CN104450846B

CN104450846B - 一种油茶粕蛋白降血压肽半连续式制备方法

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Publication number: CN104450846B
Application number: CN201410731233.9A
Authority: CN
Inventors: 龚吉军; 黄卫文; 王挥; 唐静; 卢锟
Original assignee: Central South University of Forestry and Technology
Current assignee: Central South University of Forestry and Technology
Priority date: 2014-12-05
Filing date: 2014-12-05
Publication date: 2018-05-01
Anticipated expiration: 2034-12-05
Also published as: CN104450846A

Abstract

一种油茶粕蛋白降血压肽半连续式制备方法，包括以下步骤：(1)配制油茶粕蛋白质量浓度为2%‑6%的油茶粕蛋白溶液；将油茶粕蛋白溶液送入供料槽，利用蠕动泵向反应器中连续补充油茶粕蛋白液；(2)所得油茶粕蛋白溶液依次经过装有蛋白酶I、II、Ⅲ的反应器I、II、Ⅲ，每个反应器区域设pH值感应探头及自动pH值调节器；(3)超滤；(4)超滤所得滤液进入收集槽；(5)脱盐处理；(6)干燥，即得。采用本发明，能实现油茶粕蛋白降血压肽的半连续化制备，且所制备的油茶粕蛋白降血压肽中灰分含量小于1.0%，蛋白回收率为93.0%，ACE抑制率大于94.0%，对原发性高血压大鼠具有显著的降血压效果。

Description

一种油茶粕蛋白降血压肽半连续式制备方法

技术领域

本发明涉及一种饼粕蛋白降血压肽半连续式制备方法，尤其是涉及一种油茶粕蛋白降血压肽半连续式制备方法。

背景技术

高血压(收缩压大于140 mmHg和/或舒张压大于90 mmHg)是一种世界范围的心血管疾病，其与心肌梗死、脑卒中、动脉粥样硬化、冠心病和中风等高度关联，因而对机体健康的危害性极大。在外周血管血压的调控中，ACE(EC 3.4.15.1)扮演着重要的角色，越来越多的证据表明其是心血管疾病诱发的主要风险因子。ACE是一种二肽羧基肽酶，它不但与血压的调控有关，而且还与心血管的功能有关。在肾素-血管紧张素系统中，通过从C端切掉一个二肽，ACE将无活性的Ang-I转变成Ang-II，后者是一种能强烈收缩血管的八肽。而且Ang-II还会导致肾小管产生醛固酮，后者具有潴留钠的作用，也会导致血压的上升。此外，ACE还能分解舒缓激肽，后者是一种具有减压作用的九肽。因此，抑制ACE的活性不但能降低Ang-II的水平，还能提高舒缓激肽和脑啡肽的水平，从而起到降血压的作用。在高血压病的控制中，抑制ACE的活性被认为是一种有效的治疗方式。因此，开发具有ACE抑制活性的药物来控制高血压已成为重要的研发目标。目前，已经有大量的人工合成的ACE抑制剂面世，然而，这些人工合成的抑制剂存在诸多副作用，如干咳、精力显著下降和血管性水肿等。自从在蛇毒液中发现存在ACE抑制肽以来，已经在很多食物蛋白水解液中发现存在ACE抑制肽。

油茶粕蛋白降血压肽是以油茶粕蛋白为原料经复合蛋白酶水解后冷冻干燥所得，该蛋白多肽富含谷氨酸、精氨酸、亮氨酸和天冬氨酸，且氨基酸组成全面，其生物价(BV)和蛋白质功效比(PER)接近鱼蛋白，而且还具有显著的降血压活性，因此，油茶粕降血压肽是一种极具开发利用价值的降血压保健食品功能因子。

食物源ACE抑制肽因其源自天然、无毒的食物蛋白，故安全性高，这是人工合成的ACE抑制剂无法比拟的，目前已成为功能食品和药物研究的一个热点。然而，因降血压肽的分离成本高且含量低，目前还没有实现产业化。

到目前为止，还未见有关油茶粕多肽ACE抑制活性及降血压效应的研究报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是，克服现有降血压肽制备技术中多肽得率低、降血压活性不高，且生产不能实现连续化的缺陷，提供一种油茶粕蛋白降血压肽半连续式制备方法，所得油茶粕蛋白降血压肽活性较高，产率较高。

