糖包覆的VC-VE脂质体及其制备方法和应用。
背景技术
1965年，英国学者Bangham和Standish最早发现将磷脂分散在水中会形成多层囊泡，每一层均为脂质双分子层，囊泡中央和各层之间被水相隔开，并称之为脂质体。脂质体一经发现就引起了生物学家、药学家的兴趣。鉴于其独特的结构特点和组成，脂质体可作为功能性成分的载体起到缓释、稳定有效成分等作用。
维生素C是一种水溶性的维生素，它可合成胶原蛋白和黏多糖，减少自由基对皮肤的损害，延缓衰老，还可抑制皮肤中异常色素的沉积和酪氨酸酶的活性，减少黑色素的形成，被广泛应用在美白和抗氧化护肤化妆品中。而维生素E是一种脂溶性的维生素，它可以钝化过氧化自由基的活性或与脂质过氧化自由基反应，并具有抗衰老、提高机体免疫力等作用。
但是维生素C性质不稳定，在储藏和加工过程中受热、见光易氧化、分解，导致其利用率显著降低，故不能充分发挥效用。其次，维生素C是水溶性的，不易渗透到皮肤角质层，而脂质体恰具有增强渗透性的特点。故为提高其在人体中的吸收利用率，将维生素C包裹在脂质体的内水腔中。
由于目前常见的维生素C或维生素E脂质体存在稳定性欠佳、不易储存、脂质体内活性物质容易泄露等问题。同时。目前制备脂质体的方法主要有薄膜蒸发法，反相蒸发法，冻融法，乙醇注入法等。上述方法存在有机溶剂残留、颗粒单分散性差等缺点。这些不足抑制了维生素C和维生素E在化妆品行业的应用。
因此，我们需要一种新的维生素C或维生素E脂质体及其制备方法，以克服现有技术中的不足，发展维生素C和维生素E在化妆品行业的应用。
发明内容
为解决现有技术的不足，本发明提出一种壳聚糖包覆的VC-VE脂质体，该脂质体具有包封率高、稳定性好、脂质体粒径均匀，单分散性高等优点。同时，本发明还提出一种超临界二氧化碳法，避免了产品中有机溶剂的残留，从而提高了所述VC-VE脂质体在化妆品应用中的安全性。
为实现上述目的，所采取的技术方案是：一种壳聚糖包覆的VC-VE脂质体，包含以下组份：卵磷脂、胆固醇、维生素C、维生素E及壳聚糖；其中，所述VC-VE脂质体以卵磷脂和胆固醇形成的磷脂双分子层为脂质体骨架材料，维生素C包埋于所述脂质体的内水相，维生素E包封于所述磷脂双分子层间，并且，壳聚糖包覆于所述VC-VE脂质体的表面。
在本发明一实施例中，所述各组份之间的质量比关系为：
所述卵磷脂与所述胆固醇的质量比为(4～4.5) : 1，优选地，所述卵磷脂与所述胆固醇的质量比为4 : 1；
所述卵磷脂：维生素C：维生素E的质量比为17 : (7～17) : 1，优选地，所述卵磷脂：维生素C：维生素E的质量比为17 : (7～9) : 1。
在本发明一实施例中，所述卵磷脂选自蛋黄卵磷脂。
本发明还提供一种上述壳聚糖包覆的VC-VE脂质体的制备方法，以超临界二氧化碳流体为介质，经过成膜、孵化和包覆步骤而制得壳聚糖包覆的VC-VE脂质体。
在本发明一实施例中，所述制备方法包括以下步骤：
（1）先将维生素E溶解于甲醇，获得维生素E的甲醇溶液；然后，将卵磷脂、胆固醇和所述维生素E的甲醇溶液混合，再加入氯仿溶液，旋转蒸发成膜并去除有机溶液，然后加入维生素C溶液并搅拌；其中，
所述卵磷脂选自蛋黄卵磷脂；
所述卵磷脂与所述胆固醇的质量比为(4～4.5) : 1，优选地，所述卵磷脂与所述胆固醇的质量比为4 : 1；
