CN104397355A - 发酵脱除饲料中黄曲霉毒素的方法和发酵饲料的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种发酵脱除饲料中黄曲霉毒素的方法和发酵饲料的制备方法，该发酵脱除饲料中黄曲霉毒素的方法将产朊假丝酵母(Candida utilis)CGMCC 2.2066接种到待处理饲料中进行发酵处理，实现饲料中黄曲霉毒素的脱除。该方法利用产朊假丝酵母(Candida utilis)CGMCC 2.2066对黄曲霉毒素的高效降解作用，达到了对饲料中黄曲霉毒素高效的生物脱除效果。
Description
技术领域
本发明涉及微生物领域，具体涉及一种发酵脱除饲料中黄曲霉毒素的方法和发酵饲料的制备方法。
背景技术
自1960年英国10万只火鸡死于黄曲霉毒素之后，黄曲霉毒素就已成为饲料和食品行业的重点监测对象。黄曲霉毒素是由黄曲霉(Aspergillus flavus)等真菌产生的一类天然有毒物质，包括黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1和M2等几种结构类似物；其中，以黄曲霉毒素B1最为常见，也是毒性最强的一种。1993年世界卫生组织(WHO)将黄曲霉毒素定为1类致癌物，主要诱发肝癌，对肾、肺、胃等也有致癌作用。畜禽动物一次性采食剂量较大黄曲霉毒素，会引起急性中毒并死亡；而长期小剂量摄入后在体内的富集，会导致动物的慢性中毒，表现为器官受损、进食减少、生产能力降低、机体免疫机能下降、致癌或致畸变等。
玉米、花生等粮食收贮和加工过程中，由于管理等方面的原因会很容易导致黄曲霉素毒素污染，被污染的原料或产品只有经过脱毒处理后才能用于饲料和食品加工。现有的黄曲霉毒素脱除技术有：
(1)物理法
将水合铝硅酸钠钙、蒙脱石、沸石等吸附材料加入饲料中，利用其在动物肠胃中和黄曲霉毒素的接触，对游离的霉菌毒素进行高效吸附，然后从粪便中排出，但是当饲料中黄曲霉毒素在肠胃中游离出来后，也有被动物部分吸收的危险。黄曲霉毒素对高能射线的稳定性较差，可以利用微波、紫外线或γ射线等照射受污染的饲料，使黄曲霉毒素化学结构发生变化，达到脱毒的目的，但高能射线同样可以破坏饲料中的维生素等营养物质，同时也很难规模化使用。
(2)化学法
将一些可以与黄曲霉毒素发生反应，但对人畜无害的化学物质添加到饲料中，通过化学反应的方法降低或去除黄曲霉毒素的毒害作用。受黄曲霉毒素污染的玉米或花生可以直接用NaOH溶液或其他碱液清洗，黄曲霉毒素会被水解成邻位香豆素钠盐而被除去，也可用NaHSO3浸泡污染过的饲料，脱毒效果较好，但该方法对饲料养分会造成较大的损失。也有人利用臭氧等其他化学物质对黄曲霉毒素进行脱毒处理，均有一定的处理效果，但缺乏实际应用和经济技术上的可行性。在欧美等国常用的方法是在污染饲料中加入氨化剂，然后密封处理，利用氨对毒素的裂解作用，达到脱毒的目的，该方法操作简便，脱毒效果好，但该方法会造成饲料中氨残留。
(3)生物法
葡甘露聚糖酯化物是微生物代谢产物，具有与黄曲霉毒素结合的能力，在饲料中加入适量的葡甘露聚糖寡糖可有效吸附毒素，但不能从化学本质上脱除黄曲霉毒素。自然界中存在大量可以降解黄曲霉毒素的微生物，利用现代生物工程手段选育高性能降解微生物，通过在饲料中添加微生物或降解酶，可以有效控制饲料中的黄曲霉毒素的含量水平。
黄曲霉毒素的物理和化学脱除法效果明显，但是选择性差，对饲料中其他营养成分的破坏作用较大，缺乏实际应用和经济技术可行性；生物法对饲料理化性质、营养成分破坏作用小，脱毒的特异性强，但由于酶促反应条件要求高，酶的稳定性低，选择高性能的降解菌株和建立科学的降解体系是黄曲霉毒素生物脱除应用的前提和基础。
发明内容
本发明提供了一种发酵脱除饲料中黄曲霉毒素的方法和发酵饲料的制备方法，该发酵脱除饲料中黄曲霉毒素的方法利用产朊假丝酵母(Candida utilis)CGMCC 2.2066对黄曲霉毒素的高效降解作用，达到了对饲料中黄曲霉毒素高效的生物脱除效果。
一种发酵脱除饲料中黄曲霉毒素的方法，将产朊假丝酵母(Candida utilis)CGMCC 2.2066接种到待处理饲料中进行发酵处理。
所述产朊假丝酵母(Candida utilis)CGMCC 2.2066制成菌液后再接种到待处理饲料中。
本发明所述的产朊假丝酵母(Candida utilis)CGMCC 2.2066购自中国普通微生物菌种保藏管理中心，该菌株具有较强的黄曲霉毒素降解能力。产朊假丝酵母(Candida utilis)CGMCC2.2066可直接接种到待处理的饲料中，也可制成菌液后再接种到待处理饲料中。
所述产朊假丝酵母(Candida utilis)CGMCC 2.2066的种子培养基为：酵母膏5-10g，蛋白胨10-20g，磷酸二氢钾1.0-5.0g，硫酸镁0.2-1.0g，愈创木酚0.1-0.5g，水1000mL，pH4.0-6.5，121℃灭菌20分钟。
所述产朊假丝酵母(Candida utilis)CGMCC 2.2066扩大培养的培养基为：葡萄糖10-20g，酵母膏5-20g，磷酸二氢钾1.0-2.0g，硫酸镁0.5-1.0g，水1000mL，pH4.0-6.5。
产朊假丝酵母(Candida utilis)CGMCC 2.2066在饲料中进行发酵处理的时间对黄曲霉素的脱除效果有影响。作为优选，所述发酵的时间为10-30d。其中，所述发酵为自然发酵或建堆发酵。且优选，建堆发酵的温度低于42℃。
本发明还公开了产朊假丝酵母(Candida utilis)CGMCC 2.2066发酵脱除饲料中黄曲霉毒素的用途。
本发明还公开了一种发酵饲料的制备方法，该方法将主料与辅料混合后，接入产朊假丝酵母(Candida utilis)CGMCC 2.2066进行发酵，发酵完成后即制得所述的发酵饲料。
所述主料可以为玉米粉。所述辅料包括氮源、碳源、无机盐、纤维素酶、蛋白酶和愈创木酚中的一种或多种。其中，所述氮源可以为NH4NO3或尿素；所述碳源可以为麸皮、谷壳粉或两者的混合。辅料中还可以添加适量的淀粉酶，可将原料中的淀粉分解成葡萄糖，促进产朊假丝酵母(Candida utilis)CGMCC 2.2066的代谢能力，以提高发酵饲料的粗蛋白含量；纤维素酶的适量加入，能够降低发酵饲料中粗纤维的含量，改善饲料的品质。所述无机盐包括钾盐、镁盐或两者的混合。
本发明还公开了所述的制备方法制得的发酵饲料，该发酵饲料脱除了黄曲霉毒素，家蓄食用时安全性高。
与现有技术相比，本发明将产朊假丝酵母(Candida utilis)CGMCC 2.2066直接或制成菌液后接种到待处理饲料中进行发酵处理，使饲料中的黄曲霉毒素被充分脱除，不仅黄曲霉毒素的脱除效果非常好，而且脱除选择性高，不会破坏饲料的理化性质和营养成分，也不会对家畜产生影响，能够与发酵饲料的生产工艺结合，易于大面积推广。
具体实施方式
下面以具体实施例来对本发明的技术方案做进一步说明，但本发明的保护范围不限于此。
实施例1
产朊假丝酵母(Candida utilis)CGMCC 2.2066为液体低温保藏菌种。
该菌种的种子培养基为：酵母膏5g，蛋白胨20g，磷酸二氢钾2.5g，硫酸镁0.5g，水1000mL，pH5.5，121℃灭菌20分钟。
扩大培养的培养基：葡萄糖20g，酵母膏15g，磷酸二氢钾2.0g，硫酸镁0.5g，愈创木酚0.5g，水1000mL，pH5.5。
种子培养基的装液量为50mL/250mL三角瓶，接种量为0.2％，培养温度为28℃，摇床转速为170r/min，恒温振荡培养3d。扩大培养的培养基装液量为100mL/500mL三角瓶，接种量为0.2％，培养温度为28℃，摇床转速为120r/min，培养时间为5d，每毫升发酵液中酵母数为5.8×1010个，终止发酵，即制得产朊假丝酵母(Candida utilis)CGMCC 2.2066液体菌种。
取黄曲霉毒素污染的玉米，粉碎过筛，筛孔直径为0.1cm。粉碎后玉米粉中黄曲霉毒素B1含量为230μg/kg。
玉米粉和其他辅料的添加比例：玉米粉100kg，尿素20kg，麸皮200kg，愈创木酚20g，淀粉酶(酶活为30000IU)50g，纤维素酶(酶活为100000IU)50g。将上述固体物料称取好后混合均匀。
取300kg水和1.5kg的液体菌种，并将液体菌种和水混合，然后加入固体物料中，将固体物料和液体充分混合。将混合好的物料装入50L的塑料桶中，室温下放置自然发酵，发酵过程中测得的最高料温为36℃。第30d取样检测，所制得的发酵饲料中黄曲霉毒素含量为8.7μg/kg，达到饲料卫生标准(GB13078-2001)要求；粗蛋白含量为12.6％。
实施例2
产朊假丝酵母(Candida utilis)CGMCC 2.2066为液体低温保藏菌种。
该菌种的种子培养基为：酵母膏5g，蛋白胨20g，磷酸二氢钾2.5g，硫酸镁0.5g，水1000mL，pH5.5，121℃灭菌20分钟。
扩大培养的培养基为：葡萄糖20g，酵母膏10g，磷酸二氢钾2.0g，硫酸镁0.5g，愈创木酚0.3g，水1000mL，pH5.5。
种子培养基的装液量为50mL/250mL三角瓶，接种量为0.2％，培养温度为28℃，摇床转速为170r/min，恒温振荡培养3d。
用10L全自动发酵罐进行菌种扩大培养，发酵时的装液量为7L，接种量为70mL，培养温度为25℃，搅拌转速为200r/min，通气强度为1vvm(即每分钟的通气量为7L)。发酵至第5d时，经检测，每毫升发酵液中酵母数为1.2×1011，终止发酵，即制得产朊假丝酵母(Candidautilis)CGMCC 2.2066的液体菌种。
取黄曲霉毒素污染的玉米，粉碎过筛，筛孔直径0.1cm。粉碎后玉米粉中黄曲霉毒素B1含量为230μg/kg。
玉米粉和其他辅料的添加比例：玉米粉1000kg，NH4NO320kg，尿素10kg，麸皮1500kg，愈创木酚200g，酶活30000IU的淀粉酶250g。将上述固体物料称取好后混合均匀。
称取1500kg水和5kg的液体菌种，并将液体菌种和水混合，然后加入固体物料中，将固体物料和液体充分混合。将混合好的物料于室内建堆发酵，堆高1m，堆宽为1.5m，外覆塑料薄膜。发酵2d后堆温达到39℃时，翻堆并重新建堆；第5d时堆温达到40℃，翻堆并重新建堆，翻堆时加入冷开水10kg；第10d时堆温达到38℃，翻堆并重新建堆，此后堆温最高为35℃，第15d时堆温和室温相同。第25d开堆检测，所制得的发酵饲料中黄曲霉毒素含量为5.3μg/kg，达到饲料卫生标准(GB13078-2001)要求；粗蛋白含量为15.2％。
对比例1
专利号为CN 101812406 B、名称为“一种降解黄曲霉毒素的复合微生物菌剂”的发明专利，采用了“产朊假丝酵母、粪肠球菌、嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌”4种微生物组成的不同比例混合的菌剂，起始浓度为25.8％，降解率仅为68.11％。而本申请所述方法的处理的饲料中黄曲霉毒素的起始浓度高达230μg/kg，降解率达到97.7％。
Claims (10)
1.一种发酵脱除饲料中黄曲霉毒素的方法，其特征在于，将产朊假丝酵母(Candida utilis)CGMCC 2.2066接种到待处理饲料中进行发酵处理。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述产朊假丝酵母(Candida utilis)CGMCC2.2066制成菌液后再接种到待处理饲料中。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，发酵时间为10-30d。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述发酵为自然发酵或建堆发酵。
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，建堆发酵的温度低于42℃。
6.产朊假丝酵母(Candida utilis)CGMCC 2.2066发酵脱除饲料中黄曲霉毒素的用途。
7.一种发酵饲料的制备方法，其特征在于，将主料与辅料混合后，接入产朊假丝酵母(Candida utilis)CGMCC 2.2066进行发酵，发酵完成后即制得所述的发酵饲料。
8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述辅料包括氮源、碳源、无机盐、纤维素酶、蛋白酶和愈创木酚中的一种或多种。
9.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述无机盐包括钾盐、镁盐或两者的混合。
10.如权利要求7～9任一项所述的制备方法制得的发酵饲料。
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109452539A (zh) * | 2018-11-14 | 2019-03-12 | 陈雨 | 玉米和小麦及其加工产品中霉菌毒素的降解方法及低毒微生物发酵饲料 |
| CN111820362A (zh) * | 2019-04-17 | 2020-10-27 | 海南泓缘生物科技股份有限公司 | 一种对ddgs中黄曲霉毒素的生物降解方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103952324A (zh) * | 2014-05-06 | 2014-07-30 | 武汉科前动物生物制品有限责任公司 | 一种马克思克鲁维酵母c2及制备方法和应用 |
| CN103966147A (zh) * | 2014-05-29 | 2014-08-06 | 江南大学 | 一株降解花生粕中黄曲霉毒素b1的解淀粉芽孢杆菌 |
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2014
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Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103952324A (zh) * | 2014-05-06 | 2014-07-30 | 武汉科前动物生物制品有限责任公司 | 一种马克思克鲁维酵母c2及制备方法和应用 |
| CN103966147A (zh) * | 2014-05-29 | 2014-08-06 | 江南大学 | 一株降解花生粕中黄曲霉毒素b1的解淀粉芽孢杆菌 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| BRONIUS BAKUTIS，ETAL.: "USE OF BIOLOGICAL METHOD FOR DETOXIFICATION OF MYCOTOXINS", 《BOTANICA LITHUANICA》 * |
| HUSSEIN H.EL-SHIEKH，ET AL.: "Bioremediation of Aflatoxins by Some Reference Fungal Strains", 《POLISH JOURNAL OF M ICROBIOLOGY》 * |
| 孙丰芹等: "黄曲霉毒素B_1的生物脱毒研究进展", 《粮油食品科技》 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109452539A (zh) * | 2018-11-14 | 2019-03-12 | 陈雨 | 玉米和小麦及其加工产品中霉菌毒素的降解方法及低毒微生物发酵饲料 |
| CN111820362A (zh) * | 2019-04-17 | 2020-10-27 | 海南泓缘生物科技股份有限公司 | 一种对ddgs中黄曲霉毒素的生物降解方法 |
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