CN104371939B - 一种培养处理焦化废水所用复合菌的培养基及其应用 - Google Patents
一种培养处理焦化废水所用复合菌的培养基及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104371939B CN104371939B CN201310356593.0A CN201310356593A CN104371939B CN 104371939 B CN104371939 B CN 104371939B CN 201310356593 A CN201310356593 A CN 201310356593A CN 104371939 B CN104371939 B CN 104371939B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- culture medium
- culture
- coking
- wastewater
- content
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F3/00—Biological treatment of water, waste water, or sewage
- C02F3/34—Biological treatment of water, waste water, or sewage characterised by the microorganisms used
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F2103/00—Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated
- C02F2103/34—Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated from industrial activities not provided for in groups C02F2103/12 - C02F2103/32
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Hydrology & Water Resources (AREA)
- Environmental & Geological Engineering (AREA)
- Water Supply & Treatment (AREA)
- Purification Treatments By Anaerobic Or Anaerobic And Aerobic Bacteria Or Animals (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明涉及微生物菌剂培养技术领域,特别是涉及一种培养处理焦化废水所用复合菌的培养基及其应用。培养处理焦化废水所用复合菌扩大培养的培养基为Ⅱ号培养基;将假单胞菌、不动杆菌、博德特氏菌、克雷伯氏菌、巨大芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌培养于Ⅱ号培养基中用于制备处理焦化废水的菌剂进而去除焦化废水中的污染物。将混合菌于本发明Ⅱ号培养基中培养所得菌体数量是使用常规LB培养基的1.5‑2.5倍,并且Ⅱ号培养基成本仅为常规LB培养基的50‑70%。
Description
技术领域
本发明涉及微生物菌剂培养技术领域,特别是涉及一种培养处理焦化废水所用复合菌的培养基及其应用。
背景技术
目前中国焦化废水排放量大,COD高,是引起水体环境污染的重大污染源。利用微生物的新陈代谢作用去除废水中有机污染物的生物处理技术同物理、化学法相比,具有成本低、效率高、易操作、无二次污染的优点,是今后发展的一个必然趋势,目前没有比生化法更经济更有效的方法。但焦化废水的共同特征是含较多生物难降解的持久性污染物,不易被现有生物处理系统中的微生物分解,从而造成在环境中的大量积累;另外,在具体的水处理技术应用中,常规工艺中自然形成的生物膜其生物菌群活性和数量较低,滤料表面生物相构成复杂,难以形成高活性菌群,针对一些有毒有害有机物的降解效能得不到进一步提高。因此,采用微生物生态位理论将各类降解菌以科学的配比,构建出高活性,稳定性强,能够高效降解废水中难生物降解有机物的复合菌剂,进而需要得到能够培养效率高同时使菌剂性能稳定,并具有高生物活性的特定培养基成分是目前急需解决的问题。进而将菌剂实现产业化,使其更好的作用于废水生物处理过程中。
发明内容
本发明的目的是提供一种培养处理焦化废水所用复合菌能力强、成本低的培养基及其应用方法。
为实现上述目的,本发明采用的技术方案为:
一种培养处理焦化废水所用复合菌的培养基:培养处理焦化废水所用复合菌扩大培养的培养基为Ⅱ号培养基;
其中Ⅱ号培养基成分为每升含有蔗糖8-12g,可溶性淀粉12-17g,甘油3-7g,鱼粉1-3g,尿素6-10g,(NH4)2SO41-3g,NaCl2-4g,K2HPO42-4g,KH2PO40.5-2g,pH6.0-7.0。
进一步的说,Ⅱ号培养基成分为每升含有蔗糖10g,可溶性淀粉15g,甘油5g,鱼粉2g,尿素8g,(NH4)2SO42g,NaCl3g,K2HPO43.5g,KH2PO41.5g,pH7.0。
所述复合菌按数量百分比计,假单胞菌含量45%-50%,不动杆菌含量10%-15%,博德特氏菌含量5%-10%,克雷伯氏菌含量5%-10%,巨大芽孢杆菌5%-10%,枯草芽孢杆菌5%-10%。
假单胞菌(Pseudomonas sp.)SY-NPD-3的菌种保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.6823;保藏日期为2012年11月13日,保藏单位地址为北京市朝阳区大屯路,中国科学院微生物研究所;
不动杆菌(Acinetobacter sp.)SY-PD-27的菌种保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.6824;保藏日期为2012年11月13日,保藏单位地址为北京市朝阳区大屯路,中国科学院微生物研究所;
克雷伯氏菌(Klebsiella sp.)SY-SW51的菌种保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.6826;保藏日期为2012年11月13日,保藏单位地址为北京市朝阳区大屯路,中国科学院微生物研究所;
巨大芽孢杆菌(Bacillus magterium)SY-Z5的菌种保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.5225;保藏日期为2011年9月6日,保藏单位地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所;
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)SY-ND的菌种保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.5224;保藏日期为2011年9月6日,保藏单位地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所;
博德特氏菌(Bordetella sp)SY-PDD-9的菌种保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.6825,保藏日期为2012年11月13日,保藏单位地址为北京市朝阳区大屯路,中国科学院微生物研究所;
进一步的说,所述复合菌按数量百分比计,假单胞菌含量50%,不动杆菌含量15%,博德特氏菌含量5%,克雷伯氏菌含量10%,巨大芽孢杆菌10%,枯草芽孢杆菌10%。
培养处理焦化废水所用复合菌的培养基的应用,将假单胞菌、不动杆菌、博德特氏菌、克雷伯氏菌、巨大芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌复合菌扩大培养于权利要求1所述的培养基中用于制备处理焦化废水的菌剂进而去除焦化废水中的污染物。
具体操作如下:
1)各菌株的培养:将假单胞菌、不动杆菌、博德特氏菌、克雷伯氏菌、巨大芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌分别接种于Ⅰ号培养基中进行培养,在120rpm/min摇床于28-32℃培养24-28h,使各菌浓度达到108个/mL以上,之后将各菌株按数量百分比计,假单胞菌含量45%-50%,不动杆菌含量10%-15%,博德特氏菌含量5%-10%,克雷伯氏菌含量5%-10%,巨大芽孢杆菌5%-10%和枯草芽孢杆菌5%-10%混合;
2)复合菌放大培养:按2-5%(体积)比例将混合菌接种于Ⅰ号培养基中进行培养,在120rpm/min摇床于30℃培养24-28h,混合菌浓度可达到109个/mL,之后再按2-5%(体积)比例将混合菌接种于Ⅱ号培养基中于28-32℃,pH=7.0条件下发酵培养24-28h,使溶氧量保持在40%-60%,并加入发酵培养液量2/10000的消泡剂,使复合菌浓度达到1010-1011个/mL;3)菌剂的制备:将上述放大培养的菌体离心,沉淀中加入无机盐缓冲液(KH2PO40.9g/L,Na2HPO4·12H2O6.5g/L)配成菌悬液(菌体浓度109—1010CFU/mL),而后与草炭土混合,混合比例1:1(质量比),即得固体菌剂。
所述步骤2)将Ⅱ号培养基总量的3/4(质量)添加到发酵罐中,将Ⅰ号培养基中放大培养的混合菌接种于Ⅱ号培养基中,进行发酵培养,培养8-12h后将剩余的培养基补入发酵罐中,继续进行发酵培养,培养过程中通入空气使培养过程中溶氧量保持在40%-60%,并添加GPES型消泡剂,添加量为培养基的2/10000(体积)。
本发明所具有的优点是:在本发明所述的Ⅱ号培养基培养所得的菌体数量是使用常规LB培养基的1.5-2.5倍,并且生长出的混合菌性能稳定,生物活性高、有机污染物降解能力强,氨氮去除效果好;由于Ⅱ号培养基不含常规LB培养基的胰蛋白胨等物质,其原料成本仅为LB培养基的50-70%,适合工业化使用。
具体实施方式
下面仅用本发明实验室分离得到的假单胞菌(CGMCC No.6823)、不动杆菌(CGMCCNo.6824)、博德特氏菌(CGMCC No.6825)、克雷伯氏菌(CGMCC No.6826)、巨大芽孢杆菌(CGMCC No.5225)、枯草芽孢杆菌(CGMCC No.5224)六种菌说明本发明的实施方案和效果,但本发明并不限于下述实施例。
实施例1
培养液配制:
Ⅰ号培养基:胰化蛋白胨10g,酵母提取物5g,NaCl10g,清水1000mL,pH7.0,121℃灭菌20min。
Ⅱ号培养基为:蔗糖10g,可溶性淀粉15g,甘油5g,鱼粉2g,尿素8g,(NH4)2SO42g,NaCl3g,K2HPO43.5g,KH2PO41.5g,清水1000mL,pH7.0,121℃灭菌20min。
制备上述所述复合菌剂的方法,其步骤如下:
1)复合菌制备:将假单胞菌、不动杆菌、博德特氏菌、克雷伯氏菌、巨大芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌分别接种于Ⅰ号培养基中进行培养,在120rpm/min摇床于30℃培养24h,使各菌浓度达到108个/mL以上,之后将所述菌株按数量百分比计混合,具体为复合菌按数量百分比计,假单胞菌含量50%,不动杆菌含量15%,博德特氏菌含量5%,克雷伯氏菌含量10%,巨大芽孢杆菌10%,枯草芽孢杆菌10%。
2)复合菌放大培养:按3%(体积)比例将混合菌接种于Ⅰ号培养液中进行培养,在120rpm/min摇床于30℃培养24h,混合菌浓度可达到109个/mL,将Ⅱ号培养基总量的3/4(质量)添加到发酵罐中,将Ⅰ号培养基中放大培养的混合菌按3%(体积)接种于Ⅱ号培养基中,于30℃下进行发酵培养,用HCl和NaOH调节培养基pH值,使其保持在7.0,培养8h后将剩余的培养基补入发酵罐中,继续进行发酵培养,培养过程中通入空气以空气压缩机为气源,以转子流量计调节通气量,并采用设置的搅拌转速与通气量联动使培养过程中溶氧量保持在40%-60%,通入空气的速率分别按2L/min,6L/min,12L/min通入,并且每8h进行一次改变;发酵培养过程中添加GPES型消泡剂(聚醚类消泡剂),添加量为培养基的2/10000(体积),整个扩大培养过程为培养时间24~28h,使复合菌浓度达到1010-1011个/mL。
表1 各菌株在Ⅱ号培养基与常规LB培养基培养48h后菌体浓度比较
3)将步骤2)获得的菌液在15℃、5000r/min的条件下离心30min,收集菌体与无机盐缓冲液(KH2PO40.9g/L,Na2HPO4·12H2O6.5g/L)混合,配成菌悬液(按稀释或浓缩比例计算无机盐缓冲液添加量,使菌体浓度为109—1010CFU/mL),而后再以草炭土作为载体,草炭土与菌悬液按1:1(质量比)均匀混合,在50℃条件下烘干12-18h,得到干燥的固体菌剂。
实施例2:
将上述经实施例1培养基制备所得的复合菌剂加入到不同的包含酚类、杂环类、多环芳烃类焦化废水中,其加入量分别为焦化废水重量的0.5%,实际处理效果见表,添加菌剂后均可不同程度的提高废水COD的去除率。
表2 复合菌剂对实际焦化类废水的处理效果
Claims (5)
1.一种培养处理焦化废水所用复合菌的培养基的应用,其特征在于:将假单胞菌(Pseudomonas sp.)CGMCC No.6823、不动杆菌(Acinetobacter sp.)CGMCC No.6824、博德特氏菌(Bordetella sp)CGMCC No.6825、克雷伯氏菌(Klebsiella sp.)CGMCC No.6826、巨大芽孢杆菌(Bacillus magterium)CGMCC No.5225和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)CGMCC No.5224复合菌扩大培养于培养基中用于制备处理焦化废水的菌剂进而去除焦化废水中的污染物;
培养处理焦化废水所用复合菌扩大培养的培养基为Ⅱ号培养基;
其中Ⅱ号培养基成分为每升含有蔗糖8-12g,可溶性淀粉12-17g,甘油3-7g,鱼粉1-3g,尿素6-10g,(NH4)2SO4 1-3g,NaCl 2-4g,K2HPO42-4g,KH2PO4 0.5-2g,pH6.0-7.5;
所述复合菌按数量百分比计,假单胞菌含量45%-50%,不动杆菌含量10%-15%,博德特氏菌含量5%-10%,克雷伯氏菌含量5%-10%,巨大芽孢杆菌5%-10%,枯草芽孢杆菌5%-10%。
2.按权利要求1所述的培养处理焦化废水所用复合菌的培养基的应用,其特征在于:Ⅱ号培养基成分为每升含有蔗糖10g,可溶性淀粉15g,甘油5g,鱼粉2g,尿素8g,(NH4)2SO4 2g,NaCl 3g,K2HPO4 3.5g,KH2PO41.5g,pH 7.0。
3.按权利要求1所述的培养处理焦化废水所用复合菌的培养基的应用,其特征在于:所述复合菌按数量百分比计,假单胞菌含量50%,不动杆菌含量15%,博德特氏菌含量5%,克雷伯氏菌含量10%,巨大芽孢杆菌10%,枯草芽孢杆菌10%。
4.按权利要求1所述培养处理焦化废水所用复合菌的培养基的应用,其特征在于:
1)各菌株的培养:将假单胞菌、不动杆菌、博德特氏菌、克雷伯氏菌、巨大芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌分别接种于Ⅰ号培养基中进行培养,在120rpm/min摇床于28-32℃培养24-28h,使各菌浓度达到108个/mL以上,之后将各菌株按数量百分比计,假单胞菌含量45%-50%,不动杆菌含量10%-15%,博德特氏菌含量5%-10%,克雷伯氏菌含量5%-10%,巨大芽孢杆菌5%-10%和枯草芽孢杆菌5%-10%混合;
2)复合菌放大培养:按2-5%体积比例将混合菌接种于Ⅰ号培养基中进行培养,在120rpm/min摇床于30℃培养24-28h,混合菌浓度可达到109个/mL,之后再按2-5%体积比例将混合菌接种于Ⅱ号培养基中于28-32℃,pH=7.0条件下发酵培养24-28h,使溶氧量保持在40%-60%,并加入发酵培养液量2/10000体积的消泡剂,使复合菌浓度达到1010-1011个/mL;
3)菌剂的制备:将上述放大培养的菌体离心,沉淀中加入无机盐缓冲液配成菌悬液,而后与草炭土混合,即得固体菌剂;无机盐缓冲液为:KH2PO4 0.9g/L,Na2HPO4·12H2O 6.5g/L;
Ⅰ号培养基为:胰化蛋白胨10g,酵母提取物5g,NaCl 10g,清水1000mL,pH 7.0,121℃灭菌20min。
5.按权利要求4所述培养处理焦化废水所用复合菌的培养基的应用,其特征在于:所述步骤2)将Ⅱ号培养基总量的3/4质量添加到发酵罐中,将Ⅰ号培养基中放大培养的混合菌接种于Ⅱ号培养基中,进行发酵培养,培养8-12h后将剩余的培养基补入发酵罐中,继续进行发酵培养,培养过程中通入空气使培养过程中溶氧量保持在40%-60%,并添加GPES型消泡剂,添加量为培养基的2/10000体积。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201310356593.0A CN104371939B (zh) | 2013-08-15 | 2013-08-15 | 一种培养处理焦化废水所用复合菌的培养基及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201310356593.0A CN104371939B (zh) | 2013-08-15 | 2013-08-15 | 一种培养处理焦化废水所用复合菌的培养基及其应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN104371939A CN104371939A (zh) | 2015-02-25 |
CN104371939B true CN104371939B (zh) | 2017-07-21 |
Family
ID=52551137
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201310356593.0A Active CN104371939B (zh) | 2013-08-15 | 2013-08-15 | 一种培养处理焦化废水所用复合菌的培养基及其应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN104371939B (zh) |
Families Citing this family (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110257288B (zh) * | 2019-06-23 | 2023-07-28 | 博瑞德环境集团股份有限公司 | 一种培养处理羟乙基纤维素生产外排废水所用复合菌的培养基及其应用 |
CN114929634B (zh) * | 2019-08-27 | 2024-03-29 | 微生物发现集团有限责任公司 | 用于废料、水或土壤处理或者用于饲喂动物的微生物 |
CN112522148B (zh) * | 2020-12-09 | 2022-10-14 | 江南大学 | 一种利用印染废水培养高性能复合菌群的方法 |
CN112961794B (zh) * | 2021-01-19 | 2023-01-03 | 西安中地环境科技有限公司 | 一种吸附汞的复合菌制剂及应用 |
CN113957004B (zh) * | 2021-08-30 | 2024-02-20 | 中国科学院烟台海岸带研究所 | 一株金黄杆菌及在制备盐生植物附生修复养护菌剂中的应用 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101960005A (zh) * | 2008-02-25 | 2011-01-26 | 味之素株式会社 | 5'-鸟苷酸的生产方法 |
CN101993904A (zh) * | 2009-08-10 | 2011-03-30 | 味之素株式会社 | 5’-鸟苷酸的生产方法 |
CN103214101A (zh) * | 2012-01-19 | 2013-07-24 | 中国中化股份有限公司 | 一种微生物絮凝剂及其制备与用途 |
-
2013
- 2013-08-15 CN CN201310356593.0A patent/CN104371939B/zh active Active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101960005A (zh) * | 2008-02-25 | 2011-01-26 | 味之素株式会社 | 5'-鸟苷酸的生产方法 |
CN101993904A (zh) * | 2009-08-10 | 2011-03-30 | 味之素株式会社 | 5’-鸟苷酸的生产方法 |
CN103214101A (zh) * | 2012-01-19 | 2013-07-24 | 中国中化股份有限公司 | 一种微生物絮凝剂及其制备与用途 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN104371939A (zh) | 2015-02-25 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN109207413B (zh) | 一种高效石油降解复合菌剂及其制备方法与应用 | |
CN104371939B (zh) | 一种培养处理焦化废水所用复合菌的培养基及其应用 | |
CN106906170A (zh) | 复合微生物菌剂及其制备方法和应用 | |
CN101914470B (zh) | 一株醋酸钙不动杆菌及其培养方法与应用 | |
CN101597576B (zh) | 一种石油污染土壤修复固体菌剂及其制备方法和应用 | |
CN104312938B (zh) | 恶臭假单胞菌菌株及其菌剂和应用 | |
CN105420147A (zh) | 一种强化硝酸钙治理黑臭河流的复合微生物制剂 | |
CN110982748B (zh) | 一种用于煤矸石人工生态基质的复合微生物菌剂制备及应用 | |
CN101735997B (zh) | 一种强化植物修复砷污染场地的微生物菌剂及其制备和应用方法 | |
CN106635861B (zh) | 一种耐盐的脱cod脱氮微生物菌剂及其制备方法 | |
CN104230004A (zh) | 一种处理谷氨酸发酵废水的生物制剂 | |
CN105400723A (zh) | 一种用于河道治理的复合微生物制剂 | |
CN112592240A (zh) | 一种修复土壤镉污染的生物碳基复合调理剂及其制作方法 | |
CN105132300A (zh) | 一种自然水体生态净化菌剂的制备方法 | |
CN106754572A (zh) | 一株解淀粉芽孢杆菌及其用途 | |
CN110591974A (zh) | 一种用于皮革污泥干化的嗜热微生物菌剂的制备及使用方法 | |
WO2022142381A1 (zh) | 矿化微生物粉剂制备方法 | |
WO2023039921A1 (zh) | 一种石油烃降解复合微生物菌剂及其制备方法和应用 | |
CN110093292A (zh) | 一种用于处理生活污泥的复合生物制剂及制备方法和处理方法 | |
CN117049910B (zh) | 一种利用微生物菌剂处理城市污泥生产生物有机肥的方法 | |
CN108315278A (zh) | 一种微生物制剂、制备方法及其在污水处理中的应用 | |
CN103897997A (zh) | 一种生物增效菌剂及其应用 | |
CN106119150B (zh) | 一种除磷微生物菌剂及其制备方法和应用 | |
CN111072156A (zh) | 一种用于黑臭水体治理的复合微生态制剂 | |
CN105154350B (zh) | 一种耐盐脱氮复合菌剂及其制备方法和应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant |