CN104497122A - 一种从猪胃粘膜中提取胃膜素的制备方法 - Google Patents

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刘乃山
李静洁
刘翠珍
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Abstract

本发明阐述一种从猪胃粘膜中提取胃膜素的方法。该制备方法包括以下工艺步骤：（1）消化去杂质；（2）沉淀；（3）脱脂干燥。本发明已建立起一套规模化的生产工艺，具有简单、低成本等优点，胃膜素的得率在4.37%以上，具有极大的市场竞争力。

Description

一种从猪胃粘膜中提取胃膜素的制备方法
技术领域
本发明涉及生物医药领域，具体说涉及以猪胃粘膜为原料，提取胃膜素的工艺方法。
技术背景
胃膜素，取义胃粘膜再生素，它能够激活胃粘膜细胞的再生DNA复制链，使胃粘膜快速生成新生组织，此外还有抗胃蛋白酶分解和弱抗酸作用，在胃内形成膜，覆盖溃疡面，减少胃酸的刺激，有利于溃疡面的愈合；临床上用于治疗胃、十二指肠溃疡和胃酸过多症。
自猪胃粘膜提取的胃膜素，为白色至黄白色粉末或黄褐色颗粒，有蛋白胨臭味，稍有咸味，着水涨为黏浆，呈微溶状态，水溶液呈灰色或乳白色，遇弱酸即沉淀，遇热不凝固，在溶液中能被60%以上乙醇或丙酮沉淀。与酸较长时间作用，能分解成各种蛋白质和多糖组分，其多糖组分含葡萄糖醛酸、甘露糖、乙酰氨基葡萄糖和乙酰氨基半乳糖，氨基己糖的总量为5～8%，PI3.3～5。
我国猪胃原料极为丰富，但从猪胃粘膜中提取胃膜素的工艺相对落后，国内主要按胃粘膜消化、三氯甲烷或乙醚脱脂、丙酮沉淀、干燥的工艺路线生产，该工艺耗时长、胃膜素得率低，仅1.5%左右；国外采取pH6.5的NaH3PO4、EDTA、NEM及盐酸胍的缓冲液为提取液，再经高速离心、透析、等密度梯度离心制得胃膜素，该工艺复杂、生产成本高、生产周期长；本工艺采用乙醇提取法，提高胃膜素的收率，生产成本低，通过严格控制提取乙醇浓度、加工时间和温度来提高产品质量。
发明内容：
本发明的目的就是为了生产高质量的胃膜素而又降低生产成本，提供了一种从猪胃粘膜中提取胃膜素的方法，该方法包括如下步骤：
（1）消化：取绞碎胃膜浆，投入耐酸的夹层锅中，每100kg胃膜在搅拌下加入1800ml的盐酸，pH为3到3.5之间，保温40～50℃2～3小时消化至呈半透明的浆液时停止。过滤，除去杂质，以50%氢氧化钠溶液调节pH4～5，得消化液。
（2）乙醇沉淀：上述消化液在不断搅拌下加入80％以上的乙醇，控制乙醇含量在65～70%之间，在0～5℃静置10～18小时，收集沉淀，压干。按湿重加2～3倍60～70%乙醇，充分混合均匀，洗涤1～2次，沉淀压干至可搓碎，在65～75℃温度下干燥，得粗制胃膜素。
（3）脱脂、干燥、粉碎：将得到的粗制胃膜素研磨至颗粒状，移入脱脂器中，脱脂完全后充分挥发去乙醚后在50±2℃下烘干。测试含水量应在3%以下，粉碎过80目筛即胃膜素。
与现有技术相比，本发明的优点和积极效果是：
本工艺改进乙醇提取法，工艺较为简单，生产成本低，且胃膜素的收率得到提高；生产过程中通过严格控制提取乙醇浓度、反应时间和温度来提高胃膜素产品品质，胃膜素的得率在4.37%以上，定性检测结果为正反应，质量标准检测结果为总氮质量分数为7.8%以下，还原性物质质量分数为30.8%以上，符合《化药部颁标准》的规定，具有极大的市场竞争力。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步说明。
实施例1
生产操作：
1、胃膜浆的制备：将猪胃内的杂物清洗干净，然后沿着胃壁慢慢将胃粘膜剥下，充分绞碎制成胃膜浆，置于桶中。
2、消化：取绞碎胃膜浆10kg，投入耐酸的夹层锅中，在搅拌的情况下加入180ml盐酸，pH调至3，40℃静置，在此期间经常检查和校正温度，待消化至呈半透明的浆液时停止。用双层纱布过滤，除去未消化的粗块及其他杂质，以50%氢氧化钠滴定调节pH到4，得消化液。
3、乙醇沉淀：上述消化液在不断搅拌下加入400L95%的乙醇，4℃静置12小时，吸除上清液，收集沉淀，尽量压干。按湿重加2倍65%乙醇，充分混合均匀，洗涤沉淀1次，沉淀压干至可搓碎，在70℃左右干燥，得621g粗制胃膜素。
4、脱脂、干燥、粉碎：将得到的粗制胃膜素研磨至颗粒状，移入脱脂器中，脱脂完全后充分挥发去乙醚后在50 ℃下烘干，粉碎，过80目筛即得439g胃膜素。
5、对得到胃膜素成品进行定性和质量标准检测，定性检测结果为正反应，质量标准检测结果为总氮质量分数为7.6%，还原性物质质量分数为31.2%，符合《化药部颁标准》的规定。
实例2
1、胃膜浆的制备：将猪胃内的杂物清洗干净，然后沿着胃壁慢慢将胃粘膜剥下，充分绞碎制成胃膜浆。
2、消化：取绞碎胃膜浆10kg，投入耐酸的夹层锅中，在搅拌的情况下加入180ml盐酸，pH调至3.5，45℃静置，在此期间经常检查和校正温度，待消化至呈半透明的浆液时停止。用双层纱布过滤，除去未消化的粗块及其他杂质，以50%氢氧化钠滴定调节pH到5，得消化液。
3、乙醇沉淀：上述消化液在不断搅拌下加入400L95%的乙醇，4℃静置16小时，吸除上清液，收集沉淀，尽量压干。按湿重加2倍70%乙醇，充分混合均匀，洗涤沉淀1次，沉淀压干至可搓碎，在65℃左右干燥，得642g粗制胃膜素。
4、脱脂、干燥、粉碎：将得到的粗制胃膜素研磨至颗粒状，移入脱脂器中，脱脂完全后充分挥发去乙醚后在45℃下烘干，粉碎，过80目筛即得437g胃膜素。
5、对得到胃膜素成品进行定性和质量标准检测，定性检测结果为正反应，质量标准检测结果为总氮质量分数为7.8%，还原性物质质量分数为30.8%，符合《化药部颁标准》的规定。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其它形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明技术方案的保护范围。

