CN106726642A - 一种包覆原花青素的多囊泡脂质体的制备方法 - Google Patents

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Abstract

一种包覆原花青素的多囊泡脂质体，由磷脂、中性脂质、胆固醇、有机溶剂、亲水性乳化剂、原花青素、氨基酸、渗透压调节剂和去离子水组成。本发明将磷脂、胆固醇和中性脂质溶于有机溶剂中，作为有机相；将原花青素、氨基酸、渗透压调节剂和去离子水混合作为内水相；均质有机相组分，将内水相组分加入，制得W/O型初乳液；将亲水性乳化剂、氨基酸、渗透压调节剂和去离子水混合，分散作为外水相；均质外水相组分，加入W/O型初乳液组分，均质后进行超声，再搅拌冷却至室温，形成W/O/W型多重乳液；再将多重乳液分散于氨基酸溶液中，通入氮气除去多重乳液中的有机溶剂，即得包覆原花青素的多囊泡脂质体悬浮液。本发明提高了原花青素的稳定性。

Description

一种包覆原花青素的多囊泡脂质体的制备方法
技术领域
本发明属于化妆品领域，涉及一种脂质体，具体来说是一种包覆原花青素的多囊泡脂质体及其制备方法。
背景技术
原花青素为葡萄、蓝薄、松针等植物提取物，为亲水性物质，不仅纯天然、高效、无毒，且具有抗皱、美白、防晒、保湿、抗辐射、养颜等多种功能，是一种新型高效抗氧化剂，是目前为止所发现的最强效的自由基清除剂，具有非常强的体内活性。实验证明，原花青素的抗自由基氧化能力是维生素E的50倍，维生素C的20倍，并且吸收迅速完全。但原花青素易受光、热、pH等因素影响，稳定性差，因而开发具有作用性强、稳定性好、无毒无害的原花青素脂质体类化妆品将具有广阔的前景和应用价值。
多囊脂质体(multivesieular liposomes,MVLs),又称多囊泡脂质体,是一种结构特殊的新型脂质体制剂,其不连续的水性内腔被非同心的类脂以及磷脂膜所分隔,形成许多细微的囊泡。MVLS颗粒呈蜂巢状,粒径大小一般在1-100μm之间。MVLs多囊泡的结构使其具有更多的水溶性物质包封容积,水室体积占颗粒总体积的95%,其水溶性物质的载活性物量比传统的单层脂质体和多层脂质体要高得多；当某个囊泡破裂时,活性物质从破裂囊泡释出,完整的囊泡仍然可以保持原状,因而有很好的缓释效应；脂质层的非同心结构使脂质体的稳定性增加,且活性物的释放时间延长。
对于亲水性物质的包覆需要借助于多囊泡脂质体，将原花青素包覆于内水相，形成一种针对于原花青素的包覆载体结构。以提高原花青素的稳定性、促进渗透性，进而提高原花青素的活性。
目前，关于多囊泡脂质体载体技术的研究已经有很多，多为包覆药物应用于医疗行业，其制备工艺较复杂，但包覆原花青素的多囊泡脂质体并将其应用于化妆品中的尚未见公开。
发明内容
针对现有技术中的上述技术问题，本发明提供了一种包覆原花青素的多囊泡脂质体及其制备方法，所述的这种包覆原花青素的多囊泡脂质体及其制备方法要解决现有技术中的原花青素易受光、热、pH等因素影响，稳定性差的技术问题。
本发明提供了一种包覆原花青素的多囊泡脂质体，按重量百分比计算，其原料组成及含量如下：
磷脂 1.0~20.0%；
中性脂质 1.0~10.0%；
胆固醇 1.0~10.0%；
有机溶剂 5.0~20.0%；
原花青素 0.01~5.0%；
亲水性乳化剂 0.1~12.0%；
氨基酸 0.1~1.0%；
渗透压调节剂 2.0~8.0%；
去离子水 余量；
所述的磷酸为卵磷脂、氢化卵磷脂、大豆磷脂、磷脂酰乙醇胺、二硬脂酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰乙醇胺、或者二棕榈酰磷脂酰甘油中的一种或两种以上所组成的混合物；
所述的中性脂质为三油酸甘油酯、甘油酸、月桂酸甘油酯、三癸酸甘油酯、三辛酸甘油酯、或者维生素E中的一种或两种以上所组成的混合物；
所述的有机溶剂为乙醚、乙醇、丁醇、或者乙酸乙酯中的一种或两种以上所组成的混合物；
所述的亲水性乳化剂为吐温80、聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物、肽类双分子亲油亲水表活、PEG-100硬脂酸酯、甘油硬脂酸酯、花生醇和山嵛醇和花生醇葡糖苷、鲸蜡硬脂醇和鲸蜡硬脂基葡糖苷、脂肪醇聚氧乙烯醚（21EO）、山嵛酸甘油酯、或者鲸蜡硬脂基葡糖苷中的一种或两种以上所组成的混合物；
所述的氨基酸为赖氨酸、天门冬氨酸、丝氨酸、L-精氨酸、丙氨酸、门冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、色氨酸、酪氨酸、脯氨酸、亮氨酸、或者缬氨酸中的一种或两种以上的混合物；
所述的渗透压调节剂为葡萄糖、蔗糖、或者生理盐水中的一种或两种以上的混合物。
本发明还提供了上述的一种包覆原花青素的多囊泡脂质体，按重量百分比计算，其原料组成及含量如下：
磷脂 1.0%；
中性脂质 1.0%；
胆固醇 1.0%；
有机溶剂 5.0%；
原花青素 0.01%；
亲水性乳化剂 0.1%；
氨基酸 0.1%；
渗透压调节剂 2.0%；
去离子水 余量；
所述的磷脂为卵磷脂；
所述的中性油脂为三油酸甘油酯；
所述的有机溶剂为乙醚；
所述的亲水性乳化剂为吐温80；
所述的氨基酸为赖氨酸；
所述的渗透压调节剂为葡萄糖；
本发明还提供了上述的一种包覆原花青素的多囊泡脂质体，按重量百分比计算，其原料组成及含量如下：
磷脂 10.0%；
中性脂质 5.0%；
胆固醇 5.0%；
有机溶剂 12.5%；
原花青素 2.5%；
亲水性乳化剂 6.0%；
氨基酸 0.5%；
渗透压调节剂 5.0%；
去离子水 余量；
所述的磷脂为氢化卵磷脂、或者大豆卵磷脂中的一种或两种组成的混合物；
所述的中性物质为甘油酸；
所述的有机溶剂为乙醇；
所述的亲水性乳化剂为聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物、或者PEG-100硬脂酸酯中的一种或两种所组成的混合物；
所述的氨基酸为天门冬氨酸；
所述的渗透压调节剂为蔗糖；
本发明还提供了上述的一种包覆原花青素的多囊泡脂质体，按重量百分比计算，其原料组成及含量如下：
磷脂 20.0%；
中性脂质 10.0%；
胆固醇 10.0%；
有机溶剂 20.0%；
原花青素 5.0%；
亲水性乳化剂 12.0%；
氨基酸 1.0%；
渗透压调节剂 8.0%；
去离子水 余量；
所述的磷酸为磷脂酰乙醇胺；
所述的中性脂质为三辛酸甘油酯、或者维生素E中的一种或两种所组成的混合物；
所述的有机溶剂为丁醇；
所述的亲水性乳化剂为肽类双分子亲油亲水表活、或者鲸蜡硬脂醇和鲸蜡硬脂基葡糖苷中的一种或两种所组成的混合物；
所述的氨基酸为L-精氨酸；
所述的渗透压调节剂为生理盐水；
本发明还提供了上述的一种包覆原花青素的多囊泡脂质体的制备方法，包括以下步骤：
1)按重量百分比称取磷脂、中性脂质、胆固醇、有机溶剂、亲水性乳化剂、原花青素、氨基酸、渗透压调节剂和去离子水；
2)将磷脂、胆固醇和中性脂质溶于有机溶剂中，作为有机相；
