CN104140433A - 一种青蒿素的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种青蒿素的制备方法,将超临界CO2高压液作为萃取液,通过等温法和等压法的混合流程,采用加压逆流和减压蒸发的分离手段,从黄花蒿中分离出来含过氧桥的新型倍半萜内酯,所述青蒿素的制备方法,采用超临界萃取技术,SC-CO2萃取为环境无害工艺,而且超临界流体不仅具有与液体溶剂相当的萃取能力,具有优良的传质效果,同时不仅避免了大量有机溶剂的使用,也防止了提取过程对人体健康的危害和对环境的污染,且具有提取时间短、萃取率高、节约能源及生产成本等优势,适合规模化工业生产的需要。
Description
技术领域
本发明涉及青蒿素生产领域,尤其是一种青蒿素的制备方法。
背景技术
疟疾是威胁人类生命的严重疾病之一,特别是在热带和亚热带地区。“疟疾平均每30秒杀死一个5岁以下的儿童,疟疾也是导致非洲经济长期陷于困境的主要原因之一。”奎宁、氯喹、乙氨嘧啶、伯喹和磺胺等抗疟药在长期使用后,相继产生了耐药性。
青蒿为菊科植物黄花蒿的干燥地上部分,青蒿素是从青蒿中提取分离得到的一种无色结晶,青蒿素是我国科技工作者从黄花蒿中分离并鉴定的一种全新抗疟有效成分新型化合物,是继氯喹、乙氨嘧啶、伯喹后最热的抗疟特效药,已在临床应用30多年,一直未发现疟原虫对其产生耐药性。“以青蒿素为主的联合疗法”使用3天就可见效,较传统氯喹疗法减少了4天的时间。目前,WHO已将青蒿素为基础的联合疗法列为治疗疟疾的首选方法。
近年的统计资料表明,全世界有近20亿人口受到疟原虫的感染,每年近300万人死于疟疾,尤其在非洲,疟疾发病率极高,并且表现出急速蔓延的趋势,因而对青蒿素的需求量逐年增加。另外,青蒿素及其衍生物还具有免疫抑制和细胞免疫促进作用,在治疗艾滋病及其相关疾病方面具有较好前景。
青蒿中化学成分分为4类:挥发油、倍半萜、黄酮和香豆素。青蒿中的药用成分可分为挥发性和非挥发性2个部分。非挥发性成分主要是青蒿素,它是一种含有过氧基团的倍半萜内酯,呈无色针状晶体,熔点156~157℃,分子式为C15H22O5。与已知抗疟药化学结构完全不同,其多种衍生物如双氢青蒿素、青蒿琥酯、蒿甲醚、蒿乙醚,均是治疗疟疾的有效单体。挥发性成分主要为挥发油,包括篙酮、异篙酮、按油精、左旋樟脑、丁香烯、旅烯、龙脑、石竹烯氧化物、倍半褚醇等成分。其中樟脑、龙脑、丁香烯、篙酮、异篙酮等含量较高.挥发油具有解热镇痛、抗菌消炎、止咳平喘等功效.
经国内外学者研究表明,二氢青蒿素可以增加活性氧并抑制缺氧诱导的a1因子的激活,从而对大鼠C6细胞发挥选择性细胞毒作用。钙离子在二氢青蒿素诱导肿瘤细胞凋亡中的作用,表明二氢青蒿素可诱导肺癌细胞系PC-14细胞和SPC-A-1细胞凋亡。青蒿琥酯对人大肠癌细胞的抑制作用,发现其对大肠癌细胞的抑制增殖和促进凋亡作用呈剂量依赖性。蒿甲醚、蒿乙醚和青蒿琥酯作用于肿瘤细胞后mRNA的表明,它们对肿瘤细胞的抑制作用与mRNA的表达情况之间的相关性研究。结果表明,青蒿素衍生物的作用方式与已知16种抗肿瘤药物不一致,随着对青蒿素类药物药理作用研究的不断深入,已证实其具有抗疟、抗孕、抗纤维化、抗血吸虫、抗弓形虫、抗心律失常和肿瘤细胞毒性等作用。
青蒿素虽然已经可以人工全合成,但其成本很高,无法工业化生产。目前,青蒿素的主要来源仍然是从植物黄花蒿中提取分离。黄花蒿分布较广,但由于产地的不同,所含青蒿素的差异极大(0.1%-1.3%)其中仅有部分产地(重庆、四川、广西、云南等地)的黄花蒿具有工业价值。青蒿素原料药的90%来自中国。
SFE技术(超临界流体萃取技术)在食品、医药、香料和天然色素等领域的天然物提取分离上的应用研究,一直是SFE技术研究最活跃的领域,受历史和传统习惯的影响,国外这方面的研究主要集中在天然香味物、调味品和天然色素的提取上,而国内则多集中在传统中药的有效成分的提取上,以适应中药现代化的发展要求。但萃取原理,都是从天然物中提取有效成分,其中,植物精油的提取占据了主导地位。而SFE技术的影响因素包括:萃取压力、萃取温度、萃取颗粒大小以及CO2的流量,其中:
萃取压力的影响,萃取压力是SFE最重要的参数之一,萃取温度一定时,压力增大,流体密度增大,溶剂强度增强,溶剂的溶解度就增大。对于不同的物质,其萃取压力有很大的不同。
萃取温度的影响,温度对超临界流体溶解能力影响比较复杂,在一定压力下,升高温度被萃取物挥发性增加,这样就增加了被萃取物在超临界气相中的浓度,从而使萃取量增大;但另一方面,温度升高,超临界流体密度降低,从而使化学组分溶解度减小,导致萃取数减少。因此,在选择萃取温度时要综合这两个因素考虑。
萃取颗粒大小,粒度大小可影响提取回收率,减小样品粒度,可增加固体与溶剂的接触面积,从而使萃取速度提高。不过,粒度如过小、过细,不仅会严重堵塞筛孔,造成萃取器出口过滤网的堵塞。
CO2的流量,CO2的流量的变化对超临界萃取有两个方面的影响。CO2的流量太大,会造成萃取器内CO2流速增加,CO2停留时间缩短,与被萃取物接触时间减少,不利于萃取率的提高。但另一方面,CO2的流量增加,可增大萃取过程的传质推动力,相应地增大传质系数,使传质速率加快,从而提高SFE的萃取能力。因此,合理选择CO2的流量在SFE中也相当重要。
因此,通过对各方面影响因素的综合分析,找到最合适的反应条件,利用SFE技术提取青蒿素,具有非常重要的生产实践意义。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于提供一种青蒿素的制备方法。
为解决上述技术问题,本发明的技术方案是:
一种青蒿素的制备方法,将超临界CO2高压液作为萃取液,通过等温法和等压法的混合流程,采用加压逆流和减压蒸发的分离手段,从黄花蒿(Artemisia annua L.)中分离出来含过氧桥的新型倍半萜内酯,具体步骤如下:
(1)将黄花蒿全草自然晒干,粉碎,筛分,40~80目;
(2)黄花蒿草经粉碎筛分后装入容积为1L的超临界萃取装置萃取器的萃取釜,从CO2贮罐出来的CO2冷却成液态,再由高压泵压缩后经预热器进入萃取器,与原料黄花蒿进行接触和传质,溶有溶质的超临界CO2经两级加热、两级减压后进入分离釜Ⅰ和分离釜Ⅱ,从分离釜Ⅱ顶部出来的CO2经冷却系统循环使用,萃取釜和分离釜温度均由恒温水控制恒定温度,其中萃取压力15-25MPa;两级分离釜容积均为0.6L,萃取温度30-70℃,CO2质量流量为每小时1-2kg。
优选的,上述青蒿素的制备方法,所述超临界萃取装置为HA121O50O01型超临界萃取装置,其中,萃取釜主要由快开密封装置、筒体、半球体封头和裙式支座装置组成。
优选的,上述青蒿素的制备方法,所述黄花蒿筛分为60~80目(即0.25~0.18mm)。
优选的,上述青蒿素的制备方法,所述二级分离提取青蒿素的最佳萃取压力为萃取压力18MPa,分离釜Ⅰ压力14Mpa,分离釜Ⅱ压力为6MPa。
优选的,上述青蒿素的制备方法,所述二级分离提取青蒿素的最佳萃取温度为40度,分离釜Ⅰ温度为60度,分离釜Ⅱ温度为50度。
优选的,上述青蒿素的制备方法,所述二级分离提取青蒿素的最佳CO2质量流量为每小时1.5kg。
本发明的有益效果是:
上述青蒿素的制备方法,可以得到纯度15%以上的萃取物,萃取率达到95%以上,比旧工艺提高了1.9倍,总制造成本降低约447元/kg,全流程提取时间由120h缩短约100h,且节约能源、劳动力和大量的有机溶剂,特别是汽油。
可见,采用超临界萃取技术,SC-CO2萃取为环境无害工艺,而且超临界流体不仅具有与液体溶剂相当的萃取能力,具有优良的传质效果,同时不仅避免了大量有机溶剂的使用,也防止了提取过程对人体健康的危害和对环境的污染,且具有提取时间短、萃取率高、节约能源及生产成本等优势,适合规模化工业生产的需要。
具体实施方式
为了使本领域的技术人员更好的理解本发明的技术方案,下面结合具体实施方式对本发明所述技术方案作进一步的详细说明。
实施例1
一种青蒿素的制备方法,将超临界CO2高压液作为萃取液,通过等温法和等压法的混合流程,采用加压逆流和减压蒸发的分离手段,从黄花蒿(Artemisia annua L.)中分离出来含过氧桥的新型倍半萜内酯,具体步骤如下:
(1)将黄花蒿全草自然晒干,粉碎,筛分,60目;
(2)黄花蒿草经粉碎筛分后装入容积为1L的HA121O50O01型超临界萃取装置萃取器的萃取釜,从CO2贮罐出来的CO2冷却成液态,再由高压泵压缩后经预热器进入萃取器,与原料黄花蒿进行接触和传质,溶有溶质的超临界CO2经两级加热、两级减压后进入分离釜Ⅰ和分离釜Ⅱ,从分离釜Ⅱ顶部出来的CO2经冷却系统循环使用,萃取釜和分离釜温度均由恒温水控制恒定温度,其中萃取压力20MPa,分离釜Ⅰ压力14Mpa,分离釜Ⅱ压力为6MPa;两级分离釜容积均为0.6L,萃取温度40℃,分离釜Ⅰ温度为60度,分离釜Ⅱ温度为50度,CO2质量流量为每小时1.5kg,得到青蒿素,纯度17%,萃取率到达97.8%。
所制备的青蒿素的结构如下所示:
该化合物经鉴定,分子式:C15H22O5,分子量:282.33,组分含量:C63.81%,H7.85%,O28.33%。
采用HPLCO UV法测定,分析前待测定实施例1所制备的青蒿素和酸、碱进行衍生化反应,生成最大吸收波长为260nm的Q260,再进行HPLC分析。色谱分析条件为:Water s高效液相色谱仪系统,包括Waters510高压泵、Waters717自动进样器、C18反相色谱柱(4.6mm×25cm,5μm固定相)、486紫外监测器;流动相:Na2HPO4(0.9mmol/L)ONaH2PO4(3.6mmol/L)缓冲溶液(V(甲醇)∶V(水)∶V(乙腈)=45∶45∶10,p H=7.76),体积流量:0.5mL/min.进样量:10μL,检测波长:260nm,柱温:30℃。实验测得标准曲线为:A=3.43×104c,其中:A为青蒿素的峰面积(AU·s),c为青蒿素质量浓度(μg/mL),线性相关度R=0.9996,相对标准偏差1.1%,加样回收率98.9%。
实施例2
一种青蒿素的制备方法,将超临界CO2高压液作为萃取液,通过等温法和等压法的混合流程,采用加压逆流和减压蒸发的分离手段,从黄花蒿(Artemisia annua L.)中分离出来含过氧桥的新型倍半萜内酯,具体步骤如下:
(1)将黄花蒿全草自然晒干,粉碎,筛分,40目;
(2)黄花蒿草经粉碎筛分后装入容积为1L的HA121O50O01型超临界萃取装置萃取器的萃取釜,从CO2贮罐出来的CO2冷却成液态,再由高压泵压缩后经预热器进入萃取器,与原料黄花蒿进行接触和传质,溶有溶质的超临界CO2经两级加热、两级减压后进入分离釜Ⅰ和分离釜Ⅱ,从分离釜Ⅱ顶部出来的CO2经冷却系统循环使用,萃取釜和分离釜温度均由恒温水控制恒定温度,其中萃取压力25MPa,分离釜Ⅰ压力18Mpa,分离釜Ⅱ压力为7MPa;两级分离釜容积均为0.6L,萃取温度70℃,分离釜Ⅰ温度为75度,分离釜Ⅱ温度为70度,CO2质量流量为每小时1kg,得到青蒿素,纯度15.5%,萃取率到达95.6%。
实施例3
一种青蒿素的制备方法,将超临界CO2高压液作为萃取液,通过等温法和等压法的混合流程,采用加压逆流和减压蒸发的分离手段,从黄花蒿(Artemisia annua L.)中分离出来含过氧桥的新型倍半萜内酯,具体步骤如下:
(1)将黄花蒿全草自然晒干,粉碎,筛分,80目;
(2)黄花蒿草经粉碎筛分后装入容积为1L的HA121O50O01型超临界萃取装置萃取器的萃取釜,从CO2贮罐出来的CO2冷却成液态,再由高压泵压缩后经预热器进入萃取器,与原料黄花蒿进行接触和传质,溶有溶质的超临界CO2经两级加热、两级减压后进入分离釜Ⅰ和分离釜Ⅱ,从分离釜Ⅱ顶部出来的CO2经冷却系统循环使用,萃取釜和分离釜温度均由恒温水控制恒定温度,其中萃取压力15MPa,分离釜Ⅰ压力11Mpa,分离釜Ⅱ压力为4MPa;两级分离釜容积均为0.6L,萃取温度30℃,分离釜Ⅰ温度为45度,分离釜Ⅱ温度为35度,CO2质量流量为每小时2kg,得到青蒿素,纯度15.1%,萃取率到达95.2%。
实施例4
一种青蒿素的制备方法,将超临界CO2高压液作为萃取液,通过等温法和等压法的混合流程,采用加压逆流和减压蒸发的分离手段,从黄花蒿(Artemisia annua L.)中分离出来含过氧桥的新型倍半萜内酯,具体步骤如下:
(1)将黄花蒿全草自然晒干,粉碎,筛分,60目;
