CN104109702A

CN104109702A - 一种麦白霉素发酵培养基

Info

Publication number: CN104109702A
Application number: CN201410305265.2A
Authority: CN
Inventors: 吴峰; 谢云; 张洪兰; 张葵; 雷川洋
Original assignee: CHONGQING DAXIN PHARMACEUTICAL Co Ltd; Peking University Founder Group Co Ltd; PKU Healthcare Industry Group
Current assignee: CHONGQING DAXIN PHARMACEUTICAL Co Ltd; Peking University Founder Group Co Ltd; PKU Healthcare Industry Group
Priority date: 2014-06-30
Filing date: 2014-06-30
Publication date: 2014-10-22

Abstract

本发明公布了一种麦白霉素的发酵培养基，属于麦白霉素生产领域。该发酵培养基的成分包含葡萄糖1.5～3.0％、淀粉1.5～3.0％、黄豆粉2～5％、酵母粉0.1～0.3％、鱼粉0.1～0.5％、磷酸二氢钾0.05～0.2％、硫酸镁0.05～0.2％、碳酸钙0.1～0.35％和油1～10％，还包含乳化剂。其中，乳化剂可由吐温20和吐温80组成；乳化剂中吐温20和吐温80的重量比为1:1；添加时将乳化剂添加到油中混合均匀再与其它成分混合。乳化剂的加入一方面可提高发酵后麦白霉素的含量，另一方面还可提高麦迪霉素A1和吉他霉素A6占总组分的比例，减少相关物质的影响，使得最终成品质量达到并好于药典要求。

Description

一种麦白霉素发酵培养基

技术领域

本发明涉及麦白霉素生产领域，特别涉及一种产生麦白霉素的发酵培养基。

背景技术

麦白霉素(Meleumycin，MLM)是我国抗生素工作者相继从四川、广东土壤中分离出的链霉菌(S.mycarofaciens10204及1748)，经发酵提炼所得。麦白霉素对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、化脓性链球菌和肺炎球菌中的红霉素敏感菌有较好的抗菌作用，对细小的链球菌和淋病奈瑟氏球菌等其它常见临床致病菌有一定的抗菌活性。

油是麦白霉素发酵生产的重要原材料之一。麦白霉素产生菌能产生与油相适应的脂肪酶，把脂肪分解成甘油和脂肪酸，前者氧化为丙酮酸，后者经氧化最后生成醋酸，然后以乙酰辅酶A的形式进入三羧酸循环。在不断进行氧化过程中油提供了大量能量为微生物所利用。如果油不能充分的氧化而脂肪酸堆积则不利于菌的生长及麦白霉素的合成。在现有的发酵配方中油基本是直接浮在表面，只是靠搅拌的作用使其与其它基质混合。

乳化剂是一类能使互不相溶的液体形成稳定乳状液的有机化合物。它们都是具有表面活性的物质，能降低液体间的界面张力，使互不相溶的液体易于乳化。乳化时，分散相是以很小的液珠形式(直径在0.1微米至几十微米之间)均匀地分布在连续相中，乳化剂在这些液珠的表面上形成薄膜或双电层，以阻止它们的相互凝聚，保持乳状液的稳定。乳状液是一个非均相体系。最常见的是以水为连续相，以不溶于水的有机液体为分散相的水包油型乳状液。也有以水为分散相，以不溶于水的有机液体为连续相的油包水乳状液。要配制稳定的乳状液，可以加入单一组分的乳化剂，也可同时加入几种乳化剂。目前乳化剂被广泛用于食品生产领域。

吐温又名聚山梨酯，系一系列聚氧乙烯去水山梨醇的部分脂肪酸酯。为非离子型表面活性剂，常作为水包油(O/W)型乳化剂，使其他物质均匀在溶液中分散，主要用于农药、食品、化妆品。吐温对矿物油、植物油、动物油脂等各种油脂类均有良好的乳化作用、分散作用、增溶作用。相对来说，吐温20更温和一些，吐温80的乳化性更强一些。吐温通常被认为是无毒、无刺激性的材料。据WHO的评估，按总聚山梨酯计算，日摄入量可高到25mg/kg体重。

2005版药典对麦迪霉素的要求是含麦迪霉素A1不得低于35.0％。随着药典的改版，对麦白霉素的要求进一步提高。2010年版药典二部规定麦白霉素中麦迪霉素A1应不低于48％，吉他霉素A6应不低于12％，A1、A2、A4、A6、A8之和应不低于70％。然而，目前在科研和实际生产中，有的麦白霉素产生菌发酵所产生的麦迪霉素A1和吉他霉素A6所占比例偏低，使最终成品质量刚好在合格线边沿，不合格的风险较大。

发明内容

针对上述产生麦白霉素现有技术存在的问题，本发明提供一种麦白霉素发酵培养基，该发酵培养基除包含现有麦白霉素发酵培养基的成分和含量外，还包含乳化剂。本发明提供的麦白霉素发酵培养基能提高麦白霉素产物组分中麦迪霉素A1和吉他霉素A6的比例，同时还能提高发酵后麦白霉素的含量，使之符合并高于药典要求，降低生成不合格产品的风险。

油是麦白霉素发酵生产的重要原材料之一。现有麦白霉素发酵培养基除油之外，还包含其它组分，包括葡萄糖、淀粉、黄豆粉、酵母粉、鱼粉、磷酸二氢钾、硫酸镁和碳酸钙，其重量配比为：葡萄糖1.5～3.0％、淀粉1.5～3.0％、黄豆粉2～5％、酵母粉0.1～0.3％、鱼粉0.1～0.5％、磷酸二氢钾0.05～0.2％、硫酸镁0.05～0.2％、碳酸钙0.1～0.35％和油1～10％。其中，葡萄糖0.1～0.5％是指每100mL溶液中含有0.1～0.5g葡萄糖，相当于0.001～0.005g/mL；本文中涉及培养基组分的百分含量的含义均与之相同。

本发明的技术方案是：

一种麦白霉素发酵培养基，包含组分的重量配比分别为：葡萄糖1.5～3.0％、淀粉1.5～3.0％、黄豆粉2～5％、酵母粉0.1～0.3％、鱼粉0.1～0.5％、磷酸二氢钾0.05～0.2％、硫酸镁0.05～0.2％、碳酸钙0.1～0.35％和油1～10％，此外，还包含乳化剂，用于发酵生产麦白霉素，以提高麦白霉素产物组分中麦迪霉素A1和吉他霉素A6的重量比，并提高发酵后麦白霉素的含量。

上述发酵生产麦白霉素的发酵培养基中，除包含乳化剂之外，发酵培养基的其他成分和含量可以同现有发酵生产麦白霉素的发酵培养基。本发明是在现有培养基基础上，在其中添加乳化剂。优选地，乳化剂的添加量为0.1～0.5％。

针对上述麦白霉素发酵培养基，优选地，乳化剂由吐温20和吐温80组成；进一步地，乳化剂中，吐温20和吐温80的重量比为1:1。

在发酵培养基配制时，较好的乳化剂添加方式是先将乳化剂添加到油中搅拌混合均匀后再加入其它原料中。

本发明多个实施例使用本发明提供麦白霉素发酵培养基生成麦白霉素，其中，麦迪霉素A1重量比均大于60％；吉他霉素A6重量比均大于20％；而发酵后麦白霉素的含量均为不包含乳化剂的对照组的1.1倍以上。

本发明的有益效果是：

本发明提供一种麦白霉素发酵培养基，该发酵培养基除包含现有麦白霉素发酵培养基的成分和含量外，还包含乳化剂。其中，乳化剂由吐温20和吐温80组成，吐温20和吐温80作为水包油(O/W)型乳化剂，能帮助油在发酵料液中较好的均匀分散，同时还具有增溶作用，有利于麦白霉素菌种对油和其它原材料的利用。该发酵培养基能提高麦白霉素产物组分中麦迪霉素A1和吉他霉素A6的比例，同时还能提高发酵后麦白霉素的含量，通过实验表明，使用本发明提供麦白霉素发酵培养基生成的麦白霉素，麦迪霉素A1重量比均大于60％；吉他霉素A6重量比均大于20％；而发酵后麦白霉素的含量均为不包含乳化剂的对照组的1.1倍以上。发酵液质量的提高为最终成品质量奠定了基础，使之符合并高于药典要求，降低了生成不合格产品的风险，对实际生产有着重要意义。

具体实施方式

以下结合具体实施例，对本发明作进一步说明。应理解，以下实施例仅用于说明本发明而非用于限定本发明的范围。在本发明的构思前提下，类似的制备方法都属于本发明。

实施例一：

斜面和种子培养：用麦白霉素产生菌生米卡链霉菌传斜面，斜面培养基为高氏一号培养基，温度28℃，培养5天。用成熟斜面种子接入种瓶培养，28℃，摇床转速220rpm，摇瓶装量100ml/750ml，30小时培养。所用种子培养基为：葡萄糖1～2％，淀粉1～3％，黄豆粉2～4％，磷酸二氢钾0.01～0.05％，硫酸铵0.2～0.5％，碳酸钙0.1～0.3％。发酵培养：将成熟种子液接入发酵瓶培养。接种量2ml/20ml，28℃，摇床转速220rpm，摇瓶装量20ml/250ml，48h发酵。所用发酵培养基为：油1～10％，葡萄糖1.5～3.0％、淀粉1.5～3.0％、黄豆粉2～5％、酵母粉0.1～0.3％、鱼粉0.1～0.5％、磷酸二氢钾0.05～0.2％、硫酸镁0.05～0.2％、碳酸钙0.1～0.3％。其中发酵培养基中油是提前添加含吐温20和吐温80按重量1:1比例混合的乳化剂(按配置发酵培养基总量，每100ml发酵培养基包含吐温20和吐温50各0.05g)搅拌均匀后再加入培养基中的。最后用高效液相色谱法检测麦白霉素的组分；抗生素微生物检定法测定麦白霉素含量，检测方法参见2010版药典。

发酵结束后测得麦白霉素中A1重量比为64.52％，A6重量比为22.23％。而没有添加乳化剂的对照组(其它工艺步骤和配料同实施例1)中，发酵结束后测得麦白霉素中A1的重量比为58.25％，A6的重量比为19.32％。添加乳化剂后发酵产生的麦白霉素总量为没添加乳化剂的对照组产生麦白霉素含量的1.15倍。

实施例二：

在发酵培养基的油中提前添加含吐温20和吐温80按1:1比例混合的乳化剂(按配置发酵培养基总量，每100ml发酵培养基添加0.2g)搅拌均匀后再加入培养基中的。其余同实施例一。

发酵结束后测得麦白霉素A1的重量比为63.78％，麦白霉素A6的重量比例为22.68％。产生麦白霉素含量为没添加乳化剂的对照组产生麦白霉素含量的1.17倍。

实施例三：

在发酵培养基的油中提前添加含吐温20和吐温80按1:1比例混合的乳化剂(按配置发酵培养基总量，每100ml发酵培养基添加0.5g)搅拌均匀后再加入培养基中的。其余同实施例1。

发酵结束后测得麦白霉素A1的重量占总比例62.14％，麦白霉素A6的重量占总比例23.58％。产生麦白霉素含量为没添加乳化剂的对照组产生麦白霉素含量的1.11倍。

Claims

1.一种麦白霉素的发酵培养基，所述发酵培养基包含葡萄糖1.5～3.0％、淀粉1.5～3.0％、黄豆粉2～5％、酵母粉0.1～0.3％、鱼粉0.1～0.5％、磷酸二氢钾0.05～0.2％、硫酸镁0.05～0.2％、碳酸钙0.1～0.35％和油1～10％，其特征在于，还包含乳化剂。

2.根据权利要求1所述的发酵培养基，其特征在于，所述乳化剂的含量为0.1～0.5％。

3.根据权利要求1所述的发酵培养基，其特征在于，所述乳化剂由吐温20和吐温80组成。

4.根据权利要求3所述的发酵培养基，其特征在于，所述乳化剂中吐温20和吐温80的重量比为1:1。

5.权利要求1～4任一所述发酵培养基的制备方法，其特征在于，将所述乳化剂添加到所述油中混合均匀，再与其它成分混合。