CN104222022B - 一种光合细菌一步食物链高密度养殖卤虫的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种光合细菌一步食物链高密度养殖卤虫的方法，包括如下步骤：(1)、光合细菌培养容器消毒处理，对培养容器的器壁进行消毒处理，消毒后用煮沸海水冲洗干净；(2)、卤虫培养容器消毒处理，对培养容器的器壁进行消毒处理，消毒后用煮沸海水冲洗干净；(3)、卤虫养殖液的配制；(4)、光合细菌的接种与培养；(5)、卤虫的接种与培养。本发明的优点是采用光合细菌作为卤虫的单一饵料，采用一步食物链养殖方式，营养全面、培养方便、无毒无害、成本较低。
Description
技术领域
本发明属于卤虫养殖领域，尤其是涉及一种光合细菌一步食物链高密度养殖卤虫的方法。
背景技术
光合细菌(PSB,photosynthetic bacteria)是一类厌氧或者兼性厌氧自养细菌，广泛分布于土壤、盐湖、淡水、海水、温泉甚至两极地区，在污染严重的排污口也大量存在。光合细菌能够在厌氧条件下进行光合作用，但是不释放氧气，胞内含有多种菌绿素和类胡萝卜素，光照条件下能够利用硫化氢、硫代硫酸盐、分子氢等将二氧化碳还原成有机物，同时固定大气中的氮。光合细菌含有丰富的营养物质：蛋白质，维生素B12、叶酸、核黄素、类胡罗卜素、辅酶Q10等促长因子和生理活性物质。
目前，光合细菌仅作为一种营养添加剂应用于水产养殖，如鱼类、虾蟹等，但是单纯将光合细菌作为单一的饵料进行养殖的技术还没有相关案例。
卤虫(Artemia sp.)又称丰年虫，是一种广温耐盐性的一种小型甲壳动物，能够在淡水和咸水中生活。卤虫含有丰富的营养物质，干品含有蛋白质60％、脂肪20％以及丰富的高级不饱和脂肪酸、微量元素和种类丰富的生长因子。卤虫作为一种优质的活体饵料，在水产养殖中应用非常广泛。但是目前国际上卤虫资源有限，成体卤虫资源主要依靠野生繁殖，国际上人工养殖卤虫的技术含量也比较低，主要是越南等国家的粗放养殖为主。目前常用的养殖方法是在养殖的初期以肥水和补充生物饵料丰富的卤水为主，使透明度保持在30cm左右，随着卤虫的生长发育，需要逐步投喂有机碎屑，如糠麸、油饼类、玉米、鸡粪、牛羊粪等。颗粒要小于50μm，投喂量30—50kg/天·公顷，要分次饲喂。有条件可使用无机肥，每周每公顷水面施加尿素20kg、磷酸氢二铵25kg。因此，高技术含量的卤虫高密度养殖技术亟待解决。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种利用光合细菌一步食物链高密度养殖卤虫的方法，尤其适合高密度养殖卤虫。
本发明的技术方案是一种光合细菌一步食物链高密度养殖卤虫的方法，包括以下步骤：
一种光合细菌一步食物链高密度养殖卤虫的方法，包括如下步骤：
(1)光合细菌培养容器消毒处理
对培养容器的器壁进行消毒处理，消毒后用煮沸海水冲洗干净；
(2)卤虫培养容器消毒处理
对培养容器的器壁进行消毒处理，消毒后用煮沸海水冲洗干净；
(3)光合细菌培养基的配制；
(4)卤虫养殖液的配制；
(5)光合细菌的接种与培养；
(6)卤虫的接种与培养。
进一步，所述步骤(1)和步骤(2)均采用6％的次氯酸钠溶液对培养容器进行12h的消毒处理。
进一步，所述步骤(3)光合细菌培养基的配制方法是：将过滤后的饱和卤水与淡水混合，配制成盐度为30～150‰的人工海水；或者用海水晶或海水素调和淡水配制。
进一步，所述步骤(4)卤虫养殖液的配制包括如下步骤：
(1)将过滤后的饱和卤水与淡水混合，或者用海水晶或海水素调和淡水配制，配制成盐度为30～150‰卤虫养殖液；
(2)次氯酸钠消毒，调节pH为6.5～7.5；
(3)充分曝气，紫外线照射后得到卤虫养殖液。
进一步，所述步骤(5)的光合细菌的接种与培养方法为：将光合细菌菌种以10％体积比以上的接种量接种到光合细菌培养基中，厌氧培养，维持温度为25～35℃，pH 6.5～8.5，光照强度2000LUX以上，盐度为30～150‰，光合细菌密度达到109ind/ml以上时培养完成，得到成品光合细菌。
进一步，所述步骤(6)的卤虫的接种与培养方法为：将孵化后的卤虫无节幼体接种到卤虫养殖液中，接种密度为1500～10,000ind/L，维持培养温度为25～35℃，pH为6.5～7.5，溶解氧DO3.0～8.0ppm，自然光照，盐度为30～150‰，卤虫养殖液在培养容器中的深度为10～60cm,培养过程中持续在卤虫养殖液中加入光合细菌成品，当卤虫体长大于1cm时，养殖结束。
进一步，所述的培养过程中持续向卤虫养殖液中加入光合细菌成品，培养结束时卤虫养殖液透明度为10cm左右。
本发明采用的卤虫无节幼体密度的测量方法为从混匀的孵化液中取100μl卤虫5次，在解剖镜下分别计数，计算五次平均值作为卤虫无节幼体的密度；采用的卤虫体长的测量方法为随机选择卤虫10只，在显微镜镜下分别测量体长，计算10个数据的平均值作为卤虫的平均体长；根据卤虫无节幼体的成活率、生长及摄食情况，实时调节成品光合细菌的投喂量。
本发明的优点及效果：本发明采用光合细菌作为卤虫的单一饵料，采用一步食物链养殖方式，营养丰富、培养方便、无毒无害、成本较低。而且光合细菌含有种类丰富的促生长因子，能够提高卤虫抵抗力，生长迅速，能够在20d左右长为成虫，体长>1cm，而且养殖密度可以达到1000～10,000 ind/L。本方法培养出的卤虫营养均衡丰富，含有丰富的蛋白质和脂肪酸，抵抗力高。
具体实施方式
为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面针对本发明做进一步阐述，但不限定本发明的保护范围。
实施例一
(1)、光合细菌培养容器消毒处理
采用6％的次氯酸钠溶液对4个50L透明培养袋进行消毒，处理12h。然后用煮沸海水冲洗干净。
(2)、卤虫培养容器消毒处理
采用6％的次氯酸钠溶液对200L培养池进行消毒，处理12h。然后用煮沸海水冲洗干净；
(3)、光合细菌培养基的配制
用50μm滤布将饱和卤水过滤，然后与曝气12h后的自来水混合，配制成人工海水盐度为80‰。
配制1L微量元素母液包括H3BO32.86g、MnCl2·4H2O 1.81g、ZnSO4·7H2O 0.22g、Na2MoO4·2H2O 0.39g、CuSO4·5H2O 0.08g、CoCl2·6H2O 0.05g、FeCl3·6H2O 0.005g。121℃20min灭菌后备用。
使用时在1L光合细菌培养基中加入1ml微量元素母液。
配制200L光合细菌培养基包括NH4Cl 1.0g、NaHCO31.0g、KH2PO40.2g、CH3COONa5.0g、MgSO4·7H2O 0.2g、酵母膏0.2g、蛋白胨0.1g、CaCl2·2H200.1g，1L光合细菌培养基利用1L沸腾人工海水溶解，使用NaHCO3调节pH为7。
向200L光合细菌培养基中加入200ml微量元素母液，充分混匀，光合细菌培养基配制完成。
(4)、卤虫养殖液的配制
用50μm滤布将饱和卤水过滤，然后与曝气12h后的自来水混合，配制成卤虫养殖液盐度为80‰。使用6％次氯酸钠消毒12h，硫代硫酸钠调节pH为7。纯氧充分曝气，溶氧为8ppm，紫外线照射2h后得到卤虫养殖液。
(5)、光合细菌的接种与培养
将培养液分装到4个培养袋后，将光合细菌菌种以20％体积比的接种量接种。扎紧培养袋口，隔绝空气培养，控制温度为30℃，pH在6.5～8.5，光照强度5000LUX。每天摇晃培养袋，培养液颜色逐渐变深。7d后，光合细菌密度达到8×108ind/ml,；10d后，光合细菌密度达到5×109ind/ml，培养完成。
(6)、卤虫的接种与培养
选择渤海湾品系卤虫卵进行孵化，以5000ind/L的密度接种到卤虫养殖液中。控制温度为28～32℃，pH为6.5～7.5，盐度浮动在80‰左右。
在卤虫卵孵化24小时之后开始投喂成品光合细菌维持卤虫养殖液透明度为10cm左右，投放的光合细菌成品需要充分曝气11h-13h以后才能投饲。
最终，卤虫的成活率为74.3％，平均养殖密度为3715ind/L。
实施例二
(1)、光合细菌培养容器消毒处理
采用6％的次氯酸钠溶液对4个50L透明培养袋进行消毒，处理12h。然后用煮沸海水冲洗干净。
(2)、卤虫培养容器消毒处理
采用6％的次氯酸钠溶液对200L培养池进行消毒，处理12h。然后用煮沸海水冲洗干净；
(3)、光合细菌培养基的配制
同实施例一的步骤(3)，盐度为100‰。
(4)、卤虫培养基的配制
同实施例一的步骤(4)，盐度为100‰。
(5)、光合细菌的接种与培养
将培养液分装到4个培养袋后，将光合细菌菌种以20％体积比的接种量接种。
扎紧培养袋口，隔绝空气培养，控制温度为30℃，pH在6.5～8.5，光照强度5000LUX。
每天摇晃培养袋，培养液颜色逐渐变深。7d后，光合细菌密度达到6.3×108ind/ml,；10d后，光合细菌密度达到3.4×109ind/ml，11d后，光合细菌密度达到5.7×109ind/ml，培养完成。
(6)、卤虫的接种与培养
选择渤海湾品系卤虫卵进行孵化，以3000ind/L的密度进行接种。控制温度为28～32℃，pH为6.5～7.5，盐度浮动在100‰左右。
在卤虫卵孵化24小时之后开始投喂成品光合细菌维持卤虫养殖液透明度为10cm左右，投放的光合细菌成品需要充分曝气11h-13h以后才能投饲。
最终，卤虫的成活率为72.1％，平均养殖密度为2163ind/L。
实施例三
(1)、光合细菌培养容器消毒处理
采用6％的次氯酸钠溶液对4个50L透明培养袋进行消毒，处理12h。然后用煮沸海水冲洗干净。
(2)、卤虫培养容器消毒处理
采用6％的次氯酸钠溶液对200L培养池进行消毒，处理12h。然后用煮沸海水冲洗干净；
(3)、光合细菌培养基的配制
同实施例一的步骤(3)，盐度为60‰。
(4)、卤虫培养基的配制
同实施例一的步骤(4)，盐度为60‰。
(5)、光合细菌的接种与培养
将培养液分装到4个培养袋后，将光合细菌菌种以20％体积比的接种量接种。
扎紧培养袋口，隔绝空气培养，控制温度为30℃，pH在6.5～8.5，光照强度5000LUX。
每天摇晃培养袋，培养液颜色逐渐变深。7d后，光合细菌密度达到9.3×108ind/m；10d后，光合细菌密度达到6.4×109ind/ml，培养完成。
(6)、卤虫的接种与培养
选择渤海湾品系卤虫卵进行孵化，以1500ind/L的密度进行接种。控制温度为28～32℃，pH为6.5～7.5，盐度浮动在60‰左右。
在卤虫卵孵化24小时之后开始投喂成品光合细菌维持卤虫养殖液透明度为10cm左右，投放的光合细菌成品需要充分曝气11h-13h以后才能投饲。
最终，卤虫的成活率为83.4％，平均养殖密度为1260ind/L。
以上对本发明的三个实施例进行了详细说明，但所述内容仅为本发明的较佳实施例，不能被认为用于限定本发明的实施范围。凡依本发明申请范围所作的均等变化与改进等，均应仍归属于本发明的专利涵盖范围之内。
Claims (5)
1.一种光合细菌一步食物链高密度养殖卤虫的方法，包括如下步骤：
(1)光合细菌培养容器消毒处理
对培养容器的器壁进行消毒处理，消毒后用煮沸海水冲洗干净；
(2)卤虫培养容器消毒处理
对培养容器的器壁进行消毒处理，消毒后用煮沸海水冲洗干净；
(3)光合细菌培养基的配制；
(4)卤虫养殖液的配制；
(5)光合细菌的接种与培养；
(6)卤虫的接种与培养；
其中，步骤(4)包括如下步骤：
(1)将过滤后的饱和卤水与淡水混合，或者用海水晶或海水素调和淡水配制，配制成盐度为30～150‰卤虫养殖液；
(2)次氯酸钠消毒，调节pH为6.5～7.5；
(3)充分曝气，紫外线照射后得到卤虫养殖液；
其中，所述步骤(6)的卤虫的接种与培养方法为：将孵化后的卤虫无节幼体接种到卤虫养殖液中，接种密度为1500～10,000ind/L，维持培养温度为25～35℃，pH为6.5～7.5，溶解氧DO3.0～8.0ppm，自然光照，盐度为30～150‰，卤虫养殖液在培养容器中的深度为10～60cm，培养过程中持续在卤虫养殖液中加入光合细菌成品，当卤虫体长大于1cm时，养殖结束。
2.根据权利要求1所述的光合细菌一步食物链高密度养殖卤虫的方法，其特征在于，所述步骤(1)和步骤(2)均采用6％的次氯酸钠溶液对培养容器进行12h的消毒处理。
3.根据权利要求1所述的光合细菌一步食物链高密度养殖卤虫的方法，其特征在于，所述步骤(3)光合细菌培养基的配制方法是：将过滤后的饱和卤水与淡水混合，配制成盐度为30～150‰的人工海水；或者用海水晶或海水素调和淡水配制。
4.根据权利要求1所述的光合细菌一步食物链高密度养殖卤虫的方法，其特征在于，所述步骤(5)的光合细菌的接种与培养方法为：将光合细菌菌种以10％体积比以上的接种量接种到光合细菌培养基中，厌氧培养，维持温度为25～35℃，pH 6.5～8.5，光照强度2000Lux以上，盐度为30～150‰，光合细菌密度达到109ind/ml以上时培养完成，得到成品光合细菌。
5.根据权利要求1所述的光合细菌一步食物链高密度养殖卤虫的方法，其特征在于，所述的培养过程中持续向卤虫养殖液中加入光合细菌成品，培养结束时卤虫养殖液透明度为10cm。
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