3)配置1~100mmol/L的氨基酸溶液，将原花青素、30~60%的氨基酸溶液、30~60%的渗透压调节剂和30~60%的去离子水的混合溶液，作为内水相；
4)将步骤3）中所得内水相加入有机相中，以均质速度7200～30000rpm均质有机相组分，同时将内水相组分加入其中，均质1～15min，制得W/O型初乳液；
5)将亲水性乳化剂、剩余含量的氨基酸溶液、剩余含量的渗透压调节剂和剩余含量的去离子水的混合溶液，作为外水相；
6)以均质速度7200～30000rpm均质外水相组分，同时将步骤4）制得的W/O型初乳液组分加入其中，均质1～15min后，选择超声功率20%～30%，超声5秒停止5秒，对乳状液超声1～20min，搅拌至体系均一并自然冷却降至室温，制成W/O/W型多重乳液；
7)配置与步骤3)中浓度相同的氨基酸溶液，将得到的多重乳液分散于配置的氨基酸溶液中，其中多重乳液与氨基酸溶液的体积比为5:1～1:5，通入氮气除去多重乳液中的有机溶剂，制得包覆原花青素的多囊泡脂质体悬浮液。
该步骤7)中的氨基酸溶液的作用是影响水溶液的pH，调节油水界面磷脂的表面电荷，提高多囊泡脂质体的静电稳定性，减少多囊泡脂质体在氮吹除去有机溶剂过程中的破乳现象，并不参与多囊泡脂质体的形成过程，因此配方中氨基酸的含量并不包括此部分。
本发明将磷脂、胆固醇和中性脂质溶于有机溶剂中，作为有机相；将原花青素、氨基酸、渗透压调节剂和去离子水混合均匀作为内水相；均质有机相组分，将内水相组分加入，制得W/O型初乳液；将亲水性乳化剂、氨基酸、渗透压调节剂和去离子水混合，分散均匀作为外水相；均质外水相组分，加入之前制备的W/O型初乳液组分，均质后进行超声，再搅拌冷却至室温，形成W/O/W型多重乳液；再将多重乳液分散于氨基酸溶液中，通入氮气除去多重乳液中的有机溶剂，即得包覆原花青素的多囊泡脂质体悬浮液。
本发明采用了适宜的磷脂、中性脂质、胆固醇、有机溶剂、氨基酸和去离子水的复配方案。制备过程中采用两步乳化法，并且进行超声，因此，最终所得的多囊泡脂质体的分散相粒子的粒径较均一，并且其制备工艺简单、能耗低，形成的乳液体系稳定，不仅给原花青素提供了合适的载体，提高了原花青素的稳定性，且其对皮肤温和，吸收快, 兼具功能性和美容性。
本发明和已有技术相比，其技术进步是显著的。本发明的包覆原花青素的多囊泡脂质体为原花青素的包覆提供适合的载体，同时提高原花青素的稳定性、促进渗透性，进而提高原花青素的活性，开发出具有作用性强、稳定性好、无毒无害的含原花青素活性物的化妆品。
附图说明
图1是实施例1所得的包覆原花青素的多囊泡脂质体的显微镜照片
具体实施方式
下面通过具体实施例并结合附图对本发明进一步阐述，但并不限制本发明。
实施例1
一种包覆原花青素的多囊泡脂质体，按重量百分比计算，其原料组成及含量如下：
磷脂 1.0%；
中性脂质 1.0%；
胆固醇 1.0%；
有机溶剂 5.0%；
原花青素 0.01%；
亲水性乳化剂 0.1%；
氨基酸 0.1%；
渗透压调节剂 2.0%；
去离子水 余量；
所述的磷脂为卵磷脂；
所述的中性油脂为三油酸甘油酯；
所述的有机溶剂为乙醚；
所述的亲水性乳化剂为吐温80；
所述的氨基酸为赖氨酸；
所述的渗透压调节剂为葡萄糖；
上述的一种包覆原花青素的多囊泡脂质体的制备方法，具体包括如下步骤：
1)按重量百分比称取磷脂、中性脂质、胆固醇、有机溶剂、亲水性乳化剂、原花青素、氨基酸、渗透压调节剂和去离子水；
2)将磷脂、胆固醇和中性脂质溶于有机溶剂中，作为有机相；