所述卵磷脂：维生素C：维生素E的质量比为17 : (7～17) : 1，优选地，所述卵磷脂：维生素C：维生素E的质量比为17 : (7～9) : 1；
所述氯仿与甲醇的体积比为(7～8):3；
（2）使步骤（1）的混合液在50~60℃温度下、在压力为12~16Mpa的二氧化碳气氛下孵化，获得VC-VE脂质体溶液；
（3）将步骤（2）获得的VC-VE脂质体溶液以边滴加边搅拌的方式加入到壳聚糖的醋酸溶液中，室温反应后获得壳聚糖包覆的VC-VE脂质体；其中，
所述VC-VE脂质体溶液与壳聚糖的醋酸溶液的体积比为1:4。
在本发明一实施例中，在步骤（3）中，所述壳聚糖的醋酸溶液中壳聚糖的质量浓度为1～3mg/ml。
在本发明一实施例中，在所述步骤（2）中，孵化时间为1小时；在所述步骤（3）中，室温反应时间为1小时。
在本发明一实施例中，所述壳聚糖的醋酸溶液的pH值为6.5。
在本发明一较佳实施例中，提供一种上述壳聚糖包覆的VC-VE脂质体的制备方法，所述制备方法具体包括：
（1）先将维生素E溶解于甲醇，获得维生素E的甲醇溶液；然后，将蛋黄卵磷脂、胆固醇和所述维生素E的甲醇溶液混合，再加入氯仿溶液，完全溶解后旋转蒸发成膜，并抽真空使有机溶剂完全挥发；然后，再加入维生素C溶液，磁力搅拌使膜脱落，得一混悬液；其中，
所述蛋黄卵磷脂与胆固醇的质量比为4 : 1；
所述蛋黄卵磷脂：维生素C：维生素E的质量比为17 : (7～17) : 1；
所述氯仿与甲醇的体积比为8:3；
（2）使步骤（1）的混悬液在50~60℃温度下、在压力为12~16Mpa的二氧化碳气氛下孵化1小时，获得VC-VE脂质体溶液；
（3）将步骤（2）获得的VC-VE脂质体溶液以边滴加边搅拌的方式加入到壳聚糖的醋酸溶液中，室温反应1小时后获得壳聚糖包覆的VC-VE脂质体；其中，
所述VC-VE脂质体溶液与壳聚糖的醋酸溶液的体积比为1:4；
所述壳聚糖的醋酸溶液的pH值为6.5；
所述壳聚糖的醋酸溶液中壳聚糖的质量浓度为1～3mg/ml。
本发明还提供上述壳聚糖包覆的VC-VE脂质体在化妆品中的应用。
在本发明中应用超临界二氧化碳流体来制备VC-VE脂质体。所述超临界二氧化碳流体是一种环境友好型溶剂，在制备结束后易于与产物分离且不造成环境污染，并具备优良溶剂的特性。在本发明中，超临界二氧化碳法的优势主要表现在以下几个方面：第一，与其他制备方法比较，超临界二氧化碳法制备的脂质体粒径较为均匀，单分散性高；第二，与蒸发、萃取或稀释等操作比较，利用超临界二氧化碳法制备的脂质体有机溶剂残留量低，为脂质体的安全应用提供了可能；第三，在孵化过程中，超临界二氧化碳流体可以溶解磷脂中的小分子杂质，释放二氧化碳时杂质会被带离体系，达到纯化磷脂提高脂质体质量的目的；第四，超临界二氧化碳流体是二氧化碳气体在一定温度下经高压作用形成的，体系中的高压有利于活性分子进入脂质体的内水相，进而提高脂质体的包封率。此外，超临界二氧化碳流体环境可以塑化磷脂分子的结构，这种塑化作用有利于磷脂分子形成热力学更稳定的构象，使双分子层的排列更加均匀，以达到提高脂质体稳定性的目的。
与现有技术相比，本发明的制备方法，利用超临界二氧化碳流体避免了产品中有机溶剂的残留、提高了脂质体中维生素C的包封率等，使获得的VC-VE 脂质体具有脂质体粒径均匀、单分散性高、稳定性高等优点。同时，本发明将具有优异特性的化妆品添加剂壳聚糖包覆于VC-VE脂质体的表面，不仅提高了VC-VE脂质体的稳定性，也拓展了应用本发明的壳聚糖包覆的VC-VE脂质体的化妆品的功能。
