CN104431372A - 一种乳化仔猪颗粒料及其制备方法 - Google Patents

一种乳化仔猪颗粒料及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种乳化仔猪颗粒料并公开了该颗粒料的制备方法,属于饲料及饲料加工技术领域。所述乳化仔猪颗粒料,主要包括以下重量份数的原料:玉米40~50、进口肉骨粉1~3、大麦5~10、小麦麸5~10、米糠5~10、面粉5~10、豆粕10~16、膨化大豆1~5、棕榈粕2~5、紫花苜蓿提取物1~3、大豆油0.5~1、Bredol6830.015、水1、65%赖氨酸硫酸盐0.2~0.7、DL-蛋氨酸0.01~0.03、复合酶0.03~0.05、复合维生素0.3~0.4、复合微量元素0.2~0.6、复合菌剂1~5。本发明产品配方科学,可改善饲料硬度,减少幼畜腹泻,提高动物生产性能。

Description

一种乳化仔猪颗粒料及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种乳化仔猪颗粒料并涉及该乳化仔猪颗粒料的制备方法,属于饲料及饲料加工技术领域。
背景技术
随着畜牧业的高速发展,在追求高效养殖的过程中,为加快畜禽的生长速度,降低料肉比,饲料由原来的粉状为主发展为今天的以颗粒状为主,同时饲料中使用油脂的情况越来越普遍。通过改变饲料的物理状态与合理的使用油脂,畜禽的生产性能大大提高,生长速度加快,料肉比降低。
申请号201110246174.2的中国发明《断奶仔猪配合饲料及其制备方法》公开了本发明提供了一种断奶仔猪配合饲料及其制备方法,由以下原料按重量百分比配比组成:玉米40-48%,豆粕8-12%,碎米8-12%,膨化大豆10-15%,大豆油2-5%,血浆蛋白粉1-3%,乳清粉5-10%,国产鱼粉2-5%,甲酸钙0.5-0.8%,磷酸二氢钙1.0-1.5%,食盐0.1-0.3%,酸化剂0.2-0.4%,乳化剂0.05-0.15%,微生态0.02-0.05%,氯化胆碱0.03-0.07%,纳米氧化锌0.04-0.28%。所有原料都经过微粉碎,100%经过30目标准筛。可以解决传统断奶仔猪料拉稀严重、长势差、皮毛差的问题。
申请号201210300923.X的中国发明《一种断奶仔猪过渡配合饲料及其制备方法》公开了一种断奶仔猪过渡配合饲料,其含有下述重量份的组分:玉米37-46;功能性能量、蛋白饲料0-19;膨化大豆5-10;脱皮豆粕7.5-8;乳糖8-12;进口鱼粉2-3.5;浓缩大豆0-2;粉0.5-0.6;磷酸氢钙0.71-1.8;预混料0.9-1.1;赖氨酸0.26-0.5;蛋氨酸0.17-0.25;食盐0.2-0.3;氧化锌0.24-0.26;苏氨酸0.06-0.15;色氨酸0.02-0.05;甜味剂0.01-0.02;丁酸钠0.1-0.12;乳化剂0-0.4;蔗糖0-2.5;复合微生物菌剂0.1-0.12;香味剂0-0.02;酸化剂0-0.2;豆油0-2;乳清粉0-8;免疫增强剂0-15;血浆蛋白粉0-3。其中,所述复合微生物菌剂包括乳酸菌中的一种或几种。本发明的断奶过渡饲料是保证仔猪断奶后持续生长的关键之一,本断奶过渡饲料添加有益微生物,可以降低仔猪断奶后腹泻的发生,且易于消化,仔猪喜食。
申请号201310112185.0的中国发明《一种断奶仔猪配合饲料及其制备方法》公开了一种断奶仔猪配合饲料及其制备方法,配合饲料包括玉米粉、小米、麦麸、豆饼、煮熟的鸡蛋黄、血浆蛋白粉、鱼粉、白糖、食盐、混合油和中草药添加剂;其制备方法为:(1)破碎步骤;(2)配料步骤;(3)制粒步骤。本发明的有益效果是:降低断奶仔猪应激性,降低死亡率,提高仔猪个体的抗病能力,能够满足仔猪断奶初期的营养需求,适口性好、消化率高,提高了仔猪的生产性能。
但在颗粒饲料的加工过程中,除了机器参数和原料配方对颗粒饲料的品质影响极大以外,油脂的添加方式也对颗粒饲料的品质有着重要的影响。添加油脂可以改变饲料的物理性质,如改善饲料外观、降低饲料粉尘以及降低粉料日粮的分级等,但是油脂的乳化不彻底,没有乳化的油脂常常导致畜禽的腹泻,尤其在幼龄畜禽中使用油脂的效果不明显。许多研究表明,仔猪日粮中添加油脂对于仔猪的生长性能影响不显著。其主要原因是幼龄动物消化道发育不完全,胆汁酸盐和脂肪酶分泌不足,难以消化吸收饲料中的油脂,造成饲料中油脂浪费,被幼龄畜禽排出体外。而另一方面,仔猪断奶阶段对能量的要求显著高于生长猪,所以仔猪日粮中的油脂如果能被充分吸收,仔猪断奶期间的增重也将大大提高。现有的颗粒饲料成品大多回粉多,水分低,硬度大,影响生产效率,导致仔猪采食量低,从而影响仔猪生产性能,最终影响养殖场的经济效益。这些都是本行业亟待解决的问题。
发明内容
为解决上述问题,本发明以仔猪为研究对象,通过在产品中添加Bredol683和水,改善了颗粒料的乳化性能及消化吸收性。首先将Bredol683和水与配方中使用的液体油脂在自动混配均质添加设备中自动搅拌混匀后,再通过自动混配均质添加设备喷洒到混合机中,与混合机中的物料混合均匀。
本发明提供的乳化仔猪颗粒料,包括以下重量份数的原料:玉米40~50、进口肉骨粉1~3、大麦5~10、小麦麸5~10、米糠5~10、面粉5~10、豆粕10~16、膨化大豆1~5、棕榈粕2~5、紫花苜蓿提取物1~3、大豆油0.5~1、Bredol6830.015、水1、磷酸氢钙0.8~1.2、石粉0.3~0.7、食盐0.3~0.5、65%赖氨酸硫酸盐0.2~0.7、DL-蛋氨酸0.01~0.03、复合酶0.03~0.05、复合维生素0.3~0.4、复合微量元素0.2~0.6、复合菌剂1~5;
所述Bredol683,为瑞典阿克苏诺贝尔表面化学有限公司生产的乳化剂,有效成分为聚乙二醇甘油蓖麻酸脂,有效成分含量高于97%;