3)配置1~100mmol/L的氨基酸溶液，将原花青素、30~60%的氨基酸溶液、30~60%的渗透压调节剂和30~60%的去离子水的混合溶液，作为内水相；
4)将步骤3）中所得内水相加入有机相中，以均质速度7200～30000rpm均质有机相组分，同时将内水相组分加入其中，均质1～15min，制得W/O型初乳液；
5)将亲水性乳化剂、剩余含量的氨基酸溶液、剩余含量的渗透压调节剂和剩余含量的去离子水的混合溶液，作为外水相；
6)以均质速度7200～30000rpm均质外水相组分，同时将步骤4）制得的W/O型初乳液组分加入其中，均质1～15min后，选择超声功率20%～30%，超声5秒停止5秒，对乳状液超声1～20min，搅拌至体系均一并自然冷却降至室温，制成W/O/W型多重乳液；
7)配置与步骤3)中浓度相同的氨基酸溶液，将得到的多重乳液分散于配置的氨基酸溶液中，其中多重乳液与氨基酸溶液的体积比为5:1～1:5，通入氮气除去多重乳液中的有机溶剂，制得包覆原花青素的多囊泡脂质体悬浮液。
实施例2
一种包覆原花青素的多囊泡脂质体，按重量百分比计算，其原料组成及含量如下：
磷脂 10.0%；
中性脂质 5.0%；
胆固醇 5.0%；
有机溶剂 12.5%；
原花青素 2.5%；
亲水性乳化剂 6.0%；
氨基酸 0.5%；
渗透压调节剂 5.0%；
去离子水 余量；
所述的磷脂为氢化卵磷脂、大豆卵磷脂中的一种或两种组成的混合物；
所述的中性物质为甘油酸；
所述的有机溶剂为乙醇；
所述的亲水性乳化剂为聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物、PEG-100硬脂酸酯中的一种或两种所组成的混合物；
所述的氨基酸为天门冬氨酸；
所述的渗透压调节剂为蔗糖；
上述的一种包覆原花青素的多囊泡脂质体的制备方法，具体包括如下步骤：
1)按重量百分比称取磷脂、中性脂质、胆固醇、有机溶剂、亲水性乳化剂、原花青素、氨基酸、渗透压调节剂和去离子水；
2)将磷脂、胆固醇和中性脂质溶于有机溶剂中，作为有机相；
3)配置1~100mmol/L的氨基酸溶液，将原花青素、30~60%的氨基酸溶液、30~60%的渗透压调节剂和30~60%的去离子水的混合溶液，作为内水相；
4)将步骤3）中所得内水相加入有机相中，以均质速度7200～30000rpm均质有机相组分，同时将内水相组分加入其中，均质1～15min，制得W/O型初乳液；
5)将亲水性乳化剂、剩余含量的氨基酸溶液、剩余含量的渗透压调节剂和剩余含量的去离子水的混合溶液，作为外水相；
6)以均质速度7200～30000rpm均质外水相组分，同时将步骤4）制得的W/O型初乳液组分加入其中，均质1～15min后，选择超声功率20%～30%，超声5秒停止5秒，对乳状液超声1～20min，搅拌至体系均一并自然冷却降至室温，制成W/O/W型多重乳液；
7)配置与步骤3)中浓度相同的氨基酸溶液，将得到的多重乳液分散于配置的氨基酸溶液中，其中多重乳液与氨基酸溶液的体积比为5:1～1:5，通入氮气除去多重乳液中的有机溶剂，制得包覆原花青素的多囊泡脂质体悬浮液。
实施例3
一种包覆原花青素的多囊泡脂质体，按重量百分比计算，其原料组成及含量如下：
磷脂 20.0%；
中性脂质 10.0%；
胆固醇 10.0%；
有机溶剂 20.0%；
原花青素 5.0%；
亲水性乳化剂 12.0%；
氨基酸 1.0%；
渗透压调节剂 8.0%；
去离子水 余量；
所述的磷酸为磷脂酰乙醇胺；
所述的中性脂质为三辛酸甘油酯、维生素E中的一种或两种所组成的混合物；
