CN104250855B - 一种利用赖氨酸芽孢杆菌dy2菌株沤麻制备黄麻纤维的方法 - Google Patents
一种利用赖氨酸芽孢杆菌dy2菌株沤麻制备黄麻纤维的方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种利用赖氨酸芽孢杆菌DY2菌株沤麻制备黄麻纤维的方法,包括:(1)将保存的赖氨酸芽孢杆菌DY2菌株于牛肉膏蛋白胨培养基中培养,添加冻存缓冲液;(2)在黄麻麸皮培养基中接入步骤(1)所得的菌一环,摇瓶培养;(3)将步骤(2)所得的培养基接种入黄麻麸皮发酵培养基,摇瓶培养得到发酵菌液;(4)制作沤麻池;(5)将步骤(3)中制备的发酵菌液使用喷淋法送入沤麻池做沤麻处理,沤麻后制得黄麻纤维。本发明工艺简单、生产流程短、适合大规模工业化生产。
Description
技术领域
本发明属于沤麻领域,特别涉及一种利用赖氨酸芽孢杆菌DY2菌株沤麻制备黄麻纤维的方法。
背景技术
麻是纺织原料之一,其品种主要有亚麻、苎麻、大麻、红麻、黄麻、罗布麻、剑麻、蕉麻、荨麻和苘麻等。麻纤维是从各种麻植物取得的纤维的统称,具有吸湿、透气、散热和抗菌等其他天然纤维无法比拟的优点。我国作为世界上麻类资源最丰富的国家之一,每年生产的麻纤维及其制品除满足国内市场的需求,还作为大宗商品出口美国、西欧及东南亚国家,年均创汇近百亿美元。在国家节能减排政策和消费者回归自然、追求绿色的消费观念推动下,麻类纤维绿色加工技术已经成为纺织领域的研究热点。
沤麻利用细菌和水分对植物的作用,溶解或腐蚀包围在韧皮纤维束外面的大部分蜂窝状结缔组织和胶质,从而促使纤维与麻茎分离的加工过程。在广泛应用的水沤法中,麻茎浸没在水中,水渗透到麻茎的中央部分,使内部细胞膨胀,胀破最外层,从而增加对水分和细菌的吸收。沤麻法是生产优质纤维的加工工艺,沤麻过程的菌种选择是沤麻的关键。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种利用赖氨酸芽孢杆菌DY2菌株沤麻制备黄麻纤维的方法,该方法简单、生产流程短、适合大规模工业化生产。
本发明的一种利用赖氨酸芽孢杆菌DY2菌株沤麻制备黄麻纤维的方法,包括:
(1)将保存的赖氨酸芽孢杆菌DY2菌株于牛肉膏蛋白胨培养基中培养,添加冻存缓冲液;
(2)在黄麻麸皮培养基中接入步骤(1)所得的菌一环,摇瓶培养;菌一环的加入量为每1000ml菌液加入200mg;
(3)将步骤(2)所得的培养基接种入黄麻麸皮发酵培养基,摇瓶培养得到发酵菌液;
(4)制作沤麻池;
(5)将步骤(3)中制备的发酵菌液使用喷淋法送入沤麻池做沤麻处理,沤麻后制得黄麻纤维。
所述步骤(1)中的赖氨酸芽孢杆菌DY2菌株的16SrDNA序列如SEQIDNO:1所示。
所述步骤(1)中的牛肉膏蛋白胨培养基的组成为:每1000ml培养基包括牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化钠5g和水1000ml。
所述步骤(1)中的冻存缓冲液的组成为:每100ml冻存缓冲液包括甘油50ml和水50ml;加入量为每1000ml菌液加入1ml。
所述步骤(1)中的菌株保存条件为-80℃,pH自然;培养条件为37℃,pH自然,培养时间12小时。
所述步骤(2)中的黄麻麸皮培养基的组成为:每1000ml培养基包括黄麻皮200g,麸皮50g,麦芽汁50ml和水950ml;步骤(3)中的黄麻麸皮发酵培养基的组成为:每1000ml培养基包括黄麻皮100g,麸皮100g,麦芽汁200ml和水800ml,接种量为每1000ml菌液接种入30L黄麻麸皮发酵培养基。
所述步骤(2)和(3)中的培养条件为37℃,pH自然,培养时间24小时。
所述步骤(4)中的沤麻池的麻趟间距为15-20厘米,麻层厚度为2-2.5厘米。
所述步骤(5)中的沤麻条件为自然温度(约20-30摄氏度),pH自然,沤麻时间10-20天;喷淋法的工艺具体为每48小时向沤麻区域喷洒菌液6~10ml。
所述步骤(5)中的制得的黄麻纤维应用于麻袋、麻布、造纸、绳索、织地毯或窗帘。
本发明所采用的赖氨酸芽孢杆菌DY2菌株的保藏号为CGMCCNo.9120,保藏日为2014年5月4日,建议分类命名为:赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillussp.),保藏单位名称:CGMCC中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。
根据16sRDNA测序Blast及聚类分析结果,该菌与赖氨酸芽孢杆菌相似性为99%,结合生理生化试验结果和镜检分析,命名此菌株为赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillussp.)DY2菌株。16SrDNA测序中,所采用的正向引物27F,反向引物1492R,均为国际通用引物,由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。
该菌株培养条件粗放,耐热性好,生长繁殖快,可以有效去除黄麻纤维中的非纤维素胶质,且酶活稳定,菌、酶均无毒性。该菌株及培养系统能够直接用于黄麻沤麻。
有益效果
(1)本发明所采用的菌株及培养系统,经检测能够直接用于黄麻沤麻,具有沤麻周期短,沤麻效果良好等特点,菌种不易被污染,处理成本低,纤维质量好,沤麻条件温和,抗污染能力强,耐热性能好,无环境污染等优点;
(2)本发明的制备方法具有工艺简单、适合大规模工业化生产等特点;利用该体系进行亚麻脱胶具有沤麻时间短视天气情况,一般可缩短2-3天(正常收获季节)等特点。
附图说明
图1为本发明所用菌株显微镜染色照片(油镜);
图2a-j为本发明采用引物27F产生的细菌DNA图谱;
图3a-j为本发明采用引物1492R产生的细菌DNA图谱。
具体实施方式
下面结合具体实施例,进一步阐述本发明。应理解,这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解,在阅读了本发明讲授的内容之后,本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改,这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
实施例1
沤麻时间据黄麻收获时间定,一般为9月中下旬至10月中下旬。
沤麻方法:
(1)将保存的赖氨酸芽孢杆菌DY2菌株于牛肉膏蛋白胨培养基(每1000ml培养基包括牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化钠5g和水1000ml)中培养,添加冻存缓冲液(每100ml冻存缓冲液包括甘油50ml和水50ml),培养条件为37℃,pH自然,培养时间12小时;
(2)在黄麻麸皮培养基(每1000ml培养基包括黄麻皮200g,麸皮50g,麦芽汁50ml和水950ml)1000ml中接入菌一环,摇瓶培养,培养条件为37℃,pH自然,培养时间24小时;
(3)将培养基接种入黄麻麸皮发酵培养基(每1000ml培养基包括黄麻皮100g,麸皮100g,麦芽汁200ml和水800ml),摇瓶培养得到发酵菌液,培养条件为37℃,pH自然,培养时间24小时;
(4)沤麻池的准备:用4HB-800型黄麻剥皮机将鲜皮从黄麻全杆中分离出来(韧皮部因机械挤压、打板击打已造成许多伤口,利于脱胶菌入侵,但不破坏纤维);尾部端齐(以洗麻时能甩得动为度,20根左右为一把),稍部拢齐、直,顺折成三至四层(沤麻池深度相仿,浸水时正好淹没麻把)或对折,每把麻中部靠尾处用鲜皮扎把,把与把之间用扎把的鲜皮连接,按顺序排列、排紧;一般每个沤麻池均分批投放,便于分批洗麻;投放好麻把后然后将麻把全部压入水中,基本上不露出水面为宜。最后用厚型塑料薄膜(透明)将全部麻把盖住,再压紧塑料薄膜,以防麻皮离水。麻趟间距15-20厘米。麻层厚度一般在2-2.5厘米为宜。
(5)将制备的发酵菌液使用喷淋法入沤麻池做沤麻处理,沤麻后制得可供纺织制品用黄麻纤维,沤麻条件为自然温度,pH自然;喷淋法的工艺具体为每48小时向沤麻区域喷洒菌液8ml。
完成沤制时间:视气温定,一般9月中下旬至10月中下旬,沤制时间逐渐延长,若气温变化不大,则沤制时间基本相同。在黄麻正常收获季节约为10-20天。
Claims (9)
1.一种利用赖氨酸芽孢杆菌DY2菌株沤麻制备黄麻纤维的方法,包括:
(1)将保存的赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillussp.)DY2菌株于牛肉膏蛋白胨培养基中培养,添加冻存缓冲液;其中,赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillussp.)DY2菌株的保藏号为CGMCCNo.9120,16SrDNA序列如SEQIDNO:1所示;冻存缓冲液的组成为:每100ml冻存缓冲液包括甘油50ml和水50ml;
(2)在黄麻麸皮培养基中接入步骤(1)所得的菌一环,摇瓶培养;
(3)将步骤(2)所得的培养基接种入黄麻麸皮发酵培养基,摇瓶培养得到发酵菌液;
(4)制作沤麻池;
(5)将步骤(3)中制备的发酵菌液使用喷淋法送入沤麻池做沤麻处理,沤麻后制得黄麻纤维。
2.根据权利要求1所述的一种利用赖氨酸芽孢杆菌DY2菌株沤麻制备黄麻纤维的方法,其特征在于:所述步骤(1)中的牛肉膏蛋白胨培养基的组成为:每1000ml培养基包括牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化钠5g和水1000ml。
3.根据权利要求1所述的一种利用赖氨酸芽孢杆菌DY2菌株沤麻制备黄麻纤维的方法,其特征在于:所述步骤(1)中的冻存缓冲液加入量为每1000ml菌液加入1ml冻存缓冲液。
4.根据权利要求1所述的一种利用赖氨酸芽孢杆菌DY2菌株沤麻制备黄麻纤维的方法,其特征在于:所述步骤(1)中的菌株保存条件为-80℃,pH自然;培养条件为37℃,pH自然,培养时间12小时。
5.根据权利要求1所述的一种利用赖氨酸芽孢杆菌DY2菌株沤麻制备黄麻纤维的方法,其特征在于:所述步骤(2)中的黄麻麸皮培养基的组成为:每1000ml培养基包括黄麻皮200g,麸皮50g,麦芽汁50ml和水950ml;步骤(3)中的黄麻麸皮发酵培养基的组成为:每1000ml培养基包括黄麻皮100g,麸皮100g,麦芽汁200ml和水800ml,接种量为每1000ml菌液接种入30L黄麻麸皮发酵培养基。
6.根据权利要求1所述的一种利用赖氨酸芽孢杆菌DY2菌株沤麻制备黄麻纤维的方法,其特征在于:所述步骤(2)和(3)中的培养条件为37℃,pH自然,培养时间24小时。
7.根据权利要求1所述的一种利用赖氨酸芽孢杆菌DY2菌株沤麻制备黄麻纤维的方法,其特征在于:所述步骤(4)中的沤麻池的麻趟间距为15-20厘米,麻层厚度为2-2.5厘米。
8.根据权利要求1所述的一种利用赖氨酸芽孢杆菌DY2菌株沤麻制备黄麻纤维的方法,其特征在于:所述步骤(5)中的沤麻条件为自然温度,pH自然,沤麻时间10-20天;喷淋法的工艺具体为每48小时向沤麻区域喷洒菌液6~10ml。
9.根据权利要求1所述的一种利用赖氨酸芽孢杆菌DY2菌株沤麻制备黄麻纤维的方法,其特征在于:所述步骤(5)中的制得的黄麻纤维应用于制作麻袋、麻布、造纸、绳索、织地毯或窗帘。
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