CN104107183A - 黄芪紫檀烷苷在制备免疫抑制剂方面的用途 - Google Patents

黄芪紫檀烷苷在制备免疫抑制剂方面的用途 Download PDF

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徐风
叶加
张微微
蔡少青
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Abstract

本发明通过对黄芪紫檀烷苷进行实验研究，首次发现黄芪紫檀烷苷可明显对抗刀豆蛋白A(ConA)诱导的T淋巴细胞增殖，具有免疫抑制作用，利于未来制备免疫抑制药物。

Description

黄芪紫檀烷苷在制备免疫抑制剂方面的用途
技术领域
本发明涉及医药领域，具体涉及黄芪紫檀烷苷在制备免疫抑制剂方面的用途。 
背景技术
黄芪是是一味健脾益气的中药，具有补气固表、利尿托毒、排脓、敛疮生肌的作用，临床用于气虚乏力，食少便溏，中气下陷，久泻脱肛，便血崩漏，表虚自汗，气虚水肿，痈疽难溃，久溃不敛，血虚痿黄，内热消渴，慢性肾炎蛋白尿和糖尿病等症(参见：国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[z].北京：化学工业出版社，2005：212-213.)。现代药理学研究认为，黄芪能够调节机体免疫功能并具有抗病毒作用(参见：晏洪波，梁文，涂亚庭.黄芪的免疫调节及抗病毒作用[J].华南国防医学杂志，2008，22(6)：69-70)。 
黄芪的主要化学成分包括：黄芪黄酮类化合物、黄芪皂苷类化合物、黄芪多糖类化合物、以及黄芪中的氨基酸和微量元素，其中黄芪黄酮类化合物是黄芪的重要有效成分。黄芪紫檀烷苷是黄芪异黄酮类中重要的化合物之一，其在免疫抑制方面的用途目前尚无人报道。 
发明内容
本发明的目的是提供黄芪紫檀烷苷在制备免疫抑制剂方面的用途。 
本发明所研究的黄芪紫檀烷苷的化学结构如下，通过从蒙古黄芪中分离制备得到： 
3-羟基-9，10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷(简称黄芪紫檀烷苷)： 
本发明通过刀豆蛋白A(Con A)诱导小鼠T淋巴细胞增殖试验，首次发现黄芪紫檀烷苷对T淋巴细胞增殖具有抑制作用，能用于未来制备免疫抑制剂。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的描述： 
实施例：黄芪紫檀烷苷对刀豆蛋白A(ConA)诱导的小鼠T细胞增殖的影响 
1材料 
1.1动物 
BALB/c小鼠，体重18～20g，雄性；由北京大学实验动物部提供(许可证号：SCXK11-00-0008)。动物饲养于标准环境：温度(23±1)℃，相对湿度(55±5)％，明暗周期12h/12h，标准颗粒饲料喂养。 
1.2试剂 
刀豆蛋白A(ConA)，噻唑蓝(MTT)购自美国Sigma公司；胎牛血清(FBS)，购自美国GIBCO公司；红细胞裂解液，1640培养液，磷酸盐(PBS)缓冲液均购自北京迈晨生物科技公司；DMSO(二甲基亚砜，批号20101008)，购自北京化工厂。黄芪紫檀烷苷样品用DMSO配制。 
1.3仪器 
Bro-Rad iMark酶标仪(美国伯乐公司)，Sigma3K-15离心机(德国Sigma公司)，CO2培养箱(美国Thermal Technology LLC公司)，超净工作台(北京东联哈尔仪器制造有限公司)等。 
2方法 
小鼠摘眼球放血，无菌取脾脏匀浆过滤，离心5min(4℃，1000r·min-1)，弃上清，用红细胞裂解液裂解红细胞后用PBS洗涤2次；用1640培养液(含10％FBS)悬浮脾细胞，细胞计数并使用台盘蓝染色法测定细胞的存活率，存活率＝未着色细胞数/细胞总数×100％，存活率＞95％者用于试验，细胞调至2×106个/mL。 
以丝裂原刀豆蛋白(ConA，2.5μg·mL-1)刺激T细胞使其增殖。分组：细胞对照组(含等浓度的DMSO)，Con A刺激组，黄芪紫檀烷苷待测样品组(浓度根据预试验结果定为30μmol·L-1)，各设3个复孔，重复3次。培养44h(37℃，5％CO2，饱和湿度)后加入MTT20μL(0.5mg·mL-1)，培养4h，离心6min(1500r·min-1)，弃上清后各孔均加DMSO100μL轻微振荡10min，酶标仪570nm测吸光度值(A值)。 
抑制率(％)＝(Con A组A均值-样品组A均值)/Con A组A均值×100％ 
3实验结果 
Con A能明显促进小鼠T淋巴细胞增殖(p＜0.01)，首次发现黄芪紫檀烷苷能明显抑制 
ConA诱导的T细胞增殖(p＜0.01)，抑制率分别为：57.67％，未来可用于制备免疫抑制方面的药物，具体结果见下表： 
表1：黄芪紫檀烷苷对ConA诱导的T淋巴细胞增殖的影响 
(n＝3，mean±SD) 
与DMSO对照组相比，##P＜0.01，与ConA组相比**P＜0.01。 

Claims (1)

1.3-羟基-9，10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷在制备免疫抑制剂中的用途，其结构式如下：
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