CN104345044A - 一种傅立叶变换红外光谱快速鉴别中药配方颗粒的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种傅立叶变换红外光谱快速鉴别中药配方颗粒的方法，属于中药检测技术领域。该方法是将中药配方颗粒样品用无水乙醇提取、超声提取、过滤，获得样品溶液，将样品溶液滴加在装有溴化钾粉末的玛瑙研钵中，恒温搅拌干燥，压片制样，用傅立叶变换红外光谱仪测定其红外指纹图谱，快速鉴别中药颗粒配方。该方法克服了常规红外压片制样方法下专属性差的缺点，能进行快速检测，结果判断可使用标准图谱比对或软件相似度比较鉴别；本发明用于红外指纹图谱技术检测所使用的样品是配方颗粒的醇提浓缩液，可实现定性和半定量检测；该方法简便、准确、经济、重复性好、信息量大、光谱特征性高。

Description

一种傅立叶变换红外光谱快速鉴别中药配方颗粒的方法

技术领域

本发明涉及一种快速鉴别中药配方颗粒的方法，特别涉及一种傅立叶变换红外光谱快速鉴别中药配方颗粒的方法,属于中药检测技术领域。

背景技术

随着红外光谱与色谱指纹图谱在解决中药质量标准与检验方面优势的显现， 中药质控领域结合自身实际情况形成以红外光谱为定性、半定量分析，色谱指纹图谱为定量分析的两大模式；红外光谱技术已在中药材鉴定、中药材炮制、中药配方颗粒、中药注射剂等各个领域发挥了重要作用。

红外指纹图谱技术具有特征性强、取样量小、简便迅速、准确等优点，与薄层和液相色谱鉴别比较，更环保、更简便快捷。红外光谱鉴别方法的供试品制备方法一般有：直接粉末法、溶剂提取法、分离处理或梯度萃取法。目前，中药材和配方颗粒的红外光谱鉴别的研究主要体现在传统的粉末直接压片法方面上，此制样方法虽简便快捷，但存在着不小缺陷。由于中药的成分复杂, 未经纯化的中药成分多、药材中纤维等杂质多，直接压片法所得的红外光谱图，色谱峰重叠、干扰大，灵敏度降低，红外光谱峰形多呈钝圆，专属性较差；含纤维素多的样品很难研磨制样；含油多的样品难与KBr压成均匀透明的片子；大部分中药配方颗粒加入了辅料（糊精），传统的中药配方颗粒红外光谱鉴别，采用颗粒细粉直接压片，因此产生了糊精的吸收峰，若加入的辅料比例较大（尤其矿物药配方颗粒）时则药物的吸收特征则呈现辅料的吸收。因此, 一个混合物体系的物质种类越多, 其叠加红外光谱的特征性就越差。因此，有学者采用了溶剂提取法进行样品制备，提高了检测样品红外指纹图谱的专属性和特征性。

田进国等对不同产地和品种的当归，南、北五味子以及白芍、赤芍的石油醚、乙醚和水提取物进行了红外光谱测定，结果显示：不同产地、品种的同种药材分别具有稳定的不同的光谱特征，可以作为药材品种和产地鉴别的依据。同时他还根据四种甘草的乙醚提取物的红外光谱特性，准确地鉴别了四种甘草。

徐海星等采用溶剂提取法建立了一种中药材海金沙分析鉴定的方法。以甲醇、氯仿、石油醚为提取溶剂，提取海金沙得到不同溶剂提取物，采用红外光谱图谱鉴别法对提取物进行分析、比较图谱样品与标本的相似性。该试验使用不同的溶剂对原药材进行提取处理，增大了样品差异性，提高了谱图差异化，更有利于药材的辨识。

针对不同溶剂系统的中药浸出物进行鉴别，既体现了中药成分复杂性，又充分利用了中药化学成分整体性的特点来进行鉴别（如中药HPLC指纹图谱鉴别的样品制备方法一般采用不同浓度的甲醇、乙醇或不同极性溶剂部位的提取液），具备良好的专属性、稳定性和可重复性；可操作性强，能很好克服了传统粉末直接压片法的专属性差的缺点。