附图说明
图1是本发明的壳聚糖包覆的VC-VE脂质体的原子力显微镜图；
图2a是应用本发明的制备方法制得的壳聚糖包覆的VC-VE脂质体的粒径分布；
图2b是应用现有的薄膜分散法制备壳聚糖包覆的VC-VE脂质体的粒径分布。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明做详细的说明，实施例旨在解释而非限定本发明的技术方案。
实施例1
本实施例提供一种壳聚糖包覆的VC-VE脂质体及其制备方法，所述制备方法包括：
（1）先将维生素E溶解于甲醇，获得维生素E的甲醇溶液；然后，将蛋黄卵磷脂、胆固醇和所述维生素E的甲醇溶液混合，再加入氯仿溶液，完全溶解后旋转蒸发成膜，并抽真空使有机溶剂完全挥发；然后，再加入维生素C溶液，磁力搅拌使膜脱落，得一混悬液；其中，
所述蛋黄卵磷脂与胆固醇的质量比为4 : 1；
所述蛋黄卵磷脂：维生素C：维生素E的质量比为17 : 7 : 1；
所述氯仿与甲醇的体积比为7 : 3；
（2）使步骤（1）的混悬液在50℃温度下、在压力为12Mpa的二氧化碳气氛下孵化1小时，获得VC-VE脂质体溶液；
（3）将步骤（2）获得的VC-VE脂质体溶液以边滴加边搅拌的方式加入到壳聚糖的醋酸溶液中，室温反应1小时后获得壳聚糖包覆的VC-VE脂质体；其中，
所述VC-VE脂质体溶液与壳聚糖的醋酸溶液的体积比为1:4；所述壳聚糖的醋酸溶液的pH值为6.5；所述壳聚糖的醋酸溶液中壳聚糖的质量浓度为1mg/ml。
具体来说，本实施例的制备方法如下：
称取50mg蛋黄卵磷脂及12.5mg胆固醇置于圆底烧瓶中，移入3ml VE的甲醇溶液(1mg/ml)，再加入7ml的氯仿溶液，完全溶解后旋转蒸发成膜，温度设定为40℃，抽真空使有机溶剂完全挥发。再加入10ml VC溶液（2mg/ml）于上述圆底烧瓶中，磁力搅拌使膜脱落。将上述混悬液及磁子置于高压反应釜中，并将高压反应釜置于50℃的恒温水浴中，通CO2气体至釜内压力为12MPa。然后关闭进气阀，孵化一个小时。孵化结束后，将恒温水浴温度降至室温，缓慢释放CO2气体至体系压力降至常压，即得VC-VE脂质体溶液。
取1ml脂质体溶液，以滴加的方式加入到4ml壳聚糖的醋酸溶液中(1mg/ml)，壳聚糖的醋酸溶液PH=6.5，边滴加边搅拌，室温下混合一小时后即得壳聚糖包覆的VC-VE脂质体。
实施例2
本实施例提供一种壳聚糖包覆的VC-VE脂质体及其制备方法，所述制备方法包括：
（1）先将维生素E溶解于甲醇，获得维生素E的甲醇溶液；然后，将蛋黄卵磷脂、胆固醇和所述维生素E的甲醇溶液混合，再加入氯仿溶液，完全溶解后旋转蒸发成膜，并抽真空使有机溶剂完全挥发；然后，再加入维生素C溶液，磁力搅拌使膜脱落，得一混悬液；
其中，
所述蛋黄卵磷脂与胆固醇的质量比为4 .2 : 1；
所述蛋黄卵磷脂：维生素C：维生素E的质量比为17 : 7 : 1；
所述氯仿与甲醇的体积比为8 : 3；
（2）使步骤（1）的混悬液在55℃温度下、在压力为14Mpa的二氧化碳气氛下孵化1小时，获得VC-VE脂质体溶液；
（3）将步骤（2）获得的VC-VE脂质体溶液以边滴加边搅拌的方式加入到壳聚糖的醋酸溶液中，室温反应1小时后获得壳聚糖包覆的VC-VE脂质体；其中，