所述的有机溶剂为丁醇；
所述的亲水性乳化剂为肽类双分子亲油亲水表活、鲸蜡硬脂醇和鲸蜡硬脂基葡糖苷中的一种或两种组成的混合物；
所述的氨基酸为L-精氨酸；
所述的渗透压调节剂为生理盐水；
上述的一种包覆原花青素的多囊泡脂质体的制备方法，具体包括如下步骤：
1)按重量百分比称取磷脂、中性脂质、胆固醇、有机溶剂、亲水性乳化剂、原花青素、氨基酸、渗透压调节剂和去离子水；
2)将磷脂、胆固醇和中性脂质溶于有机溶剂中，作为有机相；
3)配置1~100mmol/L的氨基酸溶液，将原花青素、30~60%的氨基酸溶液、30~60%的渗透压调节剂和30~60%的去离子水的混合溶液，作为内水相；
4)将步骤3）中所得内水相加入有机相中，以均质速度7200～30000rpm均质有机相组分，同时将内水相组分加入其中，均质1～15min，制得W/O型初乳液；
5)将亲水性乳化剂、剩余含量的氨基酸溶液、剩余含量的渗透压调节剂和剩余含量的去离子水的混合溶液，作为外水相；
6)以均质速度7200～30000rpm均质外水相组分，同时将步骤4）制得的W/O型初乳液组分加入其中，均质1～15min后，选择超声功率20%～30%，超声5秒停止5秒，对乳状液超声1～20min，搅拌至体系均一并自然冷却降至室温，制成W/O/W型多重乳液；
7)配置与步骤3)中的浓度相同的氨基酸溶液，将得到的多重乳液分散于配置的氨基酸溶液中，其中多重乳液与氨基酸溶液的体积比为5:1～1:5，通入氮气除去多重乳液中的有机溶剂，制得包覆原花青素的多囊泡脂质体悬浮液。
上述内容仅为本发明构思下的基本说明，而依据本发明的技术方案所作的任何等效变换，均应属于本发明的保护范围。

Claims (5)

1.一种包覆原花青素的多囊泡脂质体，其特征在于按重量百分比计算，其原料组成及含量如下：
磷脂 1.0~20.0%；
中性脂质 1.0~10.0%；
胆固醇 1.0~10.0%；
有机溶剂 5.0~20.0%；
原花青素 0.01~5.0%；
亲水性乳化剂 0.1~12.0%；
氨基酸 0.1~1.0%；
渗透压调节剂 2.0~8.0%；
去离子水 余量；
所述的磷酸为卵磷脂、氢化卵磷脂、大豆磷脂、磷脂酰乙醇胺、二硬脂酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰乙醇胺、或者二棕榈酰磷脂酰甘油中的一种或两种以上所组成的混合物；
所述的中性脂质为三油酸甘油酯、甘油酸、月桂酸甘油酯、三癸酸甘油酯、三辛酸甘油酯、或者维生素E中的一种或两种以上所组成的混合物；
所述的有机溶剂为乙醚、乙醇、丁醇、或者乙酸乙酯中的一种或两种以上所组成的混合物；
所述的亲水性乳化剂为吐温80、聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物、肽类双分子亲油亲水表活、PEG-100硬脂酸酯、甘油硬脂酸酯、花生醇和山嵛醇和花生醇葡糖苷、鲸蜡硬脂醇和鲸蜡硬脂基葡糖苷、脂肪醇聚氧乙烯醚（21EO）、山嵛酸甘油酯、或者鲸蜡硬脂基葡糖苷中的一种或两种以上所组成的混合物；
所述的氨基酸为赖氨酸、天门冬氨酸、丝氨酸、L-精氨酸、丙氨酸、门冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、色氨酸、酪氨酸、脯氨酸、亮氨酸、或者缬氨酸中的一种或两种以上的混合物；
所述的渗透压调节剂为葡萄糖、蔗糖、或者生理盐水中的一种或两种以上的混合物。
2.如权利要求1所述的一种包覆原花青素的多囊泡脂质体，其特征在于按重量百分比计算，其原料组成及含量如下：
