CN104171762A - 一种玉米和拉巴豆混合生产青贮饲料的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种玉米和拉巴豆混合生产青贮饲料的方法,该方法是将乳熟末期的玉米、现蕾期拉巴豆一起刈割萎蔫至含水量达65-70%后,按玉米7∶拉巴豆3的质量比进行揉搓粉碎后装填、压紧、密封制作青贮饲料。本发明玉米拉巴豆混贮后的粗蛋白为11.42%,比玉米单贮提高63.85%,中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维分别提高9.60%和24.13%,没有产生丙酸和丁酸,pH值为4.17,乳酸占总酸的87.06%,乙酸占总酸的12.94%。从感官和发酵品质两方面进行评价,青贮品质为优。本发明操作方便,能提高青贮饲料的品质和蛋白质的含量,解决了青贮饲料蛋白质不足的问题。

Description

一种玉米和拉巴豆混合生产青贮饲料的方法
技术领域
本发明涉及饲料生产方法,尤其涉及一种玉米和拉巴豆混合生产青贮饲料的方法。
背景技术
青贮饲料就是把新鲜的青绿饲料进行适当的加工(如切短)处理后,装填到密闭的青贮容器中,经过微生物的发酵作用而调制成的一种柔软多汁、具有芳香气味、营养丰富、适口性好,耐贮藏的多汁饲料。青贮饲料按青贮原料组成和营养特性分为单一青贮和混合青贮。混贮是将两种或两种以上原料按一定比例混合青贮,其优点有三,一是可以调控青贮原料的含水量,抑制梭菌的繁殖,为获得优质的青贮饲料提供了理想的物质基础。二是改善青贮饲料质量,如豆科牧草与禾本科牧草混合青贮,两者优劣势进行互补,既提高了青贮饲料的发酵品质也改善了饲料的营养价值。三是通过混合青贮能降低制作饲料的成本和技术难度。
玉米作为“饲料之王”,是继小麦、水稻的第三大粮食作物。随着畜牧业的发展,玉米早已成为全世界重要的饲料、粮食和经济兼用性作物,尤其是奶牛饲养的常备饲料和肉牛育肥的强化饲料。家畜青贮饲料的玉米品种,具有速效高产,营养价值高、非结构性碳水化合物含量高、木质素含量低,适口性好、易于消化等优点,是现代化畜牧业发展重要优质饲料来源。玉米收获时植株的含水量和可溶性碳水化合物含量均能满足成功青贮的要求,但蛋白质含量却相对较低,为提高青贮饲料的品质,将高产青贮玉米与优质的豆科牧草混贮,可以提高青贮饲料的营养价值,并且可以解决饲料蛋白不足的问题。
现有技术的缺点:1、现有青贮饲料生产主要是以玉米青贮为主,也有部分玉米与其他牧草的混合青贮。2、现有青贮饲料蛋白质含量低。
发明内容
本发明是为了解决上述不足,提供了一种玉米和拉巴豆混合生产青贮饲料的方法。
本发明的上述目的通过以下的技术方案来实现:一种玉米和拉巴豆混合生产青贮饲料的方法,其特征在于:包括以下步骤:
步骤一:青贮原料的准备:选择乳熟末期的玉米、现蕾期的拉巴豆并刈割,就地自然萎蔫6-8h,含水量达65-70%时收集,准备制作;
步骤二:青贮饲料制作:按质量比7∶3的玉米∶拉巴豆比例混合,并用青贮揉搓机将混合料切成2-3cm的原料,混匀后放入聚乙烯青贮袋中,并用真空封口机抽真空后密封,置于室温储藏;
步骤三:青贮饲料的成分分析:待储藏60d后开封取样进行青贮原料和青贮饲料的干物质、粗蛋白、可溶性碳水化合物、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维、青贮饲料的pH值及有机酸和氨态氮的分析;
步骤四:青贮饲料品质评价:对青贮饲料进行感官评价和发酵品质评价。
进一步,在步骤一所述的青贮原料的准备的具体方法如下:
在玉米达乳熟末期,拉巴豆为现蕾期的时候齐地刈割,割后就地自然萎蔫6-8h,含水量达65-70%时收集,准备制作;
进一步,步骤二所述的青贮饲料制作的具体方法如下:
按7∶3的质量比即玉米7∶拉巴豆3的混合比例分别称取玉米、拉巴豆原料,并将所称取两种原料混合,用青贮揉搓机进行粉碎,粉碎成2-3cm长的原料段,再次混合均匀后装入聚乙烯青贮袋中,边填边压紧,最后用真空封口机抽真空后密封,置于室温储藏。
进一步,步骤三所述的青贮饲料的成分分析的具体方法如下:
室温放置60d后开袋,随机5点取样,然后将取的样再混合后四分法取出样品进行青贮原料和青贮饲料的干物质、粗蛋白、可溶性碳水化合物、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维成分的测定,具体方法为:称取500g湿样自然风干后在65℃条件下烘干48h,回潮24h测定干物质,使用微型植物样粉碎机粉碎原料,过40目筛,采用凯式定氮法测定粗蛋白,采用范氏洗涤纤维分析法测定中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维,采用蒽酮-硫酸法测定可溶性碳水化合物。
凯氏定氮法包括以下步骤:
称取0.5g的样品,使用定性滤纸包裹好,放入消化管中,加入硫酸钾-硫酸铜15∶1混合粉末;加入10ml浓硫酸,在420℃下进行消煮;消煮液至清亮蓝色为宜;配制40%氢氧化钠,1%的硼酸吸收液和0.1M盐酸溶液,用全自动定氮仪进行测定。
范式法测定中、酸性洗涤纤维的测定包括以下步骤:
中性洗涤纤维的测定包括以下步骤:
称取30.0g分析纯十二烷基硫酸钠;18.61g分析纯乙二胺四乙酸二钠;6.81g分析纯十水四硼酸钠;4.56g分析纯无水磷酸氢二钠,10.0ml分析纯乙二醇乙醚;全部溶解于1L蒸馏水中,控制pH值在6.9-7.1之间;称取烘干至恒重、过40目筛的样品0.45-0.55g放入已经称重的滤袋中,距离袋口4cm封口;称取一个空白袋作为对照;滤袋架上最多放24个样品包,每个托盘放置3个滤袋,托盘间呈120度放置,将放置好滤袋的支架放入纤维分析容器中,放入重锤保证第九层托盘可以浸入液面下;遵循ANKOM2000全自动分析仪的操作;NDF分析及洗涤过程结束,打开盖子取出样品,轻压滤袋将水挤出,把滤袋放入250ml烧杯中,加入足够丙酮覆盖滤袋浸泡3-5min,从丙酮中取出滤袋风干,在烘箱中105℃烘干至恒重,冷却称重后计算NDF的含量。
酸性洗涤纤维的测定包括以下步骤:
酸性洗涤剂2%十六烷基三甲基溴化铵的配制:称取20g化学纯十六烷基溴化铵溶于1000ml,1.00mol硫酸溶液中,搅拌均匀,必要时过滤;
1.00mol/L硫酸溶液的配制:量取55.74ml浓硫酸,化学纯,90%,比重1.84,慢慢加入已经装有1000ml蒸馏水的烧杯中,冷却至室温,定容至1000ml容量瓶中定容,标定;
称取烘干至恒重、过40目筛的样品0.45-0.55g放入已经称重的滤袋中,距离袋口4cm封口;称取一个空白袋作为对照,滤袋架上最多放24个样品包,每个托盘放置3个滤袋,托盘间呈120度放置,将放置好滤袋的支架放入纤维分析容器中,放入重锤保证第九层托盘可以浸入液面下;遵循ANKOM2000全自动分析仪的操作;ADF分析及洗涤过程结束,打开盖子取出样品,轻压滤袋将水挤出,把滤袋放入250ml烧杯中,加入足够丙酮覆盖滤袋浸泡3-5min,从丙酮中取出滤袋风干,在烘箱中105℃烘干至恒重,冷却沉重后计算ADF的含量。
蒽酮-硫酸比色法测定可溶性碳水化合物方法为:
蔗糖标准溶液的配制100ug/ml:称取100mg分析纯无水蔗糖,溶于蒸馏水中,并定容至100ml容量瓶中,使用时再稀释10倍,即浓度为100ug/ml;
蒽酮试剂:称取1.0g蒽酮溶于1000ml浓硫酸中,冷却至室温后置于棕色瓶中,冰箱中4℃保存,备用
蔗糖标准曲线的制作:取标准溶液分别稀释成0、20、40、60、80、100ug/ml不同梯度的标准溶液,量取稀释后的标准溶液1.0ml,加入蒽酮溶液5ml,迅速摇匀,待冷却后620nm波长下比色;用线性回归方程制定标准曲线;
测定方法:称取烘干至恒重的粉末样品0.1g,放入试管中,加入15ml蒸馏水,沸水浴30min,取出冷却过滤,定容至50ml,得到待测样品提取液;
取待测样品提取液1.0ml,加入蒽酮试剂5.0ml,迅速摇匀,冷却后在紫外分光光度计620nm波长下比色;将吸光值带入回归方程即可算出样品中可溶性碳水化合物浓度。
青贮饲料的pH值及有机酸的测定具体方法为:准确称取20g样品,加入180ml蒸馏水,搅拌均匀,置于4℃冰箱中浸提24h,四层粗纱布过滤,用pH测定仪测滤液pH;取上清液0.45um滤膜过滤后用HPLC测定乳酸、乙酸、丙酸和丁酸含量。
氨态氮的测定使用苯酚-次氯酸钠比色法测定,具体步骤以下步骤:
苯酚试剂:称取0.15g亚硝基铁氰化氯25g溶解于1.5L蒸馏水中,再加入29.7g结晶苯酚,定容至3L后,储存在棕色瓶中,备用;
次氯酸钠试剂:将15g分析纯氢氧化钠溶解于2L蒸馏水中,再次加入113.6g分析纯七水磷酸氢二钠,中火加热并不断搅拌至完全溶解;冷却后加入44.1ml含8.5%活性氯(不低于7%),并混匀,定容至3L,贮藏于棕色瓶中备用;
标准铵溶液:称取0.6607g烘干至恒重的分析纯硫酸铵溶于蒸馏水中,定容至100ml,配制成100mmol/L的铵储备液;将储备液稀释成1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mmol/L不同梯度的标准液;
具体操作步骤:向每只试管中加入50ul经稀释的样本液或标准液,空白为50ul的蒸馏水,各试管中加入2.5ml的苯酚试剂,摇匀;再次加入2ml的次氯酸钠试剂,摇匀;将混合液于95℃恒温水浴5min;冷却后630nm波长下分光光度计下比色,记录吸光值并计算。
进一步,在步骤四:青贮饲料品质评价的具体方法如下:对青贮饲料进行感官评价和发酵品质评价。
感官评定采用评分法,根据嗅觉、结构、色泽3项进行评分,满分为20分,16-20为优良,10-15为尚好,5-9为中等,0-4为腐败。
采用费氏青贮饲料评分方案。根据青贮饲料中乳酸、乙酸、丁酸分别占总酸含量确定单项得分,3个单项得分相加得总分,满分为100分,根据这个评分,将青贮饲料品质分为优(80分以上)、良(61-80分)、中(41-60分)、差(21-40分)、劣(0-20分)5个级别。
本发明与现有技术相比的优点是:本发明采用豆科拉巴豆与玉米进行混贮生产青贮饲料,丰富了青贮原料的种类,可以提高青贮料的营养价值;并且使用玉米拉巴豆质量比为7∶3的比例制作的青贮饲料提高了青贮料蛋白质含量和青贮品质。
附图说明
图1是本发明实施例的工艺流程图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明进一步详述:
如图1所示,本发明一种玉米和拉巴豆混合生产青贮饲料的方法,包括以下步骤:
S101:青贮原料的准备:选择乳熟末期的玉米、现蕾期的拉巴豆并刈割,就地自然萎蔫6-8h,含水量达65-70%时收集,准备制作;
S102:青贮饲料制作:按质量比7∶3的玉米∶拉巴豆比例混合,并用青贮揉搓机将混合料切成2-3cm的原料,混匀后放入聚乙烯青贮袋中,并用真空封口机抽真空后密封,置于室温储藏;
S103:青贮饲料的成分分析:待储藏60d后开封取样进行青贮原料和青贮饲料的干物质、粗蛋白、可溶性碳水化合物、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维、青贮饲料的pH值及有机酸和氨态氮的分析;
S104:青贮饲料品质评价:对青贮饲料进行感官评价和发酵品质评价。
以下结合具体的实验对本发明进行进一步的说明。
发明人于2012年在四川省凉山州畜牧兽医科学研究所牧草实验室进行玉米拉巴豆混贮生产青贮饲料的试验,主要研究情况如下:
1、试验材料与方法:
1.1、试验材料:乳熟末期的玉米(豫玉22号);现蕾期拉巴豆(润高拉巴豆)。
1.2、试验设计:试验设两个处理,玉米∶拉巴豆质量比为7∶3混贮、玉米单贮,每处理重复3次。
1.3 试验方法
1.3.1 青贮饲料的调制
将乳熟末期的玉米、现蕾期拉巴豆齐地刈割后,就地自然萎蔫6h,收获运回实验室,一处理按7∶3的重量比即玉米7∶拉巴豆3的混合比例分别称取玉米、拉巴豆原料,并将所称取两种原料混合,用RC-30型揉搓粉碎机进行粉碎,粉碎成2-3cm长的原料段,再次混合均匀后装入聚乙烯真空袋(20cm×28cm)密封保存,平均袋重300g,另一处理将运回的玉米粉碎成2-3cm长的原料段,装入聚乙烯真空袋(20cm×28cm)密封保存,平均袋重300g,两处理都置于室温保存60d后。开封取样分析相关指标;另备500g的原料在室内条件下阴干测定相关指标。
1.3、分析项目与方法:
1.3.1、感官评定:采用德国农业协会(Deutche Lan DwirtschaftsGeseutschaft)评分法,根据嗅觉、结构、色泽3项进行评分,满分为20分,16-20为优良,10-15为尚好,5-9为中等,0-4为腐败。
1.3.2、青贮原料和青贮饲料的化学成分的测定:在65℃条件下烘干48h测定干物质(DM),使用微型植物样粉碎机粉碎原料,过40目筛,采用凯式定氮法测定粗蛋白(CP),采用范氏方法测定中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF),采用蒽酮-硫酸法测定可溶性碳水化合物(WSC),采用苯酚-次氯酸钠比色法测定氨态氮。
1.3.3、青贮饲料的pH值及有机酸的测定:试验前备好180ml去离子水,打开青贮袋,称取20g青贮料湿样倒入去离子水中,放入4℃冰箱放置24h后,浸提液用四层纱布、滤纸过滤到烧杯中,用雷磁pHS-3C测定浸提液的pH值。取另一份滤液,0.45um滤膜过滤于5ml的离心管中,使用SHIMADZE-10A型高效液相色谱仪分析滤液中的乳酸、乙酸、丙酸、丁酸含量。
1.3.4、青贮饲料发酵品质评价:采用费氏青贮饲料评分方案。根据青贮饲料中乳酸、乙酸、丁酸分别占总酸含量确定单项得分,3个单项得分相加得总分,满分为100分,根据这个评分,将青贮饲料品质分为优(80分以上)、良(61-80分)、中(41-60分)、差(21-40分)、劣(0-20分)5个级别。
1.4、统计分析:采用Excel对原料特性、感官评定及品质评分数据进行整理和分析。
2、结果与分析:
2.1 感官评价:
玉米单贮效果优良,为1级。玉米拉巴豆混贮有较轻的酸味,芳香味较弱,茎叶结构保持良好,柔软松散,色泽为黄绿色,青贮效果尚好,评为2级。拉巴豆玉米混贮的感官评定如下:
表1 感官评价
2.2、营养成分分析:
成功获得优质青贮饲料不仅需要适宜的水分含量,还应有足够的可溶性碳水化合物及乳酸菌数。研究表明,水分含量应控制在55%~65%,新鲜材料可溶性碳水化合物含量为25~35g/kg,乳酸菌要求材料草每克鲜草105个以上,是成功青贮的最低限度;本试验中玉米原料与7∶3玉米拉巴豆混合样的水分含量分别为75.15%和76.83%,玉米的可溶性碳水化合物高,玉米拉巴豆混合的可溶性碳水化合物低。青贮后7∶3玉米拉巴豆混贮的粗蛋白为11.42%比玉米单贮提高63.85%,中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维分别提高9.60%和24.13%,可溶性碳水化合物比玉米单贮降低83.02%。
表2 营养成分(绝干基础)%
2.3、发酵品质分析
玉米单贮p值为3.79,7∶3玉米拉巴豆混贮为4.17,乳酸含量分别为87.06%和68.43%,乙酸含量分别为12.94%和31.57%,两处理均未产生丙酸和丁酸。pH值、乳酸含量、乙酸含量差异显著(P<0.05),氨态氮占总氮百分比差异显著(P<0.05),7∶3玉米拉巴豆混贮最高,为15.28%,比玉米单贮高88.51%。
表3 青贮料的发酵品质如下:
其中TA:总酸;同一列中不同小写字母表示差异显著(P<0.05)
2.4、青贮饲料发酵品质评价:
玉米单贮总分为100分,青贮质量为优,7∶3玉米拉巴豆混贮总分为94分,质量也为优,与感官评定结果一致。
表4 青贮发酵品质评分如下:
3、讨论:
3.1、混贮对青贮营养成分的影响。
青贮后玉米拉巴豆7∶3混贮的粗蛋白为11.42%比玉米单贮提高63.85%,中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)是反映纤维质量好坏的最有效的指标,ADF与动物消化率呈负相关,是指示饲草能量的关键,其含量越低,饲草的消化率越高,饲用价值越大。本试验中7∶3玉米拉巴豆混贮的NDF含量相对于玉米单贮提高了9.60%,ADF提高了24.13%,可能是高ADF(36.81%)的拉巴豆原料与低ADF(27.38%)玉米混贮后使青贮料的ADF介于两者之间,NDF与原料相比差异不大。
3.2、混贮对青贮PH及有机酸含量的影响。
青贮饲料中,pH值受到不同牧草不同化学成分的影响,同时还与青贮时牧草本身的含水量有关,豆科牧草含WSC低(约占鲜草的9%~11%),用于发酵的底物较少,因此青贮时pH值下降速度不如可溶性碳水化合物相对高的禾本科牧草。本试验中玉米单贮pH值为3.79,7∶3玉米拉巴豆混贮后pH为4.17,这说明玉米与豆科牧草混贮会使PH值增高。各处理乳酸含量均超过60%,乳酸含量占绝对优势,因此可认为以同型乳酸发酵为主。在混贮中乙酸含量高于玉米单贮,这可能与拉巴豆原料的特性有关,但乙酸含量的增加有利于提高青贮有氧稳定性。可溶性碳水化合物是乳酸菌生长繁殖的底物,本试验中虽然拉巴豆可溶性碳水化合物含量不足(1.53%),但玉米的可溶性碳水化合物含量高(3.53%)发酵底物充足。促使青贮饲料pH值快速降低,有效抑制了梭菌繁殖,混贮处理未产生丁酸。
3.3、混贮对青贮氨态氮含量的影响。
氨态氮与总氮的比值被广泛用于衡量青贮好坏的重要指标,比值越大,说明氨基酸和蛋白质分解越多,青贮越差。Kaiser等、万里强等指出,青贮中氨态氮含量不仅与青贮发酵过程有关,还受牧草种类及牧草成份含量的影响。本试验中7∶3玉米拉巴豆混贮的氨态氮含量高为15.28%,说明向玉米中添加拉巴豆增加了氨态氮生长量。Fairbairn等研究证明,低pH值可以有效地抑制蛋白酶活性;郭旭生等也报道,向青贮料中添加糖可以降低pH值、抑制蛋白质的分解及微生物的繁殖。本试验中没有向青贮料中添加糖,但是在拉巴豆中添加玉米可提高青贮料的WSC含量。
3.4 发酵品质评价:
发酵品质好的鲜草青贮料pH低于4.2,若低于4.5则为中等,高于4.8则发酵品质差,丁酸含量应低于0.1%,氨态氮占总氮的比例应低于10%。在本试验中拉巴豆玉米混贮氨态氮占总氮百分比超过10%,发酵品质评分为94分,等级为优,可见7∶3玉米拉巴豆混贮也能达到好的发酵效果。
以上所述仅为本发明的实施例,并非因此限制本发明的专利范围,凡是利用本发明说明书所作的等效结构或等效流程变换,或直接或间接运用在其他相关的技术领域,均同理包括在本发明的专利保护范围内。

Claims (5)

1.一种玉米和拉巴豆混合生产青贮饲料的方法,其特征在于:包括以下步骤:
步骤一:青贮原料的准备:选择乳熟末期的玉米、现蕾期的拉巴豆并刈割,就地自然萎蔫6-8h,含水量达65-70%时收集,准备制作;
步骤二:青贮饲料制作:按质量比7∶3的玉米∶拉巴豆比例混合,并用青贮揉搓机将混合料切成2-3cm的原料,混匀后放入聚乙烯青贮袋中,并用真空封口机抽真空后密封,置于室温储藏;
步骤三:青贮饲料的成分分析:待储藏60d后开封取样进行青贮原料和青贮饲料的干物质、粗蛋白、可溶性碳水化合物、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维、青贮饲料的pH值及有机酸和氨态氮的分析;
步骤四:青贮饲料品质评价:对青贮饲料进行感官评价和发酵品质评价。
2.根据权利要求1所述的一种玉米和拉巴豆混合生产青贮饲料的方法,其特征在于:步骤一所述的青贮原料的准备的具体方法如下:
在玉米达乳熟末期,拉巴豆为现蕾期的时候齐地刈割,割后就地自然萎蔫6-8h,含水量达65-70%时收集,准备制作。
3.根据权利要求1所述的一种玉米和拉巴豆混合生产青贮饲料的方法,其特征在于:步骤二所述的青贮饲料制作的具体方法如下:
按7∶3的质量比即玉米7∶拉巴豆3的混合比例分别称取玉米、拉巴豆原料,并将所称取两种原料混合,用青贮揉搓机进行粉碎,粉碎成2-3cm长的原料段,再次混合均匀后装入聚乙烯青贮袋中,边填边压紧,最后用真空封口机抽真空后密封,置于室温储藏。
4.根据权利要求1所述的一种玉米和拉巴豆混合生产青贮饲料的方法,其特征在于:步骤三所述的青贮饲料的成分分析的具体方法如下:
室温放置60d后开袋,随机5点取样,然后将取的样再混合后四分法取出样品进行青贮原料和青贮饲料的干物质、粗蛋白、可溶性碳水化合物、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维成分的测定,具体方法为:称取500g湿样自然风干后在65℃条件下烘干48h,回潮24h测定干物质,使用微型植物样粉碎机粉碎原料,过40目筛,采用凯式定氮法测定粗蛋白,采用范氏洗涤纤维分析法测定中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维,采用蒽酮-硫酸法测定可溶性碳水化合物;
凯氏定氮法包括以下步骤:
称取0.5g的样品,使用定性滤纸包裹好,放入消化管中,加入硫酸钾-硫酸铜15∶1混合粉末;加入10ml浓硫酸,在420℃下进行消煮;消煮液至清亮蓝色为宜;配制40%氢氧化钠,1%的硼酸吸收液和0.1M盐酸溶液,用全自动定氮仪进行测定;
范式法测定中、酸性洗涤纤维的测定包括以下步骤:
中性洗涤纤维的测定包括以下步骤:
称取30.0g分析纯十二烷基硫酸钠;18.61g分析纯乙二胺四乙酸二钠;6.81g分析纯十水四硼酸钠;4.56g分析纯无水磷酸氢二钠,10.0ml分析纯乙二醇乙醚;全部溶解于1L蒸馏水中,控制pH值在6.9-7.1之间;称取烘干至恒重、过40目筛的样品0.45-0.55g放入已经称重的滤袋中,距离袋口4cm封口;称取一个空白袋作为对照;滤袋架上最多放24个样品包,每个托盘放置3个滤袋,托盘间呈120度放置,将放置好滤袋的支架放入纤维分析容器中,放入重锤保证第九层托盘可以浸入液面下;遵循ANKOM2000全自动分析仪的操作;NDF分析及洗涤过程结束,打开盖子取出样品,轻压滤袋将水挤出,把滤袋放入250ml烧杯中,加入足够丙酮覆盖滤袋浸泡3-5min,从丙酮中取出滤袋风干,在烘箱中105℃烘干至恒重,冷却称重后计算NDF的含量;
酸性洗涤纤维的测定包括以下步骤:
酸性洗涤剂2%十六烷基三甲基溴化铵的配制:称取20g化学纯十六烷基溴化铵溶于1000ml,1.00mol硫酸溶液中,搅拌均匀,必要时过滤;
1.00mol/L硫酸溶液的配制:量取55.74ml浓硫酸,化学纯,90%,比重1.84,慢慢加入已经装有1000ml蒸馏水的烧杯中,冷却至室温,定容至1000ml容量瓶中定容,标定;
称取烘干至恒重、过40目筛的样品0.45-0.55g放入已经称重的滤袋中,距离袋口4cm封口;称取一个空白袋作为对照,滤袋架上最多放24个样品包,每个托盘放置3个滤袋,托盘间呈120度放置,将放置好滤袋的支架放入纤维分析容器中,放入重锤保证第九层托盘可以浸入液面下;遵循ANKOM2000全自动分析仪的操作;ADF分析及洗涤过程结束,打开盖子取出样品,轻压滤袋将水挤出,把滤袋放入250ml烧杯中,加入足够丙酮覆盖滤袋浸泡3-5min,从丙酮中取出滤袋风干,在烘箱中105℃烘干至恒重,冷却沉重后计算ADF的含量;
蒽酮-硫酸比色法测定可溶性碳水化合物方法为:
蔗糖标准溶液的配制100ug/ml:称取100mg分析纯无水蔗糖,溶于蒸馏水中,并定容至100ml容量瓶中,使用时再稀释10倍,即浓度为100ug/ml;
蒽酮试剂:称取1.0g蒽酮溶于1000ml浓硫酸中,冷却至室温后置于棕色瓶中,冰箱中4℃保存,备用;
蔗糖标准曲线的制作:取标准溶液分别稀释成0、20、40、60、80、100ug/ml不同梯度的标准溶液,量取稀释后的标准溶液1.0ml,加入蒽酮溶液5ml,迅速摇匀,待冷却后620nm波长下比色;用线性回归方程制定标准曲线;
测定方法:称取烘干至恒重的粉末样品0.1g,放入试管中,加入15ml蒸馏水,沸水浴30min,取出冷却过滤,定容至50ml,得到待测样品提取液;
取待测样品提取液1.0ml,加入蒽酮试剂5.0ml,迅速摇匀,冷却后在紫外分光光度计620nm波长下比色;将吸光值带入回归方程即可算出样品中可溶性碳水化合物浓度;
青贮饲料的pH值及有机酸的测定具体方法为:准确称取20g样品,加入180ml蒸馏水,搅拌均匀,置于4℃冰箱中浸提24h,四层粗纱布过滤,用pH测定仪测滤液pH;取上清液0.45um滤膜过滤后用HPLC测定乳酸、乙酸、丙酸和丁酸含量;
氨态氮的测定使用苯酚-次氯酸钠比色法测定,具体步骤以下步骤:
苯酚试剂:称取0.15g亚硝基铁氰化氯25g溶解于1.5L蒸馏水中,再加入29.7g结晶苯酚,定容至3L后,储存在棕色瓶中,备用;
次氯酸钠试剂:将15g分析纯氢氧化钠溶解于2L蒸馏水中,再次加入113.6g分析纯七水磷酸氢二钠,中火加热并不断搅拌至完全溶解;冷却后加入44.1ml含8.5%活性氯(不低于7%),并混匀,定容至3L,贮藏于棕色瓶中备用;
标准铵溶液:称取0.6607g烘干至恒重的分析纯硫酸铵溶于蒸馏水中,定容至100ml,配制成100mmol/L的铵储备液;将储备液稀释成1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mmol/L不同梯度的标准液;
具体操作步骤:向每只试管中加入50ul经稀释的样本液或标准液,空白为50ul的蒸馏水,各试管中加入2.5ml的苯酚试剂,摇匀;再次加入2ml的次氯酸钠试剂,摇匀;将混合液于95℃恒温水浴5min;冷却后630nm波长下分光光度计下比色,记录吸光值并计算。
5.根据权利要求1所述的一种玉米和拉巴豆混合生产青贮饲料的方法,其特征在于:步骤四所述的青贮饲料品质评价的具体方法如下:
感官评定采用评分法,根据嗅觉、结构、色泽3项进行评分,满分为20分,16-20为优良,10-15为尚好,5-9为中等,0-4为腐败;
采用费氏青贮饲料评分方案;根据青贮饲料中乳酸、乙酸、丁酸分别占总酸含量确定单项得分,3个单项得分相加得总分,满分为100分,根据这个评分,将青贮饲料品质分为优(80分以上)、良(61-80分)、中(41-60分)、差(21-40分)、劣(0-20分)5个级别。
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