所述VC-VE脂质体溶液与壳聚糖的醋酸溶液的体积比为1:4；所述壳聚糖的醋酸溶液的pH值为6.5；所述壳聚糖的醋酸溶液中壳聚糖的质量浓度为1mg/ml。
具体来说，本实施例的制备方法如下：
称取50mg蛋黄卵磷脂及12mg胆固醇置于圆底烧瓶中，移入3ml VE的甲醇溶液(1mg/ml)，再加入8ml的氯仿溶液，完全溶解后旋转蒸发成膜，温度设定为40℃，抽真空使有机溶剂完全挥发。再加入10ml VC溶液(2mg/ml)于上述圆底烧瓶中，磁力搅拌使膜脱落。将上述混悬液及磁子置于高压反应釜中，并将高压反应釜置于55℃的恒温水浴中，通CO2气体至釜内压力为14MPa。然后关闭进气阀，孵化一个小时。孵化结束后，将恒温水浴温度降至室温，缓慢释放CO2气体至体系压力降至常压，即得VC-VE脂质体溶液。
取1ml脂质体溶液，以滴加的方式加入到4ml壳聚糖的醋酸溶液中(1mg/ml)，壳聚糖的醋酸溶液PH=6.5，边滴加边搅拌，室温下混合一小时后即得壳聚糖包覆的VC-VE脂质体。
实施例3
本实施例提供一种壳聚糖包覆的VC-VE脂质体及其制备方法，所述制备方法包括：
（1）先将维生素E溶解于甲醇，获得维生素E的甲醇溶液；然后，将蛋黄卵磷脂、胆固醇和所述维生素E的甲醇溶液混合，再加入氯仿溶液，完全溶解后旋转蒸发成膜，并抽真空使有机溶剂完全挥发；然后，再加入维生素C溶液，磁力搅拌使膜脱落，得一混悬液；
其中，
所述蛋黄卵磷脂与胆固醇的质量比为4.3 : 1；
所述蛋黄卵磷脂：维生素C：维生素E的质量比为17 : 8 : 1；
所述氯仿与甲醇的体积比为8:3；
（2）使步骤（1）的混悬液在60℃温度下、在压力为16Mpa的二氧化碳气氛下孵化1小时，获得VC-VE脂质体溶液；
（3）将步骤（2）获得的VC-VE脂质体溶液以边滴加边搅拌的方式加入到壳聚糖的醋酸溶液中，室温反应1小时后获得壳聚糖包覆的VC-VE脂质体；其中，
所述VC-VE脂质体溶液与壳聚糖的醋酸溶液的体积比为1:4；所述壳聚糖的醋酸溶液的pH值为6.5；所述壳聚糖的醋酸溶液中壳聚糖的质量浓度为2 mg/ml。
具体来说，本实施例的制备方法如下：
称取50mg蛋黄卵磷脂及11.5mg胆固醇置于圆底烧瓶中，移入3ml VE的甲醇溶液(1mg/ml)，再加入8ml的氯仿溶液，完全溶解后旋转蒸发成膜，温度设定为40℃，抽真空使有机溶剂完全挥发。再加入8ml VC溶液(3mg/ml)于上述圆底烧瓶中，磁力搅拌使膜脱落。将上述混悬液及磁子置于高压反应釜中，并将高压反应釜置于60℃的恒温水浴中，通CO2气体至釜内压力为16MPa。然后关闭进气阀，孵化一个小时。孵化结束后，将恒温水浴温度降至室温，缓慢释放CO2气体至体系压力降至常压，即得VC-VE脂质体溶液。
取1ml脂质体溶液，以滴加的方式加入到4ml壳聚糖的醋酸溶液中(2mg/ml)，壳聚糖的醋酸溶液PH=6.5，边滴加边搅拌，室温下混合一小时后即得壳聚糖包覆的VC-VE脂质体。
实施例4
本实施例提供一种壳聚糖包覆的VC-VE脂质体及其制备方法，所述制备方法包括：
（1）先将维生素E溶解于甲醇，获得维生素E的甲醇溶液；然后，将蛋黄卵磷脂、胆固醇和所述维生素E的甲醇溶液混合，再加入氯仿溶液，完全溶解后旋转蒸发成膜，并抽真空使有机溶剂完全挥发；然后，再加入维生素C溶液，磁力搅拌使膜脱落，得一混悬液；
其中，
所述蛋黄卵磷脂与胆固醇的质量比为4 : 1；
所述蛋黄卵磷脂：维生素C：维生素E的质量比为17 : 9 : 1；
所述氯仿与甲醇的体积比为7:3；
（2）使步骤（1）的混悬液在50℃温度下、在压力为14Mpa的二氧化碳气氛下孵化1小时，获得VC-VE脂质体溶液；
（3）将步骤（2）获得的VC-VE脂质体溶液以边滴加边搅拌的方式加入到壳聚糖的醋酸溶液中，室温反应1小时后获得壳聚糖包覆的VC-VE脂质体；其中，
所述VC-VE脂质体溶液与壳聚糖的醋酸溶液的体积比为1:4；所述壳聚糖的醋酸溶液的pH值为6.5；所述壳聚糖的醋酸溶液中壳聚糖的质量浓度为3mg/ml。
具体来说，本实施例的制备方法如下：
称取50mg蛋黄卵磷脂及12.5mg胆固醇置于圆底烧瓶中，移入3ml VE的甲醇溶液(1mg/ml)，再加入7ml的氯仿溶液，完全溶解后旋转蒸发成膜，温度设定为40℃，抽真空使有机溶剂完全挥发。再加入5ml VC溶液(5mg/ml)于上述圆底烧瓶中，磁力搅拌使膜脱落。将上述混悬液及磁子置于高压反应釜中，并将高压反应釜置于50℃的恒温水浴中，通CO2气体至釜内压力为14MPa。然后关闭进气阀，孵化一个小时。孵化结束后，将恒温水浴温度降至室温，缓慢释放CO2气体至体系压力降至常压，即得VC-VE脂质体溶液。
取1ml脂质体溶液，以滴加的方式加入到4ml壳聚糖的醋酸溶液中(3mg/ml)，壳聚糖的醋酸溶液PH=6.5，边滴加边搅拌，室温下混合一小时后即得壳聚糖包覆的VC-VE脂质体。
申请人对实施例1~4制得的壳聚糖包覆的VC-VE脂质体进行了观测，获得如图1所示的原子力显微镜图。
同时，为了比较，申请人还应用动态光散射法分别测定了实施例1至4获得的壳聚糖包覆的VC-VE脂质体与应用常规制备方法（薄膜分散法）制得的VC-VE脂质体的粒径分布，并分别获得了图2a和图2b。图2a和图2b的纵坐标是指某一粒径范围（横坐标）内光散射信号强度，强度越高说明散射能力越强，通常情况下也就说明该范围内的粒子数量越多。从图2a和2b中可以看出，本发明的壳聚糖包覆的VC-VE脂质体粒径小、分散性好。
同时，为了比较，申请人还分别测定了实施例1至4获得的壳聚糖包覆的VC-VE脂质体中有机溶液残留水平及应用常规方法（薄膜分散法）制得的VC-VE脂质体中有机溶液残留水平，并获得如表1所示的数据。
表1. VC-VE脂质体的有机溶液残留水平对比
| 有机残留量 | 甲醇（ppm） | 氯仿（ppm） |
| 常规方法 | 287.09 | 231.29 |
| 超临界二氧化碳法 | 154.72 | 0.29 |
由表1可以看出，应用本发明的超临界二氧化碳法制得的壳聚糖包覆的VC-VE脂质体中有机溶剂的残留水平明显低于常规方法，这大大地提高了壳聚糖包覆的VC-VE脂质体的安全性，扩展了其在化妆品领域的应用。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干改变、改进和润饰，这些改变、改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (5)
1.一种壳聚糖包覆的VC-VE脂质体的制备方法，其特征在于，所述制备方法以超临界二氧化碳流体为介质，经过成膜、孵化和包覆步骤而制得壳聚糖包覆的VC-VE脂质体，包括：
(1)先将维生素E溶解于甲醇，获得维生素E的甲醇溶液；然后，将卵磷脂、胆固醇和所述维生素E的甲醇溶液混合，再加入氯仿溶液，旋转蒸发成膜并去除有机溶液，然后加入维生素C溶液并搅拌；其中，
所述卵磷脂选自蛋黄卵磷脂；
所述卵磷脂与所述胆固醇的质量比为(4～4.5):1；
所述卵磷脂：维生素C：维生素E的质量比为17:(7～17):1；
所述氯仿与甲醇的体积比为(7～8):3；
(2)使步骤(1)的混合液在50～60℃温度下、在压力为12～16Mpa的二氧化碳气氛下孵化，获得VC-VE脂质体溶液；
(3)将步骤(2)获得的VC-VE脂质体溶液以边滴加边搅拌的方式加入到壳聚糖的醋酸溶液中，室温反应后获得壳聚糖包覆的VC-VE脂质体；其中，所述VC-VE脂质体溶液与壳聚糖的醋酸溶液的体积比为1:4。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述壳聚糖的醋酸溶液中壳聚糖的质量浓度为1～3mg/ml。
3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在所述步骤(2)中，孵化时间为1小时；在所述步骤(3)中，室温反应时间为1小时。
4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述壳聚糖的醋酸溶液的pH值为6.5。
5.一种壳聚糖包覆的VC-VE脂质体的制备方法，其特征在于，所述制备方法具体包括：
(1)先将维生素E溶解于甲醇，获得维生素E的甲醇溶液；然后，将蛋黄卵磷脂、胆固醇和所述维生素E的甲醇溶液混合，再加入氯仿溶液，完全溶解后旋转蒸发成膜，并抽真空使有机溶剂完全挥发；然后，再加入维生素C溶液，磁力搅拌使膜脱落，得一混悬液；其中，
所述蛋黄卵磷脂与胆固醇的质量比为4:1；
所述蛋黄卵磷脂：维生素C：维生素E的质量比为17:(7～9):1；
所述氯仿与甲醇的体积比为(7～8):3；
(2)使步骤(1)的混悬液在50～60℃温度下、在压力为12～16Mpa的二氧化碳气氛下孵化1小时，获得VC-VE脂质体溶液；
(3)将步骤(2)获得的VC-VE脂质体溶液以边滴加边搅拌的方式加入到壳聚糖的醋酸溶液中，室温反应1小时后获得壳聚糖包覆的VC-VE脂质体；其中，
所述VC-VE脂质体溶液与壳聚糖的醋酸溶液的体积比为1:4；
所述壳聚糖的醋酸溶液的pH值为6.5；
所述壳聚糖的醋酸溶液中壳聚糖的质量浓度为1～3mg/ml。
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| Factors effect on the loading efficiency of Vitamin C loaded chitosan-coated nanoliposomes;Nan Liu等;《Colloids and Surfaces B: Biointerfaces》;20101231;第16-19页 * |
| 纳米脂质体超临界二氧化碳制备技术研究;王东;《中国优秀硕士学位论文全文数据库工程技Ⅰ辑》;20091215(第12期);第3、9页 * |
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