磷脂 1.0%；
中性脂质 1.0%；
胆固醇 1.0%；
有机溶剂 5.0%；
原花青素 0.01%；
亲水性乳化剂 0.1%；
氨基酸 0.1%；
渗透压调节剂 2.0%；
去离子水 余量；
所述的磷脂为卵磷脂；
所述的中性油脂为三油酸甘油酯；
所述的有机溶剂为乙醚；
所述的亲水性乳化剂为吐温80；
所述的氨基酸为赖氨酸；
所述的渗透压调节剂为葡萄糖。
3.如权利要求1所述的一种包覆原花青素的多囊泡脂质体，其特征在于按重量百分比计算，其原料组成及含量如下：
磷脂 10.0%；
中性脂质 5.0%；
胆固醇 5.0%；
有机溶剂 12.5%；
原花青素 2.5%；
亲水性乳化剂 6.0%；
氨基酸 0.5%；
渗透压调节剂 5.0%；
去离子水 余量；
所述的磷脂为氢化卵磷脂、或者大豆卵磷脂中的一种或两种组成的混合物；
所述的中性物质为甘油酸；
所述的有机溶剂为乙醇；
所述的亲水性乳化剂为聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物、或者PEG-100硬脂酸酯中的一种或两种所组成的混合物；
所述的氨基酸为天门冬氨酸；
所述的渗透压调节剂为蔗糖。
4.如权利要求1所述的一种包覆原花青素的多囊泡脂质体，其特征在于按重量百分比计算，其原料组成及含量如下：
磷脂 20.0%；
中性脂质 10.0%；
胆固醇 10.0%；
有机溶剂 20.0%；
原花青素 5.0%；
亲水性乳化剂 12.0%；
氨基酸 1.0%；
渗透压调节剂 8.0%；
去离子水 余量；
所述的磷酸为磷脂酰乙醇胺；
所述的中性脂质为三辛酸甘油酯、或者维生素E中的一种或两种所组成的混合物；
所述的有机溶剂为丁醇；
所述的亲水性乳化剂为肽类双分子亲油亲水表活、或者鲸蜡硬脂醇和鲸蜡硬脂基葡糖苷中的一种或两种所组成的混合物；
所述的氨基酸为L-精氨酸；
所述的渗透压调节剂为生理盐水。
5.权利要求书1、2、3或4所述的一种包覆原花青素的多囊泡脂质体的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
1）按重量百分比称取磷脂、中性脂质、胆固醇、有机溶剂、亲水性乳化剂、原花青素、氨基酸、渗透压调节剂和去离子水；
2）将磷脂、胆固醇和中性脂质溶于有机溶剂中，作为有机相；
3）配置1~100mmol/L的 氨基酸溶液，将原花青素、30~60%的氨基酸溶液、30~60%的渗透压调节剂和30~60%的去离子水的混合溶液，作为内水相；
4）将步骤3）中所得内水相加入有机相中，以均质速度7200～30000rpm均质有机相组分，同时将内水相组分加入其中，均质1～15min，制得W/O型初乳液；
5）将亲水性乳化剂、剩余含量的氨基酸、剩余含量的渗透压调节剂和剩余含量的去离子水的混合溶液，作为外水相；
6）以均质速度7200～30000rpm均质外水相组分，同时将步骤4）制得的W/O型初乳液组分加入其中，均质1～15min后，选择超声功率20%～30%，超声5秒停止5秒，对乳状液超声1～20min，搅拌至体系均一并自然冷却降至室温，制成W/O/W型多重乳液；
7）配置与步骤3)中浓度相同得到氨基酸溶液，将得到的多重乳液分散于配置的氨基酸溶液中，其中多重乳液与氨基酸溶液的体积比为5:1～1:5，通入氮气除去多重乳液中的有机溶剂，制得包覆原花青素的多囊泡脂质体悬浮液。
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