Claims (10)

1.一种胃膜素的制备方法，其特征在于以下步骤：（1）消化去杂质；（2）沉淀；（3）脱脂干燥。
2.权利要求1所述制备方法，其特征在于，各步骤具体为：
（1）取猪胃粘膜，绞碎制成胃膜浆，加入盐酸消化，PH3～4，保温35～55℃静置至消化为半透明浆液，过滤去杂质，调节pH至弱酸性，得到消化液；
（2）消化液在搅拌状态下加入80％以上的乙醇，控制乙醇含量在60～75%之间，在0～8℃静置10～18小时，沉淀物用乙醇洗涤压干搓碎，在65～75℃温度下干燥得胃膜素粗品；
（3）脱脂、干燥、粉碎：将胃膜素粗品脱脂完全后充分挥发去乙醚后在45～55 ℃下烘干，粉碎过80目筛即胃膜素。
3.根据权利要求书2所述的办法，其特征在于，步骤（1）中，加入盐酸后溶液PH在3～3.5之间。
4.根据权利要求书2所述的办法，其特征在于，步骤（1）中，保温温度控制在40～50℃之间。
5.根据权利要求书2所述的办法，其特征在于，步骤（1）中，静置时间在2～3小时之间，不超过4小时。
6.根据权利要求书2所述的办法，其特征在于，步骤（1）中，得到的消化液pH调节至4～5之间。
7.根据权利要求书2所述的办法，其特征在于，步骤（2）中，所用乙醇要使消化液中醇含量达到65～70%之间。
8.根据权利要求书2所述的办法，其特征在于，步骤（2）中静置温度保持在0～6℃之间。
9.根据权利要求书2所述的办法，其特征在于，步骤（2）中，洗涤用乙醇含量在60～70%之间。
10.根据权利要求书2所述的办法，其特征在于，步骤（3）中， 干燥温度在50±2℃之间。
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