CN104370760A - 模拟移动床色谱拆分奥昔布宁对映体的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种模拟移动床色谱拆分手性药物对映体的方法。本发明的特征是：采用模拟移动床色谱系统，填料为表面涂敷了直链淀粉-三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)的球形硅胶，流动相为正己烷、乙醇和三氟乙酸（TFA）溶液，在正相条件下拆分奥昔布宁对映体得到高纯度的R-奥昔布宁和S-奥昔布宁。模拟移动床色谱系统是连续化生产，自动化程度高，生产效率高。

Description

模拟移动床色谱拆分奥昔布宁对映体的方法

技术领域

本发明涉及一种手性药物的拆分技术，特别是奥昔布宁对映体的模拟移动床色谱分离方法。

背景技术

奥昔布宁英文名称oxybutynin chloride 或 Ditropan，为第三代治疗尿失禁首选药物，其分子中含有一个手性碳原子，临床上以外消旋体的形式使用，但临床前体外组织和体内活性研究证实，其两种对映体具有不同的药理活性，因此，研究奥昔布宁对映体的手性分离分析方法对于研究其药理和药效作用具有重要意义，同时获得单一构型的奥昔布宁具有巨大的医药商业价值。

发明内容

本发明的目的是提供一种奥昔布宁对映体模拟移动床拆分的方法。

为实现上述发明目的采用的技术方案如下：一种奥昔布宁对映体的模拟移动床的拆分方法，其特征在于用表面涂敷了直链淀粉-三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)的球形硅胶为固定相，用正己烷、乙醇和三氟乙酸（TFA）溶液为流动相，用模拟移动床系统从奥昔布宁对映体中拆分出高纯度的R-奥昔布宁和S-奥昔布宁，包括以下步骤：

（1）将奥昔布宁外消旋体溶于流动相中，浓度为：0~30g/L；

（2）用模拟移动床拆分奥昔布宁外消旋体；

（3）浓缩、重结晶得到高纯度的R-奥昔布宁和S-奥昔布宁。

本发明具有以下技术效果：本发明采用模拟移动床系统，从奥昔布宁的外消旋体中拆分出具有光学纯度的奥昔布宁单体，工艺简单，生产连续自动化，产品质量稳定，溶剂采用正己烷、乙醇和三氟乙酸（TFA）溶液，可回收利用，无污染，实现清洁生产。

具体实施方式

1、设备及条件选择

采用模拟移动床色谱系统，该系统包括洗脱泵、进样泵、萃取泵、色谱柱、电磁阀、单向阀、控温器和PLC系统控制器及计算机组成。样品溶液和洗脱液分别从样品液入口和洗脱液入口注入系统，奥昔布宁的两个单体分别从提余液和提取液两个出口中流出，每隔一定的时间样品液和洗脱液入口、提取液和提余液出口沿流动相流动的方向切换至下一支色谱柱。

2、色谱柱填料及流动相(溶剂)选择

以表面涂敷了直链淀粉-三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)的球形硅胶为手性固定相，填料粒度为5~75um，微粒越小，粒径分布越窄，越有利于分离；但粒径越小系统压力越大，最适宜的粒径范围是20~40um；

流动相(溶剂)为正己烷、乙醇和三氟乙酸（TFA）溶液。

3、分离步骤

A样品用流动相溶解，浓度为0~30g/L，色谱系统由4~24根制备柱组成，分为4个区，色谱柱数目越多分离越好，但系统的复杂度及系统压力越高，最适合的是8~12根，通过模拟移动床色谱系统的控制器，定期控制电磁阀的开闭，使洗脱口、进样口、萃取液和残余液出口沿流动相的方向定期变换，使奥昔布宁的两个单体从提取液和提余液出口流出系统；

B得到的产品溶液，经过浓缩、重结晶得到纯度在99%以上的合格产品；

C成品检验

流动相：正己烷:乙醇:三氟乙酸=90:10:0.01

流速：1.0 mL/min

泵：江苏汉邦科技分析泵

色谱柱：Chiralpak AD-H柱(4.6*250mm)

检测器：江苏汉邦科技紫外检测器

检测波长：223nm。

下面结合实例进一步说明本发明：

分离实例一

1、样品的配制：样品用流动相溶解，制成浓度为5g/L，经0.45um有机滤膜过滤后备用；

2、模拟移动床参数的选择：确定参数如下：进样流速0.4mL/min，洗脱流速2.0mL/min，提取液流速1.4mL/min，提余液流速1.0mL/min，切换时间5.5min，温度控制在25~35℃；

