CN104382848B - 一种他克莫司混悬型滴眼液及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种他克莫司混悬型滴眼液的制备方法。该方法包括将他克莫司溶于有机溶剂中，通过微孔滤膜过滤除菌；将除菌过滤后的他克莫司有机溶液加入注射用水中，析出合适粒径的他克莫司微粒，采用切向流超滤装置置换溶剂，除去有机溶剂残留，得到无菌的他克莫司微粒悬浊液；再与经灭菌后的其余辅料的溶液混合均匀制得。本发明方法制备的他克莫司混悬型滴眼液，无菌和粒径均符合要求，可以有效增强药物在眼中的滞留性；且本发明工艺简单合理，适于放大生产。

Description

一种他克莫司混悬型滴眼液及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种混悬型滴眼液的制备方法，具体涉及他克莫司混悬型滴眼液的制备方法，属于药物制剂技术领域。

背景技术

结膜炎是眼科最常见和多发的疾病，是结膜组织在外界和机体自身因素的作用而发生的炎性反应的统称。虽然结膜炎本身对视力影响并不严重，但是当其炎症波及角膜或引起并发症时，可导致视力的损害。目前已有多种滴眼液上市，比如妥布霉素滴眼液、他克莫司滴眼液、奥洛他定滴眼液、酮替芬滴眼液等；其中有些药物是水溶性的，比如妥布霉素，奥洛他定等，有些药物水溶性很差，比如他克莫司；水溶性差的药物在制备混悬型滴眼液时，需要控制粒径，并且滴眼液制剂对无菌要求很高，所以灭菌方法会影响到滴眼液制剂最终的质量。

目前在滴眼液制备中常用的降低粒径的方法，主要有气流粉碎、球磨粉碎、冷冻干燥等方法。常用的灭菌方法有干热灭菌法、湿热灭菌法、过滤除菌法、辐射灭菌法等。

他克莫司(Tacrolimus，FK506)是一种疏水性大环内酯类免疫抑制剂，体外应用显示其免疫抑制作用是环孢素的10-100倍，临床上已广泛应用于治疗移植排斥和自身免疫性疾病，2008年日本批准他克莫司滴眼液用于治疗春季卡他性结膜炎。他克莫司几乎不溶于水，文献“中国医院药学杂志2005,14(11)：715-716”报道了他克莫司滴眼液的制备及临床应用，其中他克莫司滴眼液由他克莫司、羟丙甲纤维素、氯化钠和硫柳汞等组成；有文献“中国医院药学杂志2009,29(22)：1951-1952”报道了他克莫司滴眼液的质量控制及稳定性考察，这类滴眼液稳定性很差，经典恒温加速试验预测储存有效期结果表明，他克莫司滴眼液在25℃的有效期仅为46.69天。

随着新剂型新技术的研究，他克莫司眼用新剂型有脂质体、环糊精包合物、纳米粒和缓释胶原药膜等。他克莫司脂质体制剂的主要缺点是灭菌消毒困难，制备复杂且成本较高，易氧化产生毒性，所以临床应用较为困难；他克莫司环糊精包合物滴眼液用于眼部局部给药后，眼表药物已被快速清除，药物难以维持较长时间药效；他克莫司纳米粒制剂可以延长药物在角膜的滞留时间并且提高药物进入角膜浓度，但是纳米粒制剂在制备过程中易带入有机溶剂，残留溶剂不被临床所接收；他克莫司缓释胶原药膜是外形类似角膜接触镜的半透明柔软的药膜，由猪或牛巩膜提取而成，其不易实现工业化生产，患者顺应性差。

专利CN1069195C公布一种他克莫司混悬组合物的制备方法，将他克莫司与非离子表面活性剂溶于有机溶剂中，向其中加入水，得到平均粒径为5μm或5μm以下的微粒，冷冻干燥得到冻干产品。这种方法制备所得他克莫司微粒的粒径分布宽，粒径偏大；水加入有机溶剂中快速析出大量微粒极易聚集，给后期分散处理工序造成很大困难；水的加入速度对粒径有很大影响，工艺放大不易实现；冻干操作复杂，对设备要求高。且他克莫司对热不稳定，干热、湿热和辐射灭菌均会造成降解，导致杂质含量显著上升。

因此，开发一种路线简单合理、适于放大生产，粒径合适并可以达到无菌要求的混悬型滴眼液的制备方法有着非常重要的临床意义。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供一种无菌的他克莫司混悬型滴眼液的制备方法。

本发明的技术方案如下：

一种无菌的他克莫司混悬型滴眼液的制备方法，包括步骤如下：

将他克莫司溶于有机溶剂中，通过微孔滤膜过滤除菌；

将过滤除菌后的他克莫司的有机溶液加入注射用水中，析出粒径D₉₀小于5μm的他克莫司微粒，采用切向流超滤装置置换溶剂除去有机溶剂，使有机溶剂残留小于200ppm，得到无菌的他克莫司微粒悬浊液，再与经灭菌后的辅料的水溶液混合均匀制得无菌的混悬型滴眼液；

其中，所述有机溶剂为能与水混溶并能溶解他克莫司的溶剂；

所述辅料包括助悬剂、渗透压调节剂、防腐剂、pH调节剂。

优选的，一种无菌的他克莫司混悬型滴眼液的制备方法，步骤如下：

(1)将他克莫司溶于5-30质量倍的有机溶剂中，通过微孔滤膜过滤除菌，将除菌过滤后他克莫司的有机溶液加入8-30质量倍的注射用水中(此处析晶用的注射用水：他克莫司的有机溶液＝8-30：1)，析出合适粒径D₉₀小于5μm的他克莫司微粒，采用切向流超滤装置置换溶剂，洗滤4-6倍体积(以析晶用水计)，使有机溶剂残留小于200ppm，得到无菌的他克莫司微粒悬浊液；

所述有机溶剂为乙醇、甲醇、正丙醇、异丙醇、叔丁醇、正丁醇、丙酮、乙酸乙酯中的一种或几种；

(2)将助悬剂、渗透压调节剂和防腐剂用注射用水溶解，用pH调节剂调节pH值4.3-5.5，灭菌；

(3)将步骤(1)的他克莫司微粒混悬液加入到步骤(2)的溶液中混合均匀；

(4)加注射用水至全量，混合均匀；

(5)无菌分装。

根据本发明的方法，优选的，将过滤除菌后的他克莫司的有机溶液加入注射用水中，析出粒径D₉₀小于2μm的他克莫司微粒。更优选D₉₀为0.2-1μm。

根据本发明的方法，优选的，所述有机溶剂为乙醇或乙酸乙酯。所述有机溶剂与他克莫司的重量比为5～30:1，优选为10～20:1。所述有机溶剂在工艺中使用并最终除去。

根据本发明的方法，优选的，所述的助悬剂选自卡波姆、聚维酮、羟丙甲纤维素、玻璃酸钠、聚卡波菲、黄原胶、阿拉伯胶、聚乙烯醇、聚乙二醇、泊洛沙姆、吐温80、聚氧乙烯蓖麻油中的一种或几种；进一步优选聚乙烯醇或羟丙甲纤维素。助悬剂的用量根据具体种类选定，一般是他克莫司的0.5-20质量倍。

所述的渗透压调节剂选自氯化钠、氯化钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、甘露醇、甘油、硼酸、硼砂中的一种或几种；进一步优选氯化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠的组合，或者磷酸氢二钠与磷酸二氢钠的组合。渗透压调节剂的用量按本领域常识选择。

所述的防腐剂选自苯扎溴铵、苯扎氯铵、三氯叔丁醇、尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯中的一种或几种；防腐剂一般用量不超过滴眼液的0.01％。

所述的pH调节剂选自氢氧化钠、盐酸、磷酸、三乙醇胺、碳酸钠、碳酸氢钠中的一种或几种。一般是用它们的水溶液。

根据本发明的方法，优选的，所述过滤除菌用微孔滤膜的孔径为0.15-0.45μm。

上述优选技术方案中，步骤(2)所述的灭菌方式为过滤除菌、湿热灭菌或辐射灭菌。

进一步优选的技术方案中，所述他克莫司微粒的D₉₀为0.2-1μm。

进一步优选的技术方案中，步骤(1)中，将除菌过滤后他克莫司的有机溶液加入注射用水中时，控制加料速度50-75mL/min。

在加料速度较快时，采用高速剪切等适当辅助手段，可使有机溶剂快速扩散，析出他克莫司微粒达到所需要的粒度范围。

根据本发明的方法，优选的，制得的无菌的混悬型滴眼液在无菌环境中，用低密度聚乙烯滴眼剂瓶分装，5mL/支。

本发明技术方案中，采用的除菌过滤加析晶法来制备混悬型滴眼液，并采用切向流装置置换溶剂除去有机溶剂，可将有机溶剂残留控制在200ppm以内，最好在50ppm以内，既保证混悬粒径分布合格，也达到无菌要求。

本发明中，更优选的技术方案为：

一种他克莫司混悬型滴眼液的制备方法，以他克莫司混悬型滴眼液100体积份计，组成如下：

他克莫司0.1质量份；

助悬剂1.6质量份；

渗透压调节剂0.9质量份

防腐剂0.01质量份；

用pH调节剂调节pH值4.3-5.5；

有机溶剂(工艺中使用并最终除去的溶剂)1质量份；

注射用水补足至100体积份。

步骤如下：

(1)将他克莫司溶于有机溶剂中，通过微孔滤膜过滤除菌，将除菌过滤后他克莫司的有机溶液加入注射用水中，析出粒径D₉₀小于2μm的他克莫司微粒，采用切向流超滤装置滤除有机溶剂，洗滤4-6倍体积，使有机溶剂残留小于200ppm，得到无菌的他克莫司微粒悬浊液；

(2)将助悬剂、渗透压调节剂、防腐剂用注射用水溶解，用pH调节剂调节pH值4.3-5.5，灭菌；

(3)将步骤(1)的他克莫司微粒混悬液加入到步骤(2)的溶液中混合均匀；

(4)加注射用水至全量，混合均匀；

(5)无菌分装。

上述质量份单位为：克(g)，相应的体积份的单位为：毫升(mL)；或者质量份单位为：公斤(kg)，相应的体积份的单位为：升(L)。

例如：以他克莫司滴眼液100ml(100体积份)计，他克莫司0.1份指的是他克莫司0.1g；注射用水补足至100体积份指的是注射用水补足至100mL；有机溶剂1份，指的是有机溶剂1g(有机溶剂与他克莫司质量比10:1)。

上述优选技术方案中，步骤(2)所述的洗滤4-6倍体积，洗滤倍数越多有机溶剂残留越低。当选用乙醇为溶剂时，洗滤4倍体积时乙醇残留可降至200ppm。

本发明的技术关键点在于：

本发明采用微孔滤膜过滤除菌结合析晶法制备混悬型滴眼液，既可以达到无菌要求，也不会使滴眼液的杂质增加，同时粒径也符合眼用要求。

本发明发现控制他克莫司与有机溶剂的比例对于粒径D₉₀来说十分关键。一般认为有机溶剂所用比例越大微粒粒度越小，但不可避免地相应的析晶用的注射用水、洗滤用水的用量都要增加，而在切向流超滤装置不变的情况下洗滤时间延长，导致染菌风险增大。因此，本发明意外发现他克莫司与有机溶剂的比例控制在1:5-1:30，能够控制他克莫司微粒粒径D₉₀在所期望的范围内(粒径D₉₀小于10μm)。此时析晶用的注射用水是他克莫司的有机溶液的8-30质量倍，相应的洗滤用水是析晶用注射用水的4-6倍体积。最优选他克莫司与有机溶剂的比例为1:10-1:20。

此外，他克莫司有机溶液向注射用水中加料的速度与扩散条件也会对析出他克莫司微粒粒度有影响。一般情况下加料速度慢(＜1mL/min)，他克莫司的有机溶剂溶液扩散较好，粒度就小，但是这样无法满足生产过程中的无菌保证等综合条件控制。为了确保无菌控制，本发明优选较快的加料速度(约70mL/min)，采用高速剪切等相对较大的外力为含有他克莫司的有机溶剂提供快速扩散的条件，也能很好地辅助粒径的控制，实现粒径D₉₀小于5μm的技术目标。

本发明的有益效果在于：

1、本发明方法制备的他克莫司混悬型滴眼液，无菌和粒径均符合要求，可以有效增强药物在眼中的滞留性，避免了他克莫司全身应用的毒副作用；

2、本发明方法制备的他克莫司混悬型滴眼液不含有机溶剂，产品质量稳定，减少了眼睛局部用药的刺激性；

3、本发明他克莫司混悬型滴眼液的制备工艺简单，适合工业化生产。

具体实施方式

下面通过具体的制备实施例进一步说明本发明，但是，应当理解为，这些实施例仅仅是用于更详细具体地说明之用，而不应理解为用于以任何形式限制本发明。

实施例中过滤除菌使用滤膜装置购自颇尔公司；使用的切向流超滤装置购自日本旭化成公司，洗滤用溶剂为注射用水。

实施例1、0.1％他克莫司混悬滴眼液的制备(0.1％是指0.1g/100mL，即1mg/mL；下同)处方：

制备工艺：

(1)称取处方量的他克莫司，加入乙醇中搅拌溶解，通过0.2μm滤膜过滤除菌，得到无菌滤液；在无菌环境中，将滤液加入200mL注射用水中，析出他克莫司微粒(粒径D₉₀1.0μm)，通过切向流超滤装置洗滤去除乙醇溶剂，洗滤4-6倍体积得到无菌的他克莫司微粒悬浊液；

(2)称取处方量的聚乙烯醇，加入700mL注射用水中，加热搅拌溶解，将苯扎氯铵、氯化钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠，加入其中搅拌溶解，用磷酸或氢氧化钠溶液调节pH值4.3-5.5，通过0.2μm滤膜过滤除菌；

(3)将步骤(1)的他克莫司微粒悬浊液加入步骤(2)的溶液中，补足处方量注射用水，混合均匀；

(4)在无菌环境中，用低密度聚乙烯滴眼剂瓶分装，5mL/支。

实施例2、0.1％他克莫司混悬滴眼液的制备

制备工艺：

(1)称取处方量的他克莫司加入乙酸乙酯中搅拌溶解，通过0.2μm滤膜过滤除菌，得到无菌滤液，在无菌环境中，将滤液加入300ml注射用水中，析出他克莫司微粒(平均粒径D₉₀1.3μm)，通过切向流超滤装置洗滤去除乙酸乙酯溶剂，洗滤4-6倍体积，得到无菌的他克莫司微粒悬浊液；

(2)称取处方量的羟丙甲纤维素0.5g，加入300ml注射用水中，搅拌溶解，通过121℃30min湿热灭菌，

(3)称取苯扎溴铵0.1g、磷酸二氢钠3.5g、磷酸氢二钠0.85g，加入300ml注射用水中，搅拌溶解，磷酸或氢氧化钠调节pH4.3-5.5通过0.2μm滤膜过滤除菌，得到无菌溶液3。

(4)将无菌的他克莫司微粒悬浊液加入无菌溶液2中，混合均匀，将无菌溶液3加入其中，补足处方量注射用水，混合均匀。

(5)在无菌环境中，用低密度聚乙烯滴眼剂瓶分装，5mL/支。

试验例1：对实施例1制备的他克莫司滴眼液进行了稳定性考察试验。

(1)影响因素试验：

取实施例1制备的他克莫司滴眼液，采用低密度聚乙烯滴眼剂瓶包装，除去外包装，分别置于光照(4500lx±500lx)、高温40℃、高温60℃的条件下，放置10天。分别于第5天、10天取样，检测各项稳定性考察指标，结果见表1。

表1 他克莫司滴眼液影响因素试验结果表

从表1中可以看出，本发明工艺制备的他克莫司混悬滴眼液在光照条件下放置10天，各项质量指标与0天比较，有关物质符合质量要求，其余各项指标均无明显变化；在60℃高温条件下放置10天，各项质量指标与0天比较，有关物质符合质量要求，其他各项指标均无明显变化；在40℃高温条件下放置10天，各项质量指标0天比较均无明显变化，稳定性良好。

(2)加速试验：

取实施例1制备的他克莫司滴眼液，采用低密度聚乙烯滴眼剂瓶包装，置于温度40℃±2℃、相对湿度25％±5％的条件下放置6个月，分别于第1、2、3、6个月末取样，检测各项稳定性考察指标，结果见表2。

表2 他克莫司滴眼液加速试验结果表

从表2中可以看出，本发明工艺制备的他克莫司混悬滴眼液在40℃±2℃、25％±5％RH条件下放置6个月，各项质量指标与0天比较，最大单个杂质和粒度的变化均符合质量标准的要求，其他指标与0天相比无明显变化，稳定性良好。

(3)长期试验：

取实施例1制备的他克莫司滴眼液，采用低密度聚乙烯滴眼剂瓶包装，置于温度30℃±2℃、相对湿度35％±5％的条件下放置6个月，分别于第3、6个月取样，检测各项稳定性考察指标，结果见表3。

表3 他克莫司滴眼液长期试验结果表

从表3中可以看出，本发明工艺制备的他克莫司混悬滴眼液在30℃±2℃、35％±5％RH条件下放置6个月，各项质量指标与0天比较，最大单个杂质和粒度的变化均符合质量标准的要求，其他指标均无明显变化，稳定性良好。

试验例2：他克莫司滴眼液对日本大耳白兔的眼部刺激性试验

试验目的：观察日本大耳白兔分别多次给予他克莫司滴眼液后对给药部位的刺激性及及产生刺激性后的可逆性。

试验样品：本发明实施例1的产品进行眼部刺激性试验

试验方法：取健康的日本大耳白兔4只，雌雄各半，采用同体左右侧自身对照法。试验前24小时内对每只动物的双眼进行检查(包括使用荧光素钠检查)，有眼睛刺激症状、角膜缺陷和结膜损伤的动物不能用于试验。每只动物右侧眼睛滴入0.05ml他克莫司滴眼液原液，左侧眼睛滴入同体积0.9％氯化钠注射液，模拟临床进行给药，上午下午各1次，连续给药28天。每天给药前以及末次给药后1、2、4、24、48和72h对眼部进行大体检查。第2、8、15、22天初次给药前和末次给药后1、24和72h使用裂隙灯显微镜进行眼科检查(包括荧光素钠检查)，按眼部刺激评分标准对角膜、虹膜和结膜的刺激反应进行检查评分、记录眼部反应的分值。如72小时未见任何刺激症状，则试验结束，如存在持久性损伤，延长观察期限至药后14天再次进行眼科检查。

试验结果：家兔连续28天给予他克莫司滴眼液，裂隙灯显微镜检查显示动物对照侧和用药侧角膜透明、无浑浊，荧光素钠染色检查部分动物偶见散在或弥漫性黄绿色斑，每个时间点对照侧和用药侧均有发现，但刺激反应分值均不超过1分；动物虹膜纹理清晰、无充血、无肿胀，结膜无充血、无水肿、无分泌物，每个时间点刺激反应分值均为0分；综上所述，他克莫司滴眼液给药刺激性评价为无刺激性。

实施例3、0.1％他克莫司混悬滴眼液的制备

处方：

制备工艺：

(1)称取处方量的他克莫司，加入乙醇中搅拌溶解，通过0.2μm滤膜过滤除菌，得到无菌滤液；在无菌环境中，将滤液加入400mL注射用水中，析出他克莫司微粒(粒径D₉₀0.5μm)，通过切向流超滤装置洗滤去除乙醇溶剂，洗滤4-6倍体积，并将料液浓缩至200-300ml，得到无菌的他克莫司微粒悬浊液；

(2)称取处方量的聚乙烯醇，加入700mL注射用水中，加热搅拌溶解，将苯扎氯铵、氯化钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠，加入其中搅拌溶解，用磷酸或氢氧化钠溶液调节pH值4.3-5.5，通过0.2μm滤膜过滤除菌；

(3)将步骤(1)的他克莫司微粒悬浊液加入步骤(2)的溶液中，补足处方量注射用水，混合均匀；

(4)在无菌环境中，用低密度聚乙烯滴眼剂瓶分装，5mL/支。

试验例3：

实施例3的产品稳定性考察，在30℃±2℃、35％±5％RH条件下放置6个月，结果见下表4。

表4 他克莫司滴眼液(粒度D₉₀0.5μm)长期试验结果表

对比表3、表4分析可知，粒径符合质量要求的他克莫司混悬型滴眼液产品，在30℃±2℃、35％±5％RH条件下放置6个月，各项指标变化均符合要求，两者稳定性变化趋势相同。

实施例4(对比例)、0.1％他克莫司混悬滴眼液的制备

处方：

制备工艺：

(1)他克莫司原料药经气流粉碎，粒径D₉₀6.3μm。称取处方量的他克莫司，25kgy辐射灭菌。

(2)称取处方量的聚乙烯醇，加入300mL注射用水中，加热搅拌溶解，湿热灭菌，将灭菌后的他克莫司微粉加入其中，探头超声至分散均匀。

(3)将苯扎氯铵、氯化钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠，加入500mL注射用水中搅拌溶解，用磷酸或氢氧化钠溶液调节pH值4.3-5.5，通过0.2μm滤膜过滤除菌；

(4)将步骤(2)的他克莫司微粒悬浊液加入步骤(3)的溶液中，补足处方量注射用水，混合均匀；

(5)在无菌环境中，用低密度聚乙烯滴眼剂瓶分装，5mL/支。

试验例4：实施例4步骤(1)辐射灭菌对原料药他克莫司的影响

表5 辐射灭菌对他克莫司原料药的影响

从表5中可以看出，辐射灭菌会造成他克莫司降解，有关物质显著增长。

试验例5：实施例4的产品稳定性考察，在30℃±2℃、35％±5％RH条件下放置6个月，结果见表6。

表:6 他克莫司滴眼液(粒度D₉₀6μm)长期试验结果表

从表5中可以看出，气流粉碎工艺制备的他克莫司混悬滴眼液在30℃±2℃、35％±5％RH条件下放置6个月，粒度显著增长，沉降体积比有降低趋势，其余各项质量指标与0天比较无明显变化。

对比表3、表6分析可知，粒径偏大的他克莫司混悬型滴眼液，在储存过程中粒径显著增长；而析晶工艺制备的他克莫司混悬型滴眼液，储存过程中粒径没有明显变化，稳定性更好。

Claims (10)

1.一种无菌的他克莫司混悬型滴眼液的制备方法，包括步骤如下：

将他克莫司溶于5-30质量倍的有机溶剂中，通过微孔滤膜过滤除菌；

将过滤除菌后的他克莫司的有机溶液加入8-30质量倍的注射用水中，控制加料速度50-75mL/min，析出粒径D₉₀小于5μm的他克莫司微粒，采用切向流超滤装置置换溶剂除去有机溶剂，使有机溶剂残留小于200ppm，得到无菌的他克莫司微粒悬浊液，再与经灭菌后的辅料的水溶液混合均匀制得无菌的混悬型滴眼液；

其中，所述有机溶剂为乙醇或乙酸乙酯；

所述辅料包括助悬剂、渗透压调节剂、防腐剂、pH调节剂。

2.如权利要求1所述的混悬型滴眼液的制备方法，其特征在于步骤如下：

（1）将他克莫司溶于5-30质量倍的有机溶剂中，通过微孔滤膜过滤除菌，将除菌过滤后他克莫司的有机溶液加入8-30质量倍的注射用水中，析出合适粒径D₉₀小于5μm的他克莫司微粒，采用切向流超滤装置置换溶剂，洗滤4-6倍体积，以析晶用水计，使有机溶剂残留小于200ppm，得到无菌的他克莫司微粒悬浊液；

（2）将助悬剂、渗透压调节剂和防腐剂用注射用水溶解，用pH调节剂调节pH值4.3-5.5，灭菌；

（3）将步骤（1）的他克莫司微粒混悬液加入到步骤（2）的溶液中混合均匀；

（4）加注射用水至全量，混合均匀；

（5）无菌分装。

3.如权利要求1或2所述的无菌的他克莫司混悬型滴眼液的制备方法，其特征在于将过滤除菌后的他克莫司的有机溶液加入注射用水中，析出粒径D₉₀小于2μm的他克莫司微粒。

4.如权利要求1或2所述的无菌的他克莫司混悬型滴眼液的制备方法，其特征在于将过滤除菌后的他克莫司的有机溶液加入注射用水中，析出粒径D₉₀为0.2-1μm。

5.如权利要求1或2所述的无菌的他克莫司混悬型滴眼液的制备方法，其特征在于所述有机溶剂与他克莫司的重量比为10~20:1。

6.如权利要求1或2所述的无菌的他克莫司混悬型滴眼液的制备方法，其特征在于所述的助悬剂选自卡波姆、聚维酮、羟丙甲纤维素、玻璃酸钠、聚卡波菲、黄原胶、阿拉伯胶、聚乙烯醇、聚乙二醇、泊洛沙姆、吐温80、聚氧乙烯蓖麻油中的一种或几种；

所述的渗透压调节剂选自氯化钠、氯化钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、甘露醇、甘油、硼酸、硼砂中的一种或几种；

所述的防腐剂选自苯扎溴铵、苯扎氯铵、三氯叔丁醇、尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯中的一种或几种；

所述的pH调节剂选自氢氧化钠、盐酸、磷酸、三乙醇胺、碳酸钠、碳酸氢钠中的一种或几种。

7.如权利要求2所述的无菌的他克莫司混悬型滴眼液的制备方法，其特征在于步骤（2）所述的灭菌方式为过滤除菌、湿热灭菌或辐射灭菌。

8.如权利要求1或2所述的无菌的他克莫司混悬型滴眼液的制备方法，其特征在于所述过滤除菌用微孔滤膜的孔径为0.15-0.45μm。

9.如权利要求1或2所述的无菌的他克莫司混悬型滴眼液的制备方法，其特征在于制得的无菌的混悬型滴眼液在无菌环境中，用低密度聚乙烯滴眼剂瓶分装，5mL/支。

10.如权利要求1或2所述的无菌的他克莫司混悬型滴眼液的制备方法，其特征在于，以他克莫司混悬型滴眼液100体积份计，组成如下：

他克莫司 0.1质量份；

助悬剂1.6质量份；

渗透压调节剂0.9质量份

防腐剂0.01质量份；

用pH调节剂调节pH值4.3-5.5；

有机溶剂1质量份；

注射用水补足至100体积份；

步骤如下：

（1）将他克莫司溶于有机溶剂中，通过微孔滤膜过滤除菌，将除菌过滤后他克莫司的有机溶液加入注射用水中，析出粒径D₉₀小于2μm的他克莫司微粒，采用切向流超滤装置滤除有机溶剂，洗滤4-6倍体积，使有机溶剂残留小于200ppm，得到无菌的他克莫司微粒悬浊液；

（2）将助悬剂、渗透压调节剂、防腐剂用注射用水溶解，用pH调节剂调节pH值4.3-5.5，灭菌；

（3）将步骤（1）的他克莫司微粒混悬液加入到步骤（2）的溶液中混合均匀；

（4）加注射用水至全量，混合均匀；

（5）无菌分装。