CN115176886B - 一种高蛋白低纤维杂交构树青贮饲料及其制备方法 - Google Patents

一种高蛋白低纤维杂交构树青贮饲料及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明提供一种高蛋白低纤维杂交构树青贮饲料及其制备方法,该方法包括以下步骤:S1、制备青贮原料;S2、向青贮原料中加入发酵菌、糖蜜和纤维素酶,混匀后进行裹包、青贮发酵,青贮发酵完成后,得到高蛋白低纤维杂交构树青贮饲料;发酵菌是由植物乳杆菌、乳酸片球菌和布氏乳杆菌以质量比2~4:1:1混合而成;按照青贮原料的重量计算,发酵菌的添加总量为0.5×107~1.0×107CFU/g,糖蜜的添加量为10~30g/kg,纤维素酶的添加量为3×103~9×103U/kg。该方法制得的青贮饲料青贮质量高,蛋白含量高;纤维素含量低,粗蛋白为12%~17%,NDF为38%~53%,ADF为31%~40%。

Description

一种高蛋白低纤维杂交构树青贮饲料及其制备方法
技术领域
本发明涉及青贮饲料制备技术领域,具体涉及一种高蛋白低纤维杂交构树青贮饲料及其制备方法。
背景技术
构树作为一种粗蛋白含量高的木本饲料,其构树叶片的CP(粗蛋白)含量在20%左右,明显高于大米、玉米、大麦,因此,构树叶可用作高蛋白粗饲料,具有十分远大的开发前景。然而开发利用构树饲料资源的过程中发现,构树中粗纤维含量较高,且含有单宁和木质素等抗营养因子,大量采食会影响饲料适口性,导致动物采食量下降,消化利用率降低,这使得构树作为饲料应用受到了限制。因此,需要对构树饲料进行适当的加工处理,以降低纤维素和抗营养因子含量,提高饲料适口性和营养物质消化率。
目前,关于构树营养成分的研究大多集中在构树叶上,例如,屠焰等对杂交构树叶片的研究结果显示,构树叶中CP(粗蛋白)含量为28.7%,ADF(酸性洗涤纤维)含量为13.0%,NDF(中性洗涤纤维)含量为15.9%。然而,构树叶产量较低,且在收割时难以实现构树枝叶分离,在产业上推广不具有普遍性。而对于反刍动物,可以采食构树嫩枝条。但是对于构树全株用作高蛋白粗饲料的研究还未见报道,因此亟需补充构树全株相关研究数据。
有研究表明,添加一定量的构树饲料对猪、鸡等单胃动物的生长性能无显著影响,但添加过多会导致单胃动物对饲料的营养物质吸收率降低。但是对于反刍动物而言,反刍动物能够通过瘤胃中微生物发酵提高对饲料中营养物质的消化吸收率。屠焰等利用瘘管牛研究杂交构树不同部位在瘤胃中24和48小时后降解率,结果表明构树中CP(粗蛋白)和DM(干物质)的瘤胃降解率高于其他粗饲料,尤其是构树叶片和嫩枝的瘤胃降解率高达90%左右。但是构树茎杆的NDF(中性洗涤纤维)和ADF(酸性洗涤纤维)在瘤胃中降解率较低,这主要是由于构树茎杆中纤维素和木质素的含量相对较高,而这些成分不仅降低了构树的适口性,也导致构树的营养成分难以被动物吸收利用,成为阻碍构树作为优质蛋白饲料的障碍。
青贮技术是将收割后的新鲜原料经铡切粉碎后放入青贮设备中压实,加入促进发酵的乳酸菌制剂或其他辅料,然后密封保存。青贮能够在厌氧环境中促进乳酸菌大量繁殖,将淀粉和WSC(可溶性碳水化合物)转化为乳酸,使青贮的pH降低到4.2以下,从而有效抑制腐败菌的生长,达到长期保存饲料的目的。杂交构树青贮可以软化木质素或植物纤维素,改善原料适口性。例如,张益民等在构树叶片中添加酵母和米曲霉进行发酵。
影响青贮的因素主要有酶制剂的种类和数量、水分含量、WSC含量等。其中,酶制剂的添加量不宜过多,一方面是出于成本考虑,另一方面过多的酶制剂可能造成原料组织结构崩解,产生粘性。另外,将乳酸菌与其它酶制剂混合使用青贮效果不佳。例如Yifen Zhang等在苜蓿青贮过程中添加乳酸菌和细胞降解酶研究在不同温度条件下苜蓿的青贮效果,结果表明添加乳酸菌和细胞降解酶的组WSC含量最高,ADF和NDF含量最低。
构树叶的缓冲能较高、可溶性碳水化合物(WSC)含量较少,单一物质直接用于发酵品质较差;而且构树鲜叶含水量高,青贮营养损失大,易制作失败。基于此,有必要提供一种稳定性高,且青贮效果好的高蛋白低纤维杂交构树青贮饲料的制备方法。
发明内容
为解决上述问题,本发明的目的在于提供一种稳定性高,且青贮效果好的高蛋白低纤维杂交构树青贮饲料及其制备方法。
为实现上述目的,本发明的技术方案如下。
一种高蛋白低纤维杂交构树青贮饲料的制备方法,包括以下步骤:
S1、制备青贮原料;
S2、向S1的青贮原料中加入发酵菌、糖蜜和纤维素酶,混匀后进行裹包、青贮发酵,青贮发酵完成后,得到高蛋白低纤维杂交构树青贮饲料;
其中,所述发酵菌是由植物乳杆菌、乳酸片球菌和布氏乳杆菌以质量比2~4:1:1混合而成;
按照青贮原料的重量计算,发酵菌的添加总量为0.5×107~1.0×107CFU/g,糖蜜的添加量为10~30g/kg,纤维素酶的添加量为3×103~9×103U/kg。
本发明中,糖蜜中含有丰富的WSC,能够提高青贮中干物质和乳酸的含量,降低pH和氨态氮浓度。
进一步,所述发酵菌添加到青贮原料之前,还包括菌种活化;
所述菌种活化是将发酵菌在28~32℃、pH6.8~7.0条件下,用MRS培养基培养活化。
进一步,当青贮原料为构树全株时,植物乳杆菌、乳酸片球菌和布氏乳杆菌的质量比为4∶1∶1。
更进一步,所述青贮原料是将构树全株切成2~4cm的小段,即得。
更进一步,按照青贮原料的重量计算,所述青贮原料的含水量为45~60%。
更进一步,按照青贮原料的重量计算,发酵菌的添加量为1.0×107CFU/g,糖蜜的添加量为30g/kg,纤维素酶的添加量为9×103U/kg。
进一步,当青贮原料为构树全株和稻草的混合时,植物乳杆菌、乳酸片球菌和布氏乳杆菌的质量比为2∶1∶1。
更进一步,按照青贮原料的重量计算,稻草的添加量为1~10%。
更进一步,按照青贮原料的重量计算,发酵菌的添加量为1.0×107CFU/g,糖蜜的添加量为30g/kg,纤维素酶的添加量为6×103U/kg。
进一步,青贮发酵的时间为40~60天。
本发明还提供一种采用上述制备方法制备得到的高蛋白低纤维杂交构树青贮饲料。
本发明的有益效果:
1、本发明所述制备方法制得的构树青贮,青贮质量高,蛋白含量高;纤维素含量低,其中,粗蛋白含量为12%~17%,NDF含量为38%~53%,ADF为31%~40%。
2、本发明通过植物乳杆菌、乳酸片球菌和布氏乳杆菌组合形成的发酵菌,配合糖蜜和纤维素酶用于对构树青贮发酵,稳定性高,且青贮效果好。
3、本发明的构树青贮可完全替代奶牛或肉牛日粮中的苜蓿干草,且构树青贮饲料使用量为12.5%。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合实施例,对本发明进行进一步详细说明。应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。
基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
本发明中,CP表示粗蛋白;DM表示干物质;NDF表示中性洗涤纤维;ADF表示酸性洗涤纤维;WSC表示可溶性碳水化合物;TVFA表示总挥发性脂肪酸;EE表示粗脂肪。
构树枝叶:来自安徽省六安市安徽华好生态养殖公司。
青贮原料:将长势良好且无病虫害的构树,于株高1.2m时收割,用铡刀铡成2~4cm长的小段,作为青贮的原料。
试验菌种:植物乳杆菌、布氏乳杆菌和乳酸片球菌购自国家菌种保藏中心。
糖蜜:购于潍坊丰冠生物有限公司。
稻草:取自安徽省六安市安徽华好生态养殖公司。
糖蜜:购于潍坊丰冠生物有限公司。
纤维素酶:购于湖州巴克新材料有限公司。
下述各实施例中所述实验方法如无特殊说明,均为常规方法;所述试剂和材料,如无特殊说明,均可在市场上购买得到。
实施例1
一种高蛋白低纤维杂交构树青贮饲料的制备方法,包括以下步骤:
S1、将长势良好且无病虫害的构树,于株高1.2m时收割,将新鲜构树用铡刀铡成2~4cm长的小段,作为青贮原料。
S2、菌种活化
植物乳杆菌、乳酸片球菌和布氏乳杆菌均在30℃、pH6.8条件下,用MRS培养基活化,备用。
MRS培养基为:葡萄糖4g,胰蛋白胨2g,酵母提取物1g,牛肉膏2g,MnSO4·4H2O0.076g,MgSO4·7H2O 0.04g,吐温-80 0.2mL,K2HPO4 0.4g,柠檬酸胺0.4g(固体培养基加琼脂粉3.2g),无菌水200mL,pH 6.2~6.4。
S3、将植物乳杆菌、乳酸片球菌和布氏乳杆菌以质量比4∶1∶1混合得到发酵菌;
向S1的青贮原料中加入发酵菌、糖蜜和纤维素酶,按照青贮原料的重量计算,发酵菌的添加量为107CFU/g,糖蜜的添加量为30g/kg,纤维素酶的添加量为9×103U/kg;混匀后进行裹包、青贮发酵,青贮发酵的时间为60天;青贮发酵完成后,得到高蛋白低纤维杂交构树青贮饲料。
实施例2
一种高蛋白低纤维杂交构树青贮饲料的制备方法,包括以下步骤:
S1、将长势良好且无病虫害的构树,于株高1.2m时收割,将新鲜构树用铡刀铡成2~4cm长的小段,然后添加相当于青贮原料重量的10%的稻草,混匀后作为青贮原料。
S2、菌种活化
植物乳杆菌、乳酸片球菌和布氏乳杆菌均在32℃、pH7.0条件下,用MRS培养基分别进行培养活化,备用。
MRS培养基:葡萄糖4g,胰蛋白胨2g,酵母提取物1g,牛肉膏2g,MnSO4·4H2O0.076g,MgSO4·7H2O 0.04g,吐温-80 0.2mL,K2HPO4 0.4g,柠檬酸胺0.4g(固体培养基加琼脂粉3.2g),无菌水200mL,pH 6.2~6.4。
S3、将植物乳杆菌、乳酸片球菌和布氏乳杆菌以质量比2∶1∶1混合得到发酵菌;
向S1的青贮原料中加入发酵菌、糖蜜和纤维素酶,按照青贮原料的重量计算,发酵菌的添加量为107CFU/g,糖蜜的添加量为30g/kg,纤维素酶的添加量为6×103U/kg;混匀后进行裹包、青贮发酵,青贮发酵的时间为60天;青贮发酵完成后,得到高蛋白低纤维杂交构树青贮饲料。
实施例3
一种高蛋白低纤维杂交构树青贮饲料的制备方法,包括以下步骤:
S1、将长势良好且无病虫害的构树,于株高1.2m时收割,将新鲜构树用铡刀铡成2~4cm长的小段,然后阴干贮藏,并保持青贮原料的含水量为45~60%,作为青贮原料。
S2、菌种活化
植物乳杆菌、乳酸片球菌和布氏乳杆菌均在28℃、pH6.8条件下,用MRS培养基活化,备用。
MRS培养基为:葡萄糖4g,胰蛋白胨2g,酵母提取物1g,牛肉膏2g,MnSO4·4H2O0.076g,MgSO4·7H2O 0.04g,吐温-80 0.2mL,K2HPO4 0.4g,柠檬酸胺0.4g(固体培养基加琼脂粉3.2g),无菌水200mL,pH 6.2~6.4。
S3、将植物乳杆菌、乳酸片球菌和布氏乳杆菌以质量比4∶1∶1混合得到发酵菌;
向S1的青贮原料中加入发酵菌、糖蜜和纤维素酶,按照青贮原料的重量计算,发酵菌的添加量为107CFU/g,糖蜜的添加量为30g/kg,纤维素酶的添加量为9×103U/kg;混匀后进行裹包、青贮发酵,青贮发酵的时间为60天;青贮发酵完成后,得到高蛋白低纤维杂交构树青贮饲料。
实施例4
