CN102210670B

CN102210670B - 黄酮醇类化合物在制备抗缺氧药物或食品中的应用

Info

Publication number: CN102210670B
Application number: CN201110087640.7A
Authority: CN
Inventors: 嵇扬; 郑悦; 陈海生; 杨建�; 周苏萍
Original assignee: Drug & Instrument Inspection Institute Minister Of Health P L A General Logistics Department
Current assignee: Drug & Instrument Inspection Institute Minister Of Health P L A General Logistics Department
Priority date: 2011-04-08
Filing date: 2011-04-08
Publication date: 2014-03-12
Anticipated expiration: 2031-04-08
Also published as: CN102210670A

Abstract

本发明公开了黄酮醇类化合物的新用途。该新用途是其在制备抗缺氧药物、保健品或食品中的应用；所述黄酮醇类化合物具体为二氢杨梅素、杨梅素、二氢槲皮素或槲皮素。本发明采用MTT法，用H9C2(大鼠心肌细胞系)对二氢杨梅素、杨梅素、二氢槲皮素和槲皮素进行细胞活性检测实验和抗缺氧试验。结果表明，上述四种黄酮醇化合物均具有显著的抗缺氧活性，因此可用于制备抗缺氧药物、保健品或食品。

Description

黄酮醇类化合物在制备抗缺氧药物或食品中的应用

技术领域

本发明涉及黄酮醇类化合物在制备抗缺氧药物或食品中的应用。

背景技术

二氢杨梅素(Dihydromyricetin)、杨梅素(Myricetin)、二氢槲皮素(Dihydroquercetin)和槲皮素(Quercetin)为来源广泛的黄酮醇类化合物。

二氢杨梅素存在于鼠李科拐枣属植物北枳椇(Hovinia dulcis Thunb)的果实中【Seung Mi Yoo，Sungyong Mun，Jin-Hyun Kim.Recovery and pre-purification of(+)-dihydromyricetin from Hovenia dulcis，Process Biochemistry，2006(41)：567～570】。有研究表明，二氢杨梅素对小鼠肝脏谷胱甘肽-S-转移酶具有抑制作用【杨秀芬，杨子明。二氢杨梅素对小鼠肝脏谷胱甘肽-S-转移酶的抑制作用及其动力学分析，中国药理学通报，2010；26(7)：894～898】；二氢杨梅素能拮抗去甲肾上腺素(NA)和高K⁺去极化引起的兔胸主动脉条收缩反应【周天达，周雪仙。藤茶中双氢黄酮醇的分离、结构鉴定及其药理活性，中国药学杂志，1996；31(8)：458～461】；体外试验中，二氢杨梅素对O₂·、·OH、ROO·等自由基有较高的清除率，具有较强的抗氧化活性【徐静娟，姚茂君，许钢。二氢杨梅素抗氧化功能的研究，食品科学，2007；28(9)：43～45】；二氢杨梅素还具有阻止酒精导致的肝脏GSH耗竭和MDA升高，降低TG含量，减轻肝细胞脂肪变性程度的作用【苏东林，黄继红，姚茂君。二氢杨梅素的急性毒理学评价及对酒精性肝损伤的防治效果，湖南农业科学，2009(11)：90～93】；有研究表明，二氢杨梅素对Hela细胞及A2780细胞均表现出抑制作用【张玉萌，郑作文，伦玉宁。藤茶双氢杨梅树皮素对Hela细胞及A2780细胞增殖的抑制作用，中国药业，2009；18(7)：6～7】，还能抑制人肝癌BEL-7404细胞的增殖【郑作文，唐云丽，张玉萌。藤茶双氢杨梅树皮素对人肝癌BEL-7404细胞增殖的抑制作用，中国药物应用与监测，2008；5(1)：4～6】。

杨梅素存在于葡萄科蛇葡萄属植物显齿蛇葡萄的嫩茎叶中【何桂霞，裴刚，等。瑶族藤茶中杨梅素的分离与结构鉴定，中国民族医药杂志，2000；6(1)：40～41】。细胞试验显示，在不影响正常星形胶质细胞的浓度下，杨梅素和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体联用可以使成胶质细胞瘤迅速凋亡【M.D.Siegelin，Timo Gaiser，et al.Myricetin sensitizes malignant glioma cells to TRAIL-mediated apoptosis bydown-regulation of the short isoform of FLIP and bcl-2，Cancer Letters，2009(283)：230～238】；杨梅素对淋巴细胞的活化增殖反应具有抑制作用【俞瑜，曾耀英，等。杨梅素对淋巴细胞活化及增殖的影响，中国药理学通报，2006；22(1)：63～66】；杨梅素对胶原诱导的兔血小板肌动蛋白的聚合有较强的抑制作用【鄢丹李果。杨梅素抗血小板聚集的作用机理研究，中国药理通讯，2005；22(3)：43】；杨梅素对人肺癌H460细胞的增殖有抑制作用【张晓宏，徐琛玮，等。杨梅素抑制H460人肺腺癌细胞增殖及细胞外信号调节激酶通路作用，营养学报，2010(3)：268～271】，能诱导人肝癌HepG2细胞凋亡【郑玲，荆瀛黎。杨梅素诱导人肝癌HepG2凋亡机制研究，中国现代药物应用，2009；3(10)：1～3】，还可以诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡【刘昱，曹来英，等。槲皮素抗宫颈癌的机制研究，微循环学，2010；20(3)：27～29】；杨梅素能修复铁离子造成的大鼠肝细胞DNA损伤【VAL′ERIE ABALEA，JOSIANE CILLARD，et al.REPAIR OFIRON-INDUCED DNA OXIDATION BY THE FLAVONOIDMYRICETIN IN PRIMARYRAT HEPATOCYTE CULTURES，Free Radical Biology & Medicine，1999；26(11-12)：1457～1466】。

槲皮素在自然界多以苷的形式存在，例如枳椇属植物枳椇(Hovenia.acerba Lindl)的干燥叶中【梁侨丽，丁林生。枳椇叶的化学成分研究(I)，中草药，1996；27(10)：581～583】。有研究表明，槲皮素可以通过抑制蛋白激酶C和酪氨酸蛋白激酶活性的途径抑制血管紧张素II引起的新生大鼠心肌肥大【Q Tai-Chun，CHEN Lin，et al.Inhibitoryeffect of quercetin on cultured neonatal rat cardiomyocytes hypertrophy induced byangiotensin II.中国药理学报，2001；22(12)：1103～1106】；离体试验表明，槲皮素能抑制血小板与人皮肤分离的微血管内皮细胞(MVEC)的粘附【FAN Pan-Sheng，GU Zhen-Lun，et al.Effect of quercetin on adhesion of platelets to microvascular endothelial cells in vitro.中国药理学报，2001；22(9)：857～860】；槲皮素还能诱导人白血病HL-60细胞凋亡【XIAO Dong，ZHU Shou-Peng，et al.Quercetin induced apoptosis in human leukemiaHL-60 cells，中国药理学报，1997；18(3)：280～283】；槲皮素干预可显著提高实验性慢性肾衰大鼠肾脏一氧化氮、超氧化物岐化酶和过氧化脂质表达，有保护肾脏细胞和抗氧化的作用，可以减轻细胞损伤【王天然，刘彤，等。槲皮素干预实验性慢性肾衰大鼠肾脏一氧化氮超氧化物岐化酶与过氧化脂质变化，解放军药学学报，2010(4)：342～344】；槲皮素对四氯化碳所致的大鼠急性肝损伤具有保护作用【杨句容，魏来，等。槲皮素对实验性大鼠急性肝损伤的保护作用，现代医药卫生，2010(11)：1601～1602】；槲皮素可以抑制凝血酶和活化血小板刺激后的人脐静脉内皮细胞释放内皮素(ET)及增加环鸟苷一磷酸(cGMP)的合成【赵雪英，顾振纶。槲皮素对培养内皮细胞产生和释放内皮素和环磷酸鸟苷的影响，中国药理学报，1996；17(5)：442～444】。

二氢槲皮素存在于葡萄科蛇葡萄属植物显齿蛇葡萄(Ampelopsisgrossedentata(hand-Mazz)W.T.Wang)的嫩茎叶中【王岩，周莉玲，等。显齿蛇葡萄化学成分的研究。中草药，2002；25(4)：254～256】。二氢槲皮素可以减少感染A/Aichi/2/68(H3N2)病毒小鼠的死亡率【Vladimir Zarubaev，Angela et al.Anti-influenzaActivity of Dihydroquercetin Against Lethal Influenza Virus Infection，AntiviralResearch，2010；86(1)：A50】；二氢槲皮素能减少H₂O2或黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶所致SD大鼠大脑皮层神经细胞损伤【Hyang Dok-Go，Kwang Heun Lee et al.Neuroprotectiveeffects of antioxidative flavonoids，quercetin，(+)-dihydroquercetin and quercetin 3-methylether，isolated from Opuntia ficus-indica var.saboten，Brain Research，2003；965(1-2)：130～136】；二氢槲皮素还是高效的天然食品抗氧化剂【SergeyVGeodakyan，InnaVVoskoboinikova，JuryAKolesnik，et al.High-performance liquid chromatographicmethod for the determination of mangiferin，likviritin and dihydroquercetin in rat plasmaand urine，Biomedical Applications，1992；577(2)：371～375】。

但是，至今还未见有关二氢杨梅素、杨梅素、二氢槲皮素和槲皮素具有抗缺氧活性的相关报道。

发明内容

本发明的目的是提供黄酮醇类化合物的新用途。

本发明所提供的黄酮醇类化合物的新用途是其在制备抗缺氧药物、保健品或食品中的应用。

所述黄酮醇类化合物具体为二氢杨梅素、杨梅素、二氢槲皮素和/或槲皮素，其结构式如下所示。

(式I)

杨梅素：式I中R₁＝OH，R₂＝OH的化合物；

槲皮素：式I中R₁＝OH，R₂＝H的化合物；

(式II)

二氢杨梅素：式II中R₁＝OH，R₂＝OH的化合物；

二氢槲皮素：式II中R₁＝OH，R₂＝H的化合物。

本发明采用MTT法，用H9C2(大鼠心肌细胞系)对二氢杨梅素、杨梅素、二氢槲皮素和槲皮素进行了细胞活性检测实验和抗缺氧试验。结果表明，上述四种黄酮醇化合物均具有显著的抗缺氧活性，因此可用于制备抗缺氧药物、保健品或食品。

具体实施方式

下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和生物材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。

实施例1、二氢杨梅素、杨梅素、二氢槲皮素和槲皮素的抗缺氧实验

1、试验药物

槲皮素标准品由中国药品生物制品检验所提供；二氢槲皮素标准品由上海源叶生物科技有限公司提供；杨梅素、二氢杨梅素标准品由上海同田生物科技有限公司提供。

2、细胞株

大鼠心肌细胞系H9C2由中国科学院上海细胞生物研究所提供。

3、培养液

DMEM培养液+10％胎牛血清

4、其它材料

胰酶(Invitrigen)；DMSO(sigma)；MTT(sigma)；培养皿(Corning)；移液管(Corning)；96孔板(Corning)；CO₂孵箱(SANYO)；酶标仪(Biotek76833)等。

5、试验方法

以10⁴个/孔的细胞浓度接种96孔板，每孔100μl，在37℃5％CO₂、95％空气条件下培养。24小时后，加入样品液，设立复孔、DMSO缺氧对照和DMSO正常对照各3个，37℃，5％CO₂作用2h。将培养板转入无氧培养箱中，37℃5％CO₂、95％N₂条件下培养24h。每孔加入10μl 5mg/ml MTT(噻唑蓝)，37℃5％CO₂、95％空气条件下共孵育4h后，每孔加入150μl DMSO溶液，于37℃下摇床震荡15min，用酶标仪检测570nm下的OD值。

6、试验结果

表1二氢杨梅素、杨梅素、二氢槲皮素和槲皮素抗缺氧活性(OD越接近正常对照组抗缺氧效果越好，标记“*”表示和缺氧对照组比较P＜0.05，标记“**”表示和缺氧对照组比较P＜0.01)。

表1

由表1可见，二氢杨梅素、杨梅素、二氢槲皮素和槲皮素对缺氧大鼠心肌细胞有保护作用。

上述实验结果表明，二氢杨梅素、杨梅素、二氢槲皮素和槲皮素均具有抗缺氧作用，因此可用于制备抗缺氧药物或食品。

Claims

1.黄酮醇类化合物在制备抗心肌缺氧药物中的应用；所述黄酮醇类化合物选自下述至少一种：二氢杨梅素和杨梅素。

2.黄酮醇类化合物在制备抗心肌缺氧保健品中的应用；所述黄酮醇类化合物选自下述至少一种：二氢杨梅素和杨梅素。

3.黄酮醇类化合物在制备抗心肌缺氧食品中的应用；所述黄酮醇类化合物选自下述至少一种：二氢杨梅素和杨梅素。