所述紫花苜蓿提取物可以由如下方法制备:紫花苜蓿去杂切分后,加入5-10倍的护色液打浆,再加入苜蓿重量2倍的水混匀,之后加入苜蓿重量0.2-0.4%的混合酶制剂进行酶解,用乳酸调节pH值为4.5-5.5,温度50-60℃,酶解2-4h,将酶解液置于配料缸中,边缓慢搅拌边用探头式超声提取仪在电流强度0.6A/25W-1.5A/275W条件下进行超声提取20-30min,得提取液,浓缩、干燥、粉碎即得紫花苜蓿提取物;
所述护色液为pH值6.5-6.8的0.1%的抗坏血酸水溶液;
所述混合酶制剂由如下重量份数的原料组成:纤维素酶1-2、蛋白酶1-3、α-淀粉酶1-2;
所述复合菌剂的制备方法为:长双歧杆菌和植物乳杆菌混合固态发酵培养后,干燥得到。
所述固态发酵培养方法为:以固态发酵培养基质量计,首先接种长双歧杆菌菌液,接种量为6.0%,控制发酵温度35-37℃,湿度70-80%,培养12-24h,再接种植物乳杆菌菌液,接种量为1.0-3.0%,35-37℃,培养12-24h。添加植物乳杆菌后,混合发酵初期,pH呈下降趋势,pH最小值为5.0-6.0,在发酵的后期,pH呈上升趋势,发酵结束,测定其pH为6.5-7.5。发酵结束后经流化床干燥获得复合菌剂。
所述固态发酵培养基质量比例组成为:豆粕:麸皮:玉米粉=10:6:1,水份含量控制在60-70%。
利用长双歧杆菌与植物乳杆菌,以豆粕、麸皮、玉米粉为主要原料的培养基,混合固态发酵,发酵结束,游离氨基态氮含量可达到1036.8umol/g,较发酵前提高约12倍。
优选的,所述植物乳杆菌为(Lactobacillusplantarum)tlj-2014,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC NO.9405;
优选的,所述长双歧杆菌CICC6068购自中国工业微生物菌种保藏管理中心。
所述长双歧杆菌菌液由如下方法制备:长双歧杆菌在种子培养基中活化培养三次,以种子培养基质量计:第一次,接种量3%,37℃厌氧培养36h后,将经过第一次活化的菌种按4%接种量接种于种子培养基,37℃厌氧养24h,再将经过第二次活化的菌种按5%接种量接种于种子培养基,37℃厌氧培养12h,得到长双歧杆菌菌液;
所述种子培养基组成为:大豆蛋白胨5.0g,胰蛋白胨5.0g,脱脂牛乳40mL,葡萄糖10.0g,低聚木糖10.0g,中药提取物2.0g,乳酸钙0.5g,Nacl0.2g,软化水补足1000mL,pH6.8。
所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)tlj-2014,于2014年7月2日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC,地址为:北京市朝阳区北辰西路1号院3号.中国科学院微生物研究所.邮编:100101),保藏编号为CGMCC NO.9405,分类命名为:植物乳杆菌Lactobacillus plantarum。
所述植物乳杆菌菌株特点如下:在显微镜下观察,该菌株为短杆状,革兰氏染色呈阳性,无鞭毛,不产芽孢;在固体培养基上,该菌菌落为白色,表面光滑,致密,形态为圆形,边缘较整齐。
理化特征为:过氧化氢酶(-),明胶液化(-),吲哚实验(+),运动性(-),发酵产气(-),亚硝酸盐还原(-),发酵产气(-),产硫化氢气体(-),pH4.0 MRS培养基中生长(+)。
所述植物乳杆菌采用下述流程进行选育:
原始出发菌种→试管活化→硫酸二乙酯(DES)诱变→亚硝基胍(NTG)诱变→等离子体诱变→平板初筛→摇瓶复筛→传代稳定性试验。
所述出发菌株在MRS葡萄糖培养基中,其乳酸的生产速率为1.5g/L/d,当培养基pH为3.5时几乎停止生长,对亚硝酸钠的分解速率为0.34mg/h/kg白菜。出发菌株为李政采集于宁夏盐池县育肥羊场的青储饲料,采集时间2013年9月15日。
为了提高其乳酸生产速率、耐酸能力和亚硝酸盐的分解速率,依次采用DES和NTG技术对该菌种进行诱变,诱变后菌株采用MRS碳酸钙平板进行初筛,然后采用500mL摇瓶发酵,生物传感器分析仪对高产菌进行复筛,选育优良的植物乳杆菌菌株,然后做传代实验,评价其遗传稳定性。
植物乳杆菌tlj-2014遗传稳定性结果表明:经过连续传代十次,各项性能指标都比较稳定,遗传性较好,性状没有回复,因此把植物乳杆菌tlj-2014作为选育得到的目的菌株。
经验证发现:该诱变菌株的乳酸生产速率可以达到35g/L/d,该菌株经过71小时发酵后乳酸浓度达到95g/L;能够在pH为1.80的条件下存活。降解亚硝酸盐速度快,分解能力达到9.8mg/h/kg(自然发酵过程亚硝酸盐积累的速率大约为1.1mg/h/kg),能够耐1%胆盐。
采用该菌种生产泡菜,整个发酵过程中亚硝酸盐浓度在5mg/kg以下,远低于国家标准GB2714-2003中规定的含量(20mg/kg)。本发明以豆粕、麸皮和玉米粉为培养基进行固态发酵,该菌种也有良好的表现。
优选的,所述植物乳杆菌菌液由以下方法制备:
(1)一级种子培养:将植物乳杆菌CGMCC NO.9405斜面菌种1-2环接入500毫升摇瓶中,种子培养基装量100毫升,培养温度37℃,培养时间32小时;
(2)二级种子培养:将一级种子按照5%的接种量接入500毫升二级种子摇瓶中,种子培养基装量100毫升,培养温度37℃,培养时间26小时;
(3)三级种子培养:将二级种子以8%接种量接入5000毫升三级种子摇瓶中,种子培养基装量1000毫升,培养温度37℃,培养时间22小时;
(4)一级种子罐培养:将三级种子以10%接种量接入总容积为150L的一级种子罐,发酵培养基装量100L,培养温度37℃,罐压0.05MPa,培养时间18小时;
