CN104434706A - 一种用于延缓皮肤衰老的地榆提取物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用于延缓皮肤衰老的地榆提取物及其制备方法，该地榆提取物制备方法如下：将地榆根粉碎，粉末放入超声波提取设备，以乙醇-水溶液为提取溶剂，进行超声波提取，过滤，回收滤液中乙醇，用大孔吸附树脂进行分离纯化，用乙醇-水溶液洗脱，回收洗脱液中乙醇，浓缩，干燥，得到地榆提取物。实验表明该地榆提取物能有效抑制弹性蛋白酶活性以及清除自由基，可应用于延缓皮肤衰老的化妆品中。

Description

一种用于延缓皮肤衰老的地榆提取物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种植物提取物的制备方法及用途，特别是涉及一种地榆提取物的制备方法及该提取物在延缓皮肤衰老化妆品中的用途。

背景技术

弹性蛋白富含甘氨酸、脯氨酸，是皮肤弹性纤维的主要组成成分，弹性蛋白分子通过赖氨酸残基相互交联，通过交联网络的构型变化产生弹性，使皮肤在被戳或挤压后恢复到原本形状。

弹性蛋白酶是水解酶类的一种，对丙氨酸、甘氨酸、异亮氨酸、亮氨酸等含羧基的多肽键起催化水解的作用，能降解结缔组织中的弹性蛋白、胶原蛋白等多种蛋白质，使皮肤失去弹性，变得松散。

超声波提取方法是一种采用超声波辅助溶剂进行提取的方法，提取时间比传统方法如浸提法、回流提取法大为缩短，且不需要太高的提取温度，对遇热不稳定、易氧化的成分具有一定的保护作用，同时节能作用突出。

地榆是蔷薇科植物地榆Sanguisorba officinalis L.或长叶地榆Sanguisorba officinalis L. var. longifolia (Bert.) Yü et Li的根，气微，味微苦涩。根据文献报道，地榆主要有杀菌、消炎、镇痛、提升白细胞等作用。地榆提取物在延缓皮肤衰老方面的应用，文献报道的主要是地榆回流提取物清除自由基的能力。地榆超声提取物的大孔树脂分离纯化提取物通过抑制弹性蛋白酶活性和清除自由基来共同延缓皮肤衰老的应用未见报道。

发明内容

本发明的一个目的在于提供一种地榆提取物的制备方法。

本发明的另一个目的在于提供上述地榆提取物在延缓皮肤衰老化妆品中的用途。

为实现上述第一个目的，本发明所采取的技术方案是提供一种地榆提取物的制备方法，包含如下步骤：

1）取一定量的地榆根，粉碎，以8~20倍体积分数为40~80%的乙醇-水溶液为提取溶剂，在20~50℃下用200W~1000W超声波提取20~60分钟，提取液过滤并回收乙醇，浓缩得浸膏；

2）浸膏用水稀释，用大孔吸附树脂进行分离纯化，用3~6倍树脂床体积的体积分数为30%~70%的乙醇-水溶液洗脱，洗脱液回收乙醇，浓缩剩余水液，经真空干燥或冷冻干燥，得到地榆提取物。

    为实现上述第二个目的，本发明所采取的另一技术方案是提供上述地榆提取物在延缓皮肤衰老化妆品中的用途，用于抑制弹性蛋白酶的活性和清除自由基。

所述地榆提取物在延缓皮肤衰老化妆品中的用量为化妆品总质量的0.01~5%。

所述延缓皮肤衰老化妆品的剂型为膏霜、乳液、凝胶、水剂或面膜。

综上，本发明提供了一种用于延缓皮肤衰老的地榆提取物及其制备方法，通过本发明制备方法获得的地榆提取物，能抑制弹性蛋白酶的活性及清除自由基，可用于延缓皮肤衰老的化妆品中，发挥延缓皮肤衰老的功效。

具体实施方式

实施例1：

    地榆提取物的制备，步骤如下：

1）取一定量的地榆根，粉碎，以14倍体积分数为60%的乙醇-水溶液为提取溶剂，在25℃下用300W超声波提取30分钟，提取液过滤并回收乙醇，浓缩得浸膏；

2）浸膏用水稀释，用大孔吸附树脂进行分离纯化，用4倍树脂床体积的体积分数为50%的乙醇-水溶液洗脱，洗脱液回收乙醇，浓缩剩余水液，经真空干燥或冷冻干燥，得到地榆提取物。

将由步骤2）得到的地榆提取物用去离子水配制成地榆提取液，用于弹性蛋白酶活性抑制实验。在具塞试管中，依次加入刚果红-弹性蛋白、硼酸盐缓冲液，37℃水浴中振荡10min，加入预热至37℃的弹性蛋白酶溶液及地榆提取液，混匀，37℃水浴中准确振荡20min，迅速加入磷酸盐缓冲液，离心20min，取上清液与等体积的硼酸盐/磷酸盐（1：1）缓冲液混匀，于495nm测定吸光度A_x，以去离子水代替地榆提取液，测定空白对照吸光度A₀，以去离子水代替弹性蛋白酶溶液，测定地榆提取液本底吸光度A_x0。

地榆提取液对弹性蛋白酶活性的抑制率可根据下面的公式计算：抑制率(%)=(A₀-(A_x-A _x0))/A₀×100

表1 不同浓度地榆提取液对弹性蛋白酶活性的抑制率

地榆提取液浓度mg/ml	抑制率%
		0.01	27.9
0.05	41.3
		0.25	53.0

 由表1可见，由步骤2）得到的地榆提取物对弹性蛋白酶活性有一定的抑制作用。

将由步骤2）得到的地榆提取物用去离子水配制成地榆提取液，用于DPPH自由基清除实验。在具塞试管中，加入等体积的DPPH溶液与地榆提取液，混匀，静置30min，于517nm测定吸光度A_x，以去离子水代替地榆提取液，测定空白对照吸光度A₀，以无水乙醇代替DPPH溶液，测定地榆提取液本底吸光度A_x0。

地榆提取液对DPPH自由基的清除率可根据下面的公式计算：清除率(%)=(A₀-(A_x-A _x0))/A₀×100

表2 不同浓度地榆提取液对DPPH自由基的清除率

地榆提取液浓度mg/ml	自由基清除率%
		0.01	28.1
0.02	61.8
		0.05	83.1

 由表2可知，由步骤2）得到的地榆提取物对DPPH自由基有一定的清除作用。

将由步骤2）得到的地榆提取物用去离子水配制成地榆提取液，用于羟自由基清除实验。在具塞试管中，依次加入FeSO₄溶液、地榆提取液、H₂O₂溶液及水杨酸溶液，37℃水浴中保温30min，于510nm测定吸光度A_x，以去离子水代替地榆提取液，测定空白对照吸光度A₀，以去离子水代替H₂O₂溶液，测定地榆提取液本底吸光度A_x0。

地榆提取液对羟自由基的清除率可根据下面的公式计算：清除率(%)=(A₀-(A_x-A _x0))/A₀×100

表3 不同浓度地榆提取液对羟自由基的清除率

地榆提取液浓度mg/ml	自由基清除率%
		0.01	30.0
0.05	58.8
		0.10	71.3

由表3可知，由步骤2）得到的地榆提取物对羟自由基有一定的清除作用。

实施例2：

地榆提取物的制备，步骤如下：

1）取一定量的地榆根，粉碎，以20倍体积分数为40%的乙醇-水溶液为提取溶剂，在50℃下用600W超声波提取20分钟，提取液过滤并回收乙醇，浓缩得浸膏；

2）浸膏用水稀释，用大孔吸附树脂进行分离纯化，用3倍树脂床体积的体积分数为60%的乙醇-水溶液洗脱，洗脱液回收乙醇，浓缩剩余水液，经真空干燥或冷冻干燥，得到地榆提取物。

实施例3：

地榆提取物的制备，步骤如下：

1）取一定量的地榆根，粉碎，以10倍体积分数为80%的乙醇-水溶液为提取溶剂，在35℃下用800W超声波提取60分钟，提取液过滤并回收乙醇，浓缩得浸膏；

2）浸膏用水稀释，用大孔吸附树脂进行分离纯化，用5倍树脂床体积的体积分数为40%的乙醇-水溶液洗脱，洗脱液回收乙醇，浓缩剩余水液，经真空干燥或冷冻干燥，得到地榆提取物。

实施例4：

地榆提取物的制备，步骤如下：

1）取一定量的地榆根，粉碎，以12倍体积分数为70%的乙醇-水溶液为提取溶剂，在30℃下用500W超声波提取40分钟，提取液过滤并回收乙醇，浓缩得浸膏；

2）浸膏用水稀释，用大孔吸附树脂进行分离纯化，用4倍树脂床体积的体积分数为70%的乙醇-水溶液洗脱，洗脱液回收乙醇，浓缩剩余水液，经真空干燥或冷冻干燥，得到地榆提取物。

实施例5：

地榆提取物的制备，步骤如下：

1）取一定量的地榆根，粉碎，以16倍体积分数为50%的乙醇-水溶液为提取溶剂，在40℃下用400W超声波提取50分钟，提取液过滤并回收乙醇，浓缩得浸膏；

2）浸膏用水稀释，用大孔吸附树脂进行分离纯化，用6倍树脂床体积的体积分数为30%的乙醇-水溶液洗脱，洗脱液回收乙醇，浓缩剩余水液，经真空干燥或冷冻干燥，得到地榆提取物。

以上列举的实施例是对本发明的说明，不代表本发明的保护范围，任何不违背本发明实质精神对本发明进行的改进都属于本发明要求的保护范围。

Claims (6)

1.一种用于延缓皮肤衰老的地榆提取物的制备方法，其特征在于：将地榆根粉碎成粉末，以8~20倍体积分数为40~80%的乙醇-水溶液为提取溶剂，在20~50℃下用功率200W~1000W超声波提取20~60分钟，提取液过滤，回收滤液中乙醇，用大孔吸附树脂进行分离纯化，用3~6倍树脂床体积的体积分数为30%~70%的乙醇-水溶液洗脱，回收洗脱液中乙醇，浓缩剩余水液，经真空干燥或冷冻干燥除去全部溶剂，得到地榆提取物。

2.根据权利要求1所述的地榆提取物的制备方法，其特征在于所述的地榆根为蔷薇科植物地榆或长叶地榆的干燥根。

3.根据权利要求1所述的地榆提取物在延缓皮肤衰老的化妆品中的应用。

4.根据权利要求3所述的地榆提取物在延缓皮肤衰老的化妆品中的应用，其特征在于所述地榆提取物包含抑制弹性蛋白酶活性和清除自由基的成分。

5.根据权利要求3所述的地榆提取物在延缓皮肤衰老的化妆品中的应用，其特征在于所述化妆品的剂型为膏霜、乳液、凝胶、水剂或面膜。

6.根据权利要求3所述的地榆提取物在延缓皮肤衰老的化妆品中的应用，其特征在于所述的地榆提取物在化妆品中的用量为化妆品总质量的0.01~5%。