本发明解决所述技术问题所采用的技术方案是，一种油茶粕蛋白降血压肽半连续式制备方法，包括以下步骤：

(1)采用低变性度的油茶粕蛋白，其氮溶解指数(NSI)达到90.0%-98.0%(优选96.0%-98.0%)，配制油茶粕蛋白质量浓度为2%-6%(Wt/Wt)【优选3%-5%(Wt/Wt)】的油茶粕蛋白溶液；将油茶粕蛋白溶液送入供料槽，利用蠕动泵向反应器中连续补充油茶粕蛋白液；

所述低变性度的油茶粕蛋白的制备方法：采用冷榨法，在55-70℃(优选60-65℃)制油，所得油茶粕采用碱溶酸沉法提取油茶粕蛋白，经低温【35-45℃(优选38-42℃)】真空【0.02-0.04MPa(优选0.025-0.035MPa)】干燥，得低变性度油茶粕蛋白；其变性程度用氮溶解指数(NSI)来表征；

(2)步骤（1）所得油茶粕蛋白溶液依次经过装有蛋白酶I、II、Ⅲ的反应器I、II、Ⅲ，每个反应器区域设pH值感应探头及自动pH值调节器；在装有蛋白酶I【由碱性蛋白酶、风味蛋白酶与胰蛋白酶复合，质量比为3:3-5:1-3(优选3:3-4:2-3)，复合酶加入量相当于油茶粕中蛋白质量0.2%-0.6%(Wt/Wt)，优选0.3%-0.5%(Wt/Wt)，蛋白质含量采用凯氏定氮法测定】的反应器I中，pH值控制在7.0-10.0(优选8.0-9.0)，控制温度在30-60℃(优选40-50℃)，料液搅拌速度为5-20r/min(优选10-15r/min)，反应时间为3-5h(优选3.6-4.0h)；在装有蛋白酶II【中性蛋白酶与木瓜蛋白酶，质量比为2-5:3-6(优选3-4:4-5)，复合酶加入量相当于油茶粕中蛋白质量0.1%-0.5%(Wt/Wt)，优选0.2%-0.4%(Wt/Wt)，蛋白质含量采用凯氏定氮法测定】的反应器II中，pH值控制在6.0-8.0(优选6.5-7.5)，控制温度在40-60℃(优选45-50℃)，料液搅拌速度为5-20r/min(优选8-16r/min)，时间为3-5h(优选3.6-4.0h)；在装有蛋白酶Ⅲ(酸性蛋白酶) 【酶加入量相当于油茶粕中蛋白质的质量0.1%-0.5%(Wt/Wt)，优选0.2%-0.4%(Wt/Wt)，蛋白质含量采用凯氏定氮法测定】的反应器Ⅲ中,反应液pH值控制在1.5-6.5(优选1.8-5.5)，控制温度在25-45℃(优选30-42℃)，料液搅拌速度为10-30r/min(优选15-20r/min)，反应时间为3-5h(优选3.6-4.0h)；

所述反应器I、II、Ⅲ底部均设有出料口，出料口的启闭由定时启闭装置控制，以此控制酶解时间(每隔3-5h自动开启，出完物料后自动关闭)，反应器I、II、Ⅲ依次存在高度差（优选30-50cm），通过3个反应器的高度差实现半连续供料，每个反应器均设有pH值感应探头、pH值自动调节器及蛋白酶添加装置；pH值感应探头和pH值自动调节器使不同反应器种料液pH值始终控制在设定值；

(3)在装有蛋白酶Ⅲ(酸性蛋白酶)的反应器Ⅲ的末端，在线连接2kDa超滤膜组件将酶解产物分离，当运行的超滤膜组件的膜通量降至80%-90%(优选83%-87%)时，自动切换至备份超滤膜组件，并可以启动对原运行超滤膜组件的反冲以恢复其膜通量；

(4)步骤（3）超滤所得滤液进入收集槽，超滤膜截留物循环进入蛋白酶I的反应器I中继续酶解-膜分离耦联反应；

(5) 收集槽中的超滤液通过管道接入平衡透析器中进行脱盐处理，滤出液与清水的体积流量控制在20-60L/h(优选30-50L/h)，脱盐率≥99.0%；

(6)脱盐后的超滤液用管道送至低温真空干燥器中进行干燥，真空度低于0.098MPa，温度为35-50℃(优选38-45℃)，得到所述油茶粕蛋白降血压肽。

采用本发明，能实现油茶粕蛋白降血压肽的半连续化制备，且所制备的油茶粕蛋白降血压肽中灰分含量小于1.0wt%，蛋白回收率为93.0wt%，ACE抑制率大于94.0%，50mg/Kg·Bw的试验剂量可使原发性高血压大鼠(SHR)在30d内极显著降低(P<0.01)。

本发明制备的油茶粕蛋白降血压肽是一种优良的降血压功能性因子，其生产成本低，可综合利用油茶加工的副产物，有利于环保，其经济、社会和生态效益显著。

附图说明

图1为本发明之油茶粕蛋白降血压肽半连续式制备方法流程图。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明做进一步详细说明。

实施例1

本实施例包括以下步骤：

(1)采用低变性度的油茶粕蛋白，其氮溶解指数(NSI)为96.0%，配制油茶粕蛋白质量浓度为3%的油茶粕蛋白溶液；将油茶粕蛋白溶液送入供料槽，利用蠕动泵向反应器中连续补充油茶粕蛋白液；所述低变性度的油茶粕蛋白的制备方法：采用冷榨法，在61℃下制油，所得油茶粕采用碱溶酸沉法提取油茶粕蛋白，经低温(38℃)真空(0.035MPa)干燥，得低变性度油茶粕蛋白；其变性程度用氮溶解指数(NSI)来表征；

(2) 步骤（1）所得油茶粕蛋白溶液依次经过装有蛋白酶I、II、Ⅲ的反应器I、II、Ⅲ，每个反应器区域设pH值感应探头及自动pH值调节器；在装有蛋白酶I【由碱性蛋白酶、风味蛋白酶与胰蛋白酶复合，质量比为3:3:2，蛋白酶I加入量相当于油茶粕中蛋白质量0.30%(Wt/Wt】反应器I中，pH值控制在8.0，控制温度在40℃，料液搅拌速度为10r/min，反应时间3.6h；在装有蛋白酶II【由中性蛋白酶与木瓜蛋白酶复合，质量比3:4，蛋白酶II加入量相当于油茶粕中蛋白质量0.20%(Wt/Wt)】反应器中，pH值控制在6.5，控制温度在45℃，料液搅拌速度为8r/min，反应时间3.6h；在装有蛋白酶Ⅲ【酸性蛋白酶，加入量相当于油茶粕中蛋白质量0.40%】反应器Ⅲ中，反应液pH值控制在4.5，控制温度在30℃，料液搅拌速度为15r/min，反应时间3.6h；

(3)在装有蛋白酶Ⅲ(酸性蛋白酶)的反应器Ⅲ的末端，在线连接2kDa超滤膜组件将酶解产物分离，当运行的超滤膜组件的膜通量降至83%时，自动切换至备份超滤膜组件；

(4) 步骤（3）超滤所得滤液进入收集槽，超滤膜截留物循环进入蛋白酶I的反应器I中继续进行酶解-膜分离耦联反应；

(5) 收集槽中的超滤液通过管道接入平衡透析器中进行脱盐处理，滤出液与清水的体积流量控制在50L/h，脱盐率达到99.1%；

(6)脱盐后的超滤液用管道送至真空低温干燥器中进行干燥，真空度低于0.098MPa，45℃，得到所述油茶粕蛋白降血压肽。

采用本发明，所制备的油茶粕蛋白降血压肽中灰分含量小于1.0wt%，蛋白回收率为95.0wt%，ACE抑制率大于90.0%【对ACE的抑制率按下式计算：ACEI (%)=(A-B)/(A-C)×100%，式中：A为对照(50 μL 0.2 mol/L的硼酸钠缓冲液代替油茶粕降血压肽液作为对照)的OD值，B为反应液(既含ACE又含油茶粕降血压肽液)的OD值，C为反应液(只含油茶粕降血压肽液)的OD值，其他实施例同此】，50mg/Kg·Bw的试验剂量可使原发性高血压大鼠(SHR)在28d内由初始值133.23±1.19mmHg(n=10)降至107.55±1.17 mmHg(n=10)。

