CN104297332A - 一种应用于碱性小分子定性定量分析检测和高通量筛选增强电离缓冲液试剂盒及其制备 - Google Patents
一种应用于碱性小分子定性定量分析检测和高通量筛选增强电离缓冲液试剂盒及其制备 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104297332A CN104297332A CN201410455523.5A CN201410455523A CN104297332A CN 104297332 A CN104297332 A CN 104297332A CN 201410455523 A CN201410455523 A CN 201410455523A CN 104297332 A CN104297332 A CN 104297332A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- qlb2
- preparation
- qualitative
- quantitative analysis
- ionization buffer
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
Abstract
一种应用于碱性小分子定性定量分析检测和高通量筛选常规增强电离缓冲液试剂盒及其制备，若待测目标小分子是酸性结构，PH>8.加入同等体积的增强电离缓冲液QLB2；充分混合后，取样品点在靶板上即可送入表面激光解析质谱进行分析；QLB2物质组成及体积比为：100％离子水，1-7％甲酸，此试剂盒制备方法简单、成本较低。
Description
技术领域
本技术属于分析化学应用领域，具体涉及表面激光解析质谱领域。
背景技术
表面激光解析质谱是近年来发展起来的一种新型的软电离生物质谱，其中以基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)为最重要的实例，此项发明获得过诺贝尔化学奖。主要由两部分组成：基质辅助激光解吸电离离子源(MALDI)和飞行时间质量分析器(TOF)。MALDI的原理是用激光照射样品与基质形成的共结晶薄膜，基质从激光中吸收能量传递给生物分子，在电离过程中将质子转移到生物分子或从生物分子得到质子，而使生物分子电离的过程。因此它是一种软电离技术，适用于混合物及生物大分子的测定。TOF的原理是离子在电场作用下加速飞过飞行管道，根据到达检测器的飞行时间不同而被检测即测定离子的质荷比(M/Z)与离子的飞行时间成正比，检测离子。MALDI-TOF-MS具有灵敏度高、准确度高及分辨率高等特点，为生命科学等领域提供了一种强有力的分析测试手段。
然而，以基质辅助激光解析电离飞行时间质谱为首的所有基于表面激光解析的质谱都需要将样品制备在特制靶板上面，其操作是将样品分散在基质分子中并形成晶体。当用激光照射晶体时，基质从激光中吸收能量，样品解吸附，基质-样品之间发生电荷转移使得样品分子电离，电离的样品在电场作用下飞过真空的飞行管，根据到达检测器的飞行时间不同而被检测，即通过离子的质量电荷之比(M/Z)与离子的飞行时间成正比来分析离子，并测得样品分子的分子量。焦点问题就在于通用的基质分子的分子量在1000-3000da,造成了过量的背景质谱峰。这就决定了所有此类基于表面激光解析的质谱分析只能适用于大分子检测，比如蛋白质，长链多肽，核酸，高分子材料等等，而不能应用于小分子检测(分子量小于1000da)，或者说基于表面激光解析的质谱分析的高灵敏度/高通量等独特的优势无法施展在小分子分析检测上面.而分子量小于1000da的小分子却是对人类最重要的最具应用价值的一类化学产品，例如95％以上的药物小分子，所有的氨基酸，维生素等等和人类生活健康相关的化学物质。
目前现有技术针对小分子检测和筛选还停留在光谱法检测，例如荧光发光检测或者衍生出可以荧光检测的底物，但此类检测要求目标小分子分子结构具有光活性集团，另一弊端就是往往光度法灵敏度较低，检测不到微量的小分子浓度。液相质谱(LC-MS)及气相质谱(GC-MS)的已经开始应用在小分子的检测和高通量筛选。但需要消耗大量的人力和溶剂耗材，而且一个样品从制备到质谱分析再到出结果需要相当长一个过程，根据要求不同，分析一个样品从样品制备到拿到结果需要30-60分钟，远远不能满足现代生物医药发展的高通量筛选要求。
发明内容
发明目的：找到一种制备方法简单、成本较低的增强电离缓冲液制备方法，节省开支与时间。
技术方案：一种应用于碱性小分子定性定量分析检测和高通量筛选增强电离缓冲液试剂盒，由待测小分子样品样品、同等体积的增强电离缓冲液QLB2组成；QLB2物质组成及体积比为：100％离子水，1-7％甲酸。
一种应用于碱性小分子定性定量分析检测和高通量筛选增强电离缓冲液试剂盒的制备，具体步骤如下：待测目标小分子是碱性结构，PH>8.加入同等体积的增强电离缓冲液QLB2；充分混合后，取样品点在靶板上即可送入表面激光解析质谱进行分析；QLB2物质组成及体积比为：100％离子水，1-7％甲酸。
优选方案为：QLB2物质组成及体积比为：100％离子水，1％甲酸。
有益效果：1、制备方法简单；2、成本较低。
附图说明
图1检测到8种短链脂肪酸质谱图；
图2同时检测多种不同类别和分子结构的小分子质谱图
具体实施方式
此缓冲液是针对碱性小分子的表面激光解析质谱分析，经过的样品制备后，目标小分子已经聚集在上清液中。如果待测目标小分子是酸性结构，PH<4.加入同等体积的增强电离缓冲液QLB2(100％离子水，1-7％甲酸)。充分混合后，取0.5微升样品点在靶板上即可送入表面激光解析质谱进行分析。
如图1所示为将高产脂肪酸的微生物细胞裂解后的筛选结果，灵敏度达到纳摩尔级别。我们同时可以检测到高达8种短链脂肪素，包括饱和和非饱和类型。同时通量可达到每日9000个样品的分析处理能力。
本技术发明还可以同时检测多种不同类别和分子结构的小分子。如图2所示。
Claims (3)
1.一种应用于碱性小分子定性定量分析检测和高通量筛选增强电离缓冲液试剂盒，其特征在于，由待测小分子样品样品、同等体积的增强电离缓冲液QLB2组成；QLB2物质组成及体积比为：100％离子水，1-7％甲酸。
2.权利要求1所述的一种应用于碱性小分子定性定量分析检测和高通量筛选增强电离缓冲液试剂盒的制备，其特征在于，具体步骤如下：待测目标小分子是碱性结构，PH>8.加入同等体积的增强电离缓冲液QLB2；充分混合后，取样品点在靶板上即可送入表面激光解析质谱进行分析；QLB2物质组成及体积比为：100％离子水，1-7％甲酸。
3.根据权利要求1所述的应用于一种应用于碱性小分子定性定量分析检测和高通量筛选增强电离缓冲液试剂盒的制备，其特征在于，QLB2物质组成及体积比为：100％离子水，1％甲酸。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410455523.5A CN104297332A (zh) | 2014-09-09 | 2014-09-09 | 一种应用于碱性小分子定性定量分析检测和高通量筛选增强电离缓冲液试剂盒及其制备 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410455523.5A CN104297332A (zh) | 2014-09-09 | 2014-09-09 | 一种应用于碱性小分子定性定量分析检测和高通量筛选增强电离缓冲液试剂盒及其制备 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN104297332A true CN104297332A (zh) | 2015-01-21 |
Family
ID=52317153
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201410455523.5A Pending CN104297332A (zh) | 2014-09-09 | 2014-09-09 | 一种应用于碱性小分子定性定量分析检测和高通量筛选增强电离缓冲液试剂盒及其制备 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN104297332A (zh) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1865992A (zh) * | 2005-05-20 | 2006-11-22 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 水溶性多壁碳纳米管作基质在maldi－ms中的应用 |
| CN103592361A (zh) * | 2013-11-22 | 2014-02-19 | 南开大学 | 一种二硫化钨在激光解吸电离质谱检测中的应用 |
-
2014
- 2014-09-09 CN CN201410455523.5A patent/CN104297332A/zh active Pending
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1865992A (zh) * | 2005-05-20 | 2006-11-22 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 水溶性多壁碳纳米管作基质在maldi－ms中的应用 |
| CN103592361A (zh) * | 2013-11-22 | 2014-02-19 | 南开大学 | 一种二硫化钨在激光解吸电离质谱检测中的应用 |
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| HAO-YANG WANG ET AL.: "Analysis of low molecular weight compounds by MALDI-FTICR-MS", 《JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY B》 * |
| YU-CHIE CHEN: "In Situ Determination of Organic Reaction Products by Combining Thin Layer Chromatography with Surface-assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-flight Mass Spectrometry", 《RAPID COMMUNICATIONS IN MASS SPECTROMETRY》 * |
| 张森等: "适用小分子化合物MALDI分析的基质研究", 《化学进展》 * |
| 杨瑞馥 宋亚军: "《微生物法医学：理论与技术》", 31 January 2005, 化学工业出版社 * |
