CN104496954A - 功能化纳米硒的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种功能化纳米硒的制备方法，它涉及一种杀菌技术。所述的功能化纳米硒采用槲皮素修饰的功能化纳米硒、氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒和槲皮素-氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒；分别值得槲皮素修饰的功能化纳米硒、氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒和槲皮素-氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒溶液，再加以混合便得到功能化纳米硒。本发明不仅具有杀死细菌及多药耐药细菌的作用，而且具有抑制细菌及多药耐药细菌生长的作用。制备过程产物体系简单，产品可直接保存和使用。

Description

功能化纳米硒的制备方法
技术领域
本发明涉及的是一种杀菌技术，具体涉及一种功能化纳米硒的制备方法。
背景技术
细菌感染的治疗是在生物医学领域中最具挑战性的任务之一。抗生素被开发利用超过70年，一直以来都被认为是最有效的用来治疗细菌感染类型的药物。然而，滥用抗生素会导致越来越多的多重耐药性的细菌。
目前，多重耐药性超级细菌在全球范围内以前所未有的速度出现，并导致公共健康威胁，包括革兰氏阳性耐万古霉素肠球菌(VRE)，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和革兰氏阴性多药耐药(MDR)肺炎克雷伯菌，鲍曼不动杆菌，铜绿假单胞菌，和肠杆菌属，简称为“ESKAPE”。据报道，靶向细胞膜的药物可有效地治疗超级细菌，如阳离子，两亲性聚碳酸酯纳米粒子，周质蛋白的蛋白水解剂，肽聚糖识别蛋白，ATP酶抑制剂等。
近年来，抗菌材料得到了广泛的关注和高度重视，抗菌材料，指自身具有杀死或抑制微生物功能的一类新型材料。抗菌剂是某些细菌、霉菌等微生物高度敏感的化学成分，极少量的抗菌剂添加到普通材料中，即可制成抗菌材料。一般抗菌剂分为三类：天然类、有机类、无机类。天然类抗菌剂作用寿命短、耐热性差应用范围受到限制。有机类抗菌剂毒性较大，较难分解，容易造成二次污染。无机类抗菌剂克服了以上两类抗菌剂的缺点，且不易产生耐药性，目前受到广泛的关注。
纳米药物作为抗菌药物输运载体，由于其缓释作用从而延长药物作用时间，可达到靶向输送药物的目的，进而增强药物效应，减轻不良反应，提高药物稳定性，纳米药物还可采取一些新的给药途径等，因而在医药领域得到广泛应用。
硒具有提高人体免疫力、抗氧化、延缓衰老和防癌、抗癌的作用，功能化纳米硒在生物活性方面具有更多的应用，我们通过对纳米硒进行功能上的修饰，发挥了纳米硒的抗菌活性和抑制细菌生长的作用。
氯化乙酰胆碱是一种非抗生素胺类化合物，具有靶向细胞膜的作用。用于治疗血管痉挛性疾病，如肢端动脉痉挛症、栓塞性脉管炎以及治疗耳鸣、耳聋、耳病性眩晕等的药物。
最近已有研究报道了金纳米粒子通过氯化乙酰胆碱的修饰，具有靶向细胞膜的作用，再接上硫醇类药物可以有效地靶向细菌抑制细菌生长并将其杀死。
至今未发现有关纳米硒用于制备抑制细菌及多药耐药性细菌生长和杀菌药物的报道。
发明内容
针对现有技术上存在的不足，本发明目的是在于提供一种功能化纳米硒的制备方法，不仅具有杀死细菌及多药耐药细菌的作用，而且具有抑制细菌及多药耐药细菌生长的作用。制备过程产物体系简单，产品可直接保存和使用。
为了实现上述目的，本发明是通过如下的技术方案来实现：功能化纳米硒的制备方法，所述的功能化纳米硒采用槲皮素修饰的功能化纳米硒、氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒和槲皮素-氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒；
功能化纳米硒的制备方法，包括以下步骤：(1)将槲皮素溶于甲醇配制成0.5mmol/L的溶液，将其滴加至含硒溶液中混合均匀，加入NaBH4，在室温下搅拌至溶液变成橘红色，4℃下放置12小时，离心分离，弃上清液，洗涤，干燥，得到槲皮素修饰的纳米硒；
(2)将氯化乙酰胆碱溶于水，配制成0.5mmol/L的溶液，将其滴加至含硒溶液中混合均匀，滴加几滴冰醋酸，在冰浴中搅拌10分钟，加入NaBH4，在冰浴中搅拌至溶液变成橘红色，4℃下放置12小时，离心分离，弃上清液，洗涤，干燥，得到氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒；
(3)取上述配制的槲皮素和氯化乙酰胆碱溶液，按一定比例滴加至的含硒溶液中混合均匀，滴加几滴冰醋酸，在冰浴中搅拌10分钟，加入NaBH4，在冰浴中搅拌至溶液变成橘红色，4℃下放置12小时，离心分离，弃上清液，洗涤，干燥，得到槲皮素-氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒。
作为优选，所述的步骤(1)、步骤(2)、步骤(3)中的含硒溶液均为0.5～1mmol/L，NaBH4均为1mL 0.1mol/L的溶液；
本发明的有益效果：1、纳米硒不仅具有杀死细菌及多药耐药细菌的作用，而且具有抑制细菌及多药耐药细菌生长的作用；
2、本发明制备的槲皮素修饰的纳米硒、氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒或槲皮素-氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒，直接以过量的槲皮素或氯化乙酰胆碱与单质纳米硒耦合，制备过程产物体系简单，产品可直接保存和使用；
3、本发明采用的修饰剂提高了功能化纳米硒的靶向性以及在细菌细胞膜中的转运和跨膜吸收，能够增加细菌的药物摄取量，减少外排，从而保证细菌细胞内药物维持在较高水平。
具体实施方式
为使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施方式，进一步阐述本发明。
实施例1：功能化纳米硒的制备方法，所述的功能化纳米硒采用槲皮素修饰的功能化纳米硒、氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒和槲皮素-氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒，其制备方法为：(1)将槲皮素溶于甲醇配制成0.5mmol/L的溶液，将其滴加至0.5～1mmol/L的含硒溶液中混合均匀，加入1mL 0.1mol/L的NaBH4，在室温下搅拌至溶液变成橘红色，4℃下放置12h，离心分离，弃上清液，洗涤，干燥，得到槲皮素修饰的纳米硒；
(2)将氯化乙酰胆碱溶于水，配制成0.5mmol/L的溶液，将其滴加至0.5～1mmol/L的含硒溶液中混合均匀，滴加几滴冰醋酸，在冰浴中搅拌10分钟，加入1mL 0.1mol/L的NaBH4，在冰浴中搅拌至溶液变成橘红色，4℃下放置12小时，离心分离，弃上清液，洗涤，干燥，得到氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒；
(3)取上述配制的槲皮素和氯化乙酰胆碱溶液，按一定比例滴加至0.5～1mmol/L的含硒溶液中混合均匀，滴加几滴冰醋酸，在冰浴中搅拌10分钟，加入1mL 0.1mol/L的NaBH4，在冰浴中搅拌至溶液变成橘红色，4℃下放置12小时，离心分离，弃上清液，洗涤，干燥，得到槲皮素-氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒。
本实施例的功能化纳米硒为活性成分，其具有抑制细菌及多药耐药性细菌生长和杀菌的作用。本实施例制备的槲皮素修饰的纳米硒、氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒或槲皮素-氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒，直接以过量的槲皮素或氯化乙酰胆碱与单质纳米硒耦合，制备过程产物体系简单，产品可直接保存和使用；本实施例采用的修饰剂提高了功能化纳米硒的靶向性以及在细菌细胞膜中的转运和跨膜吸收，能够增加细菌的药物摄取量，减少外排，从而保证细菌细胞内药物维持在较高水平。
以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。

Claims (3)

1.功能化纳米硒，其特征在于，所述的功能化纳米硒采用槲皮素修饰的功能化纳米硒、氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒和槲皮素-氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒。
2.根据权利要求1所述的功能化纳米硒的制备方法，其特征在于，其制备方法为：((1)将槲皮素溶于甲醇配制成0.5mmol/L的溶液，将其滴加至含硒溶液中混合均匀，加入NaBH4，在室温下搅拌至溶液变成橘红色，4℃下放置12小时，离心分离，弃上清液，洗涤，干燥，得到槲皮素修饰的纳米硒；
(2)将氯化乙酰胆碱溶于水，配制成0.5mmol/L的溶液，将其滴加至含硒溶液中混合均匀，滴加几滴冰醋酸，在冰浴中搅拌10分钟，加入NaBH4，在冰浴中搅拌至溶液变成橘红色，4℃下放置12小时，离心分离，弃上清液，洗涤，干燥，得到氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒；
(3)取上述配制的槲皮素和氯化乙酰胆碱溶液，按一定比例滴加至的含硒溶液中混合均匀，滴加几滴冰醋酸，在冰浴中搅拌10分钟，加入NaBH4，在冰浴中搅拌至溶液变成橘红色，4℃下放置12小时，离心分离，弃上清液，洗涤，干燥，得到槲皮素-氯化乙酰胆碱修饰的纳米硒。
3.根据权利要求2所述的功能化纳米硒的制备方法，其特征在于，所述的步骤(1)、步骤(2)、步骤(3)中的含硒溶液均为0.5～1mmol/L，NaBH4均为1mL 0.1mol/L的溶液。
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