【注：上述结果均用±SD (n=10)表示；阴性对照组只灌喂生理盐水，阳性对照组采用50 mg/Kg·BW的蚕蛹降血压肽(常州康和生物技术有限公司)，大鼠油茶粕降血压肽的饲喂剂量为50 mg/Kg·BW】。

实施例2

本实施例包括以下步骤：

(1)采用低变性度的油茶粕蛋白，其氮溶解指数(NSI)达到98.0%，配制油茶粕蛋白质量浓度为3.5%的油茶粕蛋白溶液；将油茶粕蛋白溶液送入供料槽，利用蠕动泵向反应器中连续补充油茶粕蛋白液；所述低变性度的油茶粕蛋白的制备方法：采用冷榨法，在62℃下制油，所得油茶粕采用碱溶酸沉法提取油茶粕蛋白，经低温(39℃)真空(0.032MPa)干燥，得低变性度油茶粕蛋白；其变性程度用氮溶解指数(NSI)来表征；

(2) 步骤（1）所得油茶粕蛋白溶液依次经过装有蛋白酶I、II、Ⅲ的反应器I、II、Ⅲ，每个区域设pH值感应探头及自动pH值调节器；在装有蛋白酶I【由碱性蛋白酶、风味蛋白酶与胰蛋白酶复合，质量比为3:4:3，加入量相当于油茶粕中蛋白质量0.35%(Wt/Wt)】反应器中，pH值控制在8.2，控制温度在42℃，料液搅拌速度为12r/min，反应时间3.7h；在装有蛋白酶II(由中性蛋白酶与木瓜蛋白酶复合，质量比1:1，加入量相当于油茶粕中蛋白质量0.25%)反应器II中，pH值控制在6.8，控制温度在48℃，料液搅拌速度为10r/min，反应时间3.7h；在装有蛋白酶Ⅲ【酸性蛋白酶，加入量相当于油茶粕中蛋白质量0.35%】的反应器Ⅲ中；反应液pH值控制在3.5，控制温度在33℃，料液搅拌速度为16r/min，反应时间3.7h；

(3)在装有蛋白酶Ⅲ(酸性蛋白酶)的反应器Ⅲ的末端，在线连接2kDa超滤膜组件将酶解产物分离，当运行的超滤膜组件的膜通量降至84%时，自动切换至备份超滤膜组件；

(5) 收集槽中的超滤液通过管道接入平衡透析器中进行脱盐处理，滤出液与清水的体积流量控制在45L/h，脱盐率达到99.2%；

(6)脱盐后的超滤液用管道送至真空低温干燥器中进行干燥，真空度低于0.098MPa，42℃，得到所述油茶粕蛋白降血压肽。

采用本发明，所制备的油茶粕蛋白降血压肽中灰分含量小于1.0wt%，蛋白回收率为95.0wt%，ACE抑制率大于90.0%，50mg/Kg·Bw的试验剂量可使原发性高血压大鼠(SHR)在30d内由初始值(133.45±1.29)mmHg(n=10)降至(106.22±1.41)mmHg(n=10)。

实施例3

本实施例包括以下步骤：

(1)采用低变性度的油茶粕蛋白，其氮溶解指数(NSI)达到96.5%，配制油茶粕蛋白质量浓度为4.0%的油茶粕蛋白溶液；将油茶粕蛋白溶液送入供料槽，利用蠕动泵向反应器中连续补充油茶粕蛋白液；所述低变性度的油茶粕蛋白的制备方法：采用冷榨法，在63℃下制油，所得油茶粕采用碱溶酸沉法提取油茶粕蛋白，经低温(40℃)真空(0.030MPa)干燥，得低变性度油茶粕蛋白；其变性程度用氮溶解指数(NSI)来表征；