| 王鹏等: "《有机波谱》", 31 January 2012, 北京：国防工业出版社 * |
| 白新鹏: "《食品检验新技术》", 31 January 2010, 北京：中国计量出版社 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Zhou et al. | Strategies for large-scale targeted metabolomics quantification by liquid chromatography-mass spectrometry | |
| CN110573478B (zh) | 检测和量化有机酸代谢产物的质谱测定方法 | |
| Carrasco-Pancorbo et al. | Gas chromatography/atmospheric pressure chemical ionization-time of flight mass spectrometry: analytical validation and applicability to metabolic profiling | |
| Bennett et al. | Contrast-enhanced differential mobility-desorption electrospray ionization-mass spectrometry imaging of biological tissues | |
| JP2022517161A (ja) | マイクロバイオータ関連代謝物の検出および定量のための質量分析検定法 | |
| CN102520092B (zh) | 蜂蜜中大米糖浆掺假鉴别快速检测方法 | |
| Lin et al. | Microfluidic chip‐based liquid chromatography coupled to mass spectrometry for determination of small molecules in bioanalytical applications: A n update | |
| CN110088615A (zh) | 用于肾功能代谢物的检测和定量的质谱法测定方法 | |
| Qureshi et al. | Determination of carbohydrates in medicinal plants‐comparison between TLC, mf‐MELDI‐MS and GC‐MS | |
| CN102680565B (zh) | 同位素稀释电喷雾萃取电离串联质谱快速检测尿肌酐的分析方法 | |
| Guo et al. | Simultaneous determination of phthalates and adipates in human serum using gas chromatography–mass spectrometry with solid‐phase extraction | |
| CN103308641A (zh) | 烟草及烟草制品中三种酰胺类除草剂的高效液相色谱-串联质谱测定方法 | |
| Leitner et al. | SnapShot: mass spectrometry for protein and proteome analyses | |
| CN104833761B (zh) | 一种快速分析样品中的糖类化合物的方法 | |
| CN110044998B (zh) | 通过质谱法定量他莫昔芬及其代谢物 | |
| Serrano et al. | The one hour human proteome | |
| CN101210928B (zh) | 用功能糖芯片及飞行质谱仪分析糖结合蛋白的方法 | |
| Yao et al. | Fast‐switching high‐voltage porous‐tip electrospray ionization mass spectrometry for rapid detection of antirheumatic drugs in adulterated herbal dietary supplements | |
| CN104297332A (zh) | 一种应用于碱性小分子定性定量分析检测和高通量筛选增强电离缓冲液试剂盒及其制备 | |
| CN104266886A (zh) | 一种应用于酸性小分子定性定量分析检测和高通量筛选增强电离缓冲液试剂盒及其制备 | |
| CN104297329B (zh) | 一种应用于脂肪酸分子定性定量分析检测和高通量筛选增强试剂盒及其制备 | |
| CN104215682B (zh) | 一种应用于氨基酸分子定性定量分析检测和高通量筛选试剂盒及其制备 | |
| CN204359748U (zh) | 一种应用于小分子高通量、高灵敏度、表面激光解析质谱纳米靶板 | |
| CN104237425A (zh) | 一种应用于小分子定性定量分析检测和高通量筛选常规水容易样品试剂盒及其制备 | |
| CN104215686A (zh) | 一种应用于小肽分子定性定量分析检测和高通量筛选增强试剂盒及其制备 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20150121 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |