CN1043658C - 一种生产庆大霉素的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种利用微生物发酵方法以合成化学组合物的工艺。在使用生产庆大霉素的任何绛红色小单孢菌的情况下，它提供发酵培养基的配方和配比以及发酵工艺，增加适量的蛋氨基、赖氨酸、精氨酸，改变发酵过程中的培养温度和补料时间，增加补水工艺，缩短发酵培养周期，达到提高产率的目的。产品质量符合90年版中国药典。

Description

一种生产庆大霉素的方法
本发明涉及一种利用微生物生产庆大霉素的方法。
目前已有的普通生产庆大霉素的发酵培养基的配方和配比如表1。
中国专利CN1054617A中公开的培养基配方的配比如表2。菌种为绛红色小单孢菌(Micromonosporapurpurea)。
按CN1054617A所述方法虽然比一般技术具有发酵周期短，产率提高的优点，但这两个指标还不能达到理想的效果。
本发明的目的是提供一种快速生产庆大霉素的新工艺方法，通过对培养基成份和发酵工艺改进，大大提高了庆大霉素产率．缩短了发酵周期。
本发明技术方案是：它用绛红色小单孢菌，发酵培养基配方为：淀粉、葡萄糖、热榨黄豆饼粉、玉米粉、蛋白胨、硫酸铵、碳酸钙、硝酸钾、氯化钴、豆油、甘油聚醚、蛋氨酸、赖氨酸、精氨酸、水。
发酵工艺流程为：基础投料--接种--培养--第一次补料--第二次补料--第三次补料。培养温度为30-36℃；
其特征在于：
(1)发酵培养基配比为：
淀粉为玉米淀粉4.0-4.5％、葡萄糖1.0-1.4％、黄豆饼粉为热榨黄豆饼粉4.0-4.5％、玉米粉1.5-2.0％、蛋白胨0.3％、硫酸铵0.08％、碳酸钙0.8％、硝酸钾0.003％、氯化钴0.001％、豆油0.15％、甘油聚醚0.015％、蛋氨酸0.0008-0.09％、赖氨酸0.0008-0.09％、精氨酸0.0008-0.09％、水86-88％(同表3)。
(2)第一次补料时间在接种培养后17-19小时，第二次补料时间在接种培养后30-34小时，第三次补料时间在接种培养后第47小时。
(3)第三次补料后8-12小时补水，补水后15-19小时放罐。
本发明与现有发酵工艺结果比较，发酵周期由原工艺120-130小时缩短到70-74小时，产率大幅度提高，发酵指数由0.07亿/小时，吨左右，提高到0.10亿/小时，吨左右。产品质量符合90年版中国药典。(C1为25-50％,C1a为15-40％,C2a+C2为20-50％)。
以下结合实施例对本发明做进一步说明：
发酵培养基的配方和配比见表4。菌种使用生产庆大霉素的绛红色小单孢菌81#菌种。发酵罐体积为25吨。消毒后培养基体积为10吨，PH自然，接种量为基础料1/5。培养温度，补料时间和补水时间，发酵周期等见表4。搅拌速度为220rpm，次酵过程中进行补料，第一、二、三次补料均各为4吨，第四次补水2吨。
其结果见表4。
经岛津LC-4A高效液相色谱仪用HPLC法测定庆大霉素组份为：
C1为27％,C1a为35％,C2a+C2为38％，符合90年版中国药典。
表1
名称  配比(％)
淀粉     5
葡萄糖     0.8
黄豆饼粉     3.5
玉米粉     0.8
鱼粉     0.2
蛋白胨     0.2
硫酸铵     0.05
碳酸钙     0.6
硝酸钾     0.005
氯化钴     0.0006
豆油     0.15
甘油聚醚     0.015
水     89
表2
名称     配比(％)
淀粉     5.0-5.5
葡萄糖     0.8-1.0
黄豆饼粉     3.0-3.5
玉米粉     0.8-1.0
鱼粉     0.2
蛋白胨     0.2
硫酸铵     0.05
碳酸钙     0.6
硝酸钾     0.005
氯化钴     6r/ml
豆油     0.15
甘油聚醚     0.015
蛋氨酸     0.001-0.1
赖氨酸     0.001-0.1
精氨酸     0.001-0.1
表3
    名    称     配比(％)
淀粉     4.0-4.5
葡萄糖     1.0-1.4
黄豆饼粉(热榨)     4.0-4.5
玉米粉     1.5-2.0
蛋白胨     0.3
硫酸铵     0.08
碳酸钙     0.8
硝酸钾     0.003
氯化钴     0.001
豆油     0.15
甘油聚醚     0.015
蛋氨酸     0.0008-0.09
赖氨酸     0.0008-0.09
精氨酸     0.0008-0.09
水     86-88
    配比、条件及结果     时照     新    方    法
配比％     淀粉     5 玉米淀粉     4.0     4.5     4.3
    葡萄糖     0.8 葡萄糖     1.4     1.2     1.0
    黄豆饼粉     3.5 黄豆饼粉(热榨)     4.0     4.5     4.3
    玉米粉     0.8 玉米粉     1.5     1.7     2.0
    鱼粉     0.2
    蛋白胨     0.2 蛋白胨     0.3     0.3     0.3
    硫酸铵     0.05 硫酸铵     0.05     0.05     0.05
    碳酸钙     0.6 碳酸钙     0.8     0.8     0.8
    硝酸钾     0.005 硝酸钾     0.003     0.003     0.003
    氯化钴     0.0006 氯化钴     0.001     0.001     0.001
    豆油     0.15 豆油     0.15     0.15     0.15
    甘油聚醚     0.015 甘油聚醚     0.015     0.015     0.015
蛋氨酸     0.0008     0.009     0.09
赖氨酸     0.009     0.0008     0.09
精氨酸     0.09     0.0008     0.009
条件     发酵罐体积(T)     25     25     25     25
    培养温度(℃)     36.5     36     34     30
    一次补料时间(h)     35     17     18     19
    二次补料时间(h)     65     30     34     32
    三次补料时间(h)     90     43     49     47
    四次补水时间(h)     55     55     55
    发酵周期(h)     125     70     72     74
    放罐体积(T)     20.5     21.5     21.5     22.2
结果     生测效价(n/ml)     1080     850     908     900
    发酵指数(亿/h.T.)     0.0708     0.1044     0.1084     0.1080
    发酵指数提高率(％)     100     147.5     153.1     152.5

Claims (1)

1、一种快速生产庆大霉素的方法，它用绛红色小单孢菌，发酵培养基配方为：淀粉、葡萄糖、热榨黄豆饼粉、玉米粉、蛋白胨、硫酸铵、碳酸钙、硝酸钾、氯化钴、豆油、甘油聚醚、蛋氨酸、赖氨酸、精氨酸、水；
发酵工艺流程为：基础投料--接种--培养--第一次补料--第二次补料--第三次补料，培养温度为30-36℃；
其特征在于：
(1)发酵培养基配比为：
淀粉为玉米淀粉4.0-4.5％、葡萄糖1.0-1.4％、黄豆饼粉为热榨黄豆饼粉4.0-4.5％、玉米粉1.5-2.0％、蛋白胨0.3％、硫酸铵0.08％、碳酸钙0.8％、硝酸钾0.003％、氯化钴0.001％、豆油0.15％、甘油聚醚0.015％、蛋氨酸0.0008-0.09％、赖氨酸0.0008-0.09％、精氨酸0.0008-0.09％、水86-88％；
(2)第一次补料时间在接种培养后17-19小时，第二次补料时间在接种培养后30-34小时，第三次补料时间在接种培养后第47小时；
(3)第三次补料后8-12小时补水，补水后15-19小时放罐。
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