(2) 步骤（1）所得油茶粕蛋白溶液依次经过装有蛋白酶I、II、Ⅲ的反应器I、II、Ⅲ，每个反应区域设pH值感应探头及自动pH值调节器；在装有蛋白酶I【由碱性蛋白酶、风味蛋白酶与胰蛋白酶复合，质量比为3:4:2，加入量相当于油茶粕中蛋白质量0.40%(Wt/Wt)】反应器I中，pH值控制在8.4，控制温度在44℃，料液搅拌速度为13r/min，反应时间3.8h；在装有蛋白酶II【由中性蛋白酶与木瓜蛋白酶复合，质量比为4:5，加入量相当于油茶粕中蛋白质量0.30%(Wt/Wt)】反应器II中，pH值控制在7.0，控制温度在50℃，料液搅拌速度为14r/min，反应时间3.8h；在装有蛋白酶Ⅲ【酸性蛋白酶，加入量相当于油茶粕中蛋白质量0.30%】的反应器Ⅲ中，反应液pH值控制在3.0，控制温度在37℃，料液搅拌速度为17r/min，反应时间3.8h；

(3)在装有蛋白酶Ⅲ(酸性蛋白酶)的反应器Ⅲ的末端，在线连接2kDa超滤膜组件将酶解产物分离，当运行的超滤膜组件的膜通量降至85%时，自动切换至备份超滤膜组件；

(5) 收集槽中的超滤液通过管道接入平衡透析器中进行脱盐处理，滤出液与清水的体积流量控制在40L/h，脱盐率达到99.3%；

(6)脱盐后的超滤液用管道送至真空低温干燥器中进行干燥，真空度低于0.098MPa，39℃，得到所述油茶粕蛋白降血压肽。

采用本发明，所制备的油茶粕蛋白降血压肽中灰分含量小于1.0 %，蛋白回收率为95.0 %，ACE抑制率大于94.0%，50mg/Kg·Bw的试验剂量可使原发性高血压大鼠(SHR)在28d内由初始值(133.67±1.29)mmHg(n=10)降至(106.32±1.56)mmHg(n=10)。

实施例4

本实施例包括以下步骤：

(1)采用低变性度的油茶粕蛋白，其氮溶解指数(NSI)达到97.5%，配制油茶粕蛋白质量浓度为4.75%的油茶粕蛋白溶液；将油茶粕蛋白溶液送入供料槽，利用蠕动泵向反应器中连续补充油茶粕蛋白液；所述低变性度的油茶粕蛋白的制备方法：采用冷榨法，在64℃下制油，所得油茶粕采用碱溶酸沉法提取油茶粕蛋白，经低温(41℃)真空(0.027MPa)干燥，得低变性度油茶粕蛋白；其变性程度用氮溶解指数(NSI)来表征；

(2) 步骤（1）所得油茶粕蛋白溶液依次经过蛋白酶I、II、Ⅲ反应器，每个区域设pH值感应探头及自动pH值调节器；在装有蛋白酶I【由碱性蛋白酶、风味蛋白酶与胰蛋白酶复合，质量比为1:1:1，加入量相当于油茶粕中蛋白质量0.45％(Wt/Wt)】反应器I中，pH值控制在8.6，控制温度在46℃，料液搅拌速度为14r/min，反应时间3.9h；在装有蛋白酶II【由中性蛋白酶与木瓜蛋白酶复合，质量比为4:5，加入量相当于油茶粕中蛋白质量0.35%(Wt/Wt)】的反应器II中，pH值控制在7.2，控制温度在52℃，料液搅拌速度为15r/min，反应时间3.9h；在装有蛋白酶Ⅲ【酸性蛋白酶，加入量相当于油茶粕中蛋白质量0.25%(Wt/Wt)】的反应器Ⅲ中；反应液pH值控制在2.5，控制温度在39℃，料液搅拌速度为18r/min，反应时间3.9h；

(3)在装有蛋白酶Ⅲ(酸性蛋白酶)的反应器Ⅲ的末端，在线连接2kDa超滤膜组件将酶解产物分离，当运行的超滤膜组件的膜通量降至86%时，自动切换至备份超滤膜组件；

(5) 收集槽中的超滤液通过管道接入平衡透析器中进行脱盐处理，滤出液与清水的体积流量控制在35L/h，脱盐率达到99.4%；

(6)脱盐后的超滤液用管道送至真空低温干燥器中进行干燥，真空度低于0.098MPa，40℃，得到所述油茶粕蛋白降血压肽。

采用本发明，所制备的油茶粕蛋白降血压肽中灰分含量小于1.0%，蛋白回收率为93.0%，ACE抑制率大于95.0%，50mg/Kg·Bw的试验剂量可使原发性高血压大鼠(SHR)在28d内由初始值(132.96±1.45)mmHg(n=10)降至(106.22±1.18 )mmHg(n=10)。

实施例5

本实施例包括以下步骤：

(1)采用低变性度油茶粕蛋白，其氮溶解指数(NSI)达到98.0%，配制油茶粕蛋白质量浓度为5%的油茶粕蛋白溶液；将油茶粕蛋白溶液送入供料槽，利用蠕动泵向反应器中连续补充油茶粕蛋白液；所述低变性度的油茶粕蛋白的制备方法：采用冷榨法，在65℃下制油，所得油茶粕采用碱溶酸沉法提取油茶粕蛋白，经低温(42℃)真空(0.025MPa)干燥，得低变性度油茶粕蛋白；其变性程度用氮溶解指数(NSI)来表征；

(2) 步骤（1）所得油茶粕蛋白溶液依次经过装有蛋白酶I、II、Ⅲ的反应器I、II、Ⅲ，每个反应器区域设pH值感应探头及自动pH值调节器；在蛋白酶I【由碱性蛋白酶、风味蛋白酶与胰蛋白酶复合，质量比为3:4:2，加入量相当于油茶粕中蛋白质量0.50%(Wt/Wt)】的反应器I中，pH值控制在8.8，控制温度在48℃，料液搅拌速度为15r/min，反应时间4.0h；在装有蛋白酶II【由中性蛋白酶与木瓜蛋白酶复合，质量比为3:5，加入量相当于油茶粕中蛋白质量0.40%(Wt/Wt)】的反应器II中，pH值控制在7.5，控制温度在55℃，料液搅拌速度为16r/min，反应时间4.0h；在装有蛋白酶Ⅲ【酸性蛋白酶，加入量相当于油茶粕中蛋白质量0.2%(Wt/Wt)】的反应器Ⅲ中；反应液pH值控制在2.0，控制温度在41℃，料液搅拌速度为20r/min，反应时间4.0h；

(3)在装有蛋白酶Ⅲ(酸性蛋白酶)的反应器Ⅲ的末端，在线连接2kDa超滤膜组件将酶解产物分离，当运行的超滤膜组件的膜通量降至87%时，自动切换至备份超滤膜组件；

(4) 步骤（3）超滤所得滤液进入收集槽，超滤膜截留物循环进入蛋白酶I反应器I中继续进行酶解-膜分离耦联反应；

(5) 收集槽中的超滤液通过管道接入平衡透析器中进行脱盐处理，滤出液与清水的体积流量控制在30L/h，脱盐率达到99.4%；

采用本发明，所制备的油茶粕蛋白降血压肽中灰分含量小于1.0%，蛋白回收率为93.0%，ACE抑制率大于95.0%，50mg/Kg·Bw的试验剂量可使原发性高血压大鼠(SHR)在28d内由初始值(133.66±1.34)mmHg(n=10)降至(106.19±1.55)mmHg(n=10)。

Claims

1.一种油茶粕蛋白降血压肽半连续式制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)采用低变性度的油茶粕蛋白，其氮溶解指数达到90.0%-98.0%，配制油茶粕蛋白质量浓度为2%-6%的油茶粕蛋白溶液；将油茶粕蛋白溶液送入供料槽，利用蠕动泵向反应器中连续补充油茶粕蛋白液；

所述低变性度的油茶粕蛋白的制备方法：采用冷榨法，在55-70℃制油，所得油茶粕采用碱溶酸沉法提取油茶粕蛋白，经35-45℃、真空度0.02-0.04MPa低温真空干燥，得低变性度油茶粕蛋白；

(2)步骤（1）所得油茶粕蛋白溶液依次经过装有蛋白酶I、II、Ⅲ的反应器I、II、Ⅲ，每个反应器区域设pH值感应探头及自动pH值调节器；在装有蛋白酶I的反应器I中，pH值控制在7.0-10.0，控制温度在30-60℃，料液搅拌速度为5-20r/min，反应时间为3-5h；在装有蛋白酶II的反应器II中，pH值控制在6.0-8.0，控制温度在40-60℃，料液搅拌速度为5-20r/min，时间为3-5h；在装有蛋白酶Ⅲ的反应器Ⅲ中,反应液pH值控制在1.5-6.5，控制温度在25-45℃，料液搅拌速度为10-30r/min，反应时间为3-5h；

所述蛋白酶I由碱性蛋白酶、风味蛋白酶与胰蛋白酶复合，碱性蛋白酶、风味蛋白酶与胰蛋白酶的质量比为3:3-5:1-3，复合酶加入量相当于油茶粕中蛋白质量0.2%-0.6%；

所述蛋白酶II由中性蛋白酶与木瓜蛋白酶复合，中性蛋白酶与木瓜蛋白酶质量比为2-5:3-6，复合酶加入量相当于油茶粕中蛋白质量0.1%-0.5%；

所述蛋白酶Ⅲ为酸性蛋白酶，酶加入量相当于油茶粕中蛋白质的质量0.1%-0.5%；

(3)在装有蛋白酶Ⅲ的反应器Ⅲ的末端，在线连接2kDa超滤膜组件将酶解产物分离；

(5) 收集槽中的超滤液通过管道接入平衡透析器中进行脱盐处理，滤出液与清水的体积流量控制在20-60L/h，脱盐率≥99.0%；

(6)脱盐后的超滤液用管道送至低温真空干燥器中进行干燥，真空度低于0.098 MPa，温度为35-50℃，得到所述油茶粕蛋白降血压肽。

2.根据权利要求1所述的油茶粕蛋白降血压肽半连续式制备方法，其特征在于，步骤（1）中，低变性度的油茶粕蛋白，氮溶解指数为96.0%-98.0%，配制油茶粕蛋白质量浓度为3%-5%的油茶粕蛋白溶液。

3.根据权利要求1或2所述的油茶粕蛋白降血压肽半连续式制备方法，其特征在于，步骤（1）中，所述低变性度的油茶粕蛋白的制备方法：采用冷榨法，在60-65℃制油，所得油茶粕采用碱溶酸沉法提取油茶粕蛋白，经38-42℃、真空度0.025-0.035MPa低温真空干燥。

4.根据权利要求1或2所述的油茶粕蛋白降血压肽半连续式制备方法，其特征在于，步骤（2）中，所述蛋白酶I中，碱性蛋白酶、风味蛋白酶与胰蛋白酶的质量比为3:3-4:2-3。

5.根据权利要求1或2所述的油茶粕蛋白降血压肽半连续式制备方法，其特征在于，步骤（2）中，所述蛋白酶II中，中性蛋白酶与木瓜蛋白酶质量比为3-4:4-5。

6.根据权利要求1或2所述的油茶粕蛋白降血压肽半连续式制备方法，其特征在于，步骤（2）中，所述蛋白酶I的加入量为相当于油茶粕蛋白质量的0.3%-0.5%。

7.根据权利要求1或2所述的油茶粕蛋白降血压肽半连续式制备方法，其特征在于，步骤（2）中，所述蛋白酶II的加入量为相当于油茶粕蛋白质量的0.2%-0.4%。

8.根据权利要求1或2所述的油茶粕蛋白降血压肽半连续式制备方法，其特征在于，步骤（2）中，所述蛋白酶Ⅲ的加入量为相当于油茶粕蛋白质的质量0.2%-0.4%。

9.根据权利要求1或2所述的油茶粕蛋白降血压肽半连续式制备方法，其特征在于，步骤（2）中，所述反应器I、II、Ⅲ底部均设有出料口，出料口的启闭由定时启闭装置控制，以控制酶解时间，反应器I、II、Ⅲ依次存在高度差30-50cm，通过3个反应器的高度差实现半连续供料，每个反应器均设有pH值感应探头、pH值自动调节器及蛋白酶添加装置；pH值感应探头和pH值自动调节器使不同反应器中料液pH值始终控制在设定值。