3、产品收集：待模拟移动床系统运行稳定后，分别从两出口收集产品，减压浓缩、重结晶后得到最终产品；

4、成品检验：得到的产品用流动相溶解后，用分析条件检测两出口产品R-奥昔布宁和S-奥昔布宁的纯度分别为99.6%和99.5%；

每公斤固定相每天可生产R-奥昔布宁和S-奥昔布宁各0.32kg，流动相消耗为25.4L/kg，回收率为98.2%。

分离实例二

1、样品的配制：样品用流动相溶解，制成浓度为10g/L，经0.45um有机滤膜过滤后备用；

2、模拟移动床参数的选择：确定参数如下：进样流速1.0mL/min，洗脱流速4.0mL/min，提取液流速2.8mL/min，提余液流速2.2mL/min，切换时间4.2min，温度控制在25~35℃；

3、产品收集：待模拟移动床系统运行稳定后，分别从两出口收集产品，减压浓缩、重结晶后得到最终产品；

4、成品检验：得到的产品用流动相溶解后，用分析条件检测两出口产品R-奥昔布宁和S-奥昔布宁的纯度分别为99.6%和99.3%；

每公斤固定相每天可生产R-奥昔布宁和S-奥昔布宁各1.95kg，流动相消耗为23.0 L/kg，回收率为97.8%。

分离实例三

1、样品的配制：样品用流动相溶解，制成浓度为20g/L，经0.45um有机滤膜过滤后备用；

2、模拟移动床参数的选择：确定参数如下：进样流速1.5mL/min，洗脱流速7.0mL/min，提取液流速5.0mL/min，提余液流速3.5mL/min，切换时间3.1min，温度控制在25~35℃；

3、产品收集：待模拟移动床系统运行稳定后，分别从两出口收集产品，减压浓缩、重结晶后得到最终产品；

4、成品检验：得到的产品用流动相溶解后，用分析条件检测两出口产品R-奥昔布宁和S-奥昔布宁的纯度分别为99.3%和99.1%；

每公斤固定相每天可生产R-奥昔布宁和S-奥昔布宁各4.12kg，流动相消耗为22.8L/kg，回收率为97.5%。

上述实施实例用来解释说明本发明，而不是对本发明进行限制，在本发明的精神和权力要求的保护范围内，对本发明做出的任何修改和改变，都落入本发明的保护范围。

Claims (5)

1.一种奥昔布宁对映体的模拟移动床色谱拆分方法，其特征在于：采用模拟移动床色谱(简称SMBC)分离系统，系统中的洗脱泵流量0～100mL/min，压力0～10Mpa，进样泵流量0～50mL/min，压力0～10Mpa，萃取泵流量0～100mL/min，压力0～10Mpa，工作温度25～35℃，色谱柱填料为表面涂敷了直链淀粉-三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)的球形硅胶，填料粒度20～40um，流动相为正己烷、乙醇和三氟乙酸（TFA）溶液，该方法的分离步骤如下：

A、奥昔布宁外消旋体用流动相溶解，浓度为0～30g/L，由进样泵进入色谱系统，色谱系统由4～24根制备柱组成，分成四个区，每区有1～6支柱子，其中I区位于洗脱液入口与提取液出口之间，在此区实现S-奥昔布宁的解吸；II区位于提取液出口与进样口之间，在此区使S-奥昔布宁反复吸附、解吸、浓缩；III区位于进样口与提余液出口之间在此区得到R-奥昔布宁；IV区位于提余液出口与洗脱液入口之间，一方面III区的洗脱液进入到该区可循环利用，另一方面将III区与I区隔开，防止提余液中的R-奥昔布宁进入到I区；

B、得到两个单体产品，经过浓缩重结晶，得到纯度为99%以上的合格产品。

2.根据权利要求1所述的奥昔布宁的模拟移动床色谱分离方法，其特征在于所述的流动相为正己烷、乙醇和三氟乙酸（TFA）溶液。

3.根据权利要求1所述的奥昔布宁的模拟移动床色谱分离方法，其特征在于进入模拟移动床系统的浓度为0～100g/L，进样流速为0～50mL/min，洗脱液流速为0～100mL/min，萃取液流速为0～100mL/min，提余液流速为0～100mL/min。

4.根据权利要求1所述的奥昔布宁的模拟移动床色谱分离方法，其特征在于所述的定期切换电磁阀的时间为：2～15min。

5.根据权利要求1所述的奥昔布宁的模拟移动床色谱分离方法，其特征在于所述的模拟移动床色谱系统的操作温度为25～35℃。