按照实施例1的方法对4个因素进行L16(45)正交优化试验,具体因素水平见表1。
表6构树新鲜青贮正交优化试验因素水平
注:因素A的菌种比例为植物乳杆菌、乳酸片球菌、布氏乳杆菌的质量比。
实施例5
按照实施例2的方法对5个因素进行L16(45)正交优化试验,具体因素水平见表2。
表2构树混合青贮正交优化试验因素水平
注:因素B的菌种比例为植物乳杆菌、乳酸片球菌、布氏乳杆菌的质量比。
实施例6
按照实施例3的方法对5个因素进行L16(45)正交优化试验,具体因素水平见表3。
表3构树半干青贮正交优化试验因素水平
注:因素B的菌种比例为植物乳杆菌、乳酸片球菌、布氏乳杆菌的质量比。
下面对实施例1~6制备得到的杂交构树青贮饲料,以营养成分、有氧稳定性、感官指标、化学指标来判定青贮质量。
1、指标测定
1.1、常规营养成分测定
采集收割后的构树茎叶样品,实验室测定其DM、CP、Ash、NDF、ADF、EE等指标,确定营养价值。取部分青贮后的构树样品,烘干后测定其DM、CP、NDF、ADF、EE等指标。DM、Ash、CP、EE含量采用张丽英等所述《饲料分析及饲料质量检测技术》中方法测定;ADF和NDF参照VanSoest等方法进行测定。
1.2、有氧稳定性测定
每个组合取200g样品放入自封袋,扎数个小孔,再套上一个大号自封袋,防止污染及水分蒸发,插入温度计测定温度变化。样品置于阴暗处,每4h记录1次温度变化,直至样品的温度超过环境温度2℃为止。
1.3、现场感官评定
青贮开袋后进行现场感官评定,参照《青贮饲料质量评定标准》,观察青贮饲料的气味、颜色、质地。
取部分青贮料在105℃的烘箱内烘18h,所失重量为青贮水分含量。
另取30g青贮料放入200mL三角瓶中,加入超纯水120mL,加塞,放入4℃冰柜中浸提24h。浸提后将浸提液通过定量滤纸过滤,采用上海雷磁pHs-3C型精密pH计测定浸提液pH。
1.4、化学评定
将感官评定中过滤后的浸提液分装在2个5mL的离心管中,放入-20℃冰箱中贮存,待测氨态氮(NH3-N)和有机酸(乳酸、乙酸和丁酸)浓度。浸提液样品的NH3-N浓度采用“苯酚-次氯酸钠法”测定;总氮(TN)采用“凯氏定氮法”测定;有机酸浓度采用“液相色谱法”测定,总有机酸含量为乙酸、丁酸和乳酸含量之和。参照《青贮饲料质量评定标准》,将氨氮/总氮(NH3-N/TN)得分和有机酸得分(乳酸、乙酸和丁酸得分之和除以2)相加作为化学评定的总得分。
1.4、统计分析
数据先用Excel进行初步整理,采用SPSS 13.0进行单因素方差分析,Duncan′s多重比较,P<0.05为差异显著,结果以平均值±标准差表示。采用极差分析法和综合平衡法对青贮发酵得分进行正交分析,ki为该因素i水平的平均值,ki越大表明该水平越优(NH3/TN、ADF和NDF指标,ki越小,水平越优),极差R值为该因素各水平均值中最大值与最小值之差,R值越大表明该因素对结果影响越大。
2、结果与分析
2.1、新鲜构树青贮结果
2.1.1、新鲜构树青贮感官评定结果
表4新鲜构树青贮感官评定结果
注:K1、K2、K3、K4分别代表结果在水平1、2、3、4下的平均值,R代表K1、K2、K3、K4在各因素下的极差。
由表4可知,处理1组的pH最高,显著高于其他处理组(P<0.05),处理5组的pH最低。处理5的总得分最高,处理1的总得分最低。正交分析中,影响新鲜构树青贮感官评定的因素由大到小为A>C>B>D,最优组合为A4C4B4D3。
2.1.2、新鲜构树青贮化学评定结果
表5新鲜构树青贮化学评定结果
由表5可知,处理2组的NH3-N/TN含量最高,显著高于除3组外其他处理组(P<0.05),处理15组的NH3-N/TN含量最低;处理9组的乳酸含量最高,处理1组的乳酸含量最低;处理2组的乙酸含量最高;处理9组乙酸的含量最低;处理1组的丁酸含量最高,显著高于其他处理组(P<0.05);处理13组的丁酸含量最低;处理16组的化学评定总得分最高,处理2组化学评定总得分最低。正交分析中,化学评定的影响因素由大到小为A>B>C>D,最优组合为A4B4C3D4。
2.1.3、新鲜构树青贮有氧稳定性评定结果
表5新鲜构树青贮有氧稳定性评定结果
由表5可知,处理5组的有氧稳定性最高,显著高于其他处理组(P<0.05);处理1组的有氧稳定性最低,显著低于其他处理组(P<0.05)。正交分析中,有氧稳定性评定的影响因素由大到小为A>B>C>D,最优组合为A2B3C3D4。
2.1.4、新鲜构树青贮营养成分评定结果
表6新鲜构树青贮营养成分评定结果
由表6可知,处理14组的CP含量最高,处理1组的CP含量最低;处理1组的ADF和NDF含量最高,处理10组ADF和NDF含量最低。正交分析中,影响CP含量的因素由大到小为:A>B>D>C,最优组合为A4B4D3C4;影响ADF含量的因素由大到小为A>B>C>D,最优组合为A3B4C4D4;影响NDF含量的因素由大到小为C>A>D>B,最优组合为C4A3B4D4。
2.1.5、新鲜构树青贮综合平衡评定结果
表7新鲜构树青贮综合平衡评定结果
因素 感官评定 化学评定 有氧稳定性 CP ADF NDF
A(菌种组合) A4 A4 A2 A4 A3 A3
R 8.33 9.59 111.17 1.73 1.33 2.28
B(糖蜜添加量) B4 B4 B3 B4 B4 B4
R 4.41 2.83 26.17 0.73 1.05 1.84
C(纤维素酶添加量) C4 C3 C3 C4 C4 C4
R 6.00 2.55 25.01 0.34 0.59 2.57
D(青贮时间) D3 D4 D4 D3 D4 D4
R 2.91 1.78 11.34 0.71 0.57 2.00
由表7可知,新鲜构树青贮中影响青贮品质的因素由大到小为A>B>C>D,菌种组合、糖蜜添加量、纤维素酶添加量、青贮时间分别以A4、B4、C4、D4水平最优,即菌种组合为4∶1∶1,糖蜜添加量为3%,纤维素酶添加量为9×103U/kg,青贮时间60天。
2.2、混合构树青贮结果
2.2.1、混合构树青贮感官评定结果
由表8可知,处理1组的pH最高,显著高于其他处理组(P<0.05),处理10组的pH最低。处理10的总得分最高,处理1的总得分最低。正交分析中,对混合构树青贮感官评定的影响因素由大到小为E>A>C>B>D,最优组合为E4A2C4B2D3。
表8混合构树青贮感官评定结果
注:K1、K2、K3、K4分别代表结果在水平1、2、3、4下的平均值,R代表K1、K2、K3、K4在各因素下的极差。
2.2.2、混合构树青贮化学评定结果
表9混合构树青贮化学评定结果
由表9可知,处理13组的NH3-N/TN含量最高,显著高于其他处理组(P<0.05),处理8组的NH3-N/TN含量最低;处理14组的乳酸含量最高,处理1组的乳酸含量最低,显著低于其他处理组(P<0.05);处理1的乙酸含量最高,显著高于其他处理组(P<0.05),处理14组的乙酸含量最低;处理1组的丁酸含量最高,极显著高于其他处理组(P<0.01),处理11组的丁酸含量最低;处理10的总得分最高,处理1的总得分最低。正交分析中,对混合构树青贮化学评定的影响因素由大到小为B>D>A>E>C,最优组合为B3D3A2E4C4。
2.2.3、混合构树青贮有氧稳定性评定结果
表10混合构树青贮有氧稳定性评定结果
由表10可知,处理10组的有氧稳定性最高,显著高于其他处理组(P<0.05),处理1的有氧稳定性最低,显著低于其他处理组(P<0.05)。正交分析中,对混合构树青贮有氧稳定性评定的影响因素由大到小为B>C>D>A>E,最优组合为B2C3D3A2E3。
2.2.4、混合构树青贮营养成分评定结果
表11混合构树青贮营养成分评定结果
由表11可知,处理3、4组的CP含量最高,显著高于其他处理组(P<0.05);处理16组的CP含量最低;处理13组的ADF含量最高,处理4组的ADF含量最低;处理16组的NDF含量最高,处理3组的NDF含量最低,显著低于其他处理组(P<0.05)。正交分析中,对混合构树CP含量的影响因素由大到小为A>C>B>E=D,最优组合为A1C4B3E4D4;对混合构树ADF含量的影响因素由大到小为A>B>C>E>D,最优组合为A1B3C3E4D3;对混合构树NDF含量的影响因素由大到小为A>B>C>D>E,最优组合为A1B4C4D4E4。
2.2.5、混合构树青贮综合平衡评定结果
表12混合构树青贮综合平衡评定结果
因素 感官评定 化学评定 有氧稳定性 CP ADF NDF
A(稻草添加量) A2 A2 A2 A1 A1 A1
R 7.08 6.29 26.84 4.47 7.61 10.82
B(菌种组合) B2 B3 B2 B3 B3 B4
R 4.59 8.04 48.67 0.58 1.17 3.04
C(糖蜜添加量) C4 C4 C3 C4 C3 C4
R 6.17 4.58 44.33 0.7 0.78 2.77
D(纤维素酶添加量) D3 D3 D3 D4 D3 D4
R 4.17 6.96 27.16 0.56 0.41 1.26
E(青贮时间) E4 E4 E3 E4 E4 E4
R 8.84 5.29 16.17 0.56 0.69 1.06
由表12可知,混合构树青贮中影响青贮品质的因素由大到小为B>A>C>D>E,稻草含量、菌种组合、糖蜜添加量、纤维素酶添加量分别以A1或A2、B3、C4、D3、E4水平最优,即稻草含量0%或10%,菌种组合为2∶1∶1,糖蜜添加量为3%,纤维素酶添加量为6×103U/kg,青贮时间60天。根据本试验需求,为了保证混合构树青贮成功,以感官评定、化学评定与有氧稳定性指标为优先指标,因此,稻草添加量最终以10%为最优。
2.3、半干构树青贮结果
2.3.1、半干构树青贮感官评定结果
表13半干构树青贮感官评定结果
注:K1、K2、K3、K4分别代表结果在水平1、2、3、4下的平均值,R代表K1、K2、K3、K4在各因素下的极差。
由表13可知,处理1组的pH最高,显著高于其他处理组(P<0.05),处理8组的pH最低。处理4组的总得分最高,处理1组的总得分最低。正交分析中,对半干构树青贮感官评定的影响因素由大到小为C>B>E>D>A,最优组合为C4B4E4D4A2。
2.3.2、半干构树青贮化学评定结果
表14半干构树青贮化学评定结果
由表14可知,处理13组的NH3-N/TN含量最高,处理4组的NH3-N/TN含量最低;处理4组的乳酸含量最高,处理1组的乳酸含量最低;处理16组的乙酸含量最高,处理4组的乙酸含量最低;处理1的丁酸含量最高,显著高于其他处理组(P<0.05),处理13的丁酸含量最低;处理4的总得分最高,处理1的总得分最低。正交分析中,对半干构树青贮化学评定的影响因素由大到小为C>A>B>E>D,最优组合为C4A2B3E4D4。
2.3.3、半干构树青贮有氧稳定性评定结果
表15半干构树青贮有氧稳定性评定结果
由表15可知,处理10组的有氧稳定性最高,显著高于其他处理组(P<0.05);处理1组的有氧稳定性最低,显著低于其他处理组(P<0.05)。正交分析中,对半干构树青贮有氧稳定性评定的影响因素由大到小为A>C>B>D>E,最优组合为A2C4B2D3E4。
2.3.4、半干构树青贮营养成分评定结果
表16半干构树青贮营养成分评定结果
由表16可知,处理4组的CP含量最高,处理1组的CP含量最低,显著低于其他处理组(P<0.05)。处理13组的ADF含量最高,处理4组的ADF含量最低;处理1组的NDF含量最高,处理4组的NDF含量最低,显著低于其他处理组(P<0.05)。正交分析中,对半干构树CP含量的影响因素由大到小为B=C>A>E>D,最优组合为B4C4A2E4D4;对混合构树ADF含量的影响因素由大到小为A>C>B>D>E,最优组合为A1C4B4D4E4;对混合构树NDF含量的影响因素由大到小为B>C>A>E>D,最优组合为B4C4A1E4D4。
2.3.5、半干构树青贮综合平衡评定结果
表17半干构树青贮综合平衡评定结果
因素 感官评定 化学评定 有氧稳定性 CP ADF NDF
A(水分含量) A2 A2 A2 A2 A1 A1
R 1.83 8 54.00 0.54 2.46 1.58
B(菌种组合) B4 B3 B2 B4 B4 B4
R 6.00 7.29 28.34 0.91 1.00 2.66
C(糖蜜添加量) C4 C4 C4 C4 C4 C4
R 7.01 9.17 42.17 0.91 1.02 2.45
D(纤维素酶添加量) D4 D4 D3 D4 D4 D4
R 3.33 1.46 24.84 0.44 0.83 0.75
E(青贮时间) E4 E4 E4 E4 E4 E4
R 4.08 4.63 4.17 0.46 0.49 0.96
由表17可知,半干构树青贮中影响青贮品质的因素由大到小为A>C>B>D>E,水分含量、菌种组合、糖蜜添加量、纤维素酶添加量、青贮时间分别以A2、B4、C4、D4、E4水平最优,即水分含量55%,菌种组合为4∶1∶1,糖蜜添加量为3%,纤维素酶添加量为9×103U/kg,青贮时间60天。
应用实施例1
下面对本发明实施例制备的杂交构树青贮饲料进行奶公牛饲喂,用以说明其对奶公牛生长性能、瘤胃发酵参数、饲料表观消化率的影响。实施例1~6的方法制备的杂交构树青贮饲料,性能基本相近,因此,仅以实施例2的方法制备的杂交构树青贮饲料进行试验。
按照实施例2的方法制备杂交构树青贮饲料,每个裹包重50kg,杂交构树青贮饲料的营养成分如表18所示。
表18构树青贮营养成分(DM/%)
将按照实施例2的方法制备的杂交构树青贮饲料进行奶公牛饲喂,具体方法如下:
1、试验动物与饲养管理
试验于2021年1-2月在六安某规模化奶牛场进行,试验共选取30头平均月龄在12月龄左右,体重为330kg左右的奶公牛。试验牛散栏饲养,自由采食,自由饮水。TMR日粮每日饲喂两次(8:00,15:00),保证剩料量在3%左右。
2、试验设计与日粮
根据配对实验随机分成3组,每组10头,分别饲喂三种不同日粮。对照组饲喂基础日粮,根据NRC(2016)肉牛营养需要标准进行配制,满足育肥阶段营养需要;试验1组用构树青贮替代日粮中50%苜蓿干草;试验2组用构树青贮替代日粮中100%苜蓿干草;等氮替换,试验日粮组成和营养水平见表19。本试验预饲期7d,正式期30d。
表19试验日粮组成及营养水平
注:每千克预混料中提供:VA 100000IU、VD320000IU、VE 500IU、Cu 400mg、Mn800mg、Zn 1200mg、I228mg、Se 7.5mg、Co 8mg、Ca 10%、总磷4%。
3、构树青贮饲料对奶公牛生长性能的影响
表20构树青贮饲料对奶公牛生长性能的影响
从表20看出,随着构树青贮代替苜蓿干草的增加,与对照组相比,各试验组奶公牛的日增重、干物质采食量和料重比均差异不显著(P>0.05)。
4、构树青贮饲料对奶公牛瘤胃发酵参数的影响
表21构树青贮饲料对奶公牛瘤胃发酵参数的影响
从表21看出,与对照组相比,各试验组瘤胃液的pH、TVFA、乙酸的百分比、丙酸的百分比、丁酸的百分比、乙丙比、NH3-N和微生物蛋白的浓度都没有显著性差异(P>0.05)。
5、构树青贮饲料对奶公牛饲料表观消化率的影响
表22构树青贮饲料对奶公牛饲料表观消化率的影响
/>
从表22看出,各试验组的DM、CP、NDF、ADF和EE的表观消化率差异均不显著(P>0.05)。
6、构树青贮饲料饲喂奶公牛经济效益分析
表23构树青贮饲料饲喂奶公牛经济效益分析
注:未考虑人工成本与设备折旧成本;同列数据肩标无字母或含相同字母表示差异不显著(P>0.05),不同字母表示差异显著(P<0.05)。
从表23看出,试验2组鲜重采食量显著高于对照组和试验1组(P<0.05);对照组日饲料成本显著高于试验1组和试验2组(P<0.05);试验2组日利润显著高于对照组(P<0.05)。
结果表明:
(1)综合构树生物产量和营养价值,确定构树最适宜的收割高度为1.2m。
(2)新鲜构树青贮最佳工艺参数为菌种组合为植物乳杆菌:乳酸片球菌:布氏乳杆菌为4:1:1,糖蜜添加量为3%,纤维素酶添加量为9×103U/kg,青贮时间60天。
(3)构树混合青贮最佳工艺参数为稻草含量为10%,菌种组合为植物乳杆菌:乳酸片球菌:布氏乳杆菌为2:1:1,糖蜜添加量为3%,纤维素酶添加量为6×103U/kg,青贮时间60天。
(4)构树半干青贮最佳工艺参数为水分含量为55%,菌种组合为植物乳杆菌:乳酸片球菌:布氏乳杆菌为4:1:1,糖蜜添加量为3%,纤维素酶添加量为9×103U/kg,青贮时间60天。
(5)利用构树青贮饲料代替日粮中50%和100%的苜蓿干草,对奶公牛日增重、干物质采食量与料重比等生产性能没有显著影响。
(6)利用构树青贮饲料代替日粮中50%和100%的苜蓿干草,对奶公牛瘤胃发酵和营养物质消化率没有显著影响。
(7)本试验条件下,奶公牛育肥日粮中构树青贮可完全替代苜蓿干草,考虑经济效益,建议构树青贮饲料使用量为12.5%。
以上仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (2)

1.一种高蛋白低纤维杂交构树青贮饲料的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、将长势良好且无病虫害的构树,于株高1.2m时收割,将新鲜构树用铡刀铡成2~4cm长的小段,然后添加相当于青贮原料重量的10%的稻草,混匀后作为青贮原料;
S2、菌种活化
植物乳杆菌、乳酸片球菌和布氏乳杆菌均在32℃、pH7.0条件下,用MRS培养基分别进行培养活化,备用;
MRS培养基: 葡萄糖4 g,胰蛋白胨2 g,酵母提取物1 g,牛肉膏2 g,MnSO4·4H2O 0.076g,MgSO4·7H2O 0.04 g,吐温-80 0.2 mL ,K2HPO4 0.4 g,柠檬酸胺0.4 g,琼脂粉3.2 g,无菌水 200 mL,pH 6.2~6.4;
S3、将植物乳杆菌、乳酸片球菌和布氏乳杆菌以质量比2:1:1混合得到发酵菌;
向S1的青贮原料中加入发酵菌、糖蜜和纤维素酶,按照青贮原料的重量计算,发酵菌的添加量为107CFU/g,糖蜜的添加量为30g/kg,纤维素酶的添加量为6×103U/kg;混匀后进行裹包、青贮发酵,青贮发酵的时间为60天;青贮发酵完成后,得到高蛋白低纤维杂交构树青贮饲料。
2.一种采用权利要求1所述的制备方法制备得到的高蛋白低纤维杂交构树青贮饲料。
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