中药配方颗粒是中药饮片经提取、浓缩、干燥、制粒精制而成，因改变了原饮片的形状，对质量控制提出了新的要求。中药配方颗粒在生产过程中一般加入一定量的辅料进行制粒，加入的辅料如淀粉、糊精、乳糖等，具有较强的红外吸收，使样品的红外光谱吸收峰受干扰；不同生产厂家，使用的药材产地不同，生产设备与工艺不同，使用的辅料不一；致使其红外指纹图谱的特征性、专属性降低了，大大削弱了红外指纹图谱技术的鉴别能力。因此，如果对传统的粉末直接压片法进行改进，将更适用于成分复杂的中药材和中药配方颗粒的鉴别。

发明内容

本发明的目的在于开发一种安全无毒、能快速检测不同品种中药配方颗粒的方法，以应用于企业对原料、配方颗粒生产的质量控制。

为实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：

所有中药配方颗粒样品全部由广东一方制药有限公司提供，所用仪器为美国PerkinElmer Spectrum100 红外光谱仪，测试分辨率为4. 0cm^-1， 取16次平均。

一种傅立叶变换红外光谱快速鉴别中药配方颗粒的新方法，包括如下步骤：

（1）样品提取：称取配方颗粒样品粉末0.5～2g，加无水乙醇15~25ml，超声提取25~35min，过滤，取滤液浓缩至1ml，得到样品溶液；

 （2）红外制样、检测：移取样品溶液0.1ml，滴加在装有200mg溴化钾粉末的玛瑙研钵中，置电热炉中80℃恒温搅拌干燥2~5min，取出，充分研磨混匀后压片制样，用傅立叶变换红外光谱仪测定红外指纹图谱，快速鉴别中药颗粒配方。

红外指纹图谱测定，扫描过程中实时扣除水和二氧化碳干扰，环境相对湿度低于60%，采用样品的醇浸出物与溴化钾直接压片制样后检测。

将传统中药配方颗粒用KBr 直接压片法制样和改进的新方法提取后压片制样进行对比，两种制样压片方法的实验结果见表1和图1～图16。

实验结果

表1 不同样品处理方法的结果比较

实验表明，采用本发明改进后的方法获得的红外指纹图谱特征峰更多，分辨率更高；排除了麦芽糊精的干扰，更具有特征性、专一性和稳定性。本发明可用于鉴别不同炮制方法的配方颗粒如白术与麸炒白术、胆南星与制天南星等，也可以用于鉴别不同入药部位的配方颗粒如茯苓皮与茯苓，还可以用于鉴别成分相近的川牛膝与土牛膝配方颗粒等。

本发明所述的样品的红外指纹图谱需与标准对照图谱的相关性达到90%以上的红外指纹图谱。

本发明的有益效果是：

1.本发明创新性的采用中药配方颗粒的乙醇浸出物进行“湿法”压片制样。采用乙醇溶剂法制样，取中药的乙醇提取部位，既体现了中药成分复杂性，又体现了中药成分整体性的特点，样品的红外指纹图谱特征峰更多，分辨率更高，具备良好的专属性、特征性、稳定性和可重复性。该方法排除了配方颗粒中添加辅料对配方颗粒的影响；既克服了传统粉末直接压片法的专属性差的缺点，又克服了干膏粉末易吸潮、定量麻烦的缺点，该方法直接量取液体取样，实现半定量检测更便捷；

2.本发明与其他学者研究采用的溶剂提取法（多采用甲醇、氯仿、丁酮、石油醚、乙醚等）相比，该方法的提取溶剂采用乙醇，易挥发、无毒更环保；结合使用传统的压片法更简便、易于操作；

3.将改进的红外指纹图谱技术用于企业生产中药配方颗粒过程的内部生产质量控制，提高了生产检验效率，尤其对法定标准中缺乏质量控制的中药品种，是一种简便、快速、有效的质量控制手段。

附图说明

图1：麦芽糊精辅料红外指纹图谱；

图2：白术配方颗粒粉末/醇浸出物红外指纹图谱；

图3：麸炒白术配方颗粒粉末/醇浸出物红外指纹图谱；

图4：白薇配方颗粒粉末/醇浸出物红外指纹图谱；

图5：川牛膝配方颗粒粉末/醇浸出物红外指纹图谱；

图6：土牛膝配方颗粒粉末/醇浸出物红外指纹图谱；

图7：胆南星配方颗粒粉末/醇浸出物红外指纹图谱；

图8：制天南星配方颗粒粉末/醇浸出物红外指纹图谱；

图9：淡附片配方颗粒粉末/醇浸出物红外指纹图谱；

图10：地黄配方颗粒粉末/醇浸出物红外指纹图谱；

图11：莪术配方颗粒粉末/醇浸出物红外指纹图谱；

图12：桂枝配方颗粒粉末/醇浸出物红外指纹图谱；

图13：薏苡仁配方颗粒粉末/醇浸出物红外指纹图谱；

图14：知母配方颗粒粉末/醇浸出物红外指纹图谱；

图15：茯苓皮配方颗粒粉末/醇浸出物红外指纹图谱；

图16：茯苓配方颗粒粉末/醇浸出物红外指纹图谱；

图17：10批茯苓皮配方颗粒醇浸出物红外指纹图谱叠加图；

图18：10批茯苓配方颗粒醇浸出物红外指纹图谱叠加图；

图19：8批淡附片配方颗粒醇浸出物红外指纹图谱叠加图；

图20：7批知母配方颗粒醇浸出物红外指纹图谱叠加图；

图21：10批川牛膝配方颗粒醇浸出物红外指纹图谱叠加图；

图22：10批土牛膝配方颗粒醇浸出物红外指纹图谱叠加图；

图23：10批白术配方颗粒醇浸出物红外指纹图谱叠加图；

图24：10批麸炒白术配方颗粒醇浸出物红外指纹图谱叠加图；

图25：10批薏苡仁配方颗粒醇浸出物红外指纹图谱叠加图。

具体实施方式

下面通过实例对本发明做进一步详细说明，这些实例仅用来说明本发明，并不限制本发明的范围；

下述实施例所采用的压片制样方法为：

（1）样品提取：称取配方颗粒样品粉末0.5~2g，加无水乙醇15~25ml，超声提取25~35min，过滤，取滤液浓缩至1ml，得到样品溶液；

 （2）红外制样、检测：移取样品溶液0.1ml，滴加在装有200mg溴化钾粉末的玛瑙研钵中，置电热炉中80℃恒温搅拌干燥2~5min，取出，充分研磨混匀后压片制样，用傅立叶变换红外光谱仪测定红外指纹图谱，快速鉴别中药颗粒配方。

检测条件为：

（1）药品：所有中药配方颗粒样品全部由广东一方制药有限公司提供。

（2）仪器：美国PerkinElmer Spectrum100 红外光谱仪。测试分辨率为4.0cm^-1, 取16次平均。

（3）红外指纹图谱测定条件：仪器为傅立叶变换红外光谱仪，测定范围为4000cm^-1-400cm^-1，DTGS检测器，分辨率4cm^-1，扫描次数16次，扫描过程中实时扣除水和二氧化碳干扰（按制样方法制备空白压片），环境相对湿度低于60%，采用样品的醇浸出物与溴化钾直接压片制样后检测。

实施例1茯苓皮配方颗粒的红外指纹图谱

对10批茯苓皮配方颗粒产品（1308849、403023T、1308152、1305715、403264T、311306L、401092L、1305032、311306T、403044T）用本发明改进的红外指纹图谱鉴别方法测定其红外光谱图。进行图谱比对，10批茯苓皮配方颗粒样品的红外指纹图谱相似度均在0.9以上；见图17。

实施例2茯苓配方颗粒的红外指纹图谱

对10批茯苓配方颗粒产品（1304177、1304800、11105408、1110828、1108439、1205149、1205903、1210402、311334T、311767T）用本发明改进的红外指纹图谱鉴别方法测定其红外光谱图。进行图谱比对，10批茯苓配方颗粒样品的红外指纹图谱相似度均在0.9以上；见图18。

实施例3淡附片配方颗粒的红外指纹图谱

对8批淡附片配方颗粒产品（1305746、1303735、1211834、310170L、403189L、1305105、1307238、402200T）用本发明改进的红外指纹图谱鉴别方法测定其红外光谱图。进行图谱比对，8批淡附片配方颗粒样品的红外指纹图谱相似度均在0.9以上；见图19。

实施例4知母配方颗粒的红外指纹图谱

对7批知母配方颗粒产品（1212080、1308925、403075L、310128L、402204T、1305104、1305749）用本发明改进的红外指纹图谱鉴别方法测定其红外光谱图。进行图谱比对，7批知母配方颗粒样品的红外指纹图谱相似度均在0.9以上；见图20。

实施例5川牛膝配方颗粒的红外指纹图谱

对10批川牛膝配方颗粒产品（1301235、311079T、1204134、1301234、120766、402180T、402201T、406006T、409385T、406042T）用本发明改进的红外指纹图谱鉴别方法测定其红外光谱图。进行图谱比对，10批川牛膝配方颗粒样品的红外指纹图谱相似度均在0.9以上；见图21。

实施例6土牛膝配方颗粒的红外指纹图谱

对10批土牛膝配方颗粒产品（1109912、1206171、1308905、312125L、312125T、1206171、312125L、1308905、409174T、1304404）用本发明改进的红外指纹图谱鉴别方法测定其红外光谱图。进行图谱比对，10批土牛膝配方颗粒样品的红外指纹图谱相似度均在0.9以上；见图22。

实施例7白术配方颗粒的红外指纹图谱

对10批白术配方颗粒产品（312508T、1307243、403109T、404055T、404084T、1304184、1304172、1305115、1305127、1306220）用本发明改进的红外指纹图谱鉴别方法测定其红外光谱图。进行图谱比对，10批白术配方颗粒样品的红外指纹图谱相似度均在0.9以上；见图23。

实施例8麸炒白术配方颗粒的红外指纹图谱

对10批麸炒白术配方颗粒产品（1304046、1304033、1304032、1304045、1304719、1305196、1305206、1305792、1306115、1306756）用本发明改进的红外指纹图谱鉴别方法测定其红外光谱图。进行图谱比对，10批麸炒白术配方颗粒样品的红外指纹图谱相似度均在0.9以上；见图24。

实施例9薏苡仁配方颗粒的红外指纹图谱

对10批薏苡仁配方颗粒产品（312057T、401164T、309239L、311063L、403251T、1304154、1304165、1304792、1306151、1306153）用本发明改进的红外指纹图谱鉴别方法测定其红外光谱图。进行图谱比对，10批薏苡仁配方颗粒样品的红外指纹图谱相似度均在0.9以上；见图25。

Claims (3)

1.一种傅立叶变换红外光谱快速鉴别中药配方颗粒的方法，其特征在于：包括如下步骤：

（1）样品提取：称取配方颗粒样品粉末0.5～2g，加无水乙醇15~25ml，超声提取25~35min，过滤，取滤液浓缩至1ml，得到样品溶液；

 （2）红外制样、检测：移取样品溶液0.1ml，滴加在装有200mg溴化钾粉末的玛瑙研钵中，置电热炉中80℃恒温搅拌干燥2~5min，取出，充分研磨混匀后压片制样，用傅立叶变换红外光谱仪测定红外指纹图谱，快速鉴别中药配方颗粒。

2.根据权利要求1所述的一种傅立叶变换红外光谱快速鉴别中药配方颗粒的方法，其特征在于：所述的用傅立叶变换红外光谱仪测定红外指纹图谱，测定范围为4000cm^-1-400cm^-1，DTGS检测器，分辨率4cm^-1。

3.根据权利要求1所述的一种傅立叶变换红外光谱快速鉴别中药配方颗粒的方法，其特征在于：步骤（2）所述的溴化钾粉末的细度为过200目筛。