CN104116778B - 一种中药组合物、其提取物及应用 - Google Patents

一种中药组合物、其提取物及应用 Download PDF

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Abstract

本发明一种中药组合物、其提取物及应用,属于中医药技术领域。所述中药组合物由青龙衣和淫羊藿按重量比1:1组成。中药组合物的提取物是通过将重量比1:1的青龙衣与淫羊藿加水浸泡后回流提取2次,合并滤液后减压浓缩干燥即得浸膏粉末。本发明还公开了所述中药组合物及其提取物在制备治疗肝癌药物中的应用。本发明具有配制简单,疗效好,无副作用,安全性高,有利于患者及时减轻病状,并且优于青龙衣与刺五加药材组合对肝癌的治疗,具有良好的开发前景及社会和经济效益的优点。

Description

一种中药组合物、其提取物及应用
技术领域
本发明属于中医药技术领域,具体涉及一种中药组合物、其提取物及应用。
背景技术
随着环境污染的日益严重,人们受病毒、化学因素(亚硝酸、黄曲霉素、农药)、物理因素(电离辐射、紫外线)等的影响,癌症的发病率和死亡率都呈逐渐增加趋势。其中,原发性肝癌(primary hepatic carcinoma,PHC)简称肝癌(hepatoma),是指原发于肝细胞或肝内胆管上皮细胞的恶性肿瘤,是最常见的恶性肿瘤之一,被称为“肿瘤之王”。我国为原发性肝癌高发区,起病隐匿,潜伏期长,恶性度高,生存期短,生存质量差,且治疗棘手。若不能早期发现并彻底手术切除,肝癌患者的总体5年生存率不超过5%。目前,肝癌的治疗方法有手术、放疗、化疗和介入治疗。这些治疗手段不仅价格昂贵,而且治疗过程常给患者带来巨大的痛苦。因此,寻找高效、安全、经济的抗肿瘤药物也成为医药学者的重要课题。
近年来,中医药在肝癌的治疗中发挥着不可替代的作用。大量药理实验证明,中药复方如活血软坚解毒方、“晚癌康2号”、仙芦抗癌胶囊、蟾酥胶等,及单味中药如龙葵、三棱、姜黄、莪术等,具有直接抗肝癌作用。同时,已有临床疗效观察研究表明,中医药治疗肝癌的优势一方面在于能有效稳定病情,减轻毒副作用,改善临床症状,延长患者带瘤生存时间,使部分患者肿瘤缩小;另一方面治疗费用相对低廉。因此,中医药治疗成为肝癌治疗中不可或缺的重要组成部分。
发明内容
青龙衣(Pericarpium Juglandis)为胡桃科胡桃属植物核桃楸(Juglansmandshurica Maxim.)和核桃(Juglans regia L.)未成熟的外果皮。该药始载于《开宝本草》,称其为胡桃青龙,《救急方》中则称之为青胡桃皮,自《山东中草药手册》称之为“青龙衣”后,现多延用此名称。主产于河北、山东、东北等地,为民间常用中药。古代诸家多以其清热解毒、祛风疗癣、止痛止痢等功效入药。现代研究表明,青龙衣在临床应用广泛,可用于治疗足部臭汗证、银屑病以及多种癌症等。
淫羊藿又名仙灵脾、羊藿叶等,为小檗科植物淫羊藿Epimedium brevicornuMaxim.、箭叶淫羊藿Epimedium sagittatum(Sieb.et Zucc.)Maxim.、柔毛淫羊藿Epimedium pubescens.Maxim.或朝鲜淫羊藿Epimedium koreanum Nakai的干燥叶。李时珍在《本草纲目》中称其“益精气、坚筋骨、补腰膝、强心力”之功效。现代药理实验研究表明,淫羊藿能增加心脑血管血流量,促进造血功能、免疫功能及骨代谢,具有抗衰老、抗肿瘤等功效。
本发明的目的在于公开了一种中药组合物。
本发明的第二个目的在于公开了上述中药组合物的提取物。
本发明的第三个目的在于公开了上述中药组合物和提取物的应用。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的:
一种中药组合物,其中,所述中药组合物由青龙衣和淫羊藿组成,其中青龙衣与淫羊藿的重量比为1:1。
上述技术方案所述的中药组合物,其中,青龙衣为30g,淫羊藿为30g。
上述技术方案所述的中药组合物,其中,所述中药组合物用于制备治疗肝癌的药物。
一种中药组合物的提取物,其中,所述提取物通过下述步骤制备所得:
(1)、按照重量比1:1称取青龙衣与淫羊藿药材;
(2)、加水浸泡30min后回流提取2次,加水量分别为药材总重量的8倍、6倍,每次提取1小时,趁热倾出上清液,滤过,合并滤液;
(3)、减压浓缩干燥即得浸膏粉末。
上述技术方案所述的中药组合物,其中,青龙衣为30g,淫羊藿为30g。
上述技术方案所述的提取物,其中,所述提取物用于制备治疗肝癌的药物。
上述技术方案所述的中药组合物或上述技术方案所述的提取物在制备治疗肝癌药物中的应用。
上述技术方案所述的应用,其中,中药组合物或提取物具有下调Bcl-2的表达和上调Bax的表达的作用。
上述技术方案所述的应用,其中,中药组合物或提取物的剂型为医学上可接受的剂型。
上述技术方案所述的应用,其中,中药组合物或提取物的剂型为粉剂、注射液、胶囊、片剂或口服液中的一种。
本发明具有以下有益效果:
1、本发明中药组合物及其提取物不仅配制简单,疗效好,无副作用,安全性高,有利于患者及时减轻病状,并且优于青龙衣与刺五加药材组合对肝癌的治疗,具有良好的开发前景及社会和经济效益。
2、本发明中药组合物及其提取物对人肝癌细胞株HepG2和鼠肝癌细胞株H22的抑瘤效果明显强于青龙衣与刺五加组合、单独使用青龙衣和单独使用淫羊藿。
3、本发明中药组合物及其提取物对人肝癌细胞株HepG2移植性肿瘤生长和鼠肝癌细胞株H22移植性肿瘤生长的抑瘤效果明显强于青龙衣与刺五加组合、单独使用青龙衣和单独使用淫羊藿。
附图说明:
1、图1是各给药组对HepG2肝癌细胞生长抑制率的影响;
2、图2是各给药组对H22肝癌细胞生长抑制率的影响;
3、图3是各给药组对小鼠HepG2移植性肿瘤平均瘤重的影响;
4、图4是各给药组对小鼠H22移植性肿瘤平均瘤重的影响;
5、图5是各组HepG2细胞中Bcl-2的表达;
6、图6是各组HepG2细胞中Bax的表达。
具体实施方式:
为使本发明的技术方案便于理解,以下结合具体实施例对本发明中药组合物及其提取物作进一步的说明。
实施例1:一种中药组合物:
一种中药组合物,由重量比1:1的青龙衣与淫羊藿组成。
实施例2:一种中药组合物:
一种中药组合物,由30g的青龙衣和30g淫羊藿组成。
实施例3:中药组合物提取物的制备:
(1)、按照重量比1:1称取青龙衣与淫羊藿药材;
(2)、加水浸泡30min后回流提取2次,加水量分别为药材总重量的8倍、6倍,每次提取1小时,趁热倾出上清液,滤过,合并滤液,即得中药组合物提取物。
实施例4:中药组合物提取物的制备:
本实施例与实施例3相同,区别在于:步骤(1)中青龙衣为30g,淫羊藿为30g。
实施例5:中药组合物提取物浸膏粉末的制备:
将实施例3或4得到的中药组合物提取物减压浓缩干燥即得中药组合物提取物浸膏粉末。
以下结合具体实验例对本发明中药组合物(青龙衣与淫羊藿组合物)及其提取物在肝癌治疗中的有益效果作进一步说明。
一、实验材料:
1、药物及试剂:
青龙衣、淫羊藿、刺五加均购自河北省安国中药材市场,生产批号为20130322。环磷酰胺片由天津金世制药有限公司提供,生产批号20130613。生理盐水、MTT(四甲基偶氮唑盐)、苦味酸均由国药集团化学试剂北京有限公司提供,生产批号为20131012。胎牛血清购置于四季青公司,生产批号20130623。DMSO购置于Sigma公司,生产批号20130215。Bax及Bcl-2鼠抗人单抗、内参一抗(β-actin)购置Santa Cruz公司,生产批号20130808。
2、细胞及动物:
(1)细胞株:HepG2细胞系,H22肝癌瘤株,RH-35细胞系,BRL细胞系,均由军事医学科学院提供。
(2)动物:BALB/c小鼠,清洁级,雄性,6-8周龄,体重(20±2)g,购自军事医学科学院,动物合格证号SCXK-(军)2007-004。
3、材料及仪器:
Costar96孔细胞培养板(美国Corning公司);一次性0.22μm针筒式微孔滤膜(上海兴亚净化材料厂);RAK-2001耐高温塑料染色架(福州迈新);Forma恒温CO2培养箱(ThermoElectron Shanghai Instruments Co.,Ltd.);BioTek多功能酶标仪(Thermo ElectronShanghai Instruments Co.,Ltd.);ABI7500荧光定量PCR仪(美国CY-TECH);FA2004分析天平(上海天平仪器厂);ALC4239低温高速离心机(美国Sigma公司产品);725型超低温冰箱(美国Forma公司);SW-CJ-2FD超净工作台(苏州安泰空气技术有限公司)。
二、实验项目
所有处理数据均以表示,使用SPSS19.0统计软件中的单因素方差分析处理数据,用LSD法进行组间比较;否则采用非参数秩和检验,P<0.05表示有差异,P<0.01表示有显著性差异。
实验例1:以下实验例2~6中的各实验样品的提取制备:
(1)、本发明中药组合物(青龙衣与淫羊藿)的提取物浸膏粉末的制备:
精密称取青龙衣与淫羊藿药材各30g置圆底烧瓶中,加水浸泡30min后回流提取2次,加水量分别为药材总重量的8倍、6倍,每次提取1小时,趁热倾出上清液,滤过,合并滤液,减压浓缩干燥即得浸膏粉末。
(2)、青龙衣与刺五加提取物浸膏粉末的制备:
精密称取青龙衣与刺五加药材各30g置圆底烧瓶中,其余提取步骤同上。
(3)、青龙衣提取物浸膏粉末的制备:
精密称取青龙衣药材30g置圆底烧瓶中,其余提取步骤同上。
(4)、淫羊藿提取物浸膏粉末的制备:
精密称取青淫羊藿药材30g置圆底烧瓶中,其余提取步骤同上。
(5)、刺五加提取物浸膏粉末的制备:
精密称取刺五加药材30g置圆底烧瓶中,其余提取步骤同上。
实验例2:MTT法检测各给药组对人肝癌细胞株HepG2的影响:
将处于对数生长期的人肝癌细胞株HepG2用0.25%胰酶消化后,用含10%胎牛血清的RPMI1640培养液稀释成浓度为5×104个/mL的细胞悬液,接种于96孔培养板中,每孔100μl,在37℃、CO2培养箱中培养。培养HepG2细胞系至细胞生长到50-60%融合时,对照组培养液中加入溶解化合物所用的DMSO(二甲基亚砜)培养液,阳性组加入0.005g/mL环磷酰胺,青龙衣+淫羊藿组加入相当于原药材2g/mL本发明中药组合物提取物浸膏粉末,青龙衣+刺五加组加入相当于原药材2g/mL青龙衣与刺五加提取物浸膏粉末,青龙衣组加入相当于原药材2g/mL青龙衣提取物浸膏粉末,淫羊藿组加入相当于原药材2g/mL淫羊藿提取物浸膏粉末,刺五加组加入相当于原药材2g/mL刺五加提取物浸膏粉末,各100μl,每孔总液体量为200μl。培养24h后,弃上清,加入0.5mg/ml的MTT检测细胞活性。方法如下:去上清,磷酸盐缓冲液(PBS)洗2遍,MTT、37℃孵育4小时,PBS洗2遍,DMSO溶解结晶,490nm测定吸光度。
实验结果:如表1和图1(图1为各给药组对HepG2肝癌细胞生长抑制率的影响,图中▲为P<0.05,▲▲为P<0.01)所示,环磷酰胺给药后对HepG2肝癌细胞的生长抑制率为63.15%,青龙衣+淫羊藿组给药后对HepG2肝癌细胞的生长抑制率为59.39%,青龙衣+刺五加组药后对HepG2肝癌细胞的生长抑制率为50.64%,青龙衣给药后对HepG2肝癌细胞的生长抑制率为43.88%,淫羊藿给药后对HepG2肝癌细胞的生长抑制率为36.40%,刺五加给药后对HepG2肝癌细胞的生长抑制率为33.29%。与对照组相比,阳性组和青龙衣+淫羊藿组的吸收值有显著差异(P<0.01),且青龙衣+淫羊藿组的抑瘤效果明显强于青龙衣与刺五加组、青龙衣组、淫羊藿组。说明该发明专利青龙衣与淫羊藿药物组合的抑瘤效果明显。
表1 各给药组对HepG2肝癌细胞存活力的影响
注:与对照组比较,P<0.05,▲▲P<0.01。
实验例3:MTT法检测各给药组对鼠肝癌细胞株H22的影响:
将处于对数生长期的人肝癌细胞株H22用0.25%胰酶消化后,用含10%胎牛血清的RPMI1640培养液稀释成浓度为5×104个/mL的细胞悬液,接种于96孔培养板中,每孔100μl,在37℃、CO2培养箱中培养。培养H22细胞系至细胞生长到50-60%融合时,对照组培养液中加入溶解化合物所用的DMSO(二甲基亚砜)培养液,阳性组加入0.005g/mL环磷酰胺,青龙衣+淫羊藿组加入相当于原药材2g/mL本发明中药组合物提取物浸膏粉末,青龙衣+刺五加组加入相当于原药材2g/mL青龙衣与刺五加提取物浸膏粉末,青龙衣组加入相当于原药材2g/mL青龙衣提取物浸膏粉末,淫羊藿组加入相当于原药材2g/mL淫羊藿提取物浸膏粉末,刺五加组加入相当于原药材2g/mL刺五加提取物浸膏粉末,各100μl,每孔总液体量为200μl。培养24h后,弃上清,加入0.5mg/ml的MTT测细胞活性。方法如下:去上清,磷酸盐缓冲液(PBS)洗2遍,MTT、37℃孵育4小时,PBS洗2遍,DMSO溶解结晶,570nm测定吸光度。
实验结果:如表2和图2(图2是各给药组对H22肝癌细胞生长抑制率的影响,图中▲为P<0.05,▲▲为P<0.01)所示,环磷酰胺给药后对H22肝癌细胞的生长抑制率为64.58%,青龙衣+淫羊藿组给药后对H22肝癌细胞的生长抑制率为55.32%,青龙衣+刺五加组药后对H22肝癌细胞的生长抑制率为42.62%,青龙衣给药后对H22肝癌细胞的生长抑制率为39.78%,淫羊藿给药后对H22肝癌细胞的生长抑制率为35.62%,刺五加给药后对H22肝癌细胞的生长抑制率为31.98%。与对照组相比,阳性组和青龙衣+淫羊藿组的吸收值有显著差异(P<0.01),且青龙衣+淫羊藿组的抑瘤效果明显强于青龙衣与刺五加组、青龙衣组、淫羊藿组。说明该发明专利青龙衣与淫羊藿药物组合的抑瘤效果明显。
表2 各给药组对H22肝癌细胞存活力的影响
注:与对照组比较,P<0.05,▲▲P<0.01。
实验例4:人肝癌细胞株HepG2移植性肿瘤生长活性试验:
取70只雄性BALB/c小鼠,取0.2ml对数生长期的HepG2细胞(1×107/mL)注射到小鼠的右前腋窝皮下,24h后肿瘤体积长到足够测量的程度,将小鼠按肿瘤大小随机分为组:对照组加入等体积生理盐水、阳性组加入环磷酰胺0.05g/kg、青龙衣+淫羊藿组加入相当于原药材10g/kg(即每1kg小鼠给10g原药材)本发明中药组合物提取物浸膏粉末、青龙衣+刺五加组加入相当于原药材10g/kg青龙衣与刺五加提取物浸膏粉末、青龙衣组加入相当于原药材10g/kg青龙衣提取物浸膏粉末、淫羊藿组加入相当于原药材10g/kg淫羊藿提取物浸膏粉末、刺五加组加入相当于原药材10g/kg刺五加提取物浸膏粉末。各给药组按0.2mL/10g灌胃给药,每日一次,连续15天。末次给药后处死小鼠,称取瘤重,计算抑瘤率。
实验结果:如表3和图3(图3是各给药组对小鼠HepG2移植性肿瘤平均瘤重的影响,图中▲为P<0.05,▲▲为P<0.01)所示,对照组瘤体重量为1.88±0.15g,阳性组瘤体重量为0.64±0.09g,抑瘤率为65.95%,青龙衣+淫羊藿组瘤体重量为0.81±0.13g,抑瘤率为56.91%,青龙衣+刺五加组瘤体重量为1.01±0.15g,抑瘤率为46.27%,青龙衣组瘤体重量为1.11±0.17g,抑瘤率为40.95%,淫羊藿组瘤体重量为1.21±0.12g,抑瘤率为35.63%,刺五加组瘤体重量为1.27±0.18g,抑瘤率为32.45%。与对照组相比,阳性组和青龙衣+淫羊藿组的吸收值有显著差异(P<0.05),且青龙衣+淫羊藿组的抑瘤效果明显强于青龙衣+刺五加组、青龙衣组、淫羊藿组。说明该发明专利青龙衣与淫羊藿药物组合对小鼠HepG2移植性肿瘤生长的抑瘤效果明显。
表3 各给药组对小鼠HepG2移植性肿瘤生长抑制情况
注:与对照组比较,P<0.05,▲▲P<0.01。
实验例5:人肝癌细胞株H22移植性肿瘤生长活性试验:
取70只雄性BALB/c小鼠,取0.2ml对数生长期的H22细胞(1×107/mL)注射到小鼠的右前腋窝皮下,10天后,肿瘤体积长到足够测量的程度,将小鼠按肿瘤大小随机分为组:对照组加入等体积生理盐水、阳性组加入环磷酰胺0.05g/kg、青龙衣+淫羊藿组加入相当于原药材10g/kg(即每1kg小鼠给10g原药材)本发明中药组合物提取物浸膏粉末、青龙衣+刺五加组加入相当于原药材10g/kg青龙衣与刺五加提取物浸膏粉末、青龙衣组加入相当于原药材10g/kg青龙衣提取物浸膏粉末、淫羊藿组加入相当于原药材10g/kg淫羊藿提取物浸膏粉末、刺五加组加入相当于原药材10g/kg刺五加提取物浸膏粉末。各给药组按0.2mL/10g灌胃给药,每日一次,连续15天。末次给药后处死小鼠,称取瘤重,计算抑瘤率。
表4 各给药组对小鼠H22移植性肿瘤生长抑制情况
注:与对照组比较,P<0.05,▲▲P<0.01。
实验结果:如表4和图4(图4是各给药组对小鼠H22移植性肿瘤平均瘤重的影响,图中▲为P<0.05,▲▲为P<0.01)所示,对照组瘤体重量为1.76±0.21g,阳性组瘤体重量为0.65±0.09g,抑瘤率为63.06%,青龙衣+淫羊藿组瘤体重量为0.76±0.16g,抑瘤率为56.81%,青龙衣+刺五加组瘤体重量为0.89±0.15g,抑瘤率为49.43%,青龙衣组瘤体重量为1.03±0.17g,抑瘤率为41.47%,淫羊藿组瘤体重量为1.09±0.12g,抑瘤率为38.35%,刺五加组瘤体重量为1.11±0.13g,抑瘤率为36.93%。与对照组相比,阳性组和青龙衣+淫羊藿组的吸收值有显著差异(P<0.05),且青龙衣+淫羊藿组的抑瘤效果明显强于青龙衣+刺五加组、青龙衣组、淫羊藿组、刺五加组。说明该发明专利青龙衣与淫羊藿药物组合对小鼠H22移植性肿瘤生长的抑瘤效果明显。
实验例6:Western-blot检测各组细胞对Bcl-2、Bax在蛋白水平的表达差异:
将处于对数生长期的人肝癌细胞株HepG2用0.25%胰酶消化后,用含10%胎牛血清的RPMI1640培养液稀释细胞,分装于培养瓶中,培养瓶中的细胞浓度为2×105个/mL,在37℃、CO2培养箱中培养。培养24h后,每瓶加1mL的药液,即对照组培养液中加入溶解化合物所用的DMSO(二甲基亚砜)培养液,阳性组加入0.005g/mL环磷酰胺,青龙衣+淫羊藿组加入相当于原药材2g/mL本发明中药组合物提取物浸膏粉末,青龙衣+刺五加组加入相当于原药材2g/mL青龙衣与刺五加提取物浸膏粉末,青龙衣组加入相当于原药材2g/mL青龙衣提取物浸膏粉末,淫羊藿组加入相当于原药材2g/mL淫羊藿提取物浸膏粉末,刺五加组加入相当于原药材2g/mL刺五加提取物浸膏粉末。
药物作用24h后胰酶消化收集细胞。RIPA裂解液(含有蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂)裂解细胞并收集蛋白,Bradford法蛋白定量检测试剂盒测定蛋白浓度。用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离50μg蛋白,电转移至硝酸纤维素膜。膜用含3%脱脂奶粉的TBST缓冲液封闭30min,分别加入待测一抗4℃孵育过夜漂洗3次后加辣根过氧化物酶标记的二抗,室温作用1h,漂洗3次。加发光剂(ECL)反应,保鲜膜包裹,暗室进行X线胶片曝光、显影和定影。用Image-Pro Plus5.1图像分析软件对各蛋白条带和β-actin条带进行分析,以各条带的灰度值代表其蛋白的表达量,用β-actin条带灰度值进行校正,得出各条带的相对灰度值实验重复3次,取平均值。
实验结果:
(1)各组HepG2细胞中Bcl-2的表达
Western Blot结果由图5(图5为各组HepG2细胞中Bcl-2的表达,其中1为对照组,2为阳性组,3为青龙衣+淫羊藿组,4为青龙衣+刺五加组,6为淫羊藿组,7为刺五加组)可见,β-action作为内参,Bcl-2在对照组、阳性组、青龙衣+刺五加组、青龙衣组、淫羊藿组、刺五加组均有表达,其在青龙衣与淫羊藿组中表达较对照组明显降低,其表达量为对照组的65.43%。
(2)各组HepG2细胞中Bax的表达
Western Blot结果由图6(图6为各组HepG2细胞中Bax的表达,其中1为对照组,2为阳性组,3为青龙衣+淫羊藿组,4为青龙衣+刺五加组,6为淫羊藿组,7为刺五加组)可见,β-action作为内参,Bax在对照组、阳性组、青龙衣+刺五加组、青龙衣组、淫羊藿组、刺五加组均有表达,其在青龙衣与淫羊藿组中表达较对照组明显升高,其表达量为对照组的211.05%。
综上可知,Bcl-2和Bax作为凋亡相关基因,二者的作用是相互相反的,两者共同影响着肿瘤的生物学行为。通过给药后Bcl-2和Bax蛋白水平的变化来看,说明青龙衣与淫羊藿组合诱导肿瘤细胞的凋亡可能是通过下调Bcl-2的表达和上调Bax的表达,而达到抗肿瘤作用。
本发明提供的中药组合物以及中药组合物的提取物不仅配制简单,疗效好,无副作用,安全性高,有利于患者及时减轻病状,并且优于青龙衣与刺五加药材组合对肝癌的治疗,具有良好的开发前景及社会和经济效益。
以上所述,仅为本发明的较佳实施例,并非对本发明作任何形式上和实质上的限制,凡熟悉本专业的技术人员,在不脱离本发明技术方案范围内,当可利用以上所揭示的技术内容,而作出的些许更动、修饰与演变的等同变化,均为本发明的等效实施例;同时,凡依据本发明的实质技术对以上实施例所作的任何等同变化的更动、修饰与演变,均仍属于本发明的技术方案的范围内。

Claims (10)

1.一种用于治疗肝癌的中药组合物,其特征在于:所述中药组合物由青龙衣和淫羊藿组成,其中青龙衣与淫羊藿的重量比为1:1。
2.根据权利要求1所述的中药组合物,其特征在于:青龙衣为30g,淫羊藿为30g。
3.根据权利要求1或2所述的中药组合物,其特征在于:所述中药组合物用于制备治疗肝癌的药物。
4.一种用于治疗肝癌的中药组合物的提取物,其特征在于,所述提取物通过下述步骤制备所得:
(1)、按照重量比1:1称取青龙衣与淫羊藿药材;
(2)、加水浸泡30min后回流提取2次,加水量分别为药材总重量的8倍、6倍,每次提取1小时,趁热倾出上清液,滤过,合并滤液;
(3)、减压浓缩干燥即得浸膏粉末。
5.根据权利要求4所述的一种用于治疗肝癌的中药组合物的提取物,其特征在于:青龙衣为30g,淫羊藿为30g。
6.根据权利要求4或5所述的提取物,其特征在于:所述提取物用于制备治疗肝癌的药物。
7.权利要求1~3中任一项权利要求所述的中药组合物或权利要求4~6中任一项权利要求所述的提取物在制备治疗肝癌药物中的应用。
8.权利要求7所述的应用,其特征在于:中药组合物或提取物具有下调Bcl-2的表达和上调Bax的表达的作用。
9.权利要求7或8所述的应用,其特征在于:中药组合物或提取物的剂型为医学上可接受的剂型。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于:中药组合物或提取物的剂型为粉剂、注射液、胶囊、片剂或口服液中的一种。
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