所述种子培养基组成为:酪蛋白胨1%,牛肉提取物1%,酵母提取物0.5%,葡萄糖0.5%,脱脂牛乳2%,乳酸钙1%,中药提取物2%,余量为水,pH6.8;
所述发酵培养基组成为:大豆蛋白胨5.0g,胰蛋白胨5.0g,脱脂牛乳40mL,葡萄糖10.0g,中药提取物2.0g,乳酸钙0.5g,Nacl0.2g,软化水补足1000mL,pH6.8。
优选的,所述中药提取物可以由以下方法制备:
将枸杞、天门冬、紫锥菊、甘草、黄芪、灵芝子实体分别粉碎后混合,添加上述混合物重量3-6倍的柠檬酸水溶液,控制溶液的pH值为4-5,添加混合物重量0.5-1%的复合酶,所述复合酶由酸性果胶酶、中性蛋白酶和纤维素酶组成,三种酶的重量比为2.5∶1∶1.5,酶解温度为40-48℃,酶解时间为1.5-2hr;之后将pH值调整为5.1-5.6,温度升到50-60℃,同时添加混合物重量0.2-0.5%的果胶酶、0.2-1%的葡聚糖酶,作用时间为2.5-3hr;酶解液在5-10℃过滤;滤液浓缩、干燥获得中药提取物;
所述枸杞、天门冬、紫锥菊、甘草、黄芪、灵芝子实体的质量份数比为:6:1:0.5:1:0.5:0.3。
所述复合维生素由如下重量份数的原料组成:
维生素C3份、维生素A3份、维生素D31份、维生素E4份、维生素K31份、维生素B10.1份、维生素B20.2份、维生素B61.5份、维生素B120.5份、烟酰胺2份。
所述复合酶由如下重量比的酶组成:木聚糖酶:淀粉酶:中性蛋白酶:纤维素酶=0.5∶1∶1.5:1;
所述复合微量元素由如下重量份数的原料组成:
硫酸亚铁2-4份、硫酸锰1-2份、葡萄糖酸锌1-2份、碱式氯化铜1-3份、赖氨酸螯合铁0.5-1份、亚硒酸钠0.1-0.2份、碘酸钙0.5-1份。
所述乳化仔猪颗粒料的制备方法包括如下步骤:
(1)将Bredol 683和水,与配方中使用的液体油脂按比例混合均质;
(2)将配方中Bredol683、水和液体油脂之外的其它物料,在混合机中混合均匀;
(3)将步骤(1)均质得到的物料喷洒到混合机中,与混合机中的物料混合3-5min,混合均匀度控制在5%以内,混合后色泽均匀一致。混合后的物料进入调质器,调质温度为55-65℃,调质时间35-45秒,经调质后进入制粒机进行制粒、冷却至室温,筛分、定量包装为成品;
所述混合均质及喷洒到混合机中,由自动混配均质添加设备完成。
所述自动混配均质添加设备,由广州市柏歌机电设备有限公司生产,主要由物料贮罐、物料分配管路、均质机、离心泵组成,能够控制油、水和乳化剂流量,使按照定量混合并均质,高度融合后,喷洒到混合机中与其它物料混合。
有益效果:
1.乳化剂是一种既能溶解于水,又能溶解于油的两性物质。通过乳化剂把水、油混合到一起,通过改善粉末和纤维的水合作用达到最佳的生产性能。
2.在饲料中添加一定量乳化剂后,饲料中的油脂能溶解在水中,大大提高了油脂的消化吸收性能,从而减少幼畜腹泻。
3.在饲料中添加一定量乳化剂后,可以提高喂料频率、降低回粉率从而提高生产效率。
4.在饲料中添加一定量乳化剂后,可以起到保水的作用,避免饲料水分太低、太干、太硬而影响采食量,同时可以改善饲料硬度,从而提高动物生产性能。
5.棕榈粕价格低廉,无霉性和副作用,但是对单胃动物来说,能量和粗蛋白的利用率较低,棕榈粕的氨基酸含量也较低,但是它的氨基酸利用率较高,本发明将其它原料与棕榈柏按照合理的比例组合,特别添加65%赖氨酸硫酸盐和DL-蛋氨酸,与棕榈粕中含量丰富,且利用率高达93.2%的精氨酸,能够协同产生良好的效果。大豆等原料中丰富的缬氨酸,又可补充棕榈柏中缬氨酸含量不足的缺陷。故本发明适量使用棕榈柏,并与其它原料协同作用,既可降低生产成本,又可保证仔猪的营养需求。
6.紫花苜蓿(Medicago sativa)是多年生草本植物,属豆科植物。广泛分布于西北、华北、东北等地区,江淮流域也有种植,是我国栽培面积最大的牧草。紫花苜蓿的混合干草平均粗蛋白含量18.9%,粗脂肪3.37%,无氮浸出物29.97%,粗纤维26.80%,灰分7.03%。鲜草中氮、磷、钾含量丰富,且苜蓿皂甙含量较高,具有明显的降血脂,排水利尿,降胆固醇,保持体内酸碱平衡作用。应用于饲料领域,具有来源广泛、价格低廉的特点,并且有助于维护动物机体健康。但因其粗纤维含量较高,适口性较差,不易消化吸收,对雏鸡和仔猪等幼小的动物并不适用。本发明采用酶解结合超声提取工艺,将不易消化吸收的大分子物质分解为容易消化吸收的小分子物质,利于幼小动物吸收利用,并可辅助提高机体抗病能力。
7.本发明产品用于仔猪饲喂,能有效提高饲料的利用效率,其生长性能包括采食量、平均日增重、料重比,与对照组相比均有明显改善,平均日增重提高39.32%,平均日采食量提高17.39%,料肉比降低15.48%,抗生素用量比对照组降低了75-85%;毛色感官得分也有较大改善。
具体实施方式
实施例1
一种乳化仔猪颗粒料,由以下重量份数的原料组成:
玉米45、进口肉骨粉2、大麦8、小麦麸8、米糠6、面粉8、豆粕13、膨化大豆3、棕榈粕3、紫花苜蓿提取物2、大豆油1、Bredol6830.015、水1、磷酸氢钙1.0、石粉0.5、食盐0.4、65%赖氨酸硫酸盐0.5、DL-蛋氨酸0.02、复合酶0.04、复合维生素0.4、复合微量元素0.3、复合菌剂3、中药提取物1;
所述紫花苜蓿提取物由如下方法制备:紫花苜蓿去杂切分后,加入8倍的护色液打浆,再加入苜蓿重量2倍的水混匀,之后加入苜蓿重量0.3%的混合酶制剂进行酶解,用乳酸调节pH值为5.0,温度55℃,酶解3h,将酶解液置于配料缸中,边缓慢搅拌边用探头式超声提取仪在电流强度1.2A/275W条件下进行超声提取25min,得提取液,浓缩、干燥、粉碎即得紫花苜蓿提取物;
所述护色液为pH值6.5-6.8的0.1%的抗坏血酸水溶液;
所述混合酶制剂由如下重量份数的原料组成:纤维素酶1.5、蛋白酶2、α-淀粉酶2;
所述复合菌剂由如下方法制备:以固态发酵培养基质量计,首先接种长双歧杆菌菌液,接种量为6.0%,控制发酵温度37℃,湿度75%,培养24h,再接种植物乳杆菌菌液,接种量为2.0%,37℃,培养24h。添加植物乳杆菌后,混合发酵初期,pH呈下降趋势,pH最小值为5.0,在发酵的后期,pH呈上升趋势,发酵结束后,测定其pH为7.0。发酵结束后经流化床干燥获得复合菌剂。
所述固态发酵培养基质量比例组成为:豆粕:麸皮:玉米粉=10:6:1,水份含量控制在65%。
发酵结束,游离氨基态氮含量可达到1148.6umol/g,较发酵前提高约12倍。
所述植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)tlj-2014,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC NO.9405;
所述长双歧杆菌CICC6068购自中国工业微生物菌种保藏管理中心。
所述长双歧杆菌菌液由如下方法制备:长双歧杆菌在种子培养基中活化培养三次,以种子培养基质量计:第一次,接种量3%,37℃厌氧培养36h后,将经过第一次活化的菌种按4%接种量接种于种子培养基,37℃厌氧养24h,再将经过第二次活化的菌种按5%接种量接种于种子培养基,37℃厌氧培养12h,得到长双歧杆菌菌液;
所述种子培养基组成为:大豆蛋白胨5.0g,胰蛋白胨5.0g,脱脂牛乳40mL,葡萄糖10.0g,低聚木糖10.0g,中药提取物2.0g,乳酸钙0.5g,Nacl0.2g,软化水补足1000mL,pH6.8。
所述植物乳杆菌菌液由以下方法制备:
(1)一级种子培养:将植物乳杆菌CGMCC NO.9405斜面菌种1-2环接入500毫升摇瓶中,种子培养基装量100毫升,培养温度37℃,培养时间32小时;
(2)二级种子培养:将一级种子按照5%的接种量接入500毫升二级种子摇瓶中,种子培养基装量100毫升,培养温度37℃,培养时间26小时;
(3)三级种子培养:将二级种子以8%接种量接入5000毫升三级种子摇瓶中,种子培养基装量1000毫升,培养温度37℃,培养时间22小时;
(4)一级种子罐培养:将三级种子以10%接种量接入总容积为150L的一级种子罐,发酵培养基装量100L,培养温度37℃,罐压0.05MPa,培养时间18小时;
所述种子培养基组成为:酪蛋白胨1%,牛肉提取物1%,酵母提取物0.5%,葡萄糖0.5%,脱脂牛乳2%,乳酸钙1%,中药提取物2%,余量为水,pH6.8;
所述发酵培养基组成为:大豆蛋白胨5.0g,胰蛋白胨5.0g,脱脂牛乳40mL,葡萄糖10.0g,中药提取物2.0g,乳酸钙0.5g,Nacl0.2g,软化水补足1000mL,pH6.8。
所述中药提取物可以由以下方法制备:
将枸杞、天门冬、紫锥菊、甘草、黄芪、灵芝子实体分别粉碎后混合,添加上述混合物重量4倍的柠檬酸水溶液,控制溶液的pH值为4.5,添加混合物重量1%的复合酶,所述复合酶由酸性果胶酶、中性蛋白酶和纤维素酶组成,三种酶的重量比为2.5∶1∶1.5,酶解温度为44℃,酶解时间为2hr;之后将pH值调整为5.3,温度升到55℃,同时添加混合物重量0.3%的果胶酶、0.6%的葡聚糖酶,作用时间为2.5hr;酶解液在5℃过滤;滤液浓缩、干燥获得中药提取物;
所述枸杞、天门冬、紫锥菊、甘草、黄芪、灵芝子实体的质量份数比为:6:1:0.5:1:0.5:0.3。
所述复合酶由如下重量比的酶组成:木聚糖酶:淀粉酶:中性蛋白酶:纤维素酶=0.5∶1∶1.5:1;
所述复合维生素由如下重量份数的原料组成:
维生素C3份、维生素A3份、维生素D31份、维生素E4份、维生素K31份、维生素B10.1份、维生素B20.2份、维生素B61.5份、维生素B120.5份、烟酰胺2份。
所述复合微量元素由如下重量份数的原料组成:
硫酸亚铁3份、硫酸锰1.5份、葡萄糖酸锌2份、碱式氯化铜1份、赖氨酸螯合铁1份、亚硒酸钠0.1份、碘酸钙1份。
所述乳化仔猪颗粒料的制备方法包括如下步骤:首先将Bredol683和水,与配方中的大豆油在自动混配均质添加设备中均质混匀,剩余物料在混合机中混匀,之后通过自动混配均质添加设备将均质混匀的物料喷洒到混合机中,与混合机中的物料,混合3min,混合均匀度控制在5%以内,混合后色泽均匀一致。混合后的物料进入调质器,调质温度为60℃,调质时间40秒,经调质后进入制粒机进行制粒、冷却至室温,筛分、定量包装为成品。
实施例2
一种乳化仔猪颗粒料,由以下重量份数的原料组成:
玉米40、进口肉骨粉3、大麦5、小麦麸10、米糠5、面粉10、豆粕16、膨化大豆1、棕榈粕5、紫花苜蓿提取物1、大豆油0.5、Bredol6830.015、水1、磷酸氢钙0.、石粉0.3、食盐0.3、65%赖氨酸硫酸盐0.7、DL-蛋氨酸0.03、复合酶0.05、复合维生素0.4、复合微量元素0.6、复合菌剂5;
所述紫花苜蓿提取物由如下方法制备:紫花苜蓿去杂切分后,加入5倍的护色液打浆,再加入苜蓿重量2倍的水混匀,之后加入苜蓿重量0.2%的混合酶制剂进行酶解,用乳酸调节pH值为4.5,温度50℃,酶解2h,将酶解液置于配料缸中,边缓慢搅拌边用探头式超声提取仪在电流强度0.6A/25W条件下进行超声提取30min,得提取液,浓缩、干燥、粉碎即得紫花苜蓿提取物;
所述护色液为pH值6.5-6.8的0.1%的抗坏血酸水溶液;
所述混合酶制剂由如下重量份数的原料组成:纤维素酶2、蛋白酶3、α-淀粉酶2;
所述复合菌剂的制备方法为:以固态发酵培养基质量计,首先接种长双歧杆菌菌液,接种量为6.0%,控制发酵温度35℃,湿度70%,培养12h,再接种植物乳杆菌菌液,接种量为1.0%,35℃,培养24h。添加植物乳杆菌后,混合发酵初期,pH呈下降趋势,pH最小值为6.0,在发酵的后期,pH呈上升趋势,发酵结束后,测定其pH为6.5。发酵结束后经流化床干燥获得复合菌剂。
所述固态发酵培养基质量比例组成为为:豆粕:麸皮:玉米粉=10:6:1,水份含量控制在60%。
所述植物乳杆菌为本领域常用菌种;
所述长双歧杆菌为本领域常用菌种。
所述长双歧杆菌菌液由如下方法制备:长双歧杆菌在种子培养基中活化培养三次,以种子培养基质量计:第一次,接种量3%,37℃厌氧培养36h后,将经过第一次活化的菌种按4%接种量接种于种子培养基,37℃厌氧养24h,再将经过第二次活化的菌种按5%接种量接种于种子培养基,37℃厌氧培养12h,得到长双歧杆菌菌液;
所述种子培养基组成为:大豆蛋白胨5.0g,胰蛋白胨5.0g,脱脂牛乳40mL,葡萄糖10.0g,低聚木糖10.0g,中药提取物2.0g,乳酸钙0.5g,Nacl0.2g,软化水补足1000mL,pH6.8。
所述植物乳杆菌菌液由以下方法制备:
(1)一级种子培养:将植物乳杆菌斜面菌种1-2环接入500毫升摇瓶中,种子培养基装量100毫升,培养温度37℃,培养时间32小时;
(2)二级种子培养:将一级种子按照5%的接种量接入500毫升二级种子摇瓶中,种子培养基装量100毫升,培养温度37℃,培养时间26小时;
(3)三级种子培养:将二级种子以8%接种量接入5000毫升三级种子摇瓶中,种子培养基装量1000毫升,培养温度37℃,培养时间22小时;
(4)一级种子罐培养:将三级种子以10%接种量接入总容积为150L的一级种子罐,发酵培养基装量100L,培养温度37℃,罐压0.05MPa,培养时间18小时;
所述种子培养基组成为:酪蛋白胨1%,牛肉提取物1%,酵母提取物0.5%,葡萄糖0.5%,脱脂牛乳2%,乳酸钙1%,中药提取物2%,余量为水,pH6.8;
所述发酵培养基组成为:大豆蛋白胨5.0g,胰蛋白胨5.0g,脱脂牛乳40mL,葡萄糖10.0g,中药提取物2.0g,乳酸钙0.5g,Nacl0.2g,软化水补足1000mL,pH6.8。
所述中药提取物由本领域常规方法制备;
所述复合酶由如下重量比的酶组成:木聚糖酶:淀粉酶:中性蛋白酶:纤维素酶=0.5∶1∶1.5:1;
所述复合维生素由如下重量份数的原料组成:
维生素C3份、维生素A3份、维生素D31份、维生素E4份、维生素K31份、维生素B10.1份、维生素B20.2份、维生素B61.5份、维生素B120.5份、烟酰胺2份。
所述复合微量元素由如下重量份数的原料组成:
硫酸亚铁4份、硫酸锰2份、葡萄糖酸锌1份、碱式氯化铜1份、赖氨酸螯合铁0.5份、亚硒酸钠0.1份、碘酸钙1份。
所述乳化仔猪颗粒料的制备方法包括如下步骤:首先将Bredol683和水,与配方中的大豆油在自动混配均质添加设备中均质混匀后,再通过自动混配均质添加设备喷洒到混合机中,与剩余的物料,混合5min,混合均匀度控制在5%以内,混合后色泽均匀一致。混合的物料进入调质器,调质温度为65℃,调质时间35秒,经调质后进入制粒机进行制粒、冷却至室温,筛分、定量包装为成品。
实施例3
一种乳化仔猪颗粒料,由以下重量份数的原料组成:
玉米50、进口肉骨粉3、大麦10、小麦麸5、米糠5、面粉5、豆粕16、膨化大豆1、棕榈粕2、紫花苜蓿提取物3、大豆油1、Bredol6830.015、水1、磷酸氢钙1.2、石粉0.3、食盐0.5、65%赖氨酸硫酸盐0.2、DL-蛋氨酸0.01、复合酶0.05、复合维生素0.4、复合微量元素0.6、复合菌剂1;
所述紫花苜蓿提取物由如下方法制备:紫花苜蓿去杂切分后,加入10倍的护色液打浆,再加入苜蓿重量2倍的水混匀,之后加入苜蓿重量0.4%的混合酶制剂进行酶解,用乳酸调节pH值为5.5,温度60℃,酶解4h,将酶解液置于配料缸中,边缓慢搅拌边用探头式超声提取仪在电流强度1.5A/275W条件下进行超声提取20min,得提取液,浓缩、干燥、粉碎即得紫花苜蓿提取物;
所述护色液为pH值6.5-6.8的0.1%的抗坏血酸水溶液;
所述混合酶制剂由如下重量份数的原料组成:纤维素酶2、蛋白酶3、α-淀粉酶1;
所述复合菌剂的制备方法为:以固态发酵培养基质量计,首先接种长双歧杆菌菌液,接种量为6.0%,控制发酵温度36℃,湿度80%,培养24h,再接种植物乳杆菌菌液,接种量为3.0%,37℃,培养18h。添加植物乳杆菌后,混合发酵初期,pH呈下降趋势,pH最小值为5.5,在发酵的后期,pH呈上升趋势,在发酵结束后,测定其pH为7.5。发酵结束后经流化床干燥获得干燥的培养物。
所述固态发酵培养基质量比例组成为:豆粕:麸皮:玉米粉=10:6:1,水份含量控制在70%。
发酵结束,游离氨基态氮含量最高可达到1036.8umol/g,较发酵前提高约11倍。
所述植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)tlj-2014,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC NO.9405;
所述长双歧杆菌CICC6068购自中国工业微生物菌种保藏管理中心。
所述长双歧杆菌菌液制备同实施例1;
所述植物乳杆菌菌液制备同实施例1:
所述中药提取物由以下方法制备:
将枸杞、天门冬、紫锥菊、甘草、黄芪、灵芝子实体粉碎后混合,添加上述混合物重量6倍的柠檬酸水溶液,控制溶液的pH值为5,添加混合物重量1%的复合酶,所述复合酶由酸性果胶酶、中性蛋白酶和纤维素酶组成,三种酶的重量比为2.5∶1∶1.5,酶解温度为48℃,酶解时间为1.5hr;之后将pH值调整为5.6,温度升到60℃,同时添加混合物重量0.5%的果胶酶、1%的葡聚糖酶,作用时间为2.5hr;酶解液在10℃过滤;滤液浓缩、干燥获得中药提取物;
所述枸杞、天门冬、紫锥菊、甘草、黄芪、灵芝子实体的质量份数比为:6:1:0.5:1:0.5:0.3。
所述复合酶由如下重量比的酶组成:木聚糖酶:淀粉酶:中性蛋白酶:纤维素酶=0.5∶1∶1.5:1;
所述复合维生素由如下重量份数的原料组成:
维生素C3份、维生素A3份、维生素D31份、维生素E4份、维生素K31份、维生素B10.1份、维生素B20.2份、维生素B61.5份、维生素B120.5份、烟酰胺2份。
所述复合微量元素由如下重量份数的原料组成:
硫酸亚铁4份、硫酸锰1份、葡萄糖酸锌2份、碱式氯化铜3份、赖氨酸螯合铁0.5份、亚硒酸钠0.2份、碘酸钙0.5份。
所述乳化仔猪颗粒料的制备方法包括如下步骤:首先将Bredol683和水,与配方中的大豆油在自动混配均质添加设备中均质混匀后,再通过自动混配均质添加设备喷洒到混合机,与剩余的物料,混合4min,混合均匀度控制在5%以内,混合后色泽均匀一致。混合的物料进入调质器,调质温度为55℃,调质时间45秒,经调质后进入制粒机进行制粒、冷却至室温,筛分、定量包装为成品。
试验例1采用实施例1制备的乳化仔猪颗粒料做以下验证
1试验材料
1.1试验时间
生产试验于2014年7月~9月完成。
检测试验于2014年9月~11月完成。
1.2试验地点
生产试验在沈阳禾丰二车间实施。
检测试验在禾丰检测中心实施。
1.3试验日粮
试验设对照组和试验组共2个处理,每个处理4个重复。对照组不含有乳化剂Bredol683,其它与实施例1相同。
2结果与分析
生产试验
备注:在电流相同的情况下,试验组喂料频率提高了0.5Hz。喂料频率提高,那么转数高,喂料量大,从而制粒机产量提高。
成品水分的阶段检测结果(%)
以上数据表明:对照组与试验组的产品水分在保质期内相对稳定,试验组添加乳化剂
Bredol683达到了更好的保水作用。
成品硬度(kg/cm2)检测结果
备注:数据表明,试验组与对照组相比,硬度显著降低。
结果表明,添加0.015%Bredol683后,试验组喂料频率提高了0.5Hz,成品水分平均增加并保持0.99%,成品硬度平均降低了0.43kg/cm2。所以从综合经济效益分析,添加有效乳化剂的仔猪颗粒料可以增加并保住水分,提高脂类的消化吸收,避免乳仔猪腹泻,并降低硬度提高采食量,同时提高生产效率,有利于提高饲料生产者与养猪场的收益。
试验例2:饲喂效果验证,采用实施例1、实施例2制备的乳化仔猪颗粒料,与市售同类产品做以下验证
1.试验材料
1.1试验时间
试验于2014年3月开始,历时14天。
1.2试验地点
辽宁省凤山种猪场。
1.3试验动物
选用杜洛克*大白*长白三元杂交健康仔猪共240头。
1.4试验日粮
试验设对照组和两个试验组共3个处理,每个处理8个重复。实验组为本发明实例例1、实施例2的乳化仔猪颗粒料,分别标记为组1、组2。对照组饲料为市售仔猪颗粒料;
2.试验方法
2.1试验设计
本试验采用单因素随机设计,选择28日龄左右断奶猪、平均初始体重约为8.63±0.54kg的杜洛克×长白×大白三元杂交健康生长猪共240头,按体重相近和遗传基础相似的原则,随机分为3个处理,分别饲喂三种不同日粮。每个处理8个重复,每个重复(圈)10头猪,公、母各半,试验期为断奶后头两周。试验期14天,记录采食量,称量试验初始和末重,并计算日增重、日采食量和料重比。
2.2饲养管理
试验猪饲养在封闭式猪舍内,床上饲养,通风良好。试验期间自由采食和饮水,无预饲期。按猪场常规程序进行消毒、驱虫和免疫。
2.3测定指标
2.3.1日粮成分
日粮干物质、粗蛋白质、钙和总磷分别参照中华人民共和国国家标准GB/T 6435-1986、GB/T 6432-1994、GB/T 6436-2002和GB/T 6437-2002推荐的方法测定。
日粮样品分别在110℃下6mol/L盐酸水解24h和0℃下过甲酸氧化16h后经盐酸水解24h用氨基酸自动分析仪(日立L-8800,日本)测定15种氨基酸和含硫氨基酸;用4mol/L氢氧化钠在110℃下水解22h后,使用高效液相色谱仪(岛津LC-10A,日本)测定色氨酸。
2.3.2生长性能
分别于每个试验开始和结束时早晨空腹个体称重,以重复(圈)为单位记录耗料量,计算平均日增重、平均日采食量和饲料增重比。
2.4统计分析
试验数据用Excel软件进行初步处理后,采用SAS 8.2的一般线性模型(general linearmodel,GLM)模型统计分析(SAS,2001)。
3.结果与分析
饲喂不同颗粒料对乳仔猪生长性能影响的对比表
项目 对照组 组1 组2
始重(kg) 8.65±0.77 8.49±0.70 8.53±0.69
末重(kg) 12.02±0.54 13.45±0.35 12.96±0.43
平均日增重(g/d) 240.71±55A 354.29±62B 316.43±43B
平均日采食量(g/d) 405.36 485.25 466.43
饲料/增重 1.68 1.37 1.47
毛色打分(10分制) 5.6 8.8 7.9
结果表明,试验组的生长性能包括采食量、平均日增重、料重比,与对照组相比均有明显改善,平均日增重提高39.32%,平均日采食量提高17.39%,料肉比降低15.48%。实验组抗生素用量比对照组降低了75-85%;毛色感官得分也比对照组有较大的提高,且饲喂实施例1的组1效果更明显。试验结果表明,本发明乳化仔猪颗粒料明显改善了乳仔猪的适口性和采食量,提高了乳仔猪的免疫力和健康水平。从而提高养猪收益。

Claims (10)

1.一种乳化仔猪颗粒料,包括以下重量份数的原料组成:玉米40~50、进口肉骨粉1~3、大麦5~10、小麦麸5~10、米糠5~10、面粉5~10、豆粕10~16、膨化大豆1~5、棕榈粕2~5、紫花苜蓿提取物1~3、大豆油0.5~1、Bredol6830.015、水1、磷酸氢钙0.8~1.2、石粉0.3~0.7、食盐0.3~0.5、65%赖氨酸硫酸盐0.2~0.7、DL-蛋氨酸0.01~0.03、复合酶0.03~0.05、复合维生素0.3~0.4、复合微量元素0.2~0.6、复合菌剂1~5;
所述复合酶由如下重量比的酶组成:木聚糖酶:淀粉酶:中性蛋白酶:纤维素酶=0.5∶1∶1.5:1;
所述复合维生素由如下重量份数的原料组成:
维生素C3份、维生素A3份、维生素D31份、维生素E4份、维生素K31份、维生素B10.1份、维生素B20.2份、维生素B61.5份、维生素B120.5份、烟酰胺2份;
所述复合微量元素由如下重量份数的原料组成:
硫酸亚铁2-4份、硫酸锰1-2份、葡萄糖酸锌1-2份、碱式氯化铜1-3份、赖氨酸螯合铁0.5-1份、亚硒酸钠0.1-0.2份、碘酸钙0.5-1份。
2.根据权利要求1所述的乳化仔猪颗粒料,其特征在于,所述紫花苜蓿提取物由如下方法制备:紫花苜蓿去杂切分后,加入5-10倍的护色液打浆,再加入苜蓿重量2倍的水混匀,之后加入苜蓿重量0.2-0.4%的混合酶制剂进行酶解,用乳酸调节pH值为4.5-5.5,温度50-60℃,酶解2-4h,将酶解液置于配料缸中,边缓慢搅拌边用探头式超声提取仪在电流强度0.6A/25W-1.5A/275W条件下进行超声提取20-30min,得提取液,浓缩、干燥、粉碎即得紫花苜蓿提取物;
所述护色液为pH值6.5-6.8的0.1%的抗坏血酸水溶液;
所述混合酶制剂由如下重量份数的原料组成:纤维素酶1-2、蛋白酶1-3、α-淀粉酶1-2。
3.根据权利要求1所述的乳化仔猪颗粒料,其特征在于,所述复合菌剂的制备方法为:以固态发酵培养基质量计,首先接种长双歧杆菌菌液,接种量为6.0%,控制发酵温度35-37℃,湿度70-80%,培养12-24h,再接种植物乳杆菌菌液,接种量为1.0-3.0%,35-37℃,培养12-24h;发酵结束后经流化床干燥获得复合菌剂;
所述固态发酵培养基质量比例组成为:豆粕:麸皮:玉米粉=10:6:1,水份含量控制在60-70%。
4.根据权利要求3所述的乳化仔猪颗粒料,其特征在于,所述植物乳杆菌为(Lactobacillusplantarum)tlj-2014,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC NO.9405;所述长双歧杆菌为CICC6068。
5.根据权利要求3或4所述的乳化仔猪颗粒料,其特征在于,所述长双歧杆菌菌液由如下方法制备:长双歧杆菌在种子培养基中活化培养三次,以种子培养基质量计:第一次,接种量3%,37℃厌氧培养36h后,将经过第一次活化的菌种按4%接种量接种于种子培养基,37℃厌氧养24h,再将经过第二次活化的菌种按5%接种量接种于种子培养基,37℃厌氧培养12h,得到长双歧杆菌菌液;
所述种子培养基组成为:大豆蛋白胨5.0g,胰蛋白胨5.0g,脱脂牛乳40mL,葡萄糖10.0g,低聚木糖10.0g,中药提取物2.0g,乳酸钙0.5g,Nacl0.2g,软化水补足1000mL,pH6.8。
6.根据权利要求3或4所述的乳化仔猪颗粒料,其特征在于,所述植物乳杆菌菌液由以下方法制备:
(1)一级种子培养:将植物乳杆菌CGMCC NO.9405斜面菌种1-2环接入500毫升摇瓶中,种子培养基装量100毫升,培养温度37℃,培养时间32小时;
(2)二级种子培养:将一级种子按照5%的接种量接入500毫升二级种子摇瓶中,种子培养基装量100毫升,培养温度37℃,培养时间26小时;
(3)三级种子培养:将二级种子以8%接种量接入5000毫升三级种子摇瓶中,种子培养基装量1000毫升,培养温度37℃,培养时间22小时;
(4)一级种子罐培养:将三级种子以10%接种量接入总容积为150L的一级种子罐,发酵培养基装量100L,培养温度37℃,罐压0.05MPa,培养时间18小时;
所述种子培养基组成为:酪蛋白胨1%,牛肉提取物1%,酵母提取物0.5%,葡萄糖0.5%,脱脂牛乳2%,乳酸钙1%,中药提取物2%,余量为水,pH6.8;
所述发酵培养基组成为:大豆蛋白胨5.0g,胰蛋白胨5.0g,脱脂牛乳40mL,葡萄糖10.0g,中药提取物2.0g,乳酸钙0.5g,Nacl0.2g,软化水补足1000mL,pH6.8。
7.根据权利要求5或6所述的乳化仔猪颗粒料,其特征在于,所述中药提取物由以下方法制备:
将枸杞、天门冬、紫锥菊、甘草、黄芪、灵芝子实体分别粉碎后混合,添加上述混合物重量3-6倍的柠檬酸水溶液,控制溶液的pH值为4-5,添加混合物重量0.5-1%的复合酶,所述复合酶由酸性果胶酶、中性蛋白酶和纤维素酶组成,三种酶的重量比为2.5∶1∶1.5,酶解温度为40-48℃,酶解时间为1.5-2hr;之后将pH值调整为5.1-5.6,温度升到50-60℃,同时添加混合物重量0.2-0.5%的果胶酶、0.2-1%的葡聚糖酶,作用时间为2.5-3hr;酶解液在5-10℃过滤;滤液浓缩、干燥获得中药提取物;
所述枸杞、天门冬、紫锥菊、甘草、黄芪、灵芝子实体的质量份数比为:6:1:0.5:1:0.5:0.3。
8.根据权利要求1所述的乳化仔猪颗粒料,其特征在于,所述乳化仔猪颗粒料由包括如下步骤的方法制备:首先将Bredol683和水,与配方中使用的液体油脂混合均质后,喷洒到混合机中,与混合机中的物料混合3-5min,混合均匀度控制在5%以内,之后55-65℃,调质35-45秒,再进入制粒机制粒、冷却至室温,筛分、定量包装;所述混合机中的物料为:除Bredol683、水和液体油脂之外,配方中的其它物料。
9.制备权利要求1-8所述乳化仔猪颗粒料的方法,包括如下步骤:
(1)将Bredol683和水,与配方中使用的液体油脂按比例混合均质;
(2)将配方中Bredol683、水和液体油脂之外的其它物料,在混合机中混合均匀;
(3)将步骤(1)均质得到的物料喷洒到混合机中,与混合机中的物料混合3-5min,混合均匀度控制在5%以内,之后进入调质器,调质温度为55-65℃,调质时间35-45秒,经调质后进入制粒机进行制粒、冷却至室温,筛分、定量包装为成品;
所述混合均质及喷洒到混合机中,由自动混配均质添加设备完成。
10.根据权利要求9所述乳化仔猪颗粒料的制备方法,包括如下步骤:
(1)将Bredol683和水,与配方中的大豆油按比例混合均质;
(2)将配方中剩余物料,在混合机中混合均匀;
(3)将步骤(1)均质得到的物料喷洒到混合机中,与混合机中的物料混合3min,混合均匀度控制在5%以内,之后进入调质器,60℃,调质40秒,经调质后进入制粒机进行制粒、冷却至室温,筛分、定量包装为成品;
所述乳化仔猪颗粒料,由以下重量份数的原料组成:
玉米45、进口肉骨粉2、大麦8、小麦麸8、米糠6、面粉8、豆粕13、膨化大豆3、棕榈粕3、紫花苜蓿提取物2、大豆油1、Bredol6830.015、水1、磷酸氢钙1.0、石粉0.5、食盐0.4、65%赖氨酸硫酸盐0.5、DL-蛋氨酸0.02、复合酶0.04、复合维生素0.4、复合微量元素0.3、复合菌剂3、中药提取物1;
所述复合酶由如下重量比的酶组成:木聚糖酶:淀粉酶:中性蛋白酶:纤维素酶=0.5∶1∶1.5:1;
所述复合维生素由如下重量份数的原料组成:
维生素C3份、维生素A3份、维生素D31份、维生素E4份、维生素K31份、维生素B10.1份、维生素B20.2份、维生素B61.5份、维生素B120.5份、烟酰胺2份;
所述复合微量元素由如下重量份数的原料组成:
硫酸亚铁3份、硫酸锰1.5份、葡萄糖酸锌2份、碱式氯化铜1份、赖氨酸螯合铁1份、亚硒酸钠0.1份、碘酸钙1份;
所述紫花苜蓿提取物由如下方法制备:紫花苜蓿去杂切分后,加入8倍的护色液打浆,再加入苜蓿重量2倍的水混匀,之后加入苜蓿重量0.3%的混合酶制剂进行酶解,用乳酸调节pH值为5.0,温度55℃,酶解3h,将酶解液置于配料缸中,边缓慢搅拌边用探头式超声提取仪在电流强度1.2A/275W条件下进行超声提取25min,得提取液,浓缩、干燥、粉碎即得紫花苜蓿提取物;
所述护色液为pH值6.5-6.8的0.1%的抗坏血酸水溶液;
所述混合酶制剂由如下重量份数的原料组成:纤维素酶1.5、蛋白酶2、α-淀粉酶2;
所述复合菌剂由如下方法制备:以固态发酵培养基质量计,首先接种长双歧杆菌菌液,接种量为6.0%,控制发酵温度37℃,湿度75%,培养24h,再接种植物乳杆菌菌液,接种量为2.0%,37℃,培养24h;发酵结束后经流化床干燥获得复合菌剂;
所述固态发酵培养基质量比例组成为:豆粕:麸皮:玉米粉=10:6:1,水份含量控制在65%;
所述植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)tlj-2014,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC NO.9405;
所述长双歧杆菌CICC6068购自中国工业微生物菌种保藏管理中心;
所述长双歧杆菌菌液由如下方法制备:长双歧杆菌在种子培养基中活化培养三次,以种子培养基质量计:第一次,接种量3%,37℃厌氧培养36h后,将经过第一次活化的菌种按4%接种量接种于种子培养基,37℃厌氧养24h,再将经过第二次活化的菌种按5%接种量接种于种子培养基,37℃厌氧培养12h,得到长双歧杆菌菌液;
所述种子培养基组成为:大豆蛋白胨5.0g,胰蛋白胨5.0g,脱脂牛乳40mL,葡萄糖10.0g,低聚木糖10.0g,中药提取物2.0g,乳酸钙0.5g,Nacl0.2g,软化水补足1000mL,pH6.8;
所述植物乳杆菌菌液由以下方法制备:
(1)一级种子培养:将植物乳杆菌CGMCC NO.9405斜面菌种1-2环接入500毫升摇瓶中,种子培养基装量100毫升,培养温度37℃,培养时间32小时;
(2)二级种子培养:将一级种子按照5%的接种量接入500毫升二级种子摇瓶中,种子培养基装量100毫升,培养温度37℃,培养时间26小时;
(3)三级种子培养:将二级种子以8%接种量接入5000毫升三级种子摇瓶中,种子培养基装量1000毫升,培养温度37℃,培养时间22小时;
(4)一级种子罐培养:将三级种子以10%接种量接入总容积为150L的一级种子罐,发酵培养基装量100L,培养温度37℃,罐压0.05MPa,培养时间18小时;
所述种子培养基组成为:酪蛋白胨1%,牛肉提取物1%,酵母提取物0.5%,葡萄糖0.5%,脱脂牛乳2%,乳酸钙1%,中药提取物2%,余量为水,pH6.8;
所述发酵培养基组成为:大豆蛋白胨5.0g,胰蛋白胨5.0g,脱脂牛乳40mL,葡萄糖10.0g,中药提取物2.0g,乳酸钙0.5g,Nacl0.2g,软化水补足1000mL,pH6.8;
所述中药提取物由以下方法制备:
将枸杞、天门冬、紫锥菊、甘草、黄芪、灵芝子实体分别粉碎后混合,添加上述混合物重量4倍的柠檬酸水溶液,控制溶液的pH值为4.5,添加混合物重量1%的复合酶,所述复合酶由酸性果胶酶、中性蛋白酶和纤维素酶组成,三种酶的重量比为2.5∶1∶1.5,酶解温度为44℃,酶解时间为2hr;之后将pH值调整为5.3,温度升到55℃,同时添加混合物重量0.3%的果胶酶、0.6%的葡聚糖酶,作用时间为2.5hr;酶解液在5℃过滤;滤液浓缩、干燥获得中药提取物;
所述枸杞、天门冬、紫锥菊、甘草、黄芪、灵芝子实体的质量份数比为:6:1:0.5:1:0.5:0.3。
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