CN104397348A - 一种鸡新城疫中药饲料添加剂的制备方法 - Google Patents

Abstract

一种鸡新城疫中药饲料添加剂的制备方法,其是按以下步骤制备:取中药过路黄、连翘、板蓝根、金银花、黄芪、鲜猪胆、甘草；将各中药超微粉碎加乙醇溶液武火煮沸，文火保温，冷却过滤，浓缩滤液，加入白糖煮沸，冷却降至常温后接种乳酸杆菌、拜耳接合酵母菌及木醋杆菌，经168h发酵至长出白色菌块；将白色菌块低温真空干燥后，进行包埋，按比例添加到饲料中，经高温制粒冷却，制得颗粒饲料。本发明中药饲料添加剂的具有抗病毒、增加肠道内有益菌群数量、提高免疫功能、增强鸡体抗病力、降低鸡蛋中胆固醇、提高氨基酸的含量、增加钙沉积等功效，且制备方法简单、使用方便、无残留、活菌含量高。本发明的中药饲料添加剂有较好的市场前景。

Description

一种鸡新城疫中药饲料添加剂的制备方法

技术领域

本发明属于饲料添加剂技术领域，具体说是涉及一种防治鸡新城疫的天然绿色禽用中药饲料添加剂的制备方法。 

背景技术

新城疫也称亚洲鸡瘟，俗称鸡瘟，是由新城疫病毒引起的鸡和火鸡的急性高度接触性传染病，常呈败血经过。主要临床特征是呼吸困难、下痢、神经机能紊乱以及浆膜和黏膜显著出血，被世界卫生组织（OIE）列为A类传染病。该病自1928年前后在我国被发现以来，迅速成为我国养鸡业危害最大、造成经济损失最严重的禽病之一，每年由于此病造成的经济损失达数十亿元。

目前主要采用疫苗接种预防该病的发生，基本控制了典型性新城疫的流行，但病毒变异、疫苗使用和保管不当、营养不良、其他疾病对抗体产生的干扰等因素都会造成免疫失败，导致非典型性新城疫经常发生。对新城疫病治疗的药物主要是抗病毒的金刚烷胺和利巴韦林，动物实验表明两种药物均有致畸作用，且金刚烷胺还可诱导耐药毒株的产生，长期应用使病毒产生抗药性影响疗效。

鸡新城疫是一种由新城疫病毒感染的传染病, 根据中兽医理论，临床主要表现为湿热、泄泻、呼吸困难等为主要症状，因此，中兽医的治疗原则是化湿清热、止泻、理气和中。尽管中兽药制剂双黄连、黄芪多糖、板蓝根、清开灵等已经成为兽医临床治疗畜禽抗病毒性疾病的主要方法之一，在疫病的临床防疫中发挥着重要的作用，但这些药物对许多临床常见的病毒病并未表现出令人满意的临床效果，因此，继续研发有效的临床用药仍然是兽医工作者主要任务之一。

市场上的微生态制剂存在以下几个方面的问题：活菌含量低；不耐抗生素；对高温、胃酸和胆盐不稳定；保存期短等问题，从而影响了微生态制剂的广泛应用。

而将中药和微生物在一起发酵制备成中药饲料添加剂，将微生态制剂经过真空干燥，然后再经双层微胶囊包埋，制成能够预防和治疗鸡新城疫的饲料添加剂，现有技术中未见报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种具有防治鸡新城疫疾病中药饲料添加剂的制备方法，该制备方法简单、使用方便、安全环保、纯生态、无污染、无残留、活菌含量高，且中药有效成分的含量会成倍增加。

为达到上述目的，本发明采用的制备方法如下：

一种鸡新城疫中药饲料添加剂的制备方法，其特征在于它是按以下步骤制备：1、取中药过路黄、连翘、板蓝根、金银花、黄芪、鲜猪胆、甘草；2、将各中药超微粉碎加乙醇溶液武火煮沸，文火保温，冷却过滤，浓缩滤液，加入白糖煮沸，冷却降至常温后接种乳酸杆菌、拜耳接合酵母菌及木醋杆菌，经168h发酵至长出白色菌块；3、将白色菌块低温真空干燥后，进行包埋，按比例添加到饲料中，经高温制粒冷却，制得颗粒饲料。

所述的一种鸡新城疫中药饲料添加剂的制备方法，其特征是称取以下重量份的中药：过路黄80~100、连翘80~100、板蓝根60~80、金银花40~60、黄芪30~40、鲜猪胆汁5-10、甘草20~30。

所述的一种鸡新城疫中药饲料添加剂的制备方法，其特征是，称取重量份的中药(除鲜猪胆汁外)，超微粉碎，加入中药总重量8～10倍量的50%～70%的乙醇溶液，浸泡30～60min，武火煮沸，文火保温30～60min，冷却十二层纱布过滤；滤渣再加6～8倍量的水，武火煮沸，文火保温30～60min，冷却十二层纱布过滤，合并两次滤液，浓缩回收乙醇，用乙醇检测仪检测浓缩液中无乙醇时停止浓缩。

所述的一种鸡新城疫中药饲料添加剂的制备方法，其特征是以100 Kg浓缩液为单位添加白糖15～20Kg，并煮沸5～10min，冷却至常温，接种乳酸杆菌、木醋杆菌、拜耳结合酵母菌（市售）制剂10～15Kg，设定发酵温度33～37℃，湿度33%～40%，pH5.5～6.5，静置发酵培养168h,至长出白色菌块为止。

所述的一种鸡新城疫中药饲料添加剂的制备方法，其特征是取出白色菌块，放入真空干燥箱内，设定干燥温度50～60℃，干燥时间8～12h，真空度0.08～0.1Mpa。

所述的一种鸡新城疫中药饲料添加剂的制备方法，其特征是将干燥后的白色菌块经超微粉碎后，用双层微胶囊进行包埋处理，按1%～2%加入饲料中，经80～90℃，制粒10～15s，冷却即得颗粒饲料。

本发明中药饲料添加剂的具有抗病毒、增加肠道内有益菌群数量、提高免疫功能、增强鸡体抗病力等功效，且制备方法简单、使用方便、无残留、活菌含量高。本发明的有益效果在于降低了鸡蛋中胆固醇，提高了必需氨基酸含量，经国家农业部家禽品质监督检验测试中心（扬州）（报告编号：№：CP-W-2013-008）检测结果见表1：从表中可以看出胆固醇含量489mg/100g，比普通鸡蛋585mg/100g，降低了16.41%，天冬氨酸、谷氨酸、亮氨酸占总氨基酸总量的百分比分别为10.87%、12.94%、10.51%，比普通鸡蛋中上述三种氨基酸提高了2-3倍。

表1 检验结果报告书                                        

 本发明的中药饲料添加剂对鸡新城疫抗体效价的影响，本试验采用血凝抑制（HI）方法检测血清中新城疫抗体的动态变化规律，对比直接用中药和中药经过微生物发酵后对鸡新城疫疫苗免疫效果的影响。

将240只1日龄AA肉鸡，随机分成3组，每组80只，分别为中药组、发酵组和对照组，持续42d，其中中药组和发酵组添加相同剂量，各组均采取相同的免疫途径和免疫方法进行常规免疫，各组分别于第1，2，3，4，5和6周的周六，随机抽取8只鸡进行空腹心脏采血（采血前禁食12h，但不禁水），分离血清，-20℃保存。用微量血细胞凝集抑制试验(HI)法检测鸡血清NDV抗体效价。将6次采集的血清样品用微量血细胞凝集抑制试验测定NDHI抗体效价，各组不同周龄的HI抗体效价加权平均值（log₂ ^X）结果见表2。

表2各组不同周龄的HI抗体效价加权平均值（log₂ ^X）

数据采用SPSS13.0程序提供的数据分析，结果见表3。

表3  各组鸡ND HI抗体效价测定结果

注：试验组与对照组相比，*表示P＜0.05，差异显著；**表示P＜0.01，差异极显著，中药组与发酵组相比，a表示P＜0.05，b表示P＜0.01。

目前免疫接种仍是控制ND的主要方法。ND的免疫主要包括细胞免疫、体液免疫和局部免疫，感染NDV最初免疫应答是由细胞介导的，这正是免疫鸡在测出抗体之前即有早期保护作用的原因所在^[5]。鸡在初次免疫NDV后通常于6-10d即可检测到血清抗体，高峰期一般在第3-4周出现，与本试验测定结果与其相符。

从表3可以看出，中药组和发酵组对ND弱毒苗诱导的细胞、体液免疫均有免疫增强作用，尤其是发酵组的免疫增强效果明显优于对照组和中药组，表明发酵后的中药有效成分的含量提高，益生菌能够增强畜禽机体的抗病能力，此仅为养鸡企业提供一个选用参考。至于中药组和发酵组提高鸡的抗体水平，增强免疫效果以及对细胞免疫的影响的机理还有待进一步试验研究验证。

本发明的发酵液防治鸡新城疫的试验，将180只1日龄AA肉鸡，随机分成6组，每组30只，分别为发酵液预防组、发酵液治疗组、西药（金刚烷胺）预防组、西药（金刚烷胺）治疗组、感染对照组、空白对照组。饲养至7日龄时进行接种试验，空白对照组不接种病毒尿囊液，其余鸡口服经测定最小致死量为1:100稀释的病毒尿囊液0.15 ml。发酵液预防组在接种病毒的同时用发酵液预防，每次口服1ml，3次/d，连用7d；发酵液治疗组在接种病毒出现症状（接种病毒第4-5d) 时用发酵液治疗，每次口服2ml，3次/d，连用7d；西药预防组在接种病毒同时，用金刚烷胺口服液预防，每次口服1 ml，连用5d；西药治疗组在接种病毒出现症状（接种病毒第4-5d）时用金刚烷胺口服液治疗，每次口服1ml，连用5d；感染病毒为阳性对照组，不用任何药物预防与治疗；空白对照组不做任何处理。统计结果见表4。

表4 鸡新城疫预防与治疗结果（单位：羽）

 从表4中可以看出第一组鸡攻毒的同时即用发酵液治疗，只有5羽鸡出现临床症状，至第6d，发病的鸡死亡1羽，其余病鸡康复，死亡率3.3%，第二组的鸡攻毒后，待试验鸡出现典型的 新城疫症状，并用发酵液进行治疗，病鸡死亡4羽, 其余鸡治疗7d后精神好转，逐渐康复，死亡率 13.3% ，第三组、第四组试验鸡的死亡率分别达30%和43.3%，发酵液预防组与治疗组的效果明显好于金刚烷胺预防组与治疗组，而第五组的鸡攻毒后4d, 出现拉稀、呼吸困难、嗉囊积液，鸡冠、肉髯呈暗红色，个别鸡还出现有神经症状，第5d 死亡1羽，第7d死亡12羽，至第10d全部死亡，第六组鸡精神、食欲均未出现异常。

本发明的中药饲料添加剂有益菌的活菌含量高，无菌称取0.1g制剂，加入10ml稀释液中，充分摇匀，作10倍系列稀释，取最后稀释度1ml，滴入选择性琼脂培养基平皿上，每个稀释度，做3个平皿，并以L形玻棒涂布均匀，置恒温培养箱中37℃条件下培养24～48h，培养到期观察每个平皿菌落生长情况，并计数。经检测发酵后、干燥后、高温未包埋制粒后、高温包埋制粒后、市售、市售高温制粒后的活菌含量结果见表5。

表5 活菌含量检测结果报告

从表5可以看出发酵后药液活菌数含量在2.4×108cfu/g，经低温真空干燥后活菌含量在2.5×1010cfu/g，这与干燥后的收率（收得率10%）相一致，经高温未包埋过制粒后的活菌数含量在1.2×105cfu/g，与市售高温制粒后活菌数相当，经过包埋后的高温制粒后的活菌数在2.1×107cfu/g比未包埋的活菌数高出两个数量级，达到每克活菌数百万个以上，从而，解决市售微生态制剂对高温的不稳定的问题。

具体实施方式

实施例1

一种鸡新城疫中药饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤：

称取以下重量份（kg）的中药(除鲜猪胆汁外)：过路黄80、连翘80、板蓝根60、金银花40、黄芪30、鲜猪胆汁5、甘草20；超微粉碎，加入中药总重量8倍量的50%的乙醇溶液，浸泡30min，武火煮沸，文火保温30min，冷却十二层纱布过滤；滤渣再加6倍量的水，武火煮沸，文火保温30min，冷却十二层纱布过滤，合并两次滤液，浓缩回收乙醇，用乙醇检测仪检测浓缩液中无乙醇时停止浓缩。

饲料添加剂的制备：以100 Kg浓缩液为单位添加白糖15Kg，并煮沸5min，冷却至常温，接种乳酸杆菌、木醋杆菌、拜耳结合酵母菌（市售）制剂10Kg，设定发酵温度33℃，湿度33%，pH5.5，静置发酵培养168h,至长出白色菌块为止，放入真空干燥箱内，设定干燥温度50℃，干燥时间8h，真空度0.08Mpa，将干燥后的白色菌块经超微粉碎后，用双层微胶囊进行包埋处理，按1%加入饲料中，经80℃，制粒10s，冷却即得颗粒饲料。

实施例2

一种鸡新城疫中药饲料添加剂的制备方法，包括以下步骤：

称取以下重量份(kg)的中药(除鲜猪胆汁外)：过路黄100、连翘100、板蓝根 80、金银花60、黄芪40、鲜猪胆汁10、甘草30；超微粉碎，加入中药总重量10倍量的70%的乙醇溶液，浸泡60min，武火煮沸，文火保温60min，冷却十二层纱布过滤；滤渣再加8倍量的水，武火煮沸，文火保温60min，冷却十二层纱布过滤，合并两次滤液，浓缩回收乙醇，用乙醇检测仪检测浓缩液中无乙醇时停止浓缩。

饲料添加剂的制备：以100 Kg浓缩液为单位添加白糖20Kg，并煮沸10min，冷却至常温，接种乳酸杆菌、木醋杆菌、拜耳结合酵母菌（市售）制剂15Kg，设定发酵温度37℃，湿度40%，pH6.5，静置发酵培养168h,至长出白色菌块为止，放入真空干燥箱内，设定干燥温度60℃，干燥时间12h，真空度0.1Mpa，将干燥后的白色菌块经超微粉碎后，用双层微胶囊进行包埋处理，按2%加入饲料中，经90℃，制粒15s，冷却即得颗粒饲料。

Claims (6)

1.一种鸡新城疫中药饲料添加剂的制备方法，其特征在于它是按以下步骤制备：1、取中药过路黄、连翘、板蓝根、金银花、黄芪、鲜猪胆、甘草；2、将各中药超微粉碎加乙醇溶液武火煮沸，文火保温，冷却过滤，浓缩滤液，加入白糖煮沸，冷却降至常温后接种乳酸杆菌、拜耳接合酵母菌及木醋杆菌，经168h发酵至长出白色菌块；3、将白色菌块低温真空干燥后，进行包埋，按比例添加到饲料中，经高温制粒冷却，制得颗粒饲料。

2.根据权利要求1所述的一种鸡新城疫中药饲料添加剂的制备方法，其特征是称取以下重量份的中药：过路黄80~100、连翘80~100、板蓝根60~80、金银花40~60、黄芪30~40、鲜猪胆汁5-10、甘草20~30。

3.根据权利要求1所述的一种鸡新城疫中药饲料添加剂的制备方法，其特征是，称取重量份的中药(除鲜猪胆汁外)，超微粉碎，加入中药总重量8～10倍量的50%～70%的乙醇溶液，浸泡30～60min，武火煮沸，文火保温30～60min，冷却十二层纱布过滤；滤渣再加6～8倍量的水，武火煮沸，文火保温30～60min，冷却十二层纱布过滤，合并两次滤液，浓缩回收乙醇，用乙醇检测仪检测浓缩液中无乙醇时停止浓缩。

4.根据权利要求1所述的一种鸡新城疫中药饲料添加剂的制备方法，其特征是以100 Kg浓缩液为单位添加白糖15～20Kg，并煮沸5～10min，冷却至常温，接种乳酸杆菌、木醋杆菌、拜耳结合酵母菌（市售）制剂10～15Kg，设定发酵温度33～37℃，湿度33%～40%，pH5.5～6.5，静置发酵培养168h,至长出白色菌块为止。

5.根据权利要求1所述的一种鸡新城疫中药饲料添加剂的制备方法，其特征是取出白色菌块，放入真空干燥箱内，设定干燥温度50～60℃，干燥时间8～12h，真空度0.08～0.1Mpa。

6.根据权利要求1所述的一种鸡新城疫中药饲料添加剂的制备方法，其特征是将干燥后的白色菌块经超微粉碎后，用双层微胶囊进行包埋处理，按1%～2%加入饲料中，经80～90℃，制粒10～15s，冷却即得颗粒饲料。