(2)黄花蒿草经粉碎筛分后装入容积为1L的HA121O50O01型超临界萃取装置萃取器的萃取釜,从CO2贮罐出来的CO2冷却成液态,再由高压泵压缩后经预热器进入萃取器,与原料黄花蒿进行接触和传质,溶有溶质的超临界CO2经两级加热、两级减压后进入分离釜Ⅰ和分离釜Ⅱ,从分离釜Ⅱ顶部出来的CO2经冷却系统循环使用,萃取釜和分离釜温度均由恒温水控制恒定温度,其中萃取压力18MPa,分离釜Ⅰ压力13Mpa,分离釜Ⅱ压力为5MPa;两级分离釜容积均为0.6L,萃取温度45℃,分离釜Ⅰ温度为60度,分离釜Ⅱ温度为50度,CO2质量流量为每小时1.2kg,得到青蒿素,纯度16.5%,萃取率到达97.3%。
实施例5
一种青蒿素的制备方法,将超临界CO2高压液作为萃取液,通过等温法和等压法的混合流程,采用加压逆流和减压蒸发的分离手段,从黄花蒿(Artemisia annua L.)中分离出来含过氧桥的新型倍半萜内酯,具体步骤如下:
(1)将黄花蒿全草自然晒干,粉碎,筛分,80目;
(2)黄花蒿草经粉碎筛分后装入容积为1L的HA121O50O01型超临界萃取装置萃取器的萃取釜,从CO2贮罐出来的CO2冷却成液态,再由高压泵压缩后经预热器进入萃取器,与原料黄花蒿进行接触和传质,溶有溶质的超临界CO2经两级加热、两级减压后进入分离釜Ⅰ和分离釜Ⅱ,从分离釜Ⅱ顶部出来的CO2经冷却系统循环使用,萃取釜和分离釜温度均由恒温水控制恒定温度,其中萃取压力20MPa,分离釜Ⅰ压力15Mpa,分离釜Ⅱ压力为5MPa;两级分离釜容积均为0.6L,萃取温度50℃,分离釜Ⅰ温度为70度,分离釜Ⅱ温度为60度,CO2质量流量为每小时1kg,得到青蒿素,纯度16.8%,萃取率到达97.5%。
上述参照具体实施方式对该一种青蒿素的制备方法进行的详细描述,是说明性的而不是限定性的,可按照所限定范围列举出若干个实施例,因此在不脱离本发明总体构思下的变化和修改,应属本发明的保护范围之内。
Claims (6)
1.一种青蒿素的制备方法,其特征在于:将超临界CO2高压液作为萃取液,通过等温法和等压法的混合流程,采用加压逆流和减压蒸发的分离手段,从黄花蒿中分离出来含过氧桥的新型倍半萜内酯,具体步骤如下:
(1)将黄花蒿全草自然晒干,粉碎,筛分,40~80目;
(2)黄花蒿草经粉碎筛分后装入容积为1L的超临界萃取装置萃取器的萃取釜,从CO2贮罐出来的CO2冷却成液态,再由高压泵压缩后经预热器进入萃取器,与原料黄花蒿进行接触和传质,溶有溶质的超临界CO2经两级加热、两级减压后进入分离釜Ⅰ和分离釜Ⅱ,从分离釜Ⅱ顶部出来的CO2经冷却系统循环使用,萃取釜和分离釜温度均由恒温水控制恒定温度,其中萃取压力15-25MPa;两级分离釜容积均为0.6L,萃取温度30-70℃,CO2质量流量为每小时1-2kg。
2.根据权利要求1所述的青蒿素的制备方法,其特征在于:所述超临界萃取装置为HA121O50O01型超临界萃取装置。
3.根据权利要求1所述的青蒿素的制备方法,其特征在于:所述黄花蒿筛分为60~80目。
4.根据权利要求1所述的青蒿素的制备方法,其特征在于:所述二级分离提取青蒿素的萃取压力为萃取压力18MPa,分离釜Ⅰ压力14Mpa,分离釜Ⅱ压力为6MPa。
5.根据权利要求1所述的青蒿素的制备方法,其特征在于:所述二级分离提取青蒿素的萃取温度为40度,分离釜Ⅰ温度为60度,分离釜Ⅱ温度为50度。
6.根据权利要求1所述的青蒿素的制备方法,其特征在于:所述二级分离提取青蒿素的CO2质量流量为每小时1.5kg。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
